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猪瘟病毒Erns和E2蛋白重组表达及抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：1
1
作者 张洪亮 郝占武 +6 位作者 林喜平 张志 王凤雪 解倩倩 韩先杰 单虎 温永俊 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2022年第1期76-83,共8页
本研究将CSFV Erns和E2基因的主要抗原区进行克隆,构建pET32a-Erns和pET32aEK-E2重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化,以纯化的rErns、rE2重组蛋白为包被抗原,经条件优化,分别建立CSFV rErns和rE2抗体间接ELISA检测... 本研究将CSFV Erns和E2基因的主要抗原区进行克隆,构建pET32a-Erns和pET32aEK-E2重组质粒,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达和纯化,以纯化的rErns、rE2重组蛋白为包被抗原,经条件优化,分别建立CSFV rErns和rE2抗体间接ELISA检测方法。SDS-PAGE结果显示,分别获得约为47 kDa和42 kDa的重组蛋白,rErns重组蛋白主要在上清液中存在,rE2重组蛋白主要以包涵体形式存在。Western blot结果显示,纯化后的重组蛋白具有良好的免疫原性。通过方阵试验进行了ELISA反应条件优化,确定了Erns蛋白最佳包被量为2.5μg/mL,rE2蛋白最佳包被量为0.625μg/mL,待检血清最佳稀释倍数为1∶100,最佳封闭液为0.25%PVA溶液,HRP标记的兔抗猪IgG二抗最佳稀释度为1∶2000,临界值分别为0.24和0.33。上述方法仅与CSFV阳性血清发生特异性反应,检测敏感性可达到1∶1600,批内重复性和批间重复性变异系数均小于10%。本研究建立的间接ELISA方法可初步应用于CSFV Erns和E2抗体的检测,鉴别E2亚单位疫苗免疫抗体和野毒感染抗体,有利于猪瘟净化工作的实施。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 Erns基因 E2基因 蛋白表达 间接ELISA
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内蒙古畜牧业大数据技术的应用初探
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作者 菅瑞珍 蔡建军 +3 位作者 邢明勋 贾生美 林喜平 丁利芳 《当代畜禽养殖业》 2020年第3期25-26,共2页
随着互联网+的进一步发展,大众已不再局限于使用互联网来满足自身社交、娱乐、购物、消费及提高生活便利性等需求,而是由需求端转向供给端,寻求互联网与各个产业的融合。海量数据分析挖掘功能、高速移动网络和智能感应与应用的水平都得... 随着互联网+的进一步发展,大众已不再局限于使用互联网来满足自身社交、娱乐、购物、消费及提高生活便利性等需求,而是由需求端转向供给端,寻求互联网与各个产业的融合。海量数据分析挖掘功能、高速移动网络和智能感应与应用的水平都得到了极大地提升,这些前沿技术的发展不断提升着各个产业的服务能力。消费者对于产品服务的需求越来越多样化,促使产业形态发生巨大的改变。产业边界渐渐消失,每一个企业提供的产品和服务都更加全面,服务化、生态化的产业形态已经形成并不断发展。畜牧业大数据的应用目前还不是很普遍,有很大的发展空间。本文就畜牧业大数据技术在内蒙古的应用进行简要概述。 展开更多
关键词 内蒙古 畜牧业 大数据技术 应用
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