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转化生长因子-β3/胰岛素样生长因子-1联合基因转染诱导间充质干细胞成软骨细胞分化 被引量：2
1
作者 黄辉 李海涛 +4 位作者 蔺媛媛 李娅娟 杨迭影 夏晨蕾 夏长所 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期497-500,共4页
目的重组慢病毒介导转化生长因子（TGF）-β3/胰岛素样生长因子-1（HIGF-1）联合基因转染兔骨髓间充质干细胞，诱导其软骨细胞分化，比较与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率。方法全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞，... 目的重组慢病毒介导转化生长因子（TGF）-β3/胰岛素样生长因子-1（HIGF-1）联合基因转染兔骨髓间充质干细胞，诱导其软骨细胞分化，比较与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率。方法全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞，流式细胞术检测细胞表面抗原，培养后通过重组慢病毒分别转染阴性对照（N组）、TGF-β3单基因（T组）、TGF-β3/HIGF-1联合基因（TB组），培养14 d后，荧光显微镜下观察各组细胞形态，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot分别检测性别决定区Y框蛋白9（SOX9）、蛋白多糖、Ⅱ型胶原在基因水平与蛋白水平的表达量。结果流式细胞术检测造血干细胞标志物（CD34，2.07%）、白细胞表面抗原[人类白细胞抗原DR基因（HLA-DR），1.73%]均为阴性，透明质酸受体（CD44，82.79%）为阳性，荧光显微镜观察诱导后细胞形态多为多角形、方形或者类圆盘状；RT-PCR结果显示：T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原基因表达量为0.645±0.024、0.587±0.018、0.616 ±0.019，显著高于C组（0.192±0.012、0.241±0.021、0.273±0.015），N组（0.211±0.014、0.224±0.016、0.232±0.022）（P＝0.000）；TB组基因表达量为0.832±0.013、0.746±0.024、0.951±0.026，显著高于T组（P＝0.000）。T组SOX9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原蛋白表达量为1.36±0.20、0.39±0.05、0.68±0.09，显著高于C组（0.58±0.11、0.12±0.08、0.23±0.15），N组（0.62±0.14、0.13±0.06、0.25±0.02，P＝0.000）；TB组蛋白表达量为1.83±0.13、1.35±0.24、1.51±0.26，显著高于T组（P＝0.000）。结论TGF-β3/HIGF-1联合基因转染骨髓间充质干细胞能诱导其成软骨细胞分化，且联合基因转染效率高于TGF-β3单基因转染。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 软骨分化 转化生长因子-Β3 胰岛素样生长因子-1
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