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激素和非生物胁迫对月季RhPIP1;1启动子活性的调节作用 被引量:7
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作者 阴霞 陈雯 +3 位作者 王磊 薛璟祺 高俊平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期107-117,共11页
通过反向PCR方法克隆得到月季(RosahybridaL.)‘萨蔓莎’质膜型水孔蛋白基因RhPIP1;1上游2 126 bp的启动子序列。PLACE分析发现,RhPIP1;1启动子序列中含有GA、ABA和乙烯等激素诱导相关顺式作用元件及干旱、低温和盐胁迫等非生物胁迫... 通过反向PCR方法克隆得到月季(RosahybridaL.)‘萨蔓莎’质膜型水孔蛋白基因RhPIP1;1上游2 126 bp的启动子序列。PLACE分析发现,RhPIP1;1启动子序列中含有GA、ABA和乙烯等激素诱导相关顺式作用元件及干旱、低温和盐胁迫等非生物胁迫相关顺式作用元件。在RhPIP1;1promoter::GUS转基因拟南芥中发现,RhPIP1;1启动子活性与植株发育进程相关;几乎所有器官均可检测到GUS表达,而且在迅速扩展的器官以及叶片和花的维管组织中尤为强烈。同时在6 d和9 d苗龄的转基因植株中,GA处理上调了莲座叶中RhPIP1;1启动子的活性,而ABA、甘露醇、NaCl和冷处理分别下调了莲座叶和根中RhPIP1;1启动子的活性。将RhPIP1;1启动子不同长度的5′端缺失片段融合GUS基因,并在烟草叶片中瞬时表达,缺失–580 ~–256之间的324 bp片段后,启动子活性显著降低。研究结果表明RhPIP1;1启动子对多种激素和非生物胁迫存在响应,并且这种响应具有发育和器官特异性;RhPIP1;1启动子中–580~–256区段对于启动子活性具有重要的作用。%@ 展开更多
关键词 月季 RhPIP1 1 启动子活性 激素 非生物胁迫
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月季切花乙烯受体RhETR3互作蛋白RhTSPO1的筛选和鉴定 被引量:2
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作者 陈雯 +5 位作者 薛璟祺 田佶 张帅 朱春彦 高俊平 马男 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1157-1166,共10页
利用已构建的月季分裂泛素酵母双杂文库,以月季乙烯受体蛋白RhETR3为诱饵,筛选能够与RhETR3结合的互作蛋白。经酵母回转验证共得到26个阳性克隆。在候选蛋白中发现一个TspO/MBR蛋白家族的成员,命名为RhTSPO1。通过RACE分离了RhTSPO1基... 利用已构建的月季分裂泛素酵母双杂文库,以月季乙烯受体蛋白RhETR3为诱饵,筛选能够与RhETR3结合的互作蛋白。经酵母回转验证共得到26个阳性克隆。在候选蛋白中发现一个TspO/MBR蛋白家族的成员,命名为RhTSPO1。通过RACE分离了RhTSPO1基因全长,共777 bp,开放阅读框(ORF)为579 bp,编码192个氨基酸。在酵母中,利用酵母生长和β–半乳糖苷酶活性(β-gal)验证了RhETR3和RhTSPO1之间确实存在互作。将RhETR3-GFP和RhTSPO1-mCherry融合蛋白共转入烟草,激光共聚焦显微镜观察发现RhTSPO1和RhETR3蛋白共同定位于内质网上。月季花朵自然开放过程中,RhTSPO1在花瓣中的表达呈现先增强后减弱的趋势,与开放和衰老过程紧密联系,表明RhTSPO1可能参与了花朵开放过程。本试验结果表明乙烯受体蛋白水平的互作调节可能也参与月季花朵开放和衰老的调节。 展开更多
关键词 月季 花朵开放 乙烯受体 蛋白互作
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