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网络互评系统在口腔医学实践教学中的应用初探 被引量:10
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作者 李谨 +3 位作者 褚凤清 罗建平 华东 严斌 《中华医学教育探索杂志》 2018年第4期336-340,共5页
口腔医学实时训练及网络互评系统,特别适合于对临床实践训练的过程评价。本互评系统引进闭环式互评模式,即通过学生与学生、学生与教师之间的相互反馈结果来保证实践教学过程评价的可靠性,弥补了以往开环式互评系统的不足,评价结果... 口腔医学实时训练及网络互评系统,特别适合于对临床实践训练的过程评价。本互评系统引进闭环式互评模式,即通过学生与学生、学生与教师之间的相互反馈结果来保证实践教学过程评价的可靠性,弥补了以往开环式互评系统的不足,评价结果较为客观。口腔医学实时训练及网络互评系统实现了实践教学的过程控制,细化了学生能力的评价体系,促进了学生自主学习,反馈了教师教学要点。通过此系统平台,学生之间以作业为纽带共同来发现知识、解决问题,引导学生自主学习和相互学习,将学生互评和教师评价紧密结合起来,全方位展现教学要点,成为探索实现口腔医学转化式教育的有效途径,以符合社会发展新需求。 展开更多
关键词 口腔医学 实时训练 网络互评 实践教学
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低浓度尼古丁对大鼠硬腭软组织缺损愈合的影响 被引量:6
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作者 张亚军 +2 位作者 刘来奎 张梦洁 孙应明 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第15期2326-2331,共6页
背景:最新系列研究发现低浓度尼古丁具有促进血管生成,加速皮肤伤口愈合的作用,但低浓度尼古丁能否在颌面部软组织创伤修复中尤其是口腔黏膜创伤修复中发挥作用目前还不清楚。目的:观察低浓度尼古丁对大鼠硬腭黏膜缺损修复的影响。方法:... 背景:最新系列研究发现低浓度尼古丁具有促进血管生成,加速皮肤伤口愈合的作用,但低浓度尼古丁能否在颌面部软组织创伤修复中尤其是口腔黏膜创伤修复中发挥作用目前还不清楚。目的:观察低浓度尼古丁对大鼠硬腭黏膜缺损修复的影响。方法:Wistar大鼠65只,于硬腭第一磨牙近中至第三磨牙远中的黏膜作一直径为3 mm的圆形切创缺损。造模后局部给药,大鼠随机分成低浓度尼古丁+凝胶组、凝胶组、空白对照组,每组动物分别在3,7,10,14 d处死,苏木精-伊红染色观察组织愈合过程,并通过大体标本结合图像测量分析比较各组间伤口愈合差异。结果与结论:修复后3 d各组间愈合情况差异无显著性意义;修复后7,10 d组低浓度尼古丁+凝胶组愈合快于凝胶组和空白对照组(P<0.05);修复后14 d各组创面已基本愈合,各组间差异无显著性意义。提示低浓度尼古丁可能具有促进大鼠硬腭膜缺损修复的作用。 展开更多
关键词 组织构建 软组织构建 尼古丁 软组织缺损 凝胶 创面愈合率 硬腭 国家自然科学基金
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TNF-α调控基质金属蛋白酶促口腔癌细胞侵袭转移的实验研究 被引量:6
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作者 高振林 +3 位作者 许小会 陶德韬 周静萍 刘来奎 《口腔医学》 CAS 2014年第1期9-12,共4页
目的探讨TNF-α对口腔癌细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达及其对口腔癌侵袭转移作用的影响。方法用TNF-α刺激口腔癌细胞,通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot,分别从mRNA和蛋白质的水平检测TNF-α作用前后MMPs表达的变化,应用Transwell... 目的探讨TNF-α对口腔癌细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达及其对口腔癌侵袭转移作用的影响。方法用TNF-α刺激口腔癌细胞,通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot,分别从mRNA和蛋白质的水平检测TNF-α作用前后MMPs表达的变化,应用Transwell侵袭实验检测作用前后口腔癌细胞侵袭转移能力的变化。结果 TNF-α分别作用24、48、72 h后,口腔癌细胞中MMP-2、MMP-9、MMP-14 mRNA的表达明显升高。作用48 h后,口腔癌细胞中MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白质的表达同mRNA一致,也明显增高。TNF-α作用后的口腔癌细胞侵袭转移能力明显增强。结论 TNF-α可以通过上调MMPs的表达促进口腔癌的侵袭和转移能力。 展开更多
关键词 TNF-Α 口腔癌细胞 侵袭转移 基质金属蛋白酶
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可注射羟乙基壳聚糖基水凝胶理化性能及其对人牙髓细胞增殖和成牙本质向分化的作用 被引量:6
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作者 曹春玲 +2 位作者 屈小中 韩冰 王晓燕 《北京大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期10-17,共8页
目的:制备羟乙基壳聚糖(glycol-chitosan,GC)基单/双网络水凝胶,比较人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在水凝胶内三维培养增殖和分化情况,探究GC基单/双网络水凝胶及其理化性能对hDPCs生物学行为的影响。方法:制备不同组成配... 目的:制备羟乙基壳聚糖(glycol-chitosan,GC)基单/双网络水凝胶,比较人牙髓细胞(human dental pulp cells,hDPCs)在水凝胶内三维培养增殖和分化情况,探究GC基单/双网络水凝胶及其理化性能对hDPCs生物学行为的影响。方法:制备不同组成配比的GC基单网络水凝胶(GC31)和GC基双网络水凝胶(DN3131、DN6262)。用双联注射器在恒力下推注GC基单/双网络水凝胶,测定其可注射性能。用失重法测定水凝胶的体外耐降解性能,并用万能力学试验机测定材料断裂应力。在水凝胶内包封hDPCs进行三维培养,用CCK-8法和Calcein-AM/PI活死细胞染色法测定hDPCs的增殖情况。成牙本质向诱导培养14 d后,用实时荧光定量PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR,RT-PCR)测定各组成牙本质向分化相关基因牙本质涎磷蛋白(dentin sialophosphoprotein,DSPP)、牙本质基质蛋白(dentin matrix protein-1,DMP-1)和矿化相关基因碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达变化,用Von Kossa染色法观察矿化结节的形成。结果:3组水凝胶均具有良好的可注射性能,GC31推注时间最短,DN6262推注时间较DN3131长(P<0.05)。GC31水凝胶在体外降解速率高于双网络水凝胶组(P<0.05),DN3131和DN6262的降解速率差异无统计学意义(P>0.05)。GC31断裂应力为1.10 kPa,DN3131和DN6262断裂应力分别为7.33 kPa和43.30 kPa,双网络水凝胶的抗压缩性能较单网络水凝胶有明显增强。hDPCs在3种水凝胶内均处于良好的增殖状态,GC31组的增殖能力高于DN3131和DN6262组(P<0.05),DN3131组的增殖能力高于DN6262组(P<0.05)。在成牙本质向诱导培养14 d后,DN3131和DN6262组的DSPP、DMP-1、ALP表达水平较GC31组升高(P<0.05),DN3131和DN6262组的DMP-1和ALP表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。DN3131和DN6262组体外培养2周后均可见明显生成棕黑色的团块状矿化结节,而GC31组仅观察到浅棕色钙沉积染色,为零星颗粒状散在分布。结论:不同组成 展开更多
关键词 可注射水凝胶 牙髓再生 支架 双网络水凝胶
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上皮间质转化在大鼠舌黏膜创口愈合中的作用 被引量:2
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作者 孔苗苗 孙应明 +3 位作者 张梦洁 张亚军 刘来奎 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第5期454-457,共4页
目的:越来越多的研究阐明EMT与癌症转移,组织器官纤维化及皮肤创伤愈合的情况关系密切,但在口腔黏膜创伤愈合方面的作用却依然需要进一步探索。文中通过对大鼠舌背部黏膜创口愈合过程的观察探讨上皮间质转化( epithe-lial-to-mesenc... 目的:越来越多的研究阐明EMT与癌症转移,组织器官纤维化及皮肤创伤愈合的情况关系密切,但在口腔黏膜创伤愈合方面的作用却依然需要进一步探索。文中通过对大鼠舌背部黏膜创口愈合过程的观察探讨上皮间质转化( epithe-lial-to-mesenchymal transition , EMT)在大鼠舌黏膜创口愈合过程中的作用及其意义。方法取8周龄Wistar 大鼠,于舌背部黏膜处作一直径为3 mm的圆形缺损模型,分别于术后0、1、2、3、4、8 d处死,HE染色观察组织愈合过程,同时采用免疫组织荧光法检测 EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin, E-cad),波形蛋白(Vimentin)和成纤维细胞特异性蛋白-1(fibroblast specif-ic proteins, FSP1)在舌黏膜创口愈合过程中的表达。结果大鼠舌黏膜创口边缘E-cad表达术后2~4 d较0、1d减少,间质细胞特异蛋白Vimentin、FSP1在上皮基底层表达。术后8 d舌黏膜创口完全愈合,E-cad表达量与0 d相近,上皮基地层仍可见少量Vimentin、FSP1表达。结论 E-cad、Vimentin、FSP1参与舌黏膜创口愈合过程,部分上皮细胞向创口中心迁徙过程中具备了间质细胞特性。 展开更多
关键词 上皮间质转化 E-钙黏蛋白 波形蛋白 成纤维细胞特异性蛋白-1 舌黏膜
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MT1-MMP miRNA干扰载体的构建及沉默效果评价 被引量:2
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作者 朱丽芳 +3 位作者 宁天云 宋晓陵 张玮 刘来奎 《口腔生物医学》 2012年第3期117-119,123,共4页
目的:构建膜型基质金属蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)基因miRNA干扰载体,检测其对靶基因的沉默效率。方法:设计4种MT1-MMP基因特异性miRNA寡聚单链DNA,利用载体构建试剂盒构建MT1-MMP基因特异性干扰质粒... 目的:构建膜型基质金属蛋白酶-1(membrane-type matrix metalloproteinase-1,MT1-MMP)基因miRNA干扰载体,检测其对靶基因的沉默效率。方法:设计4种MT1-MMP基因特异性miRNA寡聚单链DNA,利用载体构建试剂盒构建MT1-MMP基因特异性干扰质粒,挑选阳性克隆,测序无误后扩增,表明载体构建成功。抽提干扰质粒,用脂质体2000转染HEK293细胞,通过实时荧光定量PCR法检测干扰载体对靶基因的干扰效果。结果:本实验成功构建了MT1-MMPmiRNA干扰载体,筛选出最有效的干扰载体X173-4,并检测出其对靶基因的沉默效率可达到75%。结论:本实验结果为进一步研究MT1-MMP在口腔癌侵袭转移机制中的作用提供实验基础。 展开更多
关键词 口腔黏膜鳞癌 膜型基质金属蛋白酶-1 miRNA干扰 基因
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低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统促进大鼠硬腭黏膜创伤愈合的研究
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作者 王飞 孙应明 +3 位作者 李邦 王飞虎 刘来奎 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第4期360-364,共5页
目的低浓度尼古丁可促进新生血管的形成,进而促进创伤愈合,文中旨在观察低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统对大鼠硬腭黏膜创伤愈合的影响。方法以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)共聚物为载体材料,用复乳挥发法(w/o/w)制备低浓度尼古丁缓释微粒,以... 目的低浓度尼古丁可促进新生血管的形成,进而促进创伤愈合,文中旨在观察低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统对大鼠硬腭黏膜创伤愈合的影响。方法以聚乳酸-羟基乙酸(PLGA)共聚物为载体材料,用复乳挥发法(w/o/w)制备低浓度尼古丁缓释微粒,以胶原膜为支架,制备低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统。将Wistar大鼠48只分为实验组和空白组,每组24只,在硬腭前部造直径3 mm的圆形创口,用6-0可吸收线分别将低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统和空白胶原膜缝合于创口上,观察1、3、7、10 d大鼠上腭组织创口愈合变化情况,并比较不同时间点愈合差异。结果电镜下尼古丁缓释微粒大体观呈现球形,大小均匀,球体表面粗糙,平均粒径(3.0±0.2)μm,其包封率和载药率分别为50.2%和4.12%。尼古丁缓释微粒第1天体外释放量较大,第2天释放量较小,从第3天尼古丁的释放量趋于稳定,且在一定的范围内波动,约在10 d后急剧下降,在第3-10天尼古丁浓度为10-5-10-4mol/L波动。大体观术后3 d时,2组创面愈合差异无统计学意义(P>0.05);术后7 d时实验组的创口愈合面积大于空白组(P=0.015,);术后10 d时,2组创面已基本愈合,差异无统计学意义(P>0.05)。术后7 d时,实验组上皮增生较空白组明显,且可见较多的成纤维细胞、炎症细胞及新生的毛细血管,上皮钉突较短,黏膜下层较疏松且新生大量的胶原纤维,固有层与骨膜紧密连接,创口基本愈合。空白组可见大量的炎性细胞,创口未完全愈合;术后10 d时,2组创口上皮细胞增殖基本已完全完成,创口愈合。结论低浓度尼古丁胶原膜缓释微粒系统可能具有促进大鼠硬腭黏膜创伤愈合的作用。 展开更多
关键词 聚乳酸-羟基乙酸 胶原膜 尼古丁缓释微粒 复乳挥发法 尼古丁胶原膜缓释微粒系统
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TNF-α对大鼠舌黏膜创伤愈合过程中上皮间质转化的影响
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作者 王飞虎 孙应明 +3 位作者 孔苗苗 王飞 刘来奎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第12期1863-1866,共4页
取60只8周龄Wistar大鼠,随机分为TNF-α+凝胶实验组和空白凝胶对照组,于其舌背部黏膜处作一圆形缺损模型;每组大鼠分别于0、24、48、72、96 h处死,取标本冰冻切片。通过免疫组织荧光法检测与上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad... 取60只8周龄Wistar大鼠,随机分为TNF-α+凝胶实验组和空白凝胶对照组,于其舌背部黏膜处作一圆形缺损模型;每组大鼠分别于0、24、48、72、96 h处死,取标本冰冻切片。通过免疫组织荧光法检测与上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP1)和波形蛋白(Vimentin)在大鼠舌黏膜创伤愈合过程中的表达。结果显示两组大鼠创伤部位上皮细胞均有表达FSP1和Vimentin,实验组发生改变的细胞数目明显较对照组多,差异有统计学意义(P<0.05)。 展开更多
关键词 创伤愈合 舌黏膜 上皮间质转化 TNF-Α
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一种釉质特异性生物矿化模板的构建 被引量:2
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作者 许小会 宁天云 +5 位作者 朱丽芳 徐晓华 祝小鹏 李全利 刘来奎 《口腔医学》 CAS 2012年第9期513-517,共5页
目的构建一种自组装类釉原蛋白两亲性寡肽,作为釉质仿生矿化的有机模板。方法依据釉原蛋白分子在釉质形成中自组装成"纳米球"超分子结构的机制,参照目前"自组装多肽类生物材料"的设计特点,通过对釉原蛋白分子功能... 目的构建一种自组装类釉原蛋白两亲性寡肽,作为釉质仿生矿化的有机模板。方法依据釉原蛋白分子在釉质形成中自组装成"纳米球"超分子结构的机制,参照目前"自组装多肽类生物材料"的设计特点,通过对釉原蛋白分子功能性残基进行改性,构建"类釉原蛋白两亲性寡肽"生物矿化模板,采用固相合成法合成并纯化,经质谱仪、高效液相色谱仪等鉴定。在寡肽溶液中加入1 mol/L的CaCl2溶液观察其能否自组装;将组装后的寡肽涂于透射电镜的铜网上,用2.5%的戊二醛固定1 h后先置于常温或40℃下10 mmol/L的CaCl2溶液中1 h,去离子水漂洗后再置于5 mmol/L的Na2HPO4溶液中1 h,5个循环后取出自然干燥,通过扫描电镜(SEM),透射电镜(TEM)及选区电子衍射(SAEDS)观察表征。结果类釉原蛋白两亲性寡肽序列为C18H35O-Thr-Lys-Arg-Glu-Glu-Val-Asp,高效液相色谱仪(HPLC)示多肽纯度为98.29%,质谱仪(MS)示肽的分子质量为1 142.41 u。通过Ca2+可使其自组装为纳米纤维超微结构的凝胶态。通过交替矿化发现组装后的类釉原蛋白两亲性寡肽能摄取溶液中的钙磷离子,在寡肽纳米纤维表面成核矿化,形成磷灰石晶体。结论成功构建了一种类釉原蛋白两亲性寡肽,可以作为釉质仿生的特异性生物矿化模板,用于诱导釉质再矿化研究。 展开更多
关键词 釉原蛋白 寡肽 自组装 仿生矿化
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人口腔癌相关成纤维细胞的分离培养及鉴定 被引量:2
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作者 周美玲 李传祝 +3 位作者 王琼 潘璐 刘来奎 《口腔生物医学》 2016年第2期57-61,共5页
目的:分离培养及鉴定口腔癌相关成纤维细胞(CAFs),为探究CAFs可能在肿瘤微环境促进口腔癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用奠定基础。方法:用组织块培养法和酶消化法分离培养、纯化原代口腔癌相关成纤维细胞CAFs和口腔黏膜正常成纤维细胞(N... 目的:分离培养及鉴定口腔癌相关成纤维细胞(CAFs),为探究CAFs可能在肿瘤微环境促进口腔癌细胞的侵袭转移中发挥重要作用奠定基础。方法:用组织块培养法和酶消化法分离培养、纯化原代口腔癌相关成纤维细胞CAFs和口腔黏膜正常成纤维细胞(NFs);细胞免疫荧光技术及免疫蛋白印迹法对口腔CAFs和NFs进行鉴定。结果:口腔CAFs和NFs分离培养成功,口腔CAFs呈长梭形,达到一定密度时呈多层生长,排列紊乱;NFs呈多胞质突的扁平星状,无重叠生长现象,排列有一定方向性。上皮标志物细胞角蛋白18(CK18)免疫荧光染色在口腔CAFs和NFs均呈阴性,间质标志物波形蛋白(Vimentin)染色均呈阳性。α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、成纤维细胞特异性蛋白-1(FSP-1),成纤维细胞激活蛋白(FAP)、血小板衍生生长因子受体α(PDGFR-α)在CAFs染色呈阳性,而在NFs中染色呈阴性。结蛋白(Desmin)在CAFs和NFs中染色均呈阳性。蛋白表达水平上,相对于NFs,CAFs中α-SMA、PDGFR-α蛋白表达呈升高趋势,FSP-1呈下降趋势,而FAP、Desmin在NFs和CAFs中表达无明显差异。结论:CAFs与NFs相比,在形态结构、生长方式、蛋白表达等方面均有明显差异。 展开更多
关键词 癌相关成纤维细胞 原代细胞培养 鉴定
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肿瘤相关巨噬细胞调控基质金属蛋白酶促口腔鳞癌细胞侵袭转移的实验研究 被引量:2
11
作者 何梦颖 许小会 +2 位作者 周美玲 刘来奎 《口腔生物医学》 2014年第4期177-180,共4页
目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对口腔鳞癌细胞基质金属蛋白酶(matrix metallproteinases,MMPs)表达以及其对口腔鳞癌细胞侵袭转移的影响。方法:用佛波脂(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和巨噬... 目的:探讨肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对口腔鳞癌细胞基质金属蛋白酶(matrix metallproteinases,MMPs)表达以及其对口腔鳞癌细胞侵袭转移的影响。方法:用佛波脂(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)和巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony-stimulating factor,M-CSF)刺激人单核/巨噬细胞株THP-1促其形成TAMs,收集其上清液作为TAMs条件培养基培养口腔鳞癌细胞,应用实时定量RT-PCR、Western blot方法检测TAMs条件培养基作用前后口腔鳞癌细胞MMPs表达的差异,应用Transwell侵袭实验检测口腔鳞癌细胞侵袭转移能力的差异。结果:THP-1细胞在PMA和MCSF作用后贴壁生长,分化成TAMs。口腔癌细胞在TAMs条件培养基作用48 h后,MMP-2、MMP-9、MMP-13 mRNA的表达水平显著增高,相同条件下蛋白质的表达水平也明显增高。TAMs条件培养基作用24 h后的口腔鳞癌细胞侵袭转移能力显著增强。结论:TAMs可以上调口腔鳞癌中MMPs的表达并促进其侵袭转移。 展开更多
关键词 肿瘤相关巨噬细胞 口腔鳞癌细胞 侵袭 转移 基质金属蛋白酶
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上皮间质转化与创伤愈合的研究进展 被引量:1
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作者 谢柳萍 +2 位作者 何梦颖 周美玲 刘来奎 《口腔生物医学》 2014年第4期202-205,共4页
上皮间质转化是指上皮细胞在特定条件下转化成间充质细胞的过程。在创伤愈合的复杂过程中,表皮细胞经历上皮间质转化过程进行创口的再上皮化,其间涉及多种细胞因子、转录因子等,本文就上皮间质转化与创伤愈合的研究进展做一综述。
关键词 上皮间质转化 创伤愈合
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pEGFP-N1-Snail真核表达质粒的构建与表达
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作者 朱丽芳 宁天云 +3 位作者 王子露 宋晓陵 刘来奎 《口腔生物医学》 2011年第3期117-119,共3页
目的:构建pEGFP-N1-Snail真核表达质粒,并进行鉴定,转染SCC25肿瘤上皮细胞,检测其表达。方法:利用RT-PCR方法从SCC9肿瘤上皮细胞中提取Snail基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-Snail重组质粒,挑选阳性克隆,PCR鉴定后送测序。重组... 目的:构建pEGFP-N1-Snail真核表达质粒,并进行鉴定,转染SCC25肿瘤上皮细胞,检测其表达。方法:利用RT-PCR方法从SCC9肿瘤上皮细胞中提取Snail基因片段,与pMD18-T载体连接,构建pMD18-T-Snail重组质粒,挑选阳性克隆,PCR鉴定后送测序。重组质粒双酶切后与pEGFP-N1真核表达载体连接,构建pEGFP-N1-Snail真核表达质粒,进行测序、酶切鉴定,表明质粒构建成功。分别抽提pEGFP-N1及pEGFP-N1-Snail质粒,用脂质体2000转染SCC25肿瘤上皮细胞,RT-PCR检测Snail在该细胞中表达。结果:本实验成功构建了pEGFP-N1-Snail真核表达质粒,并在SCC25肿瘤上皮细胞中表达。结论:本实验结果为进一步研究Snail作为转录抑制因子诱导上皮间质转化提供实验基础。 展开更多
关键词 口腔黏膜鳞癌 pEGFP—N1 SNAIL 基因
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