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高纯度血红素制备工艺的改进 被引量:16
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作者 李秀玲 余蓉 +1 位作者 曾蓉 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期738-738,744,共2页
目的 探讨高纯度血红素制备工艺。方法 以猪血为原料 ,分离红细胞 ,粗分血球蛋白后用酸性丙酮抽提制备血红素。结果 用该法制备的血红素纯度可达 99%以上 ,每升红细胞可得血红素 5 g以上。结论 用此法制备血红素纯度高 ,收率高 ,简... 目的 探讨高纯度血红素制备工艺。方法 以猪血为原料 ,分离红细胞 ,粗分血球蛋白后用酸性丙酮抽提制备血红素。结果 用该法制备的血红素纯度可达 99%以上 ,每升红细胞可得血红素 5 g以上。结论 用此法制备血红素纯度高 ,收率高 ,简便快速 ,成本低 。 展开更多
关键词 血红素 制备工艺 血红细胞
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一种测定蚯蚓纤溶酶活力的简易方法 被引量:9
2
作者 邵承斌 +1 位作者 徐敏华 俞纯方 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 1997年第6期301-304,共4页
在全面考查温度、底物浓度、酶浓度和酶促反应时间等条件的基础上,改进了用合成底物BAEE测定蚯蚓纤溶酶的方法。该法重复性好,测试条件易于控制,可用于蚯蚓纤溶酶生产的质量控制。
关键词 紫外法 蚯蚓纤溶酶 BAEE 测定
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以复合硅胶为载体的胰蛋白酶的固定化 被引量:6
3
作者 陈辉 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第2期154-155,211,共3页
目的 :制备固定化胰蛋白酶 ,用于转肽反应。方法 :以涂敷了壳聚糖的硅胶为复合载体 ,以系统全面反馈优化技术进行优化制备固定化胰蛋白酶。结果 :所制备的固定化胰蛋白酶平均酶活性为 2 2 82U/ g ,酶活性回收在 9%以上。结论 :制备的固... 目的 :制备固定化胰蛋白酶 ,用于转肽反应。方法 :以涂敷了壳聚糖的硅胶为复合载体 ,以系统全面反馈优化技术进行优化制备固定化胰蛋白酶。结果 :所制备的固定化胰蛋白酶平均酶活性为 2 2 82U/ g ,酶活性回收在 9%以上。结论 :制备的固定化酶的单位酶活性高 ,带入转肽反应体系的水分少 。 展开更多
关键词 复合硅胶 壳聚糖 固定化胰蛋白酶 优化
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固定化胰蛋白酶的制备 被引量:4
4
作者 孙晓丰 余蓉 +1 位作者 曾蓉 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2003年第3期176-178,共3页
目的 制备一种高活力的固定化胰蛋白酶 ,通过优化其制备条件提高活力回收。方法 将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体 ,以戊二醛为交联剂 ,通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果 优化后制... 目的 制备一种高活力的固定化胰蛋白酶 ,通过优化其制备条件提高活力回收。方法 将壳聚糖敷涂在硅胶的表面制成载体 ,以戊二醛为交联剂 ,通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体上制得。对固定化后的滤液做回收再利用实验。结果 优化后制得的固定化胰蛋白酶的活力单位 (AU)高达 6 84 8.4U·g-1 ,活力回收 (AR)为 2 1 .8%。回收再利用实验得到的固定化胰蛋白酶活力单位仍高达 5 90 7.2 0U·g-1 。结论 制备的固定化胰蛋白酶活力单位高 ,活力回收也较高 。 展开更多
关键词 固定化胰蛋白酶 壳聚糖 戊二醛 活力单位 活力回收
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固定化胰蛋白酶的快速制备 被引量:7
5
作者 周蕊 余蓉 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第3期26-27,共2页
目的 :快速制备高活力的固定化胰蛋白酶 ,用于转肽反应。方法 :将壳聚糖与硅胶搅拌均匀 ,同时用戊二醛进行活化制成活化载体 ,再通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体制备固定化胰蛋白酶。用正交法进行优化。结果 :用快速工艺制得的固定化... 目的 :快速制备高活力的固定化胰蛋白酶 ,用于转肽反应。方法 :将壳聚糖与硅胶搅拌均匀 ,同时用戊二醛进行活化制成活化载体 ,再通过交联反应将胰蛋白酶固定至载体制备固定化胰蛋白酶。用正交法进行优化。结果 :用快速工艺制得的固定化胰蛋白酶的活力单位为 5 990 .5U/g,活力回收为 16 .7% ,整个制备过程耗时 2 1h。结论 :快速工艺的制备过程较之改进前更为快捷简便 ,制备的固定化胰蛋白酶活力单位显著提高 。 展开更多
关键词 壳聚糖 硅胶 戊二醛 固定化胰蛋白酶 正交法
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胰岛素肠溶微球口服的实验研究 被引量:6
6
作者 刘敏 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2000年第5期227-229,共3页
目的 :研制一种可供口服的胰岛素肠溶微球。方法 :采用相分离法制备胰岛素丙烯酸树脂微球 ;建立放射性免疫法测定微球包封率 ;利用体外实验法考察微球的抗酸及肠溶能力 ;将不同处方的微球给大鼠灌胃 ,测定其血糖变化。结果 :制得微球粒... 目的 :研制一种可供口服的胰岛素肠溶微球。方法 :采用相分离法制备胰岛素丙烯酸树脂微球 ;建立放射性免疫法测定微球包封率 ;利用体外实验法考察微球的抗酸及肠溶能力 ;将不同处方的微球给大鼠灌胃 ,测定其血糖变化。结果 :制得微球粒径分布在 2~ 7μm ;包封率 95 .17% ;在人工胃液中 2h有少于 14%的胰岛素释放 ;在人工肠液中 1h内胰岛素的释放度达 96 % ;微球可使大鼠产生明显的降血糖效果。结论 :胰岛素口服肠溶微球是一类具有发展前景的制剂。 展开更多
关键词 胰岛素 口服肠溶微球 血糖 实验 药理
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制备高活力胰酶的安全低污染新工艺 被引量:6
7
作者 许浩鸿 余蓉 +1 位作者 李晓红 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期245-246,共2页
目的建立安全、低污染制备高活力胰酶的方法。方法胰脏自溶水提取,以一定浓度的蛋白质沉淀剂P60在最佳筛选条件下沉淀6h,室温干燥得胰酶粉,对上清液中的P60进行回收再利用。结果收率达15%以上,胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉胰三酶活力分别... 目的建立安全、低污染制备高活力胰酶的方法。方法胰脏自溶水提取,以一定浓度的蛋白质沉淀剂P60在最佳筛选条件下沉淀6h,室温干燥得胰酶粉,对上清液中的P60进行回收再利用。结果收率达15%以上,胰蛋白酶、胰脂肪酶、胰淀粉胰三酶活力分别为3.70×103、2.80×104、5.30×104U·g-1,为《中国药典》要求的6~8倍。结论所建立的方法能安全简便的制备新型高活力胰酶。 展开更多
关键词 胰酶 安全 制备 污染 工艺 《中国药典》 筛选条件 胰蛋白酶 胰脂肪酶 水提取 沉淀剂 蛋白质 上清液 酶活力
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高纯度胰岛素的研制与临床试用 被引量:3
8
作者 方芳 +3 位作者 祝小元 邓尚平 周文碧 熊中云 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 1991年第2期178-180,共3页
胰岛素制剂的免疫原性与其纯度密切相关。作者研制的高纯度胰岛素(HP-I)其主要大分子杂质胰岛素原、胰高血糖素和胰多肽的含量分别为76.00、2.11和0.11ppm。产品的纯度显著优于国产普通结晶胰岛素,并超过国外单峰胰岛素(SP-I)的质量标... 胰岛素制剂的免疫原性与其纯度密切相关。作者研制的高纯度胰岛素(HP-I)其主要大分子杂质胰岛素原、胰高血糖素和胰多肽的含量分别为76.00、2.11和0.11ppm。产品的纯度显著优于国产普通结晶胰岛素,并超过国外单峰胰岛素(SP-I)的质量标准。临床试用结果,病人血清中胰岛素、胰岛素原和胰多肽等三种特异抗体的阳性率分别为37.5%、0%和0%。其免疫原性也明显低于国产普通结晶胰岛素、接近丹麦单组分胰岛素(MC-I,Nordisk)的水平。 展开更多
关键词 胰岛素 糖尿病 高纯度
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变形链球菌遗传Ⅰ型和Ⅲ型利用不同糖类合成葡聚糖的研究 被引量:5
9
作者 刘琪 罗宗莲 《口腔医学纵横》 CAS CSCD 1996年第1期15-16,共2页
对变形链球菌Ⅰ型JBP(c型)和Ⅲ型6715(g型)利用蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖和甜菊糖合成葡聚糖的能力进行研究,并以红外光谱和薄层层析鉴定葡聚糖样品。结果显示两种变形链球菌只能利用蔗糖合成葡聚糖,且合成葡聚糖总体... 对变形链球菌Ⅰ型JBP(c型)和Ⅲ型6715(g型)利用蔗糖、麦芽糖、葡萄糖、果糖和甜菊糖合成葡聚糖的能力进行研究,并以红外光谱和薄层层析鉴定葡聚糖样品。结果显示两种变形链球菌只能利用蔗糖合成葡聚糖,且合成葡聚糖总体能力相似。 展开更多
关键词 口腔微生物 变形链球菌 葡聚糖 合成代谢
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药用蚯蚓纤溶酶的制备及其性质的研究 被引量:6
10
作者 彭先凤 曾蓉 +3 位作者 陈丽波 邵承斌 刘开熹 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期19-21,共3页
从爱胜蚓中制备药用纤溶酶,经工厂中试.收率为2.52~2.74%;纤溶活性为24333~26560mm2/mg;水解酪蛋白活性为598~640mU/mg。制备工艺重复性好,操作简易可行。另报道了该酶的一些生化特性和稳... 从爱胜蚓中制备药用纤溶酶,经工厂中试.收率为2.52~2.74%;纤溶活性为24333~26560mm2/mg;水解酪蛋白活性为598~640mU/mg。制备工艺重复性好,操作简易可行。另报道了该酶的一些生化特性和稳定性的研究结果。 展开更多
关键词 药用蚯蚓纤溶酶 制备 生化特性 纤溶酶 蚯蚓
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口服胰岛素微球促吸收剂的体外筛选 被引量:3
11
作者 陈辉 廖鲁剑 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2003年第3期260-262,共3页
目的 :筛选用于口服胰岛素的促吸收剂 .方法 :以胰蛋白酶为模型药物 ,通过体外肠囊翻转实验 ,以肠囊内外液中酶活力的比值为评价指标 ,考察胆盐、脱氧胆酸钠、十二烷基硫酸钠、氮酮、脑磷脂、EDTA及其复方的促吸收效果 .结果 :单独使用... 目的 :筛选用于口服胰岛素的促吸收剂 .方法 :以胰蛋白酶为模型药物 ,通过体外肠囊翻转实验 ,以肠囊内外液中酶活力的比值为评价指标 ,考察胆盐、脱氧胆酸钠、十二烷基硫酸钠、氮酮、脑磷脂、EDTA及其复方的促吸收效果 .结果 :单独使用时 ,胆盐Ⅲ号 (BSⅢ )的促吸收效率最低 ,3h仅为 11.8% ,脱氧胆酸钠的促吸收率最高 ,3h为 5 9.7% ;复合促吸收剂脱氧胆酸钠 +氮酮 +脑磷脂能在 3h内达到最佳促吸收效果 ,吸收率为 81.3% .结论 :复合促吸收剂的效果优于单一促吸收剂 ,脱氧胆酸钠 +氮酮 +脑磷脂的促吸收效果最好 . 展开更多
关键词 口服胰岛素 微球促吸收剂 体外筛选 体外肠囊翻转实验 酶活力 胆盐Ⅲ号 脱氧胆酸钠 复合促吸收剂
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猪脾脏多肽的酶法制备及其生物活性研究 被引量:5
12
作者 刘庆涛 余蓉 +3 位作者 崔瑜霞 马宇峰 吴诚光 《食品与药品》 CAS 2010年第5期161-164,共4页
目的探索酶解法制备猪脾脏多肽的最佳条件,检测所得产物的生物活性。方法用胰酶酶解法、正交试验、甲醛滴定法考察最佳酶解条件,用乙醇沉淀法收集多肽,并分别用Fe2+诱发卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸过氧化体系和纤维蛋白平板法检测多肽的... 目的探索酶解法制备猪脾脏多肽的最佳条件,检测所得产物的生物活性。方法用胰酶酶解法、正交试验、甲醛滴定法考察最佳酶解条件,用乙醇沉淀法收集多肽,并分别用Fe2+诱发卵黄脂蛋白多不饱和脂肪酸过氧化体系和纤维蛋白平板法检测多肽的抗氧化活性和溶栓活性,CM-Sepharose离子交换层析纯化最佳酶解条件下的脾多肽,利用SDS-PAGE电泳确定具备促凝活性的多肽分子片段相对分子质量。结果最佳酶解条件为60℃,pH 7.0,加酶量6.0%,时间5.5 h;检测到脾多肽具备抗氧化活性和促凝活性,经纯化后的脾多肽促凝时间比正常对照提前20 s。结论可初步判断猪脾脏多肽在抗氧化和凝血方面有一定作用,且首次证实猪脾多肽具有凝血功能。 展开更多
关键词 猪脾脏 多肽 抗氧化 促凝
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单组分胰岛素的制备及质量分析 被引量:3
13
作者 李晓红 余蓉 +2 位作者 祁晖 李涛 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期175-178,共4页
单峰胰岛素经DEAE 琼脂糖快流速离子交换层析后用醋酸锌结晶,得到结晶单组分胰岛素.层析和结晶的胰岛素回收率分别为93.8%±1.0%(n=3)和94.7%±1.5%(n=3).产品经PAGE分析为单带,HPLC检测高分子量杂蛋白和脱酰胺胰岛素的含量分别... 单峰胰岛素经DEAE 琼脂糖快流速离子交换层析后用醋酸锌结晶,得到结晶单组分胰岛素.层析和结晶的胰岛素回收率分别为93.8%±1.0%(n=3)和94.7%±1.5%(n=3).产品经PAGE分析为单带,HPLC检测高分子量杂蛋白和脱酰胺胰岛素的含量分别为0.42%±0.06%(n=3)和1.29%±0.06%(n=3),锌的残留量为0.187%±0.006%(n=3),产品效价为27.13±0.40U/mg(n=3).所有指标均达到USP24的质量标准.该工艺具有回收率高、产品质量好的特点. 展开更多
关键词 单组分胰岛素 DEAE-琼脂糖快流速离子交换层析 结晶 纯度分析
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变形链球菌表面蛋白P1与PCG,CTB的偶联实验 被引量:3
14
作者 李富明 罗宗莲 +2 位作者 张静仪 吉庆勇 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期45-47,共3页
利用共价偶联剂 SPDP将纯化的变形链球菌表面蛋白抗原 P1与霍乱毒素 B亚单位 (CTB)或前霍乱原类毒素 (PCG)分别进行偶联并进行偶联效果鉴定 ,以获取更为有效的防龋抗原。结果 :所得偶联物 P1- PCG,P1- CTB同时具有与神经节苷脂 GM1特异... 利用共价偶联剂 SPDP将纯化的变形链球菌表面蛋白抗原 P1与霍乱毒素 B亚单位 (CTB)或前霍乱原类毒素 (PCG)分别进行偶联并进行偶联效果鉴定 ,以获取更为有效的防龋抗原。结果 :所得偶联物 P1- PCG,P1- CTB同时具有与神经节苷脂 GM1特异结合的特点 ,又具有 P1的免疫特性 ,为进一步进行免疫防龋实验提供了有效的抗原。 展开更多
关键词 变形链球菌 表面蛋白 霍乱毒素 龋齿 预防
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(His)_6-Arg-Arg-人胰岛素原在大肠杆菌中的高效表达(英文) 被引量:4
15
作者 李晓红 余蓉 +2 位作者 曾蓉 彭先凤 《药物生物技术》 CAS CSCD 2003年第3期144-148,共5页
为了提高胰岛素原的表达量 ,用pQE 40质粒构建了 (His) 6 Arg Arg 人胰岛素原 [(His) 6 Arg Arg humanProinsulin ,RRhPI]的大肠杆菌表达系统。通过培养条件的优化 ,在摇瓶培养的条件下 ,目标产物RRhPI以包涵体形式获得了高效表达 ,每... 为了提高胰岛素原的表达量 ,用pQE 40质粒构建了 (His) 6 Arg Arg 人胰岛素原 [(His) 6 Arg Arg humanProinsulin ,RRhPI]的大肠杆菌表达系统。通过培养条件的优化 ,在摇瓶培养的条件下 ,目标产物RRhPI以包涵体形式获得了高效表达 ,每升培养基收获湿菌体约 2 7g ,包涵体 6g(干重 1 .8g) ,RRhPI约5 4 0mg。该水平已超过现有文献报道的摇瓶培养的最高水平。 展开更多
关键词 人胰岛素原 大肠杆菌 表达
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赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)纤溶酶部分理化性质研究 被引量:2
16
作者 邵承斌 +1 位作者 陈丽波 刘开熹 《渝州大学学报》 1994年第4期41-45,共5页
以赤子爱胜蚓为材料制得蚯蚓纤溶酶,测得该酶最适温度和最适pH值分别为55℃和9。其分子量分布范围为1.8×104~4.2×104道尔顿。在最适温度和最适pH条件下,该酶动力学参数km和V(max)以分别为0.... 以赤子爱胜蚓为材料制得蚯蚓纤溶酶,测得该酶最适温度和最适pH值分别为55℃和9。其分子量分布范围为1.8×104~4.2×104道尔顿。在最适温度和最适pH条件下,该酶动力学参数km和V(max)以分别为0.5345g/L和18.0728unit/min,PSMF对该酶活性抑制率为70%。 展开更多
关键词 蚯蚓 纤溶酶 理化性质 抑制剂 赤子受胜蚓
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鲤鱼卵透明带糖蛋白分离纯化研究 被引量:2
17
作者 陈章宝 《四川畜牧兽医学院学报》 2001年第2期17-22,共6页
温度、pH值对ZP粗品制备的影响研究 ,得出ZP粗品制备最佳条件为 :在温度为 75℃、pH值 9.0— 10 .2的溶液中提取。将 4 0 %饱和 (NH4 ) 2 SO4 去除部分杂蛋白的ZP组份用Q -SepharoseFF层析 ,分别用不同浓度的NaCl、不同pH值的Tris -HCl... 温度、pH值对ZP粗品制备的影响研究 ,得出ZP粗品制备最佳条件为 :在温度为 75℃、pH值 9.0— 10 .2的溶液中提取。将 4 0 %饱和 (NH4 ) 2 SO4 去除部分杂蛋白的ZP组份用Q -SepharoseFF层析 ,分别用不同浓度的NaCl、不同pH值的Tris -HCl缓冲液作洗脱液纯化ZP粗品即可得ZP - 1、ZP - 展开更多
关键词 鲤鱼卵 透明带 糖蛋白 分离纯化 抗生育作用
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变形链球菌mutans表面蛋白P1对人唾液接受器研究 被引量:2
18
作者 黄定明 罗宗莲 +1 位作者 周学东 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期160-162,共3页
收集人刺激性腮腺唾液,在碱性条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化唾液蛋白7种,命名为B1~B7,分别包被羟磷灰石珠,用131碘标记纯化的变形谜球菌MT6R(血清型c)粘附素蛋白P1,观察其对每种唾液蛋白的粘附能力,以研究变形... 收集人刺激性腮腺唾液,在碱性条件下聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化唾液蛋白7种,命名为B1~B7,分别包被羟磷灰石珠,用131碘标记纯化的变形谜球菌MT6R(血清型c)粘附素蛋白P1,观察其对每种唾液蛋白的粘附能力,以研究变形链珠菌粘附素蛋白P1的接受器。结果显示变形链球菌mutans表面蛋白P1对不同唾液蛋白的粘附量不同,具有选择性(P<0.01),对B5,B6粘附量特别高。已证实B5,B6为酸性富脯蛋白,提示酸性富脯蛋白可能为变形链球菌粘附素蛋白P1的重要接受器之一。 展开更多
关键词 变形链球菌蛋白P1 唾液 粘附 富脯蛋白 接受器
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不同龋敏感人群唾液蛋白的研究 被引量:2
19
作者 罗宗莲 黄定明 +1 位作者 周学东 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 1995年第2期69-70,共2页
分别收集患龋人群(DFS≥6)18例和无龋人群22例腮腺唾液,经Lowry法测定,两组人群腮腺唾液蛋白总量无显著性差异(P>0.05).采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析唾液蛋白的组成,发现两组人群唾液蛋白组成不同,碱性电泳... 分别收集患龋人群(DFS≥6)18例和无龋人群22例腮腺唾液,经Lowry法测定,两组人群腮腺唾液蛋白总量无显著性差异(P>0.05).采用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析唾液蛋白的组成,发现两组人群唾液蛋白组成不同,碱性电泳B5、B6、B7蛋白带在高龋组的出现率显著高于无龋组(P<0.05),且B5、B6对羟磷灰石有很强的吸附力,提示该蛋白在龋病发生中起着重要的作用。 展开更多
关键词 龋齿 唾液蛋白 龋敏感性
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硝酸纤维素膜上化学药物交联抗原在斑点酶免疫法中的应用 被引量:2
20
作者 潘培根 俞红吉 +1 位作者 曾蓉 《华西医科大学学报》 CSCD 1998年第2期224-226,共3页
在硝酸纤维素膜上用40%酒精直接交联方式和自然渗滤吸附方式固定抗原后,分别作斑点酶免疫法检测血清中的HCMVIgG。结果显示:前者的重复性(CV=67%)优于后者(CV=255%)。酒精交联抗原斑点酶免疫法与E... 在硝酸纤维素膜上用40%酒精直接交联方式和自然渗滤吸附方式固定抗原后,分别作斑点酶免疫法检测血清中的HCMVIgG。结果显示:前者的重复性(CV=67%)优于后者(CV=255%)。酒精交联抗原斑点酶免疫法与ELISA法比较,血清中HCMVIgG检测的一致率为932%,阳性血清、弱阳性血清和阴性血清的检测率无显著性差异。以ELISA法为金标准,酒精交联抗原班点酶免疫法的敏感性、特异性、诊断指数和诊断效率分别为100%、966%、1966%和987%,这些质量指标均达到实际应用标准。酒精交联抗原操作简便,快速,重复性好,节省材料,质量指标高。 展开更多
关键词 化学药物 抗原 斑点酶免疫法 硝酸纤维素膜
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