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过氧化氢诱导心肌细胞凋亡性和非凋亡性死亡的研究 被引量:23
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作者 曹纯章 杨绍 +1 位作者 卜丽莎 杨同书 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期457-461,I000,共6页
目的:探讨活性氧过氧化氢(H2O2)对心肌细胞损伤作用。方法:用不同浓度的 H2O2作用于新生鼠培养心肌细胞,通过琼脂糖凝胶电泳、Giemsa染色和流式细胞仪等方法观察H2O2对心肌细胞的凋亡性损伤作用,同时检测培养... 目的:探讨活性氧过氧化氢(H2O2)对心肌细胞损伤作用。方法:用不同浓度的 H2O2作用于新生鼠培养心肌细胞,通过琼脂糖凝胶电泳、Giemsa染色和流式细胞仪等方法观察H2O2对心肌细胞的凋亡性损伤作用,同时检测培养介质中乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)等生化指标的改变。结果:5mmol/L H2O2作用于培养心肌细胞6h,在琼脂糖凝胶电泳上出现梯状DNA带; Giemsa染色细胞涂片可见到染色体浓聚或边缘化,成新月型聚集在核膜周边,并有凋亡小体的存在;流式细胞仪可检测出亚二倍体峰的出现。结论:H2O2具有浓度和时间依赖关系诱导心肌细胞的调亡,在低浓度H2O2(<1mmol/L)导致培养心肌细胞的早期生物化学改变,自由基含量升高,膜通透性增加,同时伴有少量心肌细胞调亡;而在高浓度H2O2(>10mmol/L)时会造成培养心肌细胞的坏死性死亡,细胞膜崩塌,脂质过氧化物(MDA)大量产生,LDH大量泄漏,DNA琼脂糖凝胶电泳出现弥散(smear)泳带;5~10 mmol/L H2O2诱导大量心肌细胞凋亡性死亡,同时伴有 LDH和 MDA含量升高等生物化学的改变。 展开更多
关键词 过氧化氢 心肌细胞 细胞凋亡 新生大鼠
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氟中毒家兔肝细胞凋亡与肝功能损害 被引量:16
2
作者 孙景春 徐辉 +4 位作者 张桂珍 杨绍 高申 郑德明 李广生 《中国地方病防治》 CAS 2001年第3期129-131,共3页
目的 观察氟中毒对家兔肝功损害及肝细胞凋亡的影响。方法 给家兔饮水投氟3个月,采用流式细胞术检测肝细胞凋亡百分率及细胞周期,全自动生化分析仪检测血清蛋白含量和有关酶活性改变。结果 氟中毒家兔肝细胞凋亡随投氟剂量的增加... 目的 观察氟中毒对家兔肝功损害及肝细胞凋亡的影响。方法 给家兔饮水投氟3个月,采用流式细胞术检测肝细胞凋亡百分率及细胞周期,全自动生化分析仪检测血清蛋白含量和有关酶活性改变。结果 氟中毒家兔肝细胞凋亡随投氟剂量的增加呈上升趋势;血清白蛋白、总蛋白含量较对照组明显降低;血清谷雨转氨酶活性下降。结论血清白蛋白、总蛋白的改变能够反映氟中毒肝损害,但不是氟中毒损害的敏感器官。 展开更多
关键词 细胞凋亡 氟中毒 肝功能 肝细胞凋亡
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BMP-2基因转染的人骨髓基质干细胞复合PLA/PCL支架体外构建组织工程骨 被引量:13
3
作者 李建军 杨绍 +6 位作者 卜丽莎 高申 张文岚 崔亚南 王宏 刘建国 徐莘香 《骨与关节损伤杂志》 2004年第3期177-180,共4页
目的 用人骨形态发生蛋白 2腺病毒表达载体 (Ad -BMP - 2 )转染的人骨髓基质干细胞 (hBMSC) ,复合PLA/PCL(聚乳酸 /聚己内酯 )生物降解支架体外构建组织工程骨。方法 用Ad -BMP - 2转染体外培养的成人BMSC ,免疫组化、原位杂交染色和... 目的 用人骨形态发生蛋白 2腺病毒表达载体 (Ad -BMP - 2 )转染的人骨髓基质干细胞 (hBMSC) ,复合PLA/PCL(聚乳酸 /聚己内酯 )生物降解支架体外构建组织工程骨。方法 用Ad -BMP - 2转染体外培养的成人BMSC ,免疫组化、原位杂交染色和蛋白印迹方法检测细胞BMP - 2的表达 ,并通过流式细胞仪和ALP活性检测分析其对细胞增殖、分化的影响。然后将转染后细胞接种到PLA/PCL支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 转染后 ,hBMP - 2基因在mRNA水平和蛋白水平均有表达 ;S期细胞比例和ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 Ad-BMP - 2可高效转染hBMSC ,且促进细胞增殖及成骨转化。转染后细胞在PLA/PCL上生长良好 ,BMP - 展开更多
关键词 腺病毒 骨形态发生蛋白 骨髓基质干细胞 基因治疗 组织工程骨 基因转染 流式细胞仪
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Hp感染与胃癌及癌前病变中p53、bcl-2、c-myc基因表达关系的研究 被引量:11
4
作者 高歌 周长玉 +2 位作者 林种玉 侯治富 杨绍 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期325-328,共4页
目的:研究幽门螺杆菌(Hp)感染的胃癌及癌前病变患者胃粘膜p53、bcl-2、c-myc基因的表达,以探讨Hp在胃癌发生、发展过程中的作用机制。方法:应用免疫组化方法测定60例胃癌组织、18例异型增生、29例肠上皮化生、35例萎缩性胃炎、29例浅表... 目的:研究幽门螺杆菌(Hp)感染的胃癌及癌前病变患者胃粘膜p53、bcl-2、c-myc基因的表达,以探讨Hp在胃癌发生、发展过程中的作用机制。方法:应用免疫组化方法测定60例胃癌组织、18例异型增生、29例肠上皮化生、35例萎缩性胃炎、29例浅表性胃炎组织中bcl-2、c-myc基因蛋白表达情况,PCR/SSCP测定p53基因第5~8外显子突变,Hp阳性由快速尿素酶法和HE染色确定。结果:胃癌组Hp阳性41例,阴性19例。在胃癌组织中p53、bcl-2、c-myc基因阳性表达分别为38例(63.3%)、38例(63.3%)、18例(30.0%)。p53、c-myc基因在胃癌中阳性表达率显著高于异型增生(P<0.05)。bcl-2在异型增生组织中的阳性表达率与胃癌、肠上皮化生相比无显著性差异(P>0.05)。p53、bcl-2、c-myc基因表达与胃癌分期、淋巴结转移均无显著性关系(P>0.05),但bcl-2与胃癌类型、分化程度显著相关(P<0.05)。每一种病变类型Hp阳性组p53、bcl-2、c-myc基因蛋白的阳性表达率均高于Hp阴性组,两者之间有显著性差异(P<0.05)。结论:Hp感染者具有更多肿瘤生物学行为,可以引起抑癌基因p53第5~8外显子突变,癌基因c-myc、凋亡调节基因bcl-2表达增加,Hp可能为促癌剂,在胃癌的发生发展中起一定作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃肿瘤 癌前病变 胃癌 HP感染 基因表达 p53 BCL-2 C-MYC
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小儿水合氯醛保留灌肠的护理观察 被引量:13
5
作者 李沫 庞丽敏 +1 位作者 杨绍 白凤芝 《吉林医学》 CAS 2009年第16期1779-1780,共2页
目的:探讨5%水合氯醛保留灌肠的护理要点。方法:选择我科2007年6月-2008年6月收治的450例患儿,给予水合氯醛保留灌肠,男233例,女217例;年龄1-5岁,平均2.56岁。其中高热惊厥168例,颅内疾患101例,其他检查前准备181例。结果:保留灌肠后... 目的:探讨5%水合氯醛保留灌肠的护理要点。方法:选择我科2007年6月-2008年6月收治的450例患儿,给予水合氯醛保留灌肠,男233例,女217例;年龄1-5岁,平均2.56岁。其中高热惊厥168例,颅内疾患101例,其他检查前准备181例。结果:保留灌肠后5-10min催眠成功者221例;10-15min催眠成功者139例;15-20min催眠成功者60例;30例患儿无效,其中新生儿0例,婴幼儿30例。成功率为93.3%。结论:5%水合氯醛具有镇静、催眠、抗惊厥的作用,且起效快、持续时间长。保留灌肠给药操作简便、无痛苦,易被患儿和家长接受。 展开更多
关键词 小儿 水合氯醛 保留灌肠 护理
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转染BMP-2基因的兔BMSCs种植PLA/PCL支架体外构建组织工程骨 被引量:12
6
作者 卜丽莎 李建军 +5 位作者 高申 杨绍 张文岚 崔亚南 刘建国 徐莘香 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第9期677-679,共3页
目的 :用腺病毒载体将人骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因导入兔骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,种植PLA/PCL (聚乳酸 /聚己内酯 )支架体外构建组织工程骨。方法 :蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,流式细胞仪和ALP活性检测分析基因转染... 目的 :用腺病毒载体将人骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )基因导入兔骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,种植PLA/PCL (聚乳酸 /聚己内酯 )支架体外构建组织工程骨。方法 :蛋白印迹法检测转染后细胞BMP 2的表达 ,流式细胞仪和ALP活性检测分析基因转染对细胞增殖分化的影响。然后将转染后细胞接种到PLA/PCL支架上 ,扫描电镜观察细胞贴附、生长状况。结果 :转染后 ,BMSCs表达BMP 2 ,S期细胞比例和ALP活性明显增高。扫描电镜见转染细胞分布均匀 ,伸展良好。结论 :BMP 2基因转染BMSCs ,可促进细胞增殖分化。转染后细胞在PLA/PCL支架上生长良好 ,BMP 2基因治疗的组织工程骨构建成功。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形态发生蛋白 骨髓基质干细胞 组织工程骨
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微量营养素对糖尿病大鼠淋巴细胞IL-4、IL-10表达的影响 被引量:12
7
作者 张桂珍 刘霆 +3 位作者 高申 郑德明 张文岚 杨绍 《营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期330-333,共4页
目的 : 研究微量营养素硒、铬、钒、维生素 E(VE)的联合生物学效应在胰岛素依赖性糖尿病 (IDDM)发病过程中对淋巴细胞白细胞介素 - 4(IL- 4)、白细胞介素 - 1 0 (IL- 1 0 )表达的调节作用及对 IDDM发生发展的影响。方法 : 以链脲佐菌... 目的 : 研究微量营养素硒、铬、钒、维生素 E(VE)的联合生物学效应在胰岛素依赖性糖尿病 (IDDM)发病过程中对淋巴细胞白细胞介素 - 4(IL- 4)、白细胞介素 - 1 0 (IL- 1 0 )表达的调节作用及对 IDDM发生发展的影响。方法 : 以链脲佐菌素 (STZ)小剂量、多次注射方法 ,制造大鼠IDDM模型 ,用流式细胞仪检测、比较不同组合给予硒、铬、钒、VE对 IL- 4、IL- 1 0表达调控的影响及与血糖、活性氧产生等指标的关系。结果 : IDDM大鼠外周血和脾脏表达 IL- 4、IL- 1 0淋巴细胞数目总体偏低于非糖尿病大鼠 (P<0 .0 5~ 0 .0 1 )。联合给予一定剂量的硒、铬、钒、VE可不同程度地明显提高 IL- 4、IL - 1 0的表达 (P<0 .0 5~ 0 .0 1 ) ,降低升高的血糖水平 (P<0 .0 1 )和减少组织活性氧的产生 (P<0 .0 5~ 0 .0 1 )。结论 : 微量营养素可通过上调 IL- 4、IL- 1 0的表达减轻胰岛β细胞自身免疫性损害 ,防治 IDDM的发生发展。 展开更多
关键词 胰岛素依赖性糖尿病 白细胞介素-4(IL-4) 白细胞介素-10 基因表达 微量营养素 糖尿病 发病机制
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siRNA沉默survivin对人胃癌SGC-7901细胞生长的抑制作用 被引量:7
8
作者 孙延霞 杨绍 +2 位作者 高申 石张镇 卢振霞 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期477-481,共5页
目的:探讨siRNA沉默survivin基因表达对胃癌细胞生长的抑制作用及其机制,为胃癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据。方法:针对survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建2个重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA-1和-2... 目的:探讨siRNA沉默survivin基因表达对胃癌细胞生长的抑制作用及其机制,为胃癌及survivin阳性肿瘤的治疗提供理论依据。方法:针对survivin mRNA序列设计合成编码siRNA的DNA模板,构建2个重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin siRNA-1和-2;实验分为脂质体对照、空质粒转染对照及survivin siRNA重组质粒转染治疗组,转染胃癌细胞SGC-7901,采用RT-PCR法检测survivin mRNA的表达,Western blotting检测蛋白表达,观察重组质粒对其转染的SCG-7901细胞survivin基因表达的影响;用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测量细胞生长情况;用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:Western blotting、RT-PCR结果证实转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(78.25%及88.75%)均高于脂质体对照组(5%及2%)和空质粒对照组(1%及6%)(P<0.01);转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-2的SCG-7901细胞survivin蛋白质及mRNA抑制率(42%及77%)也均高于脂质体对照组和空质粒对照组(P<0.01);MTT法检测结果显示转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞体外生长的抑制率(64%)高于空质粒对照组(11%)(P<0.01);流式细胞术检测的转染重组质粒pGCsilenerU6/GFP/survivin-siRNA-1组细胞凋亡率(21.20±3.21)高于脂质体对照组(0.830±0.001)和空质粒对照组(1.98±0.67)(P<0.01)。结论:重组质粒pGCsilencerU6/GFP/survivin-siRNA可抑制胃癌细胞中survivin的表达,并抑制胃癌细胞生长,促进其凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 RNA干扰 SURVIVIN SGC-7901细胞细胞凋亡
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大肠肿瘤基因调控模式初探 被引量:7
9
作者 侯治富 王维忠 +4 位作者 印璞 张立 张文岚 杨绍 吴晓冬 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1999年第11期856-857,共2页
关键词 大肠肿瘤 基因调控模式 免疫组化
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嵌合体与同种异体肾移植免疫耐受相关性的研究 被引量:6
10
作者 傅耀文 张文岚 +2 位作者 王伟刚 周洪澜 杨绍 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期688-690,共3页
目的 探讨同种异体肾移植术后嵌合体表达情况与免疫耐受的相关性。 方法 采用3对引物 ,应用PCR和RT PCR方法 ,检测接受男性供体肾移植的女性受者外周血及尿沉渣Y染色体特异片段DNA和mRNA表达 ,进行嵌合体与免疫耐受相关性研究。 结... 目的 探讨同种异体肾移植术后嵌合体表达情况与免疫耐受的相关性。 方法 采用3对引物 ,应用PCR和RT PCR方法 ,检测接受男性供体肾移植的女性受者外周血及尿沉渣Y染色体特异片段DNA和mRNA表达 ,进行嵌合体与免疫耐受相关性研究。 结果  176例女性受者嵌合阳性 137例 ( 77.84 % ) ,阴性 39例 ( 2 2 .16 % )。阳性组平均存活时间 ( 8.9± 3.7)年 ,阴性组 ( 5 .2± 3.9)年 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;阳性组发生排斥反应 15例 ( 10 .9% ) ,阴性组 11例 ( 2 8.2 % ) ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。 结论 肾移植术后受者体内嵌合状态与免疫耐受相关 。 展开更多
关键词 免疫耐受 阴性 嵌合体 阳性 同种异体肾移植 受者 相关性 结论 生物学 显著性
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FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较 被引量:7
11
作者 张丽荣 朱筱 +5 位作者 杨绍 袭宁 马洪喜 譙元 王雪梅 王丽萍 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期573-575,共3页
随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格。固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定... 随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格。固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断。福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱。 展开更多
关键词 FineFix 福尔马林 免疫组织化学
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HLA配型、群体反应性抗体与肾移植术后早期急性排斥反应的关系 被引量:7
12
作者 杨绍 张文岚 +3 位作者 傅耀文 操海萍 张桂珍 刘冰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期273-274,共2页
目的 :研究人类白细胞抗原 (HLA)配型、群体反应性抗体 (PRA)与肾移植术后早期急性排斥反应的关系。方法 :应用单克隆抗体板、微量序列特异性引物、混合抗原板进行供受者HLA I类抗原分型、HLA II类基因分型、PRA检测。结果 :PRA为低、... 目的 :研究人类白细胞抗原 (HLA)配型、群体反应性抗体 (PRA)与肾移植术后早期急性排斥反应的关系。方法 :应用单克隆抗体板、微量序列特异性引物、混合抗原板进行供受者HLA I类抗原分型、HLA II类基因分型、PRA检测。结果 :PRA为低、中、高三组受者的早期急性排斥反应发生率分别为 16 %、2 7%、6 6 6 %。HLA位点错配数 (MM)为 0 1组明显比 5 6组早期急性排斥反应率低。结论 :良好的组织配型、低水平的PRA ,可降低早期急性排斥反应的发生。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原 群体反应性抗体 肾移植 早期 急性 排斥反应
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外周血中基质金属蛋白酶1、9对小儿川崎病冠状动脉损伤的早期诊断意义 被引量:7
13
作者 白凤芝 杨绍 +1 位作者 吴晓冬 李洪军 《中国实验诊断学》 2008年第4期490-492,共3页
目的研究川崎病(Kawasaki disease,KD)冠状动脉损伤(Coronry lesion,CAL)患儿外周血中基质金属蛋白酶1(Matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的动态变化在川崎病的早期预测和诊断中的临床意义。方法KD合并CAL患... 目的研究川崎病(Kawasaki disease,KD)冠状动脉损伤(Coronry lesion,CAL)患儿外周血中基质金属蛋白酶1(Matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)的动态变化在川崎病的早期预测和诊断中的临床意义。方法KD合并CAL患儿35例,急性期、恢复期各抽一次外周静脉血,抗凝,对照组为18例健康体检儿童。ELISA双抗体法测定血清中MMP-1、MMP-9的蛋白水平,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测外周血白细胞MMP-1、MMP-9 mRNA的表达。结果急性期血清中MMP-1、MMP-9的蛋白含量及血白细胞MMP-1、MMP-9 mRNA水平均明显高于恢复期及正常对照组(P<0.01)。结论MMP-1、MMP-9过表达是川崎病冠状动脉损伤的重要因素,监测MMP-1、MMP-9动态变化对预测及早期诊断具有重要的临床意义。 展开更多
关键词 金属蛋白酶1、9 川崎病冠状动脉损伤 ELISA双抗体法 逆转录聚合酶链式反应
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氟骨症成骨细胞激活中钙与信号转导 被引量:8
14
作者 张文岚 邢德利 +1 位作者 杨绍 李广生 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期186-187,共2页
关键词 氟骨症 成骨细胞 信号转导 氟中毒 地氟病
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免疫组化图像计算机定量分析中若干问题的探讨 被引量:8
15
作者 薄立华 杨绍 +2 位作者 郭志良 张玉成 张桂珍 《中国体视学与图像分析》 2012年第2期180-184,共5页
本文根据多年计算机图像分析系统的使用经验,结合免疫组化图像分析的特点,详细分析了免疫组化图像计算机定量分析的主要环节及诸多方面的影响因素,尤其对免疫组化图像测量参数及测量方法的选择和设计进行了较深入的探讨。旨在提高免疫... 本文根据多年计算机图像分析系统的使用经验,结合免疫组化图像分析的特点,详细分析了免疫组化图像计算机定量分析的主要环节及诸多方面的影响因素,尤其对免疫组化图像测量参数及测量方法的选择和设计进行了较深入的探讨。旨在提高免疫组化图像计算机定量分析数据的科学性、可靠性、可重复、可比性,尽可能避免人为因素对测量结果的影响。 展开更多
关键词 免疫组化图像 计算机定量分析 操作规程
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CyclinD_1与大肠癌相关性研究 被引量:5
16
作者 张文岚 杨绍 +2 位作者 王维忠 邢德利 薛丽 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第2期143-145,共3页
目的:了解CyclinD1基o表达产物(p36D1)与.大肠癌发生和进展的关系。方法:应用改良Westernblot法和免疫组化法检测33例肠道对物(大肠癌29例,癌前病变4例)及其非瘤粘膜组织CycliflD1基因产物的表达;井采用LUZeX-F图像分析仪对... 目的:了解CyclinD1基o表达产物(p36D1)与.大肠癌发生和进展的关系。方法:应用改良Westernblot法和免疫组化法检测33例肠道对物(大肠癌29例,癌前病变4例)及其非瘤粘膜组织CycliflD1基因产物的表达;井采用LUZeX-F图像分析仪对安验结果进行半之妻分析。结果:了厂卜。linD;基因产物在大肠癌组织、名前病变组织及非瘤粘膜组织有不同表达;②CycllnD;过表达与大肠在浸染深度、生物恶性度及从巴转移率呈正相关,与临床在函分期有共;③右前在生恶化Cy-clinD;这表达;@XycllnD;过人达与大肠涛临床痴理分期及预后有关。结论:CyCllnD;基0:达与大肠癌发生、进名及恶性产产切相望,可能是全要的预后因子。 展开更多
关键词 大肠癌 CYCLIND1 免疫组织化学
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抗病毒药物的研究现状 被引量:6
17
作者 侯治富 王维忠 杨绍 《中国药事》 CAS 1994年第6期372-375,共4页
本文对近十年来抗病毒药物的研究现状进行了综述,包括各种药物的临床和抗病毒机理的研究。
关键词 抗病毒药物 抗病毒机理 免疫核糖核酸
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基因治疗的研究概况 被引量:5
18
作者 侯治富 杨绍 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第8期619-624,共6页
关键词 肿瘤 基因治疗 研究状况 受体细胞 载体
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人骨形态发生蛋白-2腺病毒表达载体转染人骨髓基质干细胞及对其增殖的影响 被引量:7
19
作者 李建军 刘建国 +5 位作者 韩东 孙洪斌 卜丽莎 杨绍 张文岚 徐莘香 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期421-424,共4页
目的 :用人骨形态发生蛋白 - 2腺病毒表达载体 ( Ad- BMP- 2 )转染人骨髓基质干细胞( h BMSC) ,以探讨基因转染对 h BMSC增殖的影响。方法 :将 Ad- BMP- 2转染体外培养的成人骨髓基质干细胞 ,利用免疫组化、原位杂交染色方法检测细胞内... 目的 :用人骨形态发生蛋白 - 2腺病毒表达载体 ( Ad- BMP- 2 )转染人骨髓基质干细胞( h BMSC) ,以探讨基因转染对 h BMSC增殖的影响。方法 :将 Ad- BMP- 2转染体外培养的成人骨髓基质干细胞 ,利用免疫组化、原位杂交染色方法检测细胞内骨形态发生蛋白 - 2 ( BMP- 2 )的表达 ,蛋白印迹法检测转染后细胞培养液中 BMP- 2分泌蛋白表达。然后通过流式细胞仪分析其对细胞增殖的影响。结果 :转染后 ,h BMP- 2基因在 m RNA水平和蛋白水平均有表达。蛋白印迹法检测到培养液中有 BMP- 2蛋白阳性表达。转染 h BMP- 2基因后 ,细胞经流式细胞仪分析 ,S期细胞比例增多 ,说明细胞 DNA的合成增加。结论 :Ad- BMP- 2可高效转染 h BMSC。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形态发生蛋白 骨髓基质干细胞 基因转染
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重组pcDNA3.1-hBMP-2转染人骨髓基质干细胞和对其增殖及血管内皮生长因子表达的影响 被引量:5
20
作者 李建军 王文军 +4 位作者 景元海 卜丽莎 杨绍 张文岚 徐莘香 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2004年第2期100-103,共4页
目的 构建人骨形成蛋白 - 2 (h BMP- 2 )真核表达载体 pc DNA3.1- h BMP- 2 ,转染人骨髓基质干细胞(MSCs) ,探讨基因转染对其增殖和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。 方法 利用重组 DNA和基因克隆技术构建重组载体 pc DNA3.1- h ... 目的 构建人骨形成蛋白 - 2 (h BMP- 2 )真核表达载体 pc DNA3.1- h BMP- 2 ,转染人骨髓基质干细胞(MSCs) ,探讨基因转染对其增殖和血管内皮生长因子 (VEGF)表达的影响。 方法 利用重组 DNA和基因克隆技术构建重组载体 pc DNA3.1- h BMP- 2 ;细胞培养和基因转染技术体外转染人 MSCs;免疫细胞化学、原位杂交和蛋白印迹法检测细胞 BMP- 2的表达 ;通过流式细胞仪和 VEGF探针原位杂交分析其对细胞增殖和 VEGF表达的影响。 结果 转染后细胞在 m RNA水平和蛋白质水平均表达 BMP- 2 ;转染后 S期细胞比例增多 ,提示细胞 DNA的合成增加 ;BMP- 2基因转染上调细胞 VEGF的表达。 结论 在脂质体介导下 ,pc DNA3.1- h BMP- 2转染 MSCs获得成功。基因转染后能促进细胞增殖并将通过使 VEGF的表达增加促进血管再生 ,为进一步骨缺损的基因治疗及构建组织工程骨奠定了实验基础。 展开更多
关键词 重组pcDNA3.1-hBMP-2 基因转染 骨髓基质干细胞 细胞增殖 血管内皮生长因子 基因表达 骨形成蛋白-2 组织工程
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