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环状RNA CDR1as促进小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化和成血管相关基因表达 被引量：3
1
作者 杨玮哲 韩祥祯 +2 位作者 郑美洁 周琦琪 何惠宇 《口腔疾病防治》 2022年第6期390-397,共8页
目的 探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1的反义转录物(antisense to the cerebellar degeneration-related protein 1 transcript,CDR1as)在Balb/C小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对其... 目的 探讨环状RNA小脑变性相关蛋白1的反义转录物(antisense to the cerebellar degeneration-related protein 1 transcript,CDR1as)在Balb/C小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)中过表达与低表达后对其成骨和成血管相关基因的影响。方法 体外培养及鉴定BMSCs,将含过表达与沉默circRNA CDR1as基因的慢病毒(lentiviruses,LV)载体及对照组慢病毒分别转染至小鼠BMSCs并筛选稳定的细胞株,分为circRNA CDR1as过表达组、过表达对照组、circRNA CDR1as低表达组和低表达对照组。各组成骨诱导14、21 d后分别进行茜素红染色和碱性磷酸酶染色;qRT-PCR检测目的基因circRNA CDR1as、成骨分化特异标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关基因2(runt-related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨桥素(osteopontin,OPN)、锌指结构转录因子(osterix,OSX)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen-I,COL-1),以及成血管特异标志物血管内皮生长因子(vascular endothelial grown factor,VEGF)、血管生成素-1(angiogenin-1,Ang-1)的mRNA表达水平。结果 茜素红和ALP染色均显示:过表达实验组钙沉淀和ALP染色区域多于过表达对照组;而低表达实验组钙沉淀和ALP染色区域少于低表达对照组,随着成骨诱导天数的增加,各组的钙沉淀和ALP染色面积也增大。qRT-PCR结果显示:过表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的mRNA表达水平显著升高(P<0.001);低表达实验组BMSCs中circRNA CDR1as、ALP、RUNX2、OCN、OPN、OSX、COL-1、VEGF和Ang-1的m RNA表达水平显著降低(P<0.001)。结论 过表达circRNA CDR1as基因可促进BMSCs的成骨分化及血管生成的能力;低表达circRNA CDR1as基因可抑制BMSCs的成骨分化及血管生成的能力。 展开更多
关键词 骨 环状RNA CDR1as 基因沉默 小鼠骨髓间充质干细胞 Runt相关基因2 Ⅰ型胶原蛋白 血管内皮生长因子 成骨分化 骨组织工程
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脂多糖干预小鼠骨髓来源巨噬细胞的凋亡
2
作者 郑美洁 杨玮哲 +3 位作者 刘佳林 韩祥祯 周琦琪 何惠宇 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第31期4962-4966,共5页
背景:巨噬细胞是机体应对外界刺激的一道免疫防线,任何生物材料植入体内后的相关反应均与巨噬细胞介导的免疫反应有联系。目的:探讨脂多糖对小鼠骨髓来源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外分离培养C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞,分别加入含0... 背景:巨噬细胞是机体应对外界刺激的一道免疫防线,任何生物材料植入体内后的相关反应均与巨噬细胞介导的免疫反应有联系。目的:探讨脂多糖对小鼠骨髓来源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外分离培养C57BL/6小鼠骨髓来源巨噬细胞,分别加入含0(对照),10,100,1000μg/L脂多糖的DMEM完全培养基。培养24 h后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率,Hoechst染色观察细胞形态,RT-PCR检测白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α及凋亡相关因子Bax、P53的mRNA表达。结果与结论:①各质量浓度脂多糖组的细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),其中100,1000μg/L脂多糖组细胞凋亡率高于10μg/L脂多糖组(P<0.05);②Hoechst染色显示,对照组细胞核正常,细胞发生凋亡时染色质浓缩;各质量浓度脂多糖组细胞发生不同程度凋亡,凋亡细胞的细胞核呈致密浓染或碎块状致密浓染,颜色稍有些发白,尤以1000μg/L最明显;③RT-PCR检测显示,各质量浓度脂多糖组细胞的白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Bax及P53 mRNA表达均高于对照组(P<0.01或P<0.001),且随着脂多糖质量浓度的升高,白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达呈先升高后降低的趋势,Bax、P53 mRNA表达呈升高趋势;④结果表明,脂多糖可诱导骨髓来源巨噬细胞的凋亡。 展开更多
关键词 植入体 骨髓 巨噬细胞 脂多糖 凋亡 骨组织工程
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