术前短期化疗对脊柱结核手术安全性的实验研究 被引量：7

1

作者 王文军 王湘江 +4 位作者 王麓山 晏怡果 舒用志 杨慧龄 李子珊 《中国骨与关节外科》 2010年第6期470-475,共6页

目的通过巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)动态检测脊柱结核患者围手术期外周血的MTB-DNA的IS6110基因的含量,评估术前短期化疗对脊柱结核患者的手术安全性。方法根据IS6110基因设计两对特异性硫化修饰引物,结合高效... 目的通过巢式聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)动态检测脊柱结核患者围手术期外周血的MTB-DNA的IS6110基因的含量,评估术前短期化疗对脊柱结核患者的手术安全性。方法根据IS6110基因设计两对特异性硫化修饰引物,结合高效保真聚合酶建立的巢式PCR,动态检测25例术前短期化疗的脊柱结核患者术前1天、术后1天、术后7天、术后14天外周血MTB-DNA的IS6110基因的含量变化,对外周血扩增产物IS6110基因含量进行比较分析。结果脊柱结核患者围手术期外周血IS6110基因含量变化的两种趋势:(1)15例患者伴随术后结核病灶的清除,外周血中的结核杆菌IS6110基因的从术后1天就开始逐渐减少;(2)10例患者术后1天时外周血中结核杆菌IS6110基因有短暂回升,但与术前1天外周血中结核杆菌IS6110基因含量比较无显著性差异(P>0.05),随着术后持续抗痨治疗,结核杆菌IS6110基因含量在术后1～2周均减少,均未发生结核杆菌血行播散并发症。结论如果脊柱结核患者一般情况好,术前短期化痨后行手术治疗安全有效。 展开更多

关键词 脊柱结核 术前化疗 巢式PCR 手术

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弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达 被引量：6

2

作者 杨慧龄 肖建华 +2 位作者 梁瑜 张愉快 刘传爱 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期29-32,共4页

目的　构建弓形虫ZS2株pWR450 1 微线体蛋白 1 (MIC1 )原核表达重组质粒 ,对MIC1基因进行序列测定 ,并在不同大肠杆菌中表达。方法　用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段 ,酶切 ,连接 ,重组入pWR450 1表达载... 目的　构建弓形虫ZS2株pWR450 1 微线体蛋白 1 (MIC1 )原核表达重组质粒 ,对MIC1基因进行序列测定 ,并在不同大肠杆菌中表达。方法　用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段 ,酶切 ,连接 ,重组入pWR450 1表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定 ,进行序列测序后转化大肠杆菌TG 1、JM1 0 9(DE3)和DH5α。在不同菌体浓度及不同剂量异丙基 β D 硫代半乳糖诱导下 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定MIC1融合蛋白的表达。 结果　从ZS2株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆后获得pWR450 1 /MIC1重组质粒 ,测序结果表明 ,MIC1这部分基因与弓形虫RH株相应基因序列完全一致 ,高度保守。该基因可在不同大肠杆菌中表达相对分子质量约 70 0 0 0的融合蛋白。结论　构建了弓形虫ZS2株pWR450 1 MIC1重组质粒 。 展开更多

关键词 弓形虫属 克隆 微线体蛋白1 MIC1 基因 测序 表达

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pcDNA3.1/NT-GFP小凹蛋白1及突变体表达载体的构建及功能分析 被引量：6

3

作者 徐阳炎 杨慧龄 +2 位作者 涂剑 何淑雅 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2005年第3期297-300,共4页

目的构建pcDNA3.1/NTGFP小凹蛋白1及对突变体表达载体及表达蛋白生物活性进行分析。方法采用硫化修饰引物与Pfu酶结合的高度保真性聚合酶链反应体系,自行设计多对引物,分别扩增带His标签的小凹蛋白1全长目的片段、小凹蛋白1(缺失81～10... 目的构建pcDNA3.1/NTGFP小凹蛋白1及对突变体表达载体及表达蛋白生物活性进行分析。方法采用硫化修饰引物与Pfu酶结合的高度保真性聚合酶链反应体系,自行设计多对引物,分别扩增带His标签的小凹蛋白1全长目的片段、小凹蛋白1(缺失81～101位氨基酸)突变体1片段及小凹蛋白1(缺失143～156位氨基酸)突变体2片段;分别亚克隆入pcDNA3.1/NTGFPTOPO真核表达载体,转化TOP10E.coli大肠杆菌,在含氨苄的固体LB培养基上随机挑取6个克隆,分别提取质粒后,用PCR法筛选含正确插入阅读框的阳性克隆子并测序鉴定。用脂质体介导法瞬时转染入HepG2细胞,用MTT法、Westernblot法初步鉴定GFPHis小凹蛋白1及突变体重组融合蛋白的生物学活性。结果筛选得到正确pcDNA3.1/NTGFPHis小凹蛋白1及突变体表达载体,测序结果无碱基突变及阅读框移码,GFPHis小凹蛋白1及突变体重组融合蛋白具有天然表达蛋白相似的生物学活性。结论成功构建具有生物学活性的pcDNA3.1/NTGFP小凹蛋白1及突变体表达载体,为小凹蛋白1的功能研究奠定基础。 展开更多

关键词 分子生物学 小凹蛋白1 突变体 克隆 聚合酶链反应

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提高窖蛋白基因扩增特异性的逆转录聚合酶链方法 被引量：6

4

作者 徐阳炎 杨慧龄 +2 位作者 游咏 覃丽 涂剑 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期59-62,共4页

目的建立一种可消除逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)中非特异条带生成,提高逆转录聚合酶链反应精确度的PCR体系。方法最近作者报道了硫化修饰的引物结合具有校正活性聚合酶可提高PCR反应... 目的建立一种可消除逆转录聚合酶链反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)中非特异条带生成,提高逆转录聚合酶链反应精确度的PCR体系。方法最近作者报道了硫化修饰的引物结合具有校正活性聚合酶可提高PCR反应特异性,但其抑制非特异性扩增的效率有待进一步验证和精确测定。用小鼠窖蛋白1(caveolin-1,Cav1)中1对引物,ECV304细胞、HepG2细胞、小鼠肝、主动脉血管组织逆转录cDNA以及含人窖蛋白基因的倍比稀释质粒为模板,比较普通RT-PCR反应与硫化修饰引物结合不同校正活性聚合酶对非特异性扩增的抑制效率。结果引物3′末端硫化修饰结合具有校正活性的聚合酶可特异性关闭PCR反应中引物3′末端与模板非特异结合而引起的非特异性扩增,只允许引物3′末端与模板完全匹配的延伸反应得以进行。与普通PCR反应相比,能有效抑制50μL体系中,50ng约含2×104不匹配模板拷贝数的非特异扩增。结论引物3′端引入抗酶切的硫化修饰后,引物与模板非特异结合将由于校正活性聚合酶长期停留在试图纠正引物与模板不一致状态而得不到有效延伸,提高了PCR反应的特异性。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 硫化修饰 校正聚合酶 逆转录聚合酶链

原文传递

衡阳市口腔毛滴虫感染的调查分析 被引量：7

5

作者 唐云环 廖力 杨慧龄 《衡阳医学院学报》 1997年第2期148-149,152,共3页

本文对衡阳市453例口腔科门诊病人和体检者进行口腔毛滴虫检查，检出口腔毛滴虫者150人，阳性率为33．1％；口腔健康组为18．4％；有口腔疾病患组为40.1％，其中牙结石及口腔卫生不良者为42％，冠周炎为48．8％，龈炎及牙周炎者为37．6... 本文对衡阳市453例口腔科门诊病人和体检者进行口腔毛滴虫检查，检出口腔毛滴虫者150人，阳性率为33．1％；口腔健康组为18．4％；有口腔疾病患组为40.1％，其中牙结石及口腔卫生不良者为42％，冠周炎为48．8％，龈炎及牙周炎者为37．6％。结果显示：口腔毛滴虫与口腔疾患密切相关。 展开更多

关键词 口腔毛滴虫 口腔疾病 流行病学

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Caveolae/Caveolins与病毒感染 被引量：4

6

作者 罗迪贤 杨慧龄 +1 位作者 廖端芳 万艳平 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期321-324,共4页

Caveolae是直径为 5 0～ 10 0nm的细胞表面特异性内陷结构 ,Caveolins是它的主要标志蛋白。Caveolae/Caveolins在许多生理、病理活动中起重要作用。近年来还发现 ,Caveolae/Caveolins介导了许多病毒的感染 ,参与了病毒的吸附、穿入、转... Caveolae是直径为 5 0～ 10 0nm的细胞表面特异性内陷结构 ,Caveolins是它的主要标志蛋白。Caveolae/Caveolins在许多生理、病理活动中起重要作用。近年来还发现 ,Caveolae/Caveolins介导了许多病毒的感染 ,参与了病毒的吸附、穿入、转运、生物合成、组装及出泡等环节。这一病毒感染途径的发现 ,有助于抗病毒新药的开发和肿瘤治疗新领域的开辟。 展开更多

关键词 CAVEOLAE Caveolins 病毒 感染

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低氘水抑制宫颈癌Hela细胞增殖和侵袭能力的研究 被引量：5

7

作者 张力 张瀚彬 +4 位作者 陈淼 邬永富 黄浩海 祝葆华 杨慧龄 《中国医药导报》 CAS 2014年第9期20-25,共6页

目的探讨培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力的影响。方法用含不同氘浓度的培养基培养Hela细胞,分为150×10-6、100×10-6、75×10-6和50×10-6共4组,其中,氘浓度为150×10-6的培养基为对照组,其... 目的探讨培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力的影响。方法用含不同氘浓度的培养基培养Hela细胞,分为150×10-6、100×10-6、75×10-6和50×10-6共4组,其中,氘浓度为150×10-6的培养基为对照组,其他为实验组;用四甲基噻唑蓝(MTT)法、划痕实验检测随着培养基中氘浓度下降,Hela细胞增殖和迁移侵袭力的变化;流式细胞术检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞周期的影响;蛋白免疫印迹和免疫组化实验检测含不同氘浓度的培养基对Hela细胞肿瘤相关蛋白p21、Na+/K+-ATPase表达的影响。结果 MTT实验结果显示,随着培养基中氘浓度的降低Hela细胞增殖得到明显的抑制,其中氘浓度为50×10-6的培养基抑制效果最明显,相同条件下与对照组相比在72 h抑制率达到39.54%(P<0.01);划痕实验可观察到Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中细胞迁移能力得到明显抑制(P<0.05);Hela细胞在氘浓度为75×10-6、50×10-6的培养基中培养24 h后,流式细胞术检测S期明显低于对照组(P<0.01);Hela细胞肿瘤相关蛋白p21在氘浓度为100×10-6、75×10-6和50×10-6的培养基中的表达与对照组比较,差异均有高度统计学意义(P<0.01)。结论培养基中氘浓度的下降对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭能力有明显的抑制作用。 展开更多

关键词 低氘水 HELA 增殖 P21蛋白

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Caveolin-1在肿瘤发生发展及耐药机制中的作用 被引量：5

8

作者 杜丽芬 杨慧龄 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2007年第4期314-318,共5页

Caveolin-1是细胞膜微囊(caveolae)的重要组成结构,在大多数正常的细胞中表达丰富。通过其脚手架区域,在多种信号分子向胞内传递信息的过程中发挥着重要作用,其功能研究是生物学研究的热点。而近来研究表明caveolin-1在大多数肿瘤细胞... Caveolin-1是细胞膜微囊(caveolae)的重要组成结构,在大多数正常的细胞中表达丰富。通过其脚手架区域,在多种信号分子向胞内传递信息的过程中发挥着重要作用,其功能研究是生物学研究的热点。而近来研究表明caveolin-1在大多数肿瘤细胞中表达下降甚至缺如,过表达caveolin-1能抑制其恶性生长性状。近来的癌细胞转化及基因敲除等实验结果倾向于caveolin-1就是7q31位点的肿瘤抑制基因。但在少数肿瘤如前列腺癌、乳腺癌患者的细胞中检测到caveolin-1高表达。在纤维原细胞和上皮细胞的凋亡中起促进作用。Caveolin-1与多种肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭、转移以及凋亡关系密切,且可能是肿瘤细胞多药耐药逆转的一个新靶点,以类似于介导胆固醇流出途径的方式将药物排出细胞导致细胞耐药性增强。 展开更多

关键词 CAVEOLIN-1 肿瘤 肿瘤抑制基因 凋亡 多药耐药性

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精准医学领域肺纤维化的新兴治疗策略

9

作者 夏冬 杨慧龄 《新医学》 CAS 2024年第5期373-380,共8页

肺纤维化(PF)是一种严重危害人体健康的慢性进行性肺部疾病。其主要特征是肺组织异常纤维化和瘢痕化,导致肺泡逐渐被纤维组织替代,最终引发呼吸衰竭,给人体健康带来严重威胁。迄今为止,PF的治疗一直是一项艰巨的挑战。然而,近年来随着... 肺纤维化(PF)是一种严重危害人体健康的慢性进行性肺部疾病。其主要特征是肺组织异常纤维化和瘢痕化,导致肺泡逐渐被纤维组织替代,最终引发呼吸衰竭,给人体健康带来严重威胁。迄今为止,PF的治疗一直是一项艰巨的挑战。然而,近年来随着精准医学理念和新兴疗法的兴起,对PF的认识和治疗策略也在不断进步。该文从分子生物学和遗传学的角度全面回顾PF在精准医学领域内新兴治疗策略的最新研究进展,揭示了利用高通量生物信息技术与分析等分子生物学手段挖掘新兴治疗策略的潜在可能性。深入了解这些进展有助于临床医师更好地理解PF的病理生理过程,并为未来的临床实践提供新的思路和策略,以改善患者的预后和生活质量。 展开更多

关键词 肺纤维化 精准医学 新兴治疗策略 分子生物学 遗传学

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低氘水对肝癌HepG2细胞增殖和侵袭能力的抑制作用 被引量：4

10

作者 王坤 祝葆华 +7 位作者 王宏强 张力 李婕 陈淼 张瀚彬 邬永富 蔡晶 杨慧龄 《广东医学院学报》 2013年第3期241-244,共4页

目的探讨低氘水(deuterium-depleted water,DDW)对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭能力的抑制作用。方法 HepG2细胞及正常肝细胞LO2用50、75、100、150ppm DDW(纯净水对照组)处理,用MTT法、平皿克隆实验检测细胞增殖、侵袭转移能力,Western blo... 目的探讨低氘水(deuterium-depleted water,DDW)对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭能力的抑制作用。方法 HepG2细胞及正常肝细胞LO2用50、75、100、150ppm DDW(纯净水对照组)处理,用MTT法、平皿克隆实验检测细胞增殖、侵袭转移能力,Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果 100ppm DDW处理24h对LO2细胞、72h对HepG2增殖抑制无影响(P>0.05)。HepG2在50、75ppm DDW中细胞克隆数均低于对照组,而LO2细胞克隆数高于对照组(P<0.01)。50、75、100ppm DDW处理后HepG2细胞PCNA表达明显低于对照组(P<0.01)。结论 DDW可抑制HepG2细胞增殖和侵袭能力,但促进正常细胞LO2生长,这可能与PCNA表达下调有关。 展开更多

关键词 低氘水 HEPG2细胞 LO2细胞 增殖 PCNA

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弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序 被引量：4

11

作者 杨慧龄 肖建华 +3 位作者 刘彦 杨秋林 张愉快 刘传爱 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期324-326,共3页

目的　构建弓形虫RH株 pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒 ,为进一步DNA免疫做准备。方法　用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段 ,纯化后重组入 pUC 19克隆载体 ,再经含IPTG ,XGal... 目的　构建弓形虫RH株 pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒 ,为进一步DNA免疫做准备。方法　用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段 ,纯化后重组入 pUC 19克隆载体 ,再经含IPTG ,XGal氨苄培养基蓝白筛选 ,挑选白色克隆酶切 ,低溶点琼脂糖纯化 ,回收目的基因亚克隆入pcDNA3 .1( + ) ,经氨苄培养基过夜培养挑选 6个克隆提纯酶切 ,PCR鉴定和测序。结果　从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA 8基因片段 ,克隆成功pcDNA3 .1( + ) GRA 8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。 展开更多

关键词 弓形虫 GRA8基因 真核表达重组质粒 构建 鉴定 测序

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基于中医传承辅助平台挖掘拟组用于卵巢早衰的中药组方 被引量：4

12

作者 李娇 邓丽君 +5 位作者 乡世健 何滔 蔡慧敏 刘光明 杨慧龄 周本杰 《中国药业》 CAS 2022年第11期23-28,共6页

目的基于中医传承辅助平台分析中医药治疗卵巢早衰的方剂用药规律,为卵巢早衰有效中药组方的筛选及开发提供参考。方法检索中国知网及万方数据库中2010年至2020年运用中医药治疗卵巢早衰的文献,筛选并构建中医药治疗卵巢早衰的方药数据... 目的基于中医传承辅助平台分析中医药治疗卵巢早衰的方剂用药规律,为卵巢早衰有效中药组方的筛选及开发提供参考。方法检索中国知网及万方数据库中2010年至2020年运用中医药治疗卵巢早衰的文献,筛选并构建中医药治疗卵巢早衰的方药数据库,运用中医传承辅助平台V 2.5软件集成的数据挖掘方法,分析中医药治疗卵巢早衰的组方规律,进而拟组治疗卵巢早衰的中药组方。结果共检索到文献6151篇,最终纳入236篇。涉及238首中药方剂,包含155味中药,总使用频次为2827次。使用频次不少于30次的中药有29味,涉及使用频次2053次,主要为滋阴药、温阳药和健脾益气药,分别占39.99%(821/2053)、25.62%(526/2053)、16.51%(339/2053)。药味多甘、辛,分别占44.95%(1989/4425)和21.22%(939/4425);药性多温、平,分别占46.27%(1258/2719)和29.39%(799/2719);多入肝、肾、脾三经,分别占29.39%(1986/6758)、25.85%(1747/6758)、15.34%(1037/6758)。得到常用药物组合33组,用药规则12对。结论中医药治疗卵巢早衰以补肾、益气、活血为主,结合祛湿化浊药、疏肝解郁药、清热凉血药等辅助治疗,挖掘拟组的补肾健脾活血中药组方具有一定价值。 展开更多

关键词 卵巢早衰 中医传承辅助平台 中药组方 方剂用药规律

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乳腺癌钼靶X线特征表现与C-erbB-2表达相关性的研究 被引量：2

13

作者 李青春 姜浩 +5 位作者 陆瑶 杨慧龄 刘进才 肖文连 罗光华 胡义燕 《南华大学学报（医学版）》 2010年第5期624-627,共4页

目的研究乳腺癌钼靶X线特征表现与C-erbB-2表达的相关性。方法回顾分析91例术后病理诊断为乳腺癌患者的乳腺X线摄影胶片,按照ACR创立并推荐的BI-RADS,将X线所见分肿块(形状、边缘)、局限致密浸润影、恶性钙化进行描述,并与C-erbB-2表达... 目的研究乳腺癌钼靶X线特征表现与C-erbB-2表达的相关性。方法回顾分析91例术后病理诊断为乳腺癌患者的乳腺X线摄影胶片,按照ACR创立并推荐的BI-RADS,将X线所见分肿块(形状、边缘)、局限致密浸润影、恶性钙化进行描述,并与C-erbB-2表达进行对照,分析其相关性。结果乳腺癌恶性钙化灶与CerbB-2的表达有显著相关性(P<0.05)。结论乳腺癌钼靶X线特征表现与C-erbB-2表达有一定关联性,可初步判断C-erbB-2表达情况,并为判断肿瘤生物学行为及患者预后提供一定参考价值。 展开更多

关键词 乳腺癌 钼靶X线摄影 人类上皮生长因子2

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小凹蛋白1可能参与血管紧张素转化酶2介导的病毒感染 被引量：1

14

作者 杨慧龄 徐阳炎 +1 位作者 罗迪贤 廖端芳 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2006年第4期353-354,358,共3页

小凹是细胞信号在细胞膜区域的枢纽结构,为细胞内外信号转导发生、募集、串联、级联、交汇(cross-talk)的集散单元。其表面标志蛋白是小凹蛋白。小凹蛋白基因家族的结构与功能在进化中从蠕虫到人都是非常相似与保守的,其生物学功能研究... 小凹是细胞信号在细胞膜区域的枢纽结构,为细胞内外信号转导发生、募集、串联、级联、交汇(cross-talk)的集散单元。其表面标志蛋白是小凹蛋白。小凹蛋白基因家族的结构与功能在进化中从蠕虫到人都是非常相似与保守的,其生物学功能研究是近年的热点研究领域之一。本文就小凹/小凹蛋白在介导血管紧张素转化酶2介导的病毒感染作用提出一些新思路。 展开更多

关键词 病理学与病理生理学 小凹 病毒感染 信号传导 骨架区域 血管紧张素转化酶2

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低氘水对人黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、凋亡的调控作用及其机制探讨 被引量：2

15

作者 吴斯敏 林贤桂 +1 位作者 杜歆玥 杨慧龄 《山东医药》 CAS 2022年第8期1-5,共5页

目的观察低氘水(DDW)对人黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、凋亡的调控作用,并探讨相关机制。方法A375细胞与人角质形成细胞HaCaT分别用氘体积分数为0.0025%、0.0050%、0.0100%的DDW和超纯水(氘体积分数0.0150%)配成的高糖DMEM培养基培养。... 目的观察低氘水(DDW)对人黑色素瘤A375细胞增殖、迁移、凋亡的调控作用,并探讨相关机制。方法A375细胞与人角质形成细胞HaCaT分别用氘体积分数为0.0025%、0.0050%、0.0100%的DDW和超纯水(氘体积分数0.0150%)配成的高糖DMEM培养基培养。采用细胞增殖实验和平板克隆形成实验检测A375细胞和Ha⁃CaT细胞的增殖能力,采用划痕实验检测两种细胞迁移能力,DAPI染色观察两种细胞形态变化。采用流式细胞仪检测A375细胞凋亡和细胞周期分布情况,ATP酶测试盒检测A375细胞Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶、总ATP酶活性,采用Westernblotting法检测A375细胞中的凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax)及Caspase通路蛋白(Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-9、cleavedCaspase-9、PARP、cleavedPARP)。结果与超纯水处理相比,0.0100%、0.0050%、0.0025%氘体积分数的DDW处理的A375细胞增殖抑制率依次增高,克隆形成率和细胞迁移率依次降低(P均<0.05);DDW处理的A375细胞出现核染色质固缩、凝聚、核碎裂等现象,细胞核中凋亡小体增多。DDW对HaCat细胞的增殖能力、集落形成能力、细胞迁移能力及细胞形态没有明显影响。与超纯水处理相比,0.0100%、0.0050%、0.0025%氘体积分数的DDW处理的A375细胞凋亡率及G_(0)/G_(1)期细胞比例依次增高,G_(2)/M期细胞比例依次降低(P均<0.05)。与超纯水处理相比,0.0100%、0.0050%、0.0025%氘体积分数的DDW处理的A375细胞Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶、总ATP酶活性及Bcl-2、Caspase-9、PARP蛋白表达依次降低,Bax、cleaved Caspase-3/9、cleavedPARP蛋白表达依次增高(P均<0.05)。结论低氘水能选择性地抑制A375细胞增殖、迁移并诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性,而对人角质形成细胞无明显影响;低氘水的作用机制可能与抑制ATP酶活性、激活Caspase信号通路有关。 展开更多

关键词 低氘水 黑色素瘤 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 细胞周期 CASPASE

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弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序 被引量：1

16

作者 杨慧龄 肖建华 +2 位作者 梁瑜 张愉快 刘传爱 《南华大学学报（医学版）》 2002年第2期111-114,共4页

目的　构建弓形虫ZS2分离株pWR45 0 - 1 -MIC1原核表达重组质粒 ,为进一步表达及免疫做准备。方法　用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位 ,自行设计引物 ,用聚合酶链反应(PCR)技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋... 目的　构建弓形虫ZS2分离株pWR45 0 - 1 -MIC1原核表达重组质粒 ,为进一步表达及免疫做准备。方法　用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位 ,自行设计引物 ,用聚合酶链反应(PCR)技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋白 1 (MIC1 )的基因片段 ,经酶切、连接、重组入pWR45 0 - 1原核表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定和测序。结果　从ZS2分离株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆成功pWR45 0 - 1 -MIC1重组质粒。测序表明MIC1这部分基因与RH株相应碱基序列完全一致 ,高度保守。为下一步表达及免疫奠定基础。 展开更多

关键词 弓形虫 微线体蛋白1 部分基因原核表达 重组质粒 pWR450-1-MIC1 构建 鉴定 测序 克隆

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一种可消除非特异性条带高精度、多用途的PCR方法 被引量：1

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作者 徐阳炎 杨慧龄 +1 位作者 罗迪贤 廖端芳 《美国中华临床医学杂志》 2004年第4期306-309,共4页

目的 建立一种可消除RT-PCR反应中非特异条带生成，提高PCR反应的精确度的PCR体系。方法 比较普通RT-PCR反应与硫化修饰引物结合不同校正活性聚合酶对非特异性扩增的抑制能力。结果 引物3′末端硫化修饰结合具有校正活性的聚合酶可特异... 目的 建立一种可消除RT-PCR反应中非特异条带生成，提高PCR反应的精确度的PCR体系。方法 比较普通RT-PCR反应与硫化修饰引物结合不同校正活性聚合酶对非特异性扩增的抑制能力。结果 引物3′末端硫化修饰结合具有校正活性的聚合酶可特异性关闭PCR反应中引物3′末端与模板非特异结合而引起的非特异性扩增，只允许引物3′末端与模板完全匹配的延伸反应得以进行。结论 利用校正聚合酶是严格模板依赖型校正活性酶的特点，将引物3′末端硫化修饰后，由于校正聚合酶在PCR延伸开始之前首先会依据模板检查引物是否完全与模板匹配，如果不匹配则将根据模板先将引物修改得和模板一致后才允许延伸的特性，而引物3′端引入抗酶切的硫化修饰后，引物与模板非特异结合将由于校正活性聚合酶长期停留在试图纠正引物与模板不一致状态而得不到有效延伸，从而只允许引物与模板完全匹配的延伸得以扩增，大大提高了PCR反应的特异性。 展开更多

关键词 非特异性 引物 扩增 聚合酶 RT-PCR 修饰 PCR反应 根据 首先 不一致

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低氘水抗肿瘤作用的研究进展及其可能机制 被引量：1

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作者 陈淼 刘光甫 +2 位作者 陈楚言 杨慧龄 祝葆华 《中国医药导报》 CAS 2015年第4期155-158,F0003,共5页

饮用低氘水可以预防疾病、延缓衰老、活化机体免疫细胞,特别是对某些癌症等疾病的辅助治疗,是近年国外核医学领域和水生理学领域对低氘水研究的重大突破。目前,抗癌化疗药物仍是肿瘤的重要治疗手段,但其毒副作用强,易导致多药耐药的产生... 饮用低氘水可以预防疾病、延缓衰老、活化机体免疫细胞,特别是对某些癌症等疾病的辅助治疗,是近年国外核医学领域和水生理学领域对低氘水研究的重大突破。目前,抗癌化疗药物仍是肿瘤的重要治疗手段,但其毒副作用强,易导致多药耐药的产生,而低氘水使用方便,无毒副作用,且可能对肿瘤的多药耐药逆转有巨大作用。其抗癌机制极其复杂,故本文对低氘水抗肿瘤作用的研究进展及其可能机制做一综述。 展开更多

关键词 低氘水 抗肿瘤 机制

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血管形成抑制剂Tumstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆 被引量：1

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作者 方唯意 刘真 +8 位作者 杨慧龄 周宏珍 刘腾飞 王爽 李欣 刘求真 江庆萍 谢思明 姚开泰 《湖南师范大学学报（医学版）》 2007年第2期1-4,共4页

目的:检测Tumstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法:利用半定量RT-PCR方法检测Tumstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法... 目的:检测Tumstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法:利用半定量RT-PCR方法检测Tumstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Tumstatin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果:与相对正常鼻咽组织相比,Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Tumstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与GenBank中Tumstatin基因相应序列比较,100%同源。结论:Tumstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Tumstatin基因,为下一步将Tumstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 肿瘤抑素 胶原Ⅳ 鼻咽癌 血管生成抑制因子

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氡暴露致肿瘤的研究进展

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作者 杨锋 杨慧龄 《微量元素与健康研究》 CAS 2012年第3期63-64,68,共3页

氡是一种分布广泛的惰性气体,在衰变过程中放出α、β、γ粒子后,衰变为氡子体,氡及氡子体对人类有明显的致癌效应,尤其氡在致肺癌和白血病方面日益受到人们的重视。对氡及其子体对人类辐射危害的研究成果进行综述。

关键词 氡 肺癌 白血病 肿瘤

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