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人mda-7/IL-24对淋巴瘤细胞Namalwa的抑制作用 被引量：4
1
作者 段永娟 马小彤 +3 位作者 董成亚 张芳 林永敏 杨宾霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第5期417-422,共6页
目的:研究黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7,又称IL-24)对淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的抑制作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测10个造血系统恶性肿瘤细胞系(Namalwa、Raji、K562、NB4、U937、Ramou... 目的:研究黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7,又称IL-24)对淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的抑制作用。方法:用半定量RT-PCR方法检测10个造血系统恶性肿瘤细胞系(Namalwa、Raji、K562、NB4、U937、Ramous、CEM、KG1a、HL60、J6-1)中mda-7/IL-24的表达情况。用RT-PCR方法从活化的人外周血单个核细胞(PBMC)中克隆mda-7/IL-24编码区,构建真核表达载体pTarget-IL-24。经测序鉴定后,用脂质体法转染Namalwa细胞,筛选稳定表达细胞株。转染细胞经RT-PCR和Western blotting证实mda-7/IL-24的表达。通过MTF法、集落形成试验、流式细胞术、裸鼠体内成瘤实验来评价mda-7/IL-24对肿瘤细胞增殖、生长特性、集落形成、凋亡情况、体内致瘤能力的作用。结果:10个造血系统恶性肿瘤细胞系中未检测到mda-7/IL-24的表达;转染重组质粒pTarget-IL-24的Namalwa细胞在mRNA与蛋白水平都有mda-7/IL-24的表达;稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞增殖活力以及集落形成能力与转染空载体的对照组相比明显下降(P<0.05);但是两者的凋亡率比较无统计学意义。裸鼠体内移植瘤实验结果显示稳定表达mda-7/IL-24的Namalwa细胞株的致瘤性明显低于转染空载体的对照组(P<0.05)。结论:mda-7/IL-24对来源于Burkitt淋巴瘤的Namalwa细胞系具有明显的增殖抑制作用,为Burkitt淋巴瘤的基因治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因-7 IL-24 淋巴瘤 基因治疗
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小鼠β-防御素2与白介素18肿瘤疫苗的协同抗白血病作用研究 被引量：3
2
作者 王淑为 马小彤 +3 位作者 徐玢 杨宾霞 段永娟 林永敏 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期40-44,共5页
肿瘤免疫方面的最新进展表明,有效的抗肿瘤免疫需要天然免疫和获得性免疫的协同作用。我们在前期工作中成功制备了小鼠β-防御素2(MBD2)和IL-18基因修饰的白血病疫苗,并证实了两种瘤苗的抗白血病作用。为了进一步增强抗肿瘤效果,本实验... 肿瘤免疫方面的最新进展表明,有效的抗肿瘤免疫需要天然免疫和获得性免疫的协同作用。我们在前期工作中成功制备了小鼠β-防御素2(MBD2)和IL-18基因修饰的白血病疫苗,并证实了两种瘤苗的抗白血病作用。为了进一步增强抗肿瘤效果,本实验将MBD2和IL-18瘤苗联合应用于小鼠体内,观察是否具有协同抗白血病作用并探索机制。致瘤性实验证实,MBD2与IL-18联合瘤苗对致瘤性的抑制作用明显高于MBD2或IL-18单独瘤苗(P<0.05);免疫保护作用结果显示,联合瘤苗接种组100%小鼠仍可长期存活;治疗实验显示,与MBD2或IL-18单独瘤苗相比,联合瘤苗具有更显著的治疗效果(P<0.05)。上述结果表明,MBD2和IL-18联合瘤苗可协同诱导更有效的抗肿瘤免疫反应和免疫保护作用。机制探讨发现,联合瘤苗能诱导脾脏淋巴细胞的CTL杀伤活性以及IFN-γ产生明显增强。提示,MBD2和IL-18可能协同诱导T细胞增殖,产生IFN-γ,使免疫系统能更有效地杀伤清除白血病细胞。 展开更多
关键词 小鼠β-防御素2 白细胞介素18 L1210白血病 肿瘤疫苗
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人mda-7/IL-24对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用 被引量：3
3
作者 杨宾霞 马小彤 +3 位作者 董成亚 张芳 林永敏 段永娟 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期422-427,共6页
目的:探索人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测11个造血系统恶性肿瘤细胞系mda-7受体的转录情况。用脂质体转染法将构建... 目的:探索人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)对慢性粒细胞白血病K562细胞的抑制作用。方法:用RT-PCR法检测11个造血系统恶性肿瘤细胞系mda-7受体的转录情况。用脂质体转染法将构建的重组真核表达载体pTarget-IL-24转染K562细胞。以RT-PCR和Western blotting方法检测转染的K562细胞mda-7的表达情况;通过MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Annexin-Ⅴ/PI检测mda-7/IL-24对K562细胞增殖、集落形成、细胞周期和凋亡的影响;以裸鼠移植瘤模型观察mda-7对K562细胞移植瘤的治疗作用。结果:在11个造血系统恶性肿瘤细胞系(NB4、HL60、CEM、Namalwa、Jurkat、KG1a、U937、K562、Ramos、J6-1、HEL细胞)中没有检测到完整mda-7受体的表达。转染mda-7的K562细胞能显著表达mda-7mRNA及其蛋白;其与转染空载体和未转染的K562细胞相比,细胞增殖活力以及集落形成能力明显下降(P<0.05),细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),但细胞凋亡率没有明显变化。裸鼠体内实验证实了mda-7/IL-24明显抑制K562细胞移植瘤生长(P<0.01)。结论:mda-7/IL-24对白血病细胞系K562具有明显的体内外抑制作用,该作用与mda-7/IL-24引起细胞周期G0/G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因(mda-7/IL-24) 基因治疗 慢性粒细胞白血病 细胞周期
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mda7-/IL2-4和IL2-4delE5诱导急性髓系白血病细胞向单核细胞分化 被引量：3
4
作者 姚兴荣 马小彤 +2 位作者 杨宾霞 段永娟 林永敏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期244-250,共7页
目的:研究人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)及其剪接体IL-24 delE5与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞分化的关系。方法:十四烷酰佛波醇-乙酯(12-O-tetrade-canoylp... 目的:研究人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)及其剪接体IL-24 delE5与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞分化的关系。方法:十四烷酰佛波醇-乙酯(12-O-tetrade-canoylphorbol-13-acetate,TPA)处理人急性髓系白血病细胞系U937、HL-60,real-time PCR及Western blotting检测细胞中mda-7/IL-24和IL-24 delE5的表达,FACS检测细胞表面CD11b、CD14和CD115的表达。siRNA干扰U937、HL-60细胞中mda-7/IL-24和IL-24 delE5的表达后,再以TPA诱导细胞分化,FACS检测CD11b、CD14和CD115的表达。用前期构建的mda-7/IL-24和IL-24 delE5载体转染U937、HL-60及AML-M5患者的原代白血病细胞,观察异位过表达mda-7/IL-24和IL-24 delE5能否诱导白血病细胞向单核细胞分化。结果:TPA在诱导U937、HL-60细胞向单核细胞分化过程中显著促进mda-7/IL-24及其剪接体IL-24 delE5的表达,用siRNA干扰mda-7/IL-24及IL-24 delE5的表达后,TPA诱导U937、HL-60细胞向单核细胞分化的作用也被阻断。异位过表达mda-7/IL-24和IL-24 delE5可诱导U937、HL-60以及原代AML细胞向单核细胞分化:U937、HL-60细胞表面CD11b和CD14表达均显著升高,CD115表达仅在U937细胞有显著升高;3例AML-M5患者的原代AML细胞中CD11b、CD14及CD115表达均有不同程度升高,细胞呈现单核细胞的形态特征。结论:TPA可通过上调mda-7/IL-24及其剪接体IL-24 delE5的表达诱导白血病细胞向单核细胞分化。 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因-7(mda-7/IL-24) IL-24delE5 十四烷酰佛波醇-乙酯 急性髓系白血病 单核细胞 分化
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白细胞介素-24 delE5对人类白血病细胞系K562的抑制作用 被引量：2
5
作者 王琳 马小彤 +4 位作者 董成亚 张芳 段永娟 杨宾霞 林永敏 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2010年第3期129-132,共4页
目的 探索白细胞介素（IL）-24 delE5对人类白血病细胞系K562的抑制作用.方法 用TPA诱导白血病细胞系U937和HL-60向单核-巨噬细胞分化后,检测mda-7/IL-24及其选择性剪接体IL-24delE5的表达.构建IL-24 delE5真核表达载体,稳定转染K562细... 目的 探索白细胞介素（IL）-24 delE5对人类白血病细胞系K562的抑制作用.方法 用TPA诱导白血病细胞系U937和HL-60向单核-巨噬细胞分化后,检测mda-7/IL-24及其选择性剪接体IL-24delE5的表达.构建IL-24 delE5真核表达载体,稳定转染K562细胞.通过MTT法、集落形成实验、流式细胞术、Annexin-V/PI检测及动物实验,观察IL-24 delE5对K562细胞增殖、集落形成、细胞周期、凋亡及体内致瘤性的影响;同时与mda-7/IL-24进行比较.结果 在TPA诱导分化的U937和HL-60细胞中发现IL-24 delE5的表达.稳定转染IL-24 delE5的K562增殖及集落形成明显下降,与空载体相比,G0/G1期细胞比例由（24.46±3.99）%增至（42.69±3.04）%,细胞周期阻滞于G0/G1期,体内实验证实K562细胞移植瘤生长明显被抑制.与mda-7/IL-24相比,上述各实验结果差异均无统计学意义.结论 IL-24 delE5与mda-7/IL-24一样对人类白血病细胞系K562具有明显的体内外抑制作用,该作用可能与IL-24 delE5所引起细胞周期G0/G1期阻滞有关. 展开更多
关键词 黑素瘤分化相关基因 剪接体 基因治疗 K562细胞 细胞周期
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白细胞介素-24抑制K562细胞生长的机制 被引量：1
6
作者 郜伟峰 马小彤 +4 位作者 张芳 董成亚 段永娟 杨宾霞 林永敏 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2010年第3期133-135,共3页
目的 探讨自细胞介素-24（又称黑色素瘤分化相关基因-7,IL-24/mda-7）对白血病细胞系K562的周期阻滞作用机制.方法 利用基因芯片技术初步分析转染IL-24/mda-7与转染空载体的K562细胞之间基因表达差异,并以实时定量PCR验证;以Western blo... 目的 探讨自细胞介素-24（又称黑色素瘤分化相关基因-7,IL-24/mda-7）对白血病细胞系K562的周期阻滞作用机制.方法 利用基因芯片技术初步分析转染IL-24/mda-7与转染空载体的K562细胞之间基因表达差异,并以实时定量PCR验证;以Western blotting方法检测pRb的磷酸化水平.结果 转染IL-24/mda-7可使K562细胞的细胞周期相关基因p21^WAF-1、BCCIP上调,cdk6、Smurf2下调,定量PCR证实了上述表达变化;IL-24/mda-7转染还可明显降低K562细胞pRb磷酸化水平.结论 IL-24/mda-7可能通过调节细胞周期相关蛋白,即上调p21^WAF-1、BCCIP,下调cdk6、Smurf2,使K562阻滞于G0/G1期,从而抑制细胞生长. 展开更多
关键词 IL-24/mda-7 白血病 细胞周期 基因芯片 基因治疗
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静脉麻醉药对去甲肾上腺素累积剂量致兔肺动脉环收缩量-效关系的影响
7
作者 容俊芳 陈伯銮 +3 位作者 赵士珍 杨宾霞 程彤 国雪 《中华麻醉学杂志》 CSCD 北大核心 1997年第12期747-749,共3页
目的:通过硫喷妥钠、异丙酚、氯胺酮对去甲肾上腺素(NE)收缩肺动脉量-效关系的影响,了解三种药物对肺血管平滑肌的直接作用,以及内皮细胞完整性对其作用的影响。方法:制备兔离体肺动脉环,应用DC-001型离体器官测定仪,观察三种药物(1mM)... 目的:通过硫喷妥钠、异丙酚、氯胺酮对去甲肾上腺素(NE)收缩肺动脉量-效关系的影响,了解三种药物对肺血管平滑肌的直接作用,以及内皮细胞完整性对其作用的影响。方法:制备兔离体肺动脉环,应用DC-001型离体器官测定仪,观察三种药物(1mM)对NE累积剂量量-效曲线的影响。结果:与NE对照组比较,完整内皮时,硫喷妥钠可加强肺动脉环对低浓度NE(10^(-10)M)的收缩反应,高剂量NE(10^(-3)、10^(-4)M)时收缩幅度低于对照组(P<0.05);异丙酚、氯胺酮均使NE累积剂量量-效曲线呈非平行性右移,表现为非竞争性抑制。去内皮时,硫喷妥钠组高剂量NE时收缩幅度与完整内皮时比较有所降低(P<0.05);异丙酚、氯胺酮组高剂量NE时收缩幅度与完整内皮时比较明显增加(P<0.05)。结论:硫喷妥钠增强了NE对肺动脉的收缩作用;异丙酚和氯胺酮均可抑制NE的肺动脉收缩作用,且异丙酚的作用呈内皮依赖性。 展开更多
关键词 硫喷妥钠 静脉麻醉药 剂量效应关系
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人mda-7／IL-24的抗肿瘤作用机制
8
作者 杨宾霞 马小彤 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期343-346,共4页
mda-7／IL-24是20世纪90年代中期发现的一个新基因。由于mda-7／IL-24与人IL-10家族具有相当的同源性，后来HUGO基因命名委员会将之重新命名为IL-24，并将其归类到IL-10家族。近年研究表明，采用复制缺陷的腺病毒表达载体Ad．mda-7使其... mda-7／IL-24是20世纪90年代中期发现的一个新基因。由于mda-7／IL-24与人IL-10家族具有相当的同源性，后来HUGO基因命名委员会将之重新命名为IL-24，并将其归类到IL-10家族。近年研究表明，采用复制缺陷的腺病毒表达载体Ad．mda-7使其在肿瘤细胞异位表达，引起多种肿瘤细胞的生长抑制。尽管mda．7／IL-24肿瘤靶向性的作用机制还不是很清楚，但大量的实验结果表明该基因作为一个有效的肿瘤治疗基因，能够区分正常细胞和肿瘤细胞、诱导各种不同肿瘤细胞凋亡、启动抗肿瘤“旁观者效应”、增强肿瘤细胞对射线敏感性、抑制动物模型体内移植瘤的生长和血管新生以及具有调节免疫应答能力。 展开更多
关键词 黑色素瘤分化相关基因 白细胞介素-24 基因治疗 信号转导 细胞凋亡
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