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基因工程菌高密度发酵液中碳源物质甘油的定量检测及其浓度的优化控制 被引量：20
1
作者 杨如燕 李民 陈常庆 《工业微生物》 CAS CSCD 1999年第1期25-28,共4页
比较了高碘酸氧化法、铜离子络合法、高压液相色谱法和甘油激酶法四种不同的方法定量测定重组工程菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵液中甘油（作为细菌生长的碳源物质）的浓度，发现甘油激酶法可以排除发酵液中其他物质的干扰，精... 比较了高碘酸氧化法、铜离子络合法、高压液相色谱法和甘油激酶法四种不同的方法定量测定重组工程菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵液中甘油（作为细菌生长的碳源物质）的浓度，发现甘油激酶法可以排除发酵液中其他物质的干扰，精确测定甘油的含量。在此基础上对发酵培养基中甘油的浓度进行了优化，结果表明，甘油浓度控制在较低的水平有利于菌体密度的提高。在５Ｌ自动发酵罐中，控制甘油浓度在５ｇ／Ｌ左右，经２０ｈ的培养，最终细菌密度达到１２０ＯＤ６００（相当于４８ｇＤＣＷ／Ｌ），重组蛋白ｒｈＴＮＦα的表达量占细菌总蛋白的３０％左右。 展开更多
关键词 重组大肠杆菌 高密度发酵 甘油 肿瘤坏死因子
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重组大肠杆菌YK537/pSB┐TK高密度培养过程中有机酸的RP┐HPLC快速分析 被引量：8
2
作者 杨如燕 李民 陈常庆 《工业微生物》 CAS CSCD 1998年第3期31-33,共3页
采用高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），利用Ｃ１８反相柱快速检测重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明，经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰，可获得理想的分离效果... 采用高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），利用Ｃ１８反相柱快速检测重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明，经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰，可获得理想的分离效果，并能定量测出发酵过程中各种有机酸的积累。不同培养方式的结果表明用甘油代替葡萄糖作为细菌生长的碳源可减少乙酸的积累，降低其对细菌生长和外源蛋白表达的抑制作用，从而更易实现重组大肠杆菌的高表达、高密度培养。 展开更多
关键词 RP-HPLC 乙酸 高密度发酵 肿瘤坏死因子
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重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNFα)工程菌高密度发酵研究 被引量：4
3
作者 李民 徐皓 +2 位作者 周逸明 杨如燕 陈常庆 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期443-446,454,共5页
报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该... 报道了 rh TNFα重组菌发酵条件及高密度、高表达发酵的研究。首先研究了营养成份对其生长和表达的影响 ,确定了半合成发酵培养基 ;筛选出了 rh TNFα生长和表达的最适宿主菌 E.coli YK5 37;研究了影响高表达的几个关键因素 ,建立了该类型重组菌的诱导表达条件。结果表明限制发酵过程中乙酸积累、控制在指数生长期进行诱导、持续诱导时间不超过 5 h是实现高密度、高表达发酵的关键条件。采用半经验补料流加公式 ,在 NBS Bio Flo30 0 0型 5 L 发酵罐中利用恒溶氧 -补料培养批技术 ,限制甘油浓度在 5 g/ L,可使 E.coli YK5 37/ p SB- TR最终菌体密度和 rh TNFα的产量分别达到 A6 0 0 12 6和 8.4g/ L。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 高密度发酵 RHTNFΑ 工程菌
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幼儿礼仪教育之园本策略刍议 被引量：4
4
作者 杨如燕 《新课程研究（下旬）》 2010年第9期54-55,共2页
著名教育家陶行知曾经说过：＂六岁以前是人格陶冶最重要的时期。这个时期培养得好,以后只需顺着他继长增高的培养上去,自然成为社会优良的分子;否则就会事倍功半。＂说明幼儿期是塑造良好道德品质的关键时期。但现实生活中,我们却发现... 著名教育家陶行知曾经说过：＂六岁以前是人格陶冶最重要的时期。这个时期培养得好,以后只需顺着他继长增高的培养上去,自然成为社会优良的分子;否则就会事倍功半。＂说明幼儿期是塑造良好道德品质的关键时期。但现实生活中,我们却发现很多现象,让我们感觉到生活中幼儿文明礼仪问题的存在。 展开更多
关键词 幼儿期 礼仪教育 现实生活 著名教育家 人格陶冶 道德品质 文明礼仪 陶行知
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重组大肠杆菌YK537/pSB┐TK高密度培养过程中有机酸的RP┐HPLC快速分析
5
作者 杨如燕 李民 陈常庆 《西安体育学院学报》 北大核心 2001年第3期-,共3页
采用高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），利用Ｃ１８反相柱快速检测重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明，经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰，可获得理想的分离效果... 采用高压液相色谱法（ＨＰＬＣ），利用Ｃ１８反相柱快速检测重组大肠杆菌ＹＫ５３７／ｐＳＢ－ＴＫ高密度发酵过程中细菌代谢产生的各种有机酸。分析表明，经乙醚和水两次萃取处理后能去除样品中大部分的干扰峰，可获得理想的分离效果，并能定量测出发酵过程中各种有机酸的积累。不同培养方式的结果表明用甘油代替葡萄糖作为细菌生长的碳源可减少乙酸的积累，降低其对细菌生长和外源蛋白表达的抑制作用，从而更易实现重组大肠杆菌的高表达、高密度培养。 展开更多
关键词 RP-HPLC 乙酸 高密度发酵 肿瘤坏死因子
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寓情于“声”,润物无声——利用音乐教育促进幼儿情感的发展
6
作者 杨如燕 《新课程研究（下旬）》 2011年第5期173-174,共2页
音乐是一种善于表现和激发感情的艺术，通过节奏、旋律、和声、音色完美的组合，潜移默化地感染欣赏者，从而陶冶人的情操，净化人的心灵，促进幼儿情感的发展。要充分挖掘音乐所蕴含的教育价值，促进幼儿情感的发展，具体可以通过四个... 音乐是一种善于表现和激发感情的艺术，通过节奏、旋律、和声、音色完美的组合，潜移默化地感染欣赏者，从而陶冶人的情操，净化人的心灵，促进幼儿情感的发展。要充分挖掘音乐所蕴含的教育价值，促进幼儿情感的发展，具体可以通过四个方面进行：挖掘音乐素材，以词动情；创设良好的环境，以境激情；夯实幼儿的情感认知，寓智于情；注重幼儿的音乐表现，以行促情。 展开更多
关键词 音乐活动 情感发展 初探
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加强手术室管理预防切口感染
7
作者 杨如燕 刘惠 《科技园地》 1997年第2期41-42,共2页
关键词 手术室管理 切口感染 预防措施 无菌物管理
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幼儿礼仪教育之园本策略刍议
8
作者 杨如燕 《幼儿教育导读（下半月）》 2010年第12期8-10,共3页
著名教育家陶行知曾经说过：“六岁以前是人格陶冶最重要的时期。这个时期培养得好，以后只需顺着他继长增高的培养上去，自然成为社会优良的分子；否则就会事倍功半。”可以看出，
关键词 礼仪教育 幼儿 著名教育家 人格陶冶 陶行知 培养
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