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基于优先级的车间排产算法的研究 被引量:3
1
作者 《智能制造》 2023年第1期113-115,共3页
车间排产算法已有大量的研究,但大多基于神经网络、遗传算法和蚁群算法等排产策略,是多次迭代求解全局最优和局部最优的解,这些算法要求计划员在实际应用过程中对存在的各类因素进行详尽的量化和假定,算法的局限性使得排产工作存在一些... 车间排产算法已有大量的研究,但大多基于神经网络、遗传算法和蚁群算法等排产策略,是多次迭代求解全局最优和局部最优的解,这些算法要求计划员在实际应用过程中对存在的各类因素进行详尽的量化和假定,算法的局限性使得排产工作存在一些困难。本文提出的优先级排产算法是基于生产现状的一种策略,是基于机加车间各类资源的限制和实际需求的一种排产算法,易于在MES的实施中进行工程落地,能有效帮助机加车间解决生产排产问题,具有很好的实践指导意义。 展开更多
关键词 排产 优先级 紧迫系数 设备优先级
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基于优先级排产的车间仿真
2
作者 《智能制造》 2024年第1期89-92,共4页
优先级算法的主逻辑是生产周期长且交货期短的零件具有较高的排产优先级,也可根据情况累加其他因素系数;针对每一道工序,有许多台可用设备,在满足车间忍耐度的情况下,尽可能地排在优先级最高的设备上。本文根据某机加车间的实际业务场景... 优先级算法的主逻辑是生产周期长且交货期短的零件具有较高的排产优先级,也可根据情况累加其他因素系数;针对每一道工序,有许多台可用设备,在满足车间忍耐度的情况下,尽可能地排在优先级最高的设备上。本文根据某机加车间的实际业务场景,选取某销售订单,对订单相关的零件进行优先级排产算法仿真,输出生产计划甘特图,直观地展示零件的交付时间。 展开更多
关键词 优先级排产 仿真 甘特图
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基于PLC和组态的智能电动拧紧系统 被引量:4
3
作者 顾家友 高雪霞 《凿岩机械气动工具》 2017年第2期25-27,34,共4页
基于PLC和组态的智能电动拧紧系统主要由一套西门子的PLC单元和基于亚控组态王编写的上位机软件及外围器件组成,能够完成高质量和高效率的螺栓拧紧。该系统应用范围广,角向的拧紧头结构能够满足狭小空间螺栓的拧紧,多轴的拧紧系统能提... 基于PLC和组态的智能电动拧紧系统主要由一套西门子的PLC单元和基于亚控组态王编写的上位机软件及外围器件组成,能够完成高质量和高效率的螺栓拧紧。该系统应用范围广,角向的拧紧头结构能够满足狭小空间螺栓的拧紧,多轴的拧紧系统能提高工作效率;能够同时控制扭矩和转角两个量,使得拧紧更加精准。智能电动拧紧系统有控制系统稳定,安全性能高,操作简便易行,读数方便直观等特点,有较好的商业前景。 展开更多
关键词 PLC 组态 电动拧紧系统
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浅析社会经济统计在城市建设中的作用 被引量:2
4
作者 杨洁 《经贸实践》 2018年第15期61-61,63,共2页
社会经济统计是一种对于社会经济的总体数量进行统筹计算的经济过程。社会经济统计是一种定量分析,在对社会经济的认识中具有重要的作用。通过对社会经济现象进行再认识能够为社会经济的发展提供数据依据。本文分析了社会经济统计在市... 社会经济统计是一种对于社会经济的总体数量进行统筹计算的经济过程。社会经济统计是一种定量分析,在对社会经济的认识中具有重要的作用。通过对社会经济现象进行再认识能够为社会经济的发展提供数据依据。本文分析了社会经济统计在市场经济以及城市建设中所起到的作用,探讨了社会经济与城市建设的关系,说明了社会经济统计在经济转型中的重要意义。 展开更多
关键词 社会经济统计 城市建设 市场经济 作用
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实现中职计算机课堂教学有效性的策略探索 被引量:1
5
作者 《发明与创新(初中生)》 2019年第7期19-19,6,共2页
随着科学技术的不断发展,信息时代已然到来,计算机知识逐渐成为人才考核中最重要的一项内容。对于中职院校来说,计算机课程已经成为最重要的课程之一,基于信息化的时代背景,本文主要分析了中职计算机课堂教学存在的问题,并结合问题提出... 随着科学技术的不断发展,信息时代已然到来,计算机知识逐渐成为人才考核中最重要的一项内容。对于中职院校来说,计算机课程已经成为最重要的课程之一,基于信息化的时代背景,本文主要分析了中职计算机课堂教学存在的问题,并结合问题提出了一些改进措施,以便提高中职计算机课堂教学质量。 展开更多
关键词 中职计算机课程 有效性 策略探索
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普查存在问题及应对策略
6
作者 杨洁 《中小企业管理与科技》 2018年第24期64-65,共2页
目前,各地正陆续启动第四次全国经济普查工作。本次经济普查将了解各地第二产业和第三产业的发展规模、布局和效益,了解掌握产业组织、产业结构、产业技术、产业形态的现状等。普查在一定程度上可以准确地衡量我国的社会发展水平和综合... 目前,各地正陆续启动第四次全国经济普查工作。本次经济普查将了解各地第二产业和第三产业的发展规模、布局和效益,了解掌握产业组织、产业结构、产业技术、产业形态的现状等。普查在一定程度上可以准确地衡量我国的社会发展水平和综合国力。 展开更多
关键词 人口普查 经济普查 农业普查
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新疆巴州残疾人就业现状分析
7
作者 蒲春玲 《经济研究导刊》 2017年第1期129-130,132,共3页
目前,残疾人就业问题已成为全社会关注的热点问题。通过对新疆巴州残疾人就业现状进行分析,探究新疆巴州残疾人就业存在的问题,从而提出建设性的建议,以期为南疆残疾人就业提供有力的参考。
关键词 残疾人就业 现状分析 新疆巴州 建议
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生物有机肥对大棚西瓜生长特性及品质的影响 被引量:29
8
作者 张凤英 +1 位作者 和加卫 杨丽云 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第14期51-57,共7页
以"京欣2号"大棚西瓜为试材,研究了生物有机肥对大棚西瓜生长特性及品质的影响。结果表明:从幼苗期到膨瓜期,生物有机肥(BOF)和对照(CK)处理下西瓜株高、茎粗、主根长随生长期呈逐渐增加趋势,而叶面积指数在膨瓜期有所降低,... 以"京欣2号"大棚西瓜为试材,研究了生物有机肥对大棚西瓜生长特性及品质的影响。结果表明:从幼苗期到膨瓜期,生物有机肥(BOF)和对照(CK)处理下西瓜株高、茎粗、主根长随生长期呈逐渐增加趋势,而叶面积指数在膨瓜期有所降低,不同时期BOF西瓜株高、茎粗、主根长叶面积指数均高于对照;BOF和CK处理下叶绿素a和叶绿素b含量均随生长期增加呈先增加后降低趋势,可溶性糖和可溶性蛋白质含量表现为逐渐增加趋势,不同时期BOF处理下西瓜叶片叶绿素a、叶绿素b、可溶性糖和可溶性蛋白质含量均高于对照;生物有机肥增加了大棚西瓜根区土壤养分,BOF处理下西瓜根区土壤有机碳、全氮和全钾含量均显著高于CK(P<0.05),其中,以有机碳的增加幅度最大(73.67%),对全磷的影响不显著(P>0.05);生物有机肥显著增加了大棚西瓜的单瓜质量和产量(P<0.05),并且增加了西瓜果实中维生素C、可溶性蛋白质、可溶性总糖、总酸度、总黄酮、中心糖、边糖含量和含水量,以可溶性糖的增加幅度最大。综合比较来看,生物有机肥可有效促进西瓜营养代谢协调均衡,还可以提高糖分含量,改善西瓜品质,确保西瓜的高产优质。 展开更多
关键词 生物有机肥 大棚西瓜 生长特性 品质
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绿色荧光蛋白基因逆转录病毒载体转染人骨髓间充质干细胞及表达的研究 被引量:16
9
作者 赵宇 陆应麟 +3 位作者 乔群 徐元基 戚可名 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期24-25,共2页
目的 绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的逆转录病毒载体转染人骨髓间充质干细胞(MSCs)及其表达情况。方法 pEGFP与逆转录病毒载体经过酶切、连接等构建重组的EGFP 逆转录病毒载体 ,转染PA3 17细胞 ,用G418筛选出抗性克隆 ,获病毒上清 (滴度达... 目的 绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的逆转录病毒载体转染人骨髓间充质干细胞(MSCs)及其表达情况。方法 pEGFP与逆转录病毒载体经过酶切、连接等构建重组的EGFP 逆转录病毒载体 ,转染PA3 17细胞 ,用G418筛选出抗性克隆 ,获病毒上清 (滴度达到 8.5× 10 5cfu/ml)并感染人MSCs。流式细胞仪测定转染效率后加入成骨细胞分化培养夜 (地塞米松 (10 -7mol/L)、β 甘油磷酸钠 (10mmol/L)、维生素C(5 0mg/L ) ) ,2周后观察转染细胞的分化情况。 结果  48h后细胞转染效率为 7% ,G418筛选 2周后约 97%细胞出现抗性克隆 ,表达维持 4周。基因转染细胞能够分化为成骨细胞。结论 重组EGFP逆转录病毒载体能转染MSCs ,且不影响细胞的功能。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 基因 逆转录病毒载体 转染 骨髓间充质干细胞 表达的研究
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云南高原芳香植物精油在化妆品中的应用 被引量:21
10
作者 马永鹏 张红霞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期146-154,共9页
芳香植物是经济植物的重要组成部分,其富含的精油成分具有多种生物活性。云南高原拥有丰富的芳香植物资源,本文介绍了其地理分布、资源概况和精油的生物活性,并从赋香、保湿、美白、防治痤疮、防晒、抗衰老等方面综述了高原芳香植物精... 芳香植物是经济植物的重要组成部分,其富含的精油成分具有多种生物活性。云南高原拥有丰富的芳香植物资源,本文介绍了其地理分布、资源概况和精油的生物活性,并从赋香、保湿、美白、防治痤疮、防晒、抗衰老等方面综述了高原芳香植物精油的应用进展,说明了云南高原芳香植物精油在化妆品领域有巨大的应用潜力。通过分析云南芳香产业发展的优势及存在的问题,展望了云南芳香植物及精油的基础研究和开发应用的方向。 展开更多
关键词 云南高原 芳香植物 精油 生物活性 化妆品
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苦参化学成分和药理研究现状 被引量:15
11
作者 张少少 安银岭 +2 位作者 华燕 雷然 《中国民族民间医药》 2008年第11期8-9,共2页
主要介绍近年来苦参化学成分及其药理研究现状。
关键词 苦参 药理作用 农业应用
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滑桃树果皮的化学成分 被引量:12
12
作者 沈月毛 +1 位作者 李炳钧 许建初 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 2002年第2期9-10,21,共3页
从滑桃树 (Trewianudiflora)的果皮中分离到 5个化合物 ,经理化性质和波谱分析 ,分别确定为 :3β 乙酰石栗酸 (1)、16 碳酸 1 甘油酯 (2 )、莽草酸 (3)、β 谷甾醇 (4 )以及胡萝卜甙 (5 ) ,以上化合物均为首次从滑桃树果皮中分离得到... 从滑桃树 (Trewianudiflora)的果皮中分离到 5个化合物 ,经理化性质和波谱分析 ,分别确定为 :3β 乙酰石栗酸 (1)、16 碳酸 1 甘油酯 (2 )、莽草酸 (3)、β 谷甾醇 (4 )以及胡萝卜甙 (5 ) ,以上化合物均为首次从滑桃树果皮中分离得到。并对前人报导的 3β 乙酰石栗酸13 展开更多
关键词 滑桃树 3β-乙酰石栗酸
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玫瑰中化学成分及其美容护肤作用机制 被引量:13
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作者 解静 李明祥 +1 位作者 高建莉 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期341-349,共9页
本文概述了玫瑰应用于美容护肤的历史及其化学成分的研究现状;着重综述了玫瑰与化妆品相关的活性成分及其作用机制;并分析了玫瑰应用于化妆品开发中的现状和不足,以期为玫瑰的深入研究,尤其是玫瑰在化妆品中的应用研究提供一定的理论基... 本文概述了玫瑰应用于美容护肤的历史及其化学成分的研究现状;着重综述了玫瑰与化妆品相关的活性成分及其作用机制;并分析了玫瑰应用于化妆品开发中的现状和不足,以期为玫瑰的深入研究,尤其是玫瑰在化妆品中的应用研究提供一定的理论基础及参考。 展开更多
关键词 玫瑰 化妆品 美容护肤 活性成分
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“极边”、“次边”与宋朝边疆思想探析 被引量:14
14
作者 黎小龙 《中国边疆史地研究》 CSSCI 北大核心 2010年第2期33-40,共8页
本文以"极边"、"次边"为切入点,对宋朝的边疆思想进行了探讨。文章认为:"极边"由外边(与域外接壤之州军)和内边(与域外非接壤之州军)组成,北方强调的是对外军事战略功能,体现的是政治边疆;南方强调的是... 本文以"极边"、"次边"为切入点,对宋朝的边疆思想进行了探讨。文章认为:"极边"由外边(与域外接壤之州军)和内边(与域外非接壤之州军)组成,北方强调的是对外军事战略功能,体现的是政治边疆;南方强调的是对少数民族的控驭功能,体现的是族群边界即文化边疆。"次边"位于边疆层级结构的第二层,宋人常常将其与表示疆域最外围的词语(极边、沿边、缘边、并边等)连用,地理空间主要集中于北方。宋人对"极边"、"次边"的使用说明边疆思想在宋朝发生了重大变化,表现在边疆(界)意识凸显、边疆空间的扩展以及对边疆认识的细化。 展开更多
关键词 极边 次边 边疆思想
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肺巨细胞癌高低转移株差异表达基因的鉴定 被引量:10
15
作者 张金强 王妍 +3 位作者 王涛 徐元基 陆应麟 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期590-593,共4页
目的从两株同源但转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定差异表达基因。方法应用抑制消减杂交(SSH)技术,对来源相同、转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株PLA801C和PLA801D进行了两次实验。第1次SSH实验以PLA801C株为实验方,第2... 目的从两株同源但转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株中分离并鉴定差异表达基因。方法应用抑制消减杂交(SSH)技术,对来源相同、转移能力不同的人肺巨细胞癌细胞株PLA801C和PLA801D进行了两次实验。第1次SSH实验以PLA801C株为实验方,第2次实验以PLA801D株为实验方。将获得差异表达的片段点在氨基化的玻片上做成基因芯片,利用荧光标记的探针与芯片杂交,选取差异表达克隆,并利用RNA狭缝杂交或Northern杂交对若干片段进行验证。结果在低转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有16条;在高转移肺巨细胞癌细胞株中,高表达的序列有79条。测序后经过同源性分析,大部分序列均与已知序列高度同源,主要编码以下几类蛋白(1)细胞因子及其受体相关蛋白;(2)激酶及其相关蛋白;(3)其他蛋白,包括酶类、热休克蛋白、受体蛋白、细胞骨架蛋白、线粒体蛋白和癌基因编码产物等;(4)一些未知功能的蛋白或是从核酸序列推出来的假想蛋白。结论HSP70、AXL受体酪氨酸激酶和1433ζ等多种已知基因表达情况的改变,可能影响肺癌的转移过程,此外还发现了一些可能的肿瘤转移相关新基因。 展开更多
关键词 肺巨细胞癌 癌细胞株 差异表达基因 转移 高表达 蛋白 实验 激酶 玻片 序列
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五个不同产地绞股蓝茶挥发物及香气成分研究 被引量:11
16
作者 王忠泽 杨宇涵 +1 位作者 张红霞 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期1717-1729,共13页
为了解不同产地的绞股蓝茶的挥发性成分的差异,探明绞股蓝茶的香气成分,本研究采用溶剂辅助风味蒸发(SAFE)结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对湖南张家界、陕西平利、广西金秀、安徽亳州、云南玉溪五个不同产地的绞股蓝茶的挥发性成... 为了解不同产地的绞股蓝茶的挥发性成分的差异,探明绞股蓝茶的香气成分,本研究采用溶剂辅助风味蒸发(SAFE)结合气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对湖南张家界、陕西平利、广西金秀、安徽亳州、云南玉溪五个不同产地的绞股蓝茶的挥发性成分进行提取和分析,利用峰面积归一化法计算各个成分的相对百分含量。五个不同产地的绞股蓝茶共鉴定出98个挥发性成分,包括醛类、酸类、酚类、酯类、腈类、杂环化合物、酮类、醇类和烃类及其衍生物。从广西、安徽、湖南、陕西和云南产的绞股蓝茶中分别鉴定出48、49、50、51、50个挥发性化合物。五个样品中,检测出的共有成分为15个,其中二氢猕猴桃内酯和棕榈酸乙酯不仅为其共有成分,且相对含量均较高,其它主要成分还包括苯甲醛、正辛醛、(E,E)-2,4-庚二烯醛、苯甲醇、苯乙醛、罗勒烯、香兰素、月桂酸乙酯、2,4-二羟基-2,6,6-三甲基环己基乙酸γ-内酯、植酮、邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、十八酸乙酯等。五个不同产地绞股蓝茶主要香气成分都包括二氢猕猴桃内酯,但其它关键成分存在差别,因此不同来源的绞股蓝茶风味不尽相同。通过查阅文献对绞股蓝茶挥发性成分的香气特征进行了系统梳理,其所含挥发物的香气特征包括“水果”、“花”、“青叶”、“木香”和“脂肪”气味,这为绞股蓝茶的风味研究及产品开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 绞股蓝茶 挥发性成分 溶剂辅助风味蒸发法 气质联用
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人脂肪间充质干细胞诱导分化尿路上皮细胞的研究 被引量:12
17
作者 符伟军 史建国 +4 位作者 王晓雄 许永德 谭海颂 张旭 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期927-929,共3页
目的探讨间接共培养法诱导人脂肪间充质干细胞向尿路上皮细胞定向分化的可行性。方法人脂肪间充质干细胞提取自吸脂术患者的废弃脂肪组织中,经流式细胞法来鉴定人脂肪间充质干细胞的表型。应用Transwell培养系统构建间接共培养模型,... 目的探讨间接共培养法诱导人脂肪间充质干细胞向尿路上皮细胞定向分化的可行性。方法人脂肪间充质干细胞提取自吸脂术患者的废弃脂肪组织中,经流式细胞法来鉴定人脂肪间充质干细胞的表型。应用Transwell培养系统构建间接共培养模型,上层种植输尿管上皮细胞(1×104/cm2),下层种植脂肪间充质干细胞(0.5×10^4/cm2),共培养14d。采用免疫荧光方法鉴定尿路上皮标志物[细胞角蛋白-18(CK-18),尿斑蛋白2(UP2)]表达。将诱导后的细胞种植于I型胶原+聚乳酸混合电纺丝输尿管支架材料上,体外培养7d,免疫荧光法鉴定诱导后的细胞在输尿管支架材料上尿路上皮标志物表达。苏木素-伊红(HE)染色、Livedead法检测观察诱导后细胞生长。结果共培养7d后,诱导后的细胞形态呈现尿路上皮细胞样,14d后,免疫荧光检测表明,40%~50%的干细胞表达尿路上皮标志物(CK-18及UP2)。诱导后的细胞种植在输尿管支架材料上,细胞增殖生长良好,呈铺展状态生长,活细胞占总数的90%以上(Livedead),并且表达尿路上皮标志物。结论使用间接共培养法能成功诱导人脂肪间充质干细胞向尿路上皮细胞分化,为输尿管等泌尿系统组织工程研究提供了一种新的种子细胞。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 尿路上皮 共培养
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绣球藤的化学成分(英文) 被引量:8
18
作者 宋成 王跃虎 +2 位作者 华燕 吴章康 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2008年第2期116-119,共4页
目的:对绣球藤的化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20等方法进行分离纯化。根据理化性质和光谱分析进行结构鉴定。结果:从绣球藤乙醇提取物的乙酸乙酯部分中分离得到14个化合物,分别鉴定为:松柏醛(1),咖啡酸(2),pluc... 目的:对绣球藤的化学成分进行研究。方法:利用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20等方法进行分离纯化。根据理化性质和光谱分析进行结构鉴定。结果:从绣球藤乙醇提取物的乙酸乙酯部分中分离得到14个化合物,分别鉴定为:松柏醛(1),咖啡酸(2),pluchoic acid(3),原儿茶醛(4),香草醛(5),3,4-二羟基苯乙醇(6),4-羰基-5-羟基戊酸甲酯(7),4-hydroxydodec-2-enedioic acid(8),(+)-川木香醇F(9),(-)-丁香脂素(10),(+)-guayarol(11),(-)-牛蒡苷(12),(-)-落叶松树脂醇(13),金丝桃苷(14)。结论:这些化合物均为首次从该植物中分离得到。 展开更多
关键词 绣球藤 铁线莲属 木脂素 黄酮
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噬菌体抗体文库的构建及人源抗HIV-1 gp 160抗体的筛选 被引量:8
19
作者 赵云峰 王海涛 +5 位作者 王全立 杨景庚 孙红琰 马立人 殷震 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第1期20-24,共5页
构建人源噬菌体抗体文库如下:HIV感染者脾细胞中提取mRNA,经反转录再以人IgG重链Fd两端及轻链“通用”引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌粒载体pComb3中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,经辅助噬菌体... 构建人源噬菌体抗体文库如下:HIV感染者脾细胞中提取mRNA,经反转录再以人IgG重链Fd两端及轻链“通用”引物分别扩增Fab基因片段,依次插入到噬菌粒载体pComb3中,电转化大肠杆菌XL1-Blue,经辅助噬菌体救助,重组噬菌体得以溶源裂解,Fab表达于噬菌体包膜蛋白Ⅲ的N端.此噬菌体抗体库的容量为5×105.筛选抗HIV-1同时又具有能被抗独特型抗体“IF7”所识别的独特型的阳性抗体:以重组包膜糖蛋白gp160及gp41多肽对噬菌体抗体文库进行三次淘选,使抗gp160的特异性抗体得到100倍的富集.然后通过直接ELISA和竞争性ELISA实验筛选出两株结合性较好的特异性抗gp160抗体-3B株与1D株.直接ELISA实验表明这两株克隆均能被“1F7”所识别,为抗独特型多肽的筛选奠定了基础. 展开更多
关键词 噬菌体 HIV 独特型抗体 抗体文库
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HCVNS3基因片段酵母展示文库的构建和鉴定 被引量:8
20
作者 贾帅争 孙红琰 +4 位作者 刘晓达 王全立 章扬培 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期56-60,共5页
HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0~ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切... HCV NS3特异的 CD4+T细胞反应与 HCV感染的良性转归相关 .为了筛选其 CD4+T细胞表位 ,构建了 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .首先 DNase 不完全酶切 HCV NS3基因产生长度为 1 0 0~ 30 0 bp的随机片段 ,然后在它们两端加上含限制性内切酶 Bam H 作用位点的接头 ,再以接头序列作引物进行 PCR扩增 .最后扩增产物用 Bam H 酶切后与 Bam H 线性化的穿梭载体 p YD1连接 ,转化大肠杆菌 (E.coli) DH5α,共得到 2× 1 0 6个转化子 .转化菌落的 PCR扩增结果表明 ,约 50 %转化子含插入片段 .随机选择 5个插入片段测序 ,然后与 DNA序列数据库中的序列比较 .结果显示它们分别与 HCV NS3序列有 96%~ 99%的同源性 .用从转化菌落中提取的质粒转化酵母 (S.cerevisiae)菌株 EBY1 0 0 ,得到含 2× 1 0 5个插入片段的 HCV NS3基因片段酵母展示文库 .半乳糖诱导的酵母细胞通过和 FITC标记的抗体结合 ,用 FACS可以在 2 0 %的细胞表面检测到融合蛋白的表达 . 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 非结构蛋白3 酵母展示 基因片段随机文库
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