德昌水牛乳脂肪酸组成的气相色谱-质谱分析 被引量：12

1

作者 陈炜 龚卫华 +5 位作者 郑玉才 杨明 徐亚欧 刘旻萌 杜晞 金素钰 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2008年第1期123-125,共3页

分析德昌水牛及其杂交后代乳脂肪酸的组成特点。采集德昌水牛及其与尼里拉菲水牛的F1代常乳样品,提取脂肪后进行甲酯化,用气相色谱-质谱联用法测定脂肪酸组成。结果显示,德昌水牛及其F1代乳中的主要脂肪酸为肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、硬... 分析德昌水牛及其杂交后代乳脂肪酸的组成特点。采集德昌水牛及其与尼里拉菲水牛的F1代常乳样品,提取脂肪后进行甲酯化,用气相色谱-质谱联用法测定脂肪酸组成。结果显示,德昌水牛及其F1代乳中的主要脂肪酸为肉豆蔻酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸,乳中肉豆蔻酸、棕榈酸比例显著低于F1代,而硬脂酸、油酸比例显著高于F1代。德昌水牛乳脂肪酸组成与牛乳、牦牛乳相比存在一些差异。 展开更多

关键词 水牛乳 脂肪酸 气相色谱-质谱 德昌水牛

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牦牛、水牛和普通牛乳中脂肪酸组成及共轭亚油酸含量的比较 被引量：14

2

作者 郑玉才 龚卫华 +2 位作者 杨明 杜晞 金素钰 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2014年第5期641-646,801,共6页

为阐明牦牛(Bos grunniens)乳的脂肪酸组成特性,采用气相色谱-质谱方法分析了牦牛乳中脂肪酸的组成及共轭亚油酸(CLA)、亚油酸(LA)的含量,并与普通牛乳、水牛乳进行了比较.结果显示,试验乳样中均可检测出10多种主要的脂肪酸组分,比例最... 为阐明牦牛(Bos grunniens)乳的脂肪酸组成特性,采用气相色谱-质谱方法分析了牦牛乳中脂肪酸的组成及共轭亚油酸(CLA)、亚油酸(LA)的含量,并与普通牛乳、水牛乳进行了比较.结果显示,试验乳样中均可检测出10多种主要的脂肪酸组分,比例最高的为棕榈酸、油酸、硬脂酸和肉豆蔻酸,其比例在牦牛、水牛和奶牛之间存在差异;牦牛乳中总不饱和脂肪酸比例显著高于水牛乳和普通牛乳(P<0.05);牦牛乳中CLA含量显著高于水牛乳和普通牛乳(P<0.01),但普通牛乳中LA含量显著高于牦牛和水牛乳(P<0.01).结果提示,与普通牛乳相比,牦牛乳中高比例的不饱和脂肪酸以及高含量的CLA,赋予其更有益于人体健康的优良特性. 展开更多

关键词 牦牛 乳 脂肪酸 共轭亚油酸 气相色谱-质谱

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牦牛奶渣营养成分分析 被引量：11

3

作者 林亚秋 郑玉才 +2 位作者 邝良德 杜晞 金素钰 《食品科技》 CAS 北大核心 2009年第7期82-84,88,共4页

采用凯氏定氮法、索氏脂肪抽提法、高效液相色谱法、SDS-PAGE法,对牦牛奶渣中蛋白质、脂肪、氨基酸含量进行了测定,并分析了其蛋白质组分。结果表明,奶渣中脂肪和蛋白质含量分别为1.69%与63.92%;奶渣中含有16种水解氨基酸,必需氨基酸占... 采用凯氏定氮法、索氏脂肪抽提法、高效液相色谱法、SDS-PAGE法,对牦牛奶渣中蛋白质、脂肪、氨基酸含量进行了测定,并分析了其蛋白质组分。结果表明,奶渣中脂肪和蛋白质含量分别为1.69%与63.92%;奶渣中含有16种水解氨基酸,必需氨基酸占总氨基酸含量的46.76%,其中Asp、Phe、Lys在牦牛奶渣中所占的比例显著高于其在牦牛乳中所占的比例;牦牛奶渣蛋白质组分以CN为主,其中CN相对含量为77.56%。结果提示,牦牛奶渣含有人体所必需氨基酸,并具有高蛋白、低脂肪的特点,可作为高原地区牧民易于保存的优质蛋白来源。 展开更多

关键词 牦牛 奶渣 营养成分

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家庭自制牦牛酸奶中脂肪酸组成的分析 被引量：10

4

作者 金素钰 龚卫华 +4 位作者 杨明 郑玉才 杜晞 洪键 陈炜 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第4期794-796,共3页

用气相色谱-质谱联用仪分析了牧民家庭自制牦牛酸奶以及牦牛奶中脂肪酸的组成及共轭亚油酸的含量.结果显示:牦牛酸奶和牦牛乳中检测到14种主要的脂肪酸,相对比例高的包括豆蔻酸、棕榈酸、油酸和硬脂酸,占总脂肪酸比例的90%以上.牦牛酸... 用气相色谱-质谱联用仪分析了牧民家庭自制牦牛酸奶以及牦牛奶中脂肪酸的组成及共轭亚油酸的含量.结果显示:牦牛酸奶和牦牛乳中检测到14种主要的脂肪酸,相对比例高的包括豆蔻酸、棕榈酸、油酸和硬脂酸,占总脂肪酸比例的90%以上.牦牛酸奶中总不饱和脂肪酸的比例为31.7%,共轭亚油酸含量为0.981±0.481mg/g,高于普通牛乳和酸奶.牦牛酸奶与牦牛奶中各种脂肪酸的比例基本接近.提示在酸奶制作过程中对脂肪酸组成的影响不大. 展开更多

关键词 牦牛 酸奶 乳 脂肪酸

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用电泳和高效液相色谱法检测水牛乳中掺入的普通牛乳 被引量：8

5

作者 杜晞 方鸿滨 +2 位作者 韦吉春 金素钰 郑玉才 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2009年第2期261-263,共3页

本研究的目的是建立检测水牛乳中掺入普通牛乳的方法.在德昌水牛乳中添加不同比例的普通牛乳,用电泳或高效液相色谱分析乳清蛋白组成,根据乳中β-乳球蛋白在水牛与普通牛之间的差异,可准确鉴定水牛乳中掺入的普通牛乳.聚丙烯酰胺凝胶电... 本研究的目的是建立检测水牛乳中掺入普通牛乳的方法.在德昌水牛乳中添加不同比例的普通牛乳,用电泳或高效液相色谱分析乳清蛋白组成,根据乳中β-乳球蛋白在水牛与普通牛之间的差异,可准确鉴定水牛乳中掺入的普通牛乳.聚丙烯酰胺凝胶电泳方法能检测到掺入的1%的普通牛乳;反相高效液相色谱法能在30min内检测到掺入的10%的普通牛奶.本研究为水牛乳的质量监控提供了可行的技术手段. 展开更多

关键词 水牛 乳 电泳 高效液相色谱

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正交试验法优化凝血酶原复合物的制备工艺 被引量：7

6

作者 曹海军 叶生亮 +6 位作者 王宗奎 张学俊 杜晞 刘彬 李志雄 狄姗姗 李长清 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第11期1538-1542,共5页

目的采用正交试验法优化凝血酶原复合物（Prothrombin complex concentrate,PCC）的制备工艺。方法取DEAE-Sephadex A-50凝胶平衡体系中的柠檬酸钠、氯化钠、pH值3因素,每因素取3水平设计正交试验;称取9等份DEAE-Sephadex A-50凝胶干粉... 目的采用正交试验法优化凝血酶原复合物（Prothrombin complex concentrate,PCC）的制备工艺。方法取DEAE-Sephadex A-50凝胶平衡体系中的柠檬酸钠、氯化钠、pH值3因素,每因素取3水平设计正交试验;称取9等份DEAE-Sephadex A-50凝胶干粉,分别采用试验设计的平衡体系进行平衡;平衡后的凝胶分别与等量健康人去冷沉淀混合血浆混合,制备凝血酶原复合物浓缩物;测定浓缩物蛋白浓度及凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活性,获得4种凝血因子比活;通过正交试验直观分析及直接对比法确定较优及较差比活制备条件,对确定的条件进行验证;测定平衡体系电导率,分析正交试验中平衡体系电导率与4种凝血因子比活的相关性。结果正交试验直观分析法与直接对比法确定的凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ较优比活凝胶平衡条件一致：柠檬酸钠0.005~0.012 mol/L,氯化钠0.06~0.10 mol/L,pH 6.9~7.2;两种方法确定的较差平衡条件不同,分别为：柠檬酸钠0.012~0.02 mol/L、氯化钠0.1~0.14 mol/L,pH 7.2~7.5及柠檬酸钠0.005~0.012 mol/L,氯化钠0.1~0.14 mol/L,pH 7.2~7.5,经实验验证,两种方法确定的较优条件比活均优于较差条件,但两种较差条件中,直接对比法确定的条件更符合实际。平衡液电导率与4种凝血因子比活之间不存在线性关系,但在不同电导率条件下,4种凝血因子比活有较大波动,电导率9.67~10.34 ms/cm,4种凝血因子比活均较高;电导率12.16~12.90 ms/cm,4种凝血因子比活均较低。结论正交试验可用于凝血酶原复合物制备工艺优化,但不同分析方法结果有一定差异。平衡体系电导率对凝血酶原复合物比活有一定影响,在工艺优化时应予注意。 展开更多

关键词 正交试验 凝血酶原复合物 制备工艺 优化

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基于FⅧ探讨不同脱盐方式的效果及对其成分的影响

7

作者 裴仁俊 杜晞 +5 位作者 孙盼 黎小月 蒋鹏 李长清 林方昭 曹海军 《中国输血杂志》 CAS 2024年第3期304-311,共8页

目的基于人凝血因子Ⅷ(human coagulation factorⅧ,FⅧ)比较5种脱盐方法的脱盐效果及对FⅧ成分的影响,为蛋白脱盐方式提供参考。方法分别用Sephadex G-25 Medium凝胶、Fractogel EMD BioSEC凝胶、超滤、室温透析和4℃透析5种方法对人F... 目的基于人凝血因子Ⅷ(human coagulation factorⅧ,FⅧ)比较5种脱盐方法的脱盐效果及对FⅧ成分的影响,为蛋白脱盐方式提供参考。方法分别用Sephadex G-25 Medium凝胶、Fractogel EMD BioSEC凝胶、超滤、室温透析和4℃透析5种方法对人FⅧ进行脱盐处理。通过Na^(+)、柠檬酸根离子、甘氨酸去除率评估脱盐效果。通过脱盐前后FⅧ蛋白回收率、FⅧ活性(coagulation factorⅧactivity,FⅧ∶C)、VWF抗原(VWF antigen,VWF∶Ag)、VWF活性(VWF activity,VWF∶Ac)、VWF多聚体及SDS-PAGE分析,评估其对FⅧ成分的影响。结果在脱盐效果方面:Na+在超滤脱盐时去除率最低,为(97.90±0.06)%,Fractogel EMD BioSEC凝胶脱盐去除率最高,为(99.82±0.07)%。除Sephadex G-25 Medium凝胶脱盐与Fractoge EMD BioSEC凝胶脱盐间Na^(+)去除率无统计学意义(P=0.90)外,其他4种方法间Na+去除率存在统计学意义。甘氨酸在超滤脱盐时去除率最低,为(95.78±0.42)%,Fractogel EMD BioSEC凝胶脱盐去除率最高,为(99.81±0.08)%。除超滤脱盐外,其他4种脱盐方法间甘氨酸去除率无统计学意义。柠檬酸根离子在5种方法间去除率均无统计学意义(P=0.85)。对于FⅧ成分的影响方面:超滤脱盐FⅧ∶C、VWF∶Ag、VWF∶Ac及蛋白回收率最高,分别为(18.34±1.99)IU/mL、(11.81±0.33)IU/mL、(12.26±0.58)IU/mL、(97.13±1.37)%。5种方法脱盐前后VWF∶Ac/VWF∶Ag无明显变化。SDS-PAGE及VWF多聚体分析表明,不同脱盐方法对蛋白组成种类影响不明显。结论尽管不同方式脱盐对FⅧ蛋白组成种类无明显影响,但脱盐效果存在差异,不同方式脱盐对蛋白回收率、FⅧ∶C、VWF∶Ag及VWF∶Ac影响显著。蛋白处理过程中,对于脱盐方式的选择应给予足够重视。 展开更多

关键词 人凝血因子Ⅷ 脱盐 凝胶层析 超滤 透析

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牦牛酥油脂肪酸组成及其对小鼠血脂的影响 被引量：5

8

作者 郑玉才 龚卫华 +3 位作者 杜晞 杨明 金素钰 洪键 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2009年第4期18-20,共3页

采用气相色谱-质谱法在牦牛酥油中检测到14种主要的脂肪酸,总不饱和脂肪酸比例为31.0%,共轭亚油酸为(0.437±0.044)mg/g。饲喂牦牛酥油能显著增加小鼠的体重和腹脂的质量。饲料中添加10%的酥油能显著提高小鼠血液三酰甘油、总胆固... 采用气相色谱-质谱法在牦牛酥油中检测到14种主要的脂肪酸,总不饱和脂肪酸比例为31.0%,共轭亚油酸为(0.437±0.044)mg/g。饲喂牦牛酥油能显著增加小鼠的体重和腹脂的质量。饲料中添加10%的酥油能显著提高小鼠血液三酰甘油、总胆固醇和脂蛋白脂酶水平,降低高密度脂蛋白胆固醇浓度,但变化幅度在总体上低于添加10%的猪油。本研究表明,牦牛酥油脂肪酸组成与普通牛乳有一定差异;与猪油相比,牦牛酥油对小鼠血脂的负面影响相对较小。 展开更多

关键词 牦牛 酥油 脂肪酸 共轭亚油酸 血脂

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洗脱条件及其因素对凝血酶原复合物有效成分的影响 被引量：5

9

作者 曹海军 李志雄 +5 位作者 叶生亮 王宗奎 杜晞 张学俊 林方昭 李长清 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期349-353,共5页

目的探讨洗脱条件及其因素对凝血酶原复合物(PCC)中凝血因子(F)Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及蛋白(P)C、S、Z、抗凝血酶(AT)8种有效成分收率及比活的影响。方法选择洗脱条件中柠檬酸钠、NaCl、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据正交表配制不同洗脱... 目的探讨洗脱条件及其因素对凝血酶原复合物(PCC)中凝血因子(F)Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及蛋白(P)C、S、Z、抗凝血酶(AT)8种有效成分收率及比活的影响。方法选择洗脱条件中柠檬酸钠、NaCl、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据正交表配制不同洗脱体系;采用DEAE-Sephadex A-50凝胶,相同平衡、洗涤条件及上述不同洗脱体系,批式吸附法制备PCC浓缩物;检测浓缩物中8种成分的活性或含量,获得各成分的收率及比活;正交试验分析不同洗脱条件及其因素对8种成分收率及比活的影响。结果不同洗脱条件8种成分收率及比活有一定差异,2.4 mol/L NaCl条件比活总体较高。在所考察范围内,柠檬酸钠对FⅡ、FⅨ、FⅩ、PC、AT收率和PC、PS、AT比活有较大影响;NaCl对FⅦ、FⅩ、PS、PZ收率和FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ、PZ比活有较大影响。不同水平条件,柠檬酸钠及NaCl含量越高,4种凝血因子收率与比活越高,但对4种抗凝蛋白收率及比活影响无规律;pH6.6水平,4种凝血因子收率较高,pH6.9,其比活较高,pH对4种抗凝蛋白收率与比活的影响无规律。结论洗脱条件中高浓度的NaCl可提高PCC的整体比活;低浓度的柠檬酸钠对PCC有效成分收率及比活也有较大影响;pH对PCC中凝血因子(FⅡ,Ⅶ,Ⅸ,Ⅹ)收率及比活的影响分别有共性,对抗凝蛋白(PC,PS,PZ,AT)的影响则无规律。 展开更多

关键词 洗脱条件 凝血酶原复合物 凝血因子 抗凝蛋白 收率 比活

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献浆者因素及保存条件对部分凝血因子的影响 被引量：5

10

作者 王宗奎 窦苗苗 +8 位作者 杜晞 曹海军 叶生亮 马莉 张容 刘凤娟 李长清 李天成 谯时文 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2016年第9期899-901,共3页

目的系统分析ABO血型系统、年龄、性别及保存条件等对血浆中凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性和纤维蛋白原(Fbg)含量的影响。方法用凝固法检测101份不同血型、年龄、性别的来自正常献浆者的新鲜冰冻血浆中的FⅧ活性和Fbg含量。10份非O型(A、B、AB型... 目的系统分析ABO血型系统、年龄、性别及保存条件等对血浆中凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性和纤维蛋白原(Fbg)含量的影响。方法用凝固法检测101份不同血型、年龄、性别的来自正常献浆者的新鲜冰冻血浆中的FⅧ活性和Fbg含量。10份非O型(A、B、AB型)的血浆在融化分样后分别保存在4℃和室温(24±2℃)条件,然后在0、1、2、3、4、5、6、8、12、16、20和24 h分别检测FⅧ:C和Fbg含量。结果血型对FⅧ:C有显著性影响,O型比非O型个体低约28%(P<0.05),但对Fbg含量无影响。FⅧ(r=0.41,P<0.05)和Fbg(r=0.46,P<0.05)与年龄有显著的线性相关,都随年龄的增加而增加,每增长1岁,FⅧ:C约增加1%。51-56岁的比小于30岁的人群中FⅧ和Fbg均高约30%。性别对FⅧ和Fbg均无显著性影响。4℃和室温两种保存条件对FⅧ和Fbg无显著性影响。保存24 h,FⅧ活性减少约30%(P<0.05),Fbg含量基本无变化。结论 FⅧ:C和Fbg含量随年龄的增高而增高,O型人群比非O型的FⅧ显著地低,性别对FⅧ和Fbg均无影响。24 h内,4℃和室温2种保存条件对FⅧ和Fbg无显著性影响,FⅧ随时间降低,而Fbg基本无变化。 展开更多

关键词 ABO血型 年龄 性别 保存条件 凝血因子Ⅷ 纤维蛋白原

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凝血酶原复合物制备过程吸附条件的研究 被引量：5

11

作者 曹海军 杜晞 +4 位作者 叶生亮 张学俊 王宗奎 林方昭 李长清 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期655-660,共6页

目的探讨凝血酶原复合物制备过程凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的吸附条件,提高活性收率。方法选择DEAE-SephadexA-50凝胶平衡体系中柠檬酸钠、氯化钠、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据L9(33)正交表设计试验,配制平衡液,分别对DEAE-Sephade... 目的探讨凝血酶原复合物制备过程凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ的吸附条件,提高活性收率。方法选择DEAE-SephadexA-50凝胶平衡体系中柠檬酸钠、氯化钠、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据L9(33)正交表设计试验,配制平衡液,分别对DEAE-SephadexA-50凝胶进行平衡处理后,按1.67g/L加入等量健康人混合去冷沉淀血浆,4℃搅拌,吸附凝血因子;吸附后凝胶洗涤、洗脱,检测洗脱液中凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活性并进行活性回收率正交试验直观分析,获得较优吸附条件并进行验证。此外,分析吸附平衡体系电导率与4种因子活性收率间关系。结果柠檬酸钠、氯化钠、pH对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ吸附影响不同;在所考察范围内,pH对4种凝血因子吸附影响效应趋势一致,pH越低,吸附效果越佳;柠檬酸钠及氯化钠浓度对4种凝血因子吸附影响效应趋势不一致,柠檬酸钠浓度越高,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅹ吸附越佳,而凝血因子Ⅸ在(0.012～0.02)mol/L水平较佳;氯化钠浓度越低,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ吸附越佳,而凝血因子Ⅹ在(0.1～0.14)mol/L水平较佳;平衡体系电导率与4种因子活性收率间不存在线性关系。结论吸附条件中pH及柠檬酸钠浓度对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ吸附效果影响较大。柠檬酸钠(0.02～0.028)mol/L,氯化钠(0.02～0.06)mol/L,pH6.6～6.9条件,4种凝血因子吸附效果相对较佳。电导率对4种因子吸附效果影响不明显。 展开更多

关键词 凝血酶原复合物/制备 吸附条件 活性回收率

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阿尔茨海默病与ABO血型关联性研究概述 被引量：1

12

作者 潘波 杜晞 +1 位作者 费章城(综述) 曹海军(审校) 《中风与神经疾病杂志》 CAS 2023年第7期596-600,共5页

ABO血型的差异与多种疾病的发病风险相关。当前缺乏阿尔茨海默病(AD)发生、发展与ABO血型关联性研究的进展报告。本文概述了AD的发病机制、机体结构与异常功能及血液成分对AD的作用,总结了ABO血型的分子基础及其对机体、疾病的影响,探... ABO血型的差异与多种疾病的发病风险相关。当前缺乏阿尔茨海默病(AD)发生、发展与ABO血型关联性研究的进展报告。本文概述了AD的发病机制、机体结构与异常功能及血液成分对AD的作用,总结了ABO血型的分子基础及其对机体、疾病的影响,探讨了二者之间的内在联系及关联机制,以期为AD的早期诊断及预防提供思路。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 ABO血型 关联性 机制

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不同来源的人血清白蛋白对1-磷酸鞘氨醇的结合运载作用研究

13

作者 刘卿 赵娅菲 +6 位作者 徐俊 程露 黄雨薇 杜晞 李长清 王宗奎 马莉 《中国输血杂志》 CAS 2024年第5期524-533,共10页

目的研究不同来源的人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)对1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)的结合运载作用。方法以人血浆来源HSA(plasma derived HSA,pHSA)和基因重组HSA(recombinant HSA,rHSA)样本为研究对象,首先利用L... 目的研究不同来源的人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)对1-磷酸鞘氨醇(sphingosine-1-phosphate,S1P)的结合运载作用。方法以人血浆来源HSA(plasma derived HSA,pHSA)和基因重组HSA(recombinant HSA,rHSA)样本为研究对象,首先利用LC-MS/MS技术,比较分析上述样本中S1P含量的差异;其次,在生理浓度条件下,向HSA样本中直接添加S1P进行负载处理,比较不同来源的HSA对S1P结合作用;在无血清培养条件下,将不同来源HSA样本与HUVEC细胞进行共培养,分析不同处理组的细胞培养上清中S1P含量的变化,比较不同来源的HSA对细胞中S1P的运载作用。利用表面等离子体共振SPR技术分析不同来源HSA与S1P分子的相互作用情况并计算其亲和力大小。利用AutoDock Vina软件和Molprophet平台,对HSA和S1P进行分子对接分析,并预测HSA中S1P的关键结合口袋域。结果S1P含量检测结果显示,所有pHSA样本中均含有一定水平的S1P(3.31±0.03~30.35±0.07)μg/L,且不同厂家生产的pHSA样本中的S1P含量差异显著(P<0.001);然而所有rHSA样本中均未检测出S1P。负载处理结果显示,不同来源HSA对S1P的结合作用存在显著差异(P<0.001),且rHSA对S1P平均负载量约为pHSA的2倍(ΔC_(rHSA)=801.75±142.45μg/L vsΔC_(pHSA)=461.94±85.73μg/L;P<0.001,t=5.006)。共培养处理结果显示,所有HSA样本处理组与HUVEC细胞共培养处理6h后上清中的S1P浓度均明显升高,而空白对照组上清中S1P浓度无变化;处理6 h、12 h和24 h后各处理组间上清中S1P浓度均存在显著差异(P<0.001)。SPR分析结果显示,与rHSA相比,pHSA与S1P之间的亲和力更高(KD_(pHSA-S1P):2.38E-06,KD_(rHSA-S1P):3.72E-06)。分子对接分析和结合口袋预测发现,HSA与S1P的关键结合口袋可能位于HSA分子的IB亚结构域。结论不同来源的HSA对S1P均具有一定的结合运载作用,但这种作用差异具有统计学意义,与HSA分子的IB亚结构域存在关联。 展开更多

关键词 人血清白蛋白 人血浆来源 基因重组 1-磷酸鞘氨醇 结合运载

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不同来源人血清白蛋白对血管内皮细胞生物学效应的影响研究

14

作者 刘卿 王宗奎 +4 位作者 徐俊 程露 李长清 杜晞 马莉 《临床输血与检验》 CAS 2024年第5期577-587,共11页

目的研究不同来源人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)对血管内皮细胞生物学效应的影响。方法对体外无血清培养的HUVEC细胞添加不同来源HSA处理,利用CCK-8细胞活性检测试剂盒、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和细胞周期与细胞凋... 目的研究不同来源人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)对血管内皮细胞生物学效应的影响。方法对体外无血清培养的HUVEC细胞添加不同来源HSA处理,利用CCK-8细胞活性检测试剂盒、Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒,检测不同来源HSA处理后各组细胞增殖活性、细胞凋亡情况和细胞周期分布,并分析比较各组间差异。通过细胞划痕实验和管形成实验分析比较不同来源HSA处理对HUVEC细胞迁移和管形成的影响。结果酵母来源rHSA1对HUVEC细胞增殖活性无影响(P=0.49,q=1.601),其他HSA处理组均显示出显著促进HUVEC细胞增殖的活性,且不同来源HSA处理组间的HUVEC增殖活性存在显著差异(P<0.001,F=10.84)。所有HSA处理组均显示出抑制HUVEC细胞凋亡的作用(P<0.001),不同处理组间活细胞(P=0.07,F=2.415)、凋亡细胞(P=0.2,F=1.624)和坏死细胞(P=0.28,F=1.376)比例均无统计学差异。对比无血清对照组,在HSA处理组中除pHSA2和pHSA6处理组G0/G1期细胞比例显著降低(P<0.001)、S期无明显变化、G2/M期细胞比例明显升高(P<0.01)外,其他HSA处理组各细胞周期比例均无明显改变。在划痕实验中,对比无血清对照组,HSA处理组中pHSA(1)和pHSA(2)处理组经过12 h(P<0.001)、24 h(P<0.001)、36 h(P<0.001,P=0.002)后划痕愈合程度更高,差异具有统计学意义,而rHSA(1)和rHSA(2)处理组较对照组无明显差异。在管形成实验中,对比无血清对照组,HSA处理组中pHSA(1)和pHSA(2)处理组的节点数量(P=0.001、P=0.005)、管状分支(P<0.001)及网状结构(P<0.001)均显著增多,而rHSA(1)和rHSA(2)处理组较对照组无统计学差异。结论不同来源HSA均能够显著抑制无血清条件下血管内皮细胞的凋亡,且对血管内皮细胞的增殖活性、细胞周期、细胞迁移和管形成的影响存在一定差异。 展开更多

关键词 人血清白蛋白 血管内皮细胞 增殖 凋亡 迁移 血管生成

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人α1-抗胰蛋白酶缺乏症的临床治疗及α1-PI规模化制备的进展 被引量：4

15

作者 张学俊 曹海军 +4 位作者 王宗奎 杜晞 肖小璞 谢亦武 李长清 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期630-633,共4页

α1-抗胰蛋白酶（alpha-1-proteinase inhibitor,α1-PI或α1-antitrypsin,α1-AT）是由肝细胞合成的1种丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor,serpin）,它最重要的生理功能是在肺内抑制弹性蛋白酶的活性[1]。1963年,Laurell... α1-抗胰蛋白酶（alpha-1-proteinase inhibitor,α1-PI或α1-antitrypsin,α1-AT）是由肝细胞合成的1种丝氨酸蛋白酶抑制剂（serine protease inhibitor,serpin）,它最重要的生理功能是在肺内抑制弹性蛋白酶的活性[1]。1963年,Laurell和Eriksson[2]报道了遗传性α1-PI缺乏及其与患者早年（30~40岁）发生肺气肿的关系。 展开更多

关键词 Α1-抗胰蛋白酶 丝氨酸蛋白酶抑制剂 α1-PI缺乏症 α1-PI制备 重组人α1-PI

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基于APP/PS1双转基因小鼠初探输血传播阿尔茨海默症的风险

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作者 陈钟声 费章城 +8 位作者 裴仁俊 谯从超 王宗奎 叶生亮 马莉 张容 李长清 杜晞 曹海军 《中国输血杂志》 CAS 2023年第5期396-403,共8页

目的初探输血传播阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)的风险。方法3、6、9月龄APP/PS1小鼠各10只,雌雄各半,认知行为学能力测定,同龄C57小鼠作对照;采集上述尚未出现行为学改变的最大月龄APP/PS1小鼠血液,检测Aβ_(40)、Aβ_(42)含量... 目的初探输血传播阿尔茨海默病(alzheimer disease,AD)的风险。方法3、6、9月龄APP/PS1小鼠各10只,雌雄各半,认知行为学能力测定,同龄C57小鼠作对照;采集上述尚未出现行为学改变的最大月龄APP/PS1小鼠血液,检测Aβ_(40)、Aβ_(42)含量后备用。制备Aβ_(40)、Aβ_(42)聚合物,免疫印迹分析后备用。6~7月龄昆明小鼠随机分为6组(10只/组,雌雄各半),实验组1~2尾静脉注射APP/PS1小鼠血液(100μL/只),1组为高频次注射(3次/周),2组为低频次注射(1次/周);实验组3~4注射Aβ_(40)、Aβ_(42)聚合后混合物(100μL/只),分别为高、低频次注射,具体同上;对照组1~2注射等量生理盐水,分别为高、低频次注射。上述组别注射均持续4周,注射完毕1周后进行认知行为学能力检测及分析,最后检测昆明小鼠血液Aβ_(40)、Aβ_(42)含量。结果3、6月龄APP/PS1小鼠未出现认知行为能力改变,9月龄APP/PS1小鼠出现认知行为能力改变。6~7月龄APP/PS1小鼠血液中Aβ_(40)、Aβ_(42)含量(pg/mL)分别为418.40±2.18、15.68±0.20。所制备Aβ_(40)、Aβ_(42)聚合后混合物除单体外,多为二、三聚体。无论是高频,还是低频,输注APP/PS1小鼠血液的昆明小鼠(实验组1~2)与对照组相比,在旷场试验和条件恐惧试验中出现一定焦虑样行为和短期记忆缩短,但无显著差异;其它实验组(实验组3~4)与对照组相比,在旷场试验、新物体识别、巴恩斯迷宫、条件恐惧认知行为学分析中无明显区别。ELISA检测所有实验及对照组的昆明小鼠血液Aβ_(40)、Aβ_(42)含量(pg/mL)为10.30±0.08、3.360±0.005,组间差异不明显。结论输注APP/PS1小鼠血液及Aβ_(40)、Aβ_(42)聚合后混合物对健康昆明小鼠认知功能在短期内无明显影响,AD传播风险较小。 展开更多

关键词 阿尔兹海默病 APP/PS1小鼠 Β-淀粉样蛋白 输血 认知功能

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4种静注人免疫球蛋白制品的自身IgG抗体多样性研究

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作者 晏晓晨 马莉 +4 位作者 王宗奎 李长清 雷婷婷 杜晞 叶生亮 《中国输血杂志》 CAS 2023年第12期1102-1106,共5页

目的建立静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)制品自身IgG抗体谱展示方法及抗体种类分析方法,考察比较国内不同血液制品企业市售IVIG自身IgG抗体多样性。方法收集我国4个血液制品企业IVIG为研究对象,以人脐静脉内皮细胞... 目的建立静注人免疫球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)制品自身IgG抗体谱展示方法及抗体种类分析方法,考察比较国内不同血液制品企业市售IVIG自身IgG抗体多样性。方法收集我国4个血液制品企业IVIG为研究对象,以人脐静脉内皮细胞总蛋白为抗原,通过双向电泳结合蛋白印记方法展示不同IVIG的自身抗体谱,通过IVIG与人类蛋白质组芯片杂交,高通量鉴定不同IVIG中自身抗体的种类并进行生物信息学分析。结果建立了IVIG自身抗体谱展示方法和抗体种类分析方法,获得了较高质量的IVIG自身抗体谱以及其能够识别的人自身蛋白的生物学信息,不同IVIG制品识别自身抗原的数量、种类有明显差异。4个制品针对人脐静脉内皮细胞蛋白抗体数量分别为241~386个;识别人蛋白质芯片上蛋白数量分别为292~435个,有172个人自身蛋白被4个制品均识别。结论利用抗体谱展示和蛋白质芯片技术能够用于分析IVIG中自身IgG抗体数量及种类多样性,检测的4个厂家IVIG制品中均具有广谱自身抗体,且具有各自的独特性。 展开更多

关键词 静注人免疫球蛋白 自身IgG抗体 抗体谱 抗体多样性

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静注人免疫球蛋白中IgG二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响

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作者 雷婷婷 张巍 +3 位作者 李长清 叶生亮 杜晞 马莉 《中国输血杂志》 CAS 2023年第2期125-129,共5页

目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,... 目的研究静注人免疫球蛋白(Intravenous immunoglobulin,IVIG)中免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)二聚体含量对IgG Fc段与THP-1细胞表面受体结合能力的影响。方法利用蛋白纯化技术和高效液相色谱(HPLC)技术,制备不同浓度的IgG二聚体,然后采用直接添加的方式,制备得到含有不同浓度IgG二聚体的IVIG。最后利用本实验室已建立的IgG Fc段与THP-1细胞表面Fc段受体结合能力的检测方法,考察IgG二聚体含量对IgG Fc段与细胞表面受体结合能力的影响。结果当IVIG中IgG二聚体含量为1.11%~10.30%时,其与THP-1细胞表面Fc段受体的结合能力为97.67%~135.33%,且这种结合能力与IgG二聚体的含量呈正相关。当IgG二聚体含量超过13.22%时,IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力与IgG二聚体含量则没有相关性。结论一定浓度的IgG二聚体对IVIG中IgG Fc段与THP-1细胞表面受体的结合能力具有促进作用,但尚需动物实验和临床数据进一步验证。 展开更多

关键词 静注人免疫球蛋白(IVIG) IgG二聚体 IgG Fc段 THP-1细胞 受体结合能力

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富含IgM的静注人免疫球蛋白制品研究进展

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作者 刘卿 叶生亮 +3 位作者 朱丽媛 杜晞 马莉 李长清 《中国输血杂志》 CAS 2023年第4期353-359,共7页

富含IgM的静注人免疫球蛋白与常规的静注人免疫球蛋白制品相比,在病原及相关毒素中和、补体活性调节、细胞因子分泌和免疫细胞活性的调控等方面更具优势;但同时应重视其使用时潜在的不良反应及副作用。查阅文献后发现,在制备工艺上需要... 富含IgM的静注人免疫球蛋白与常规的静注人免疫球蛋白制品相比,在病原及相关毒素中和、补体活性调节、细胞因子分泌和免疫细胞活性的调控等方面更具优势;但同时应重视其使用时潜在的不良反应及副作用。查阅文献后发现,在制备工艺上需要解决两个突出问题:一是要开发更加简便和高效的IgM浓缩和提纯技术;二是要寻找更加优越和安全的病毒灭活技术。目前,全球市场仅有一种富含IgM的静注人免疫球蛋白制剂在售(Pentaglobin■),国内对于这类制品的基础研究、制备工艺和临床应用经验相对缺乏。本文旨在梳理近年来国内外关于富含IgM的静注人免疫球蛋白制品的研究进展,为我国相关制品的研发、生产及临床应用提供参考。 展开更多

关键词 IGM 静注人免疫球蛋白 制备工艺 作用机制 临床应用 不良反应

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睾丸特异乳酸脱氢酶-C基因选择性剪接的研究 被引量：4

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作者 洪键 贺庆华 +3 位作者 郑玉才 邝良德 杜晞 金素钰 《自然科学进展》 北大核心 2008年第9期1070-1074,共5页

采用RT-PCR方法从牦牛、狗和大鼠睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果在3种动物中均发现了4或5种Ldhc剪接体,包括外显子缺失或内含子增加两种类型,其中外显子缺失数量为1或2个的比例高.3种动物中外显子缺失... 采用RT-PCR方法从牦牛、狗和大鼠睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果在3种动物中均发现了4或5种Ldhc剪接体,包括外显子缺失或内含子增加两种类型,其中外显子缺失数量为1或2个的比例高.3种动物中外显子缺失的比例由高到低依次为外显子5,4,7,6;狗和大鼠剪接体中额外增加的内含子部分序列均导致在内含子中提前形成终止密码子;对牦牛和狗睾丸组织LDH同工酶的电泳分析未检测到潜在的多种Ldhc剪接体的表达,推测睾丸组织Ldhc选择性剪接的功能是调控该基因在睾丸中表达的方式之一;用RT-PCR方法克隆牦牛肌肉和心脏组织Ldhc基因,意外检测到Ldhc的两种剪接体,提示Ldhc基因的选择性剪接可能参与睾丸以外的其他组织沉寂Ldhc基因的表达. 展开更多

关键词 乳酸脱氢酶-C 选择性剪接 睾丸 基因表达

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