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基于UPLC-Q-TOF/MS技术快速鉴定当归中苯酞类和有机酸类成分 被引量：17
1
作者 张清清 冯媛 +6 位作者 李春花 李国川 刘兴超 李颢玥 王红芳 周莉 张一昕 《中国药房》 CAS 北大核心 2022年第5期579-585,591,共8页
目的建立全面、快速分析当归中苯酞类和有机酸类等化学成分的方法,为当归的质量评价和药效物质研究提供科学依据。方法以当归70%乙醇提取液为分析样品,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术进行分析。色谱柱为ACQUITY UP... 目的建立全面、快速分析当归中苯酞类和有机酸类等化学成分的方法,为当归的质量评价和药效物质研究提供科学依据。方法以当归70%乙醇提取液为分析样品,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术进行分析。色谱柱为ACQUITY UPLCBEH-C18,流动相为0.1%甲酸溶液-乙腈溶液(梯度洗脱),流速为0.3 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL。离子源为电喷雾离子源,采用正离子扫描模式,质量扫描范围为m/z 50~1000;毛细管电压为4000 V;雾化器压力为35 psi;裂解电压为135 V,锥孔电压为65 V;干燥气温度为320℃;干燥气流量为10 L/min,鞘流气流量为11 L/min;碰撞能量为20、40 V。使用Qualitative Analysis 10.0软件获取化合物的保留时间、准分子离子峰的精确质量数及二级碎片等信息,通过与对照品质谱图比对,并结合相关文献报道、质谱裂解规律及Chemspider、MassBank、PubChem等数据库信息对化合物进行分析。结果从当归提取物中共鉴定或推断出72个化合物,包括苯酞类化合物55个、有机酸类化合物13个、其他类化合物4个。结论成功建立了能快速、准确识别与鉴定当归中有机酸类和苯酞类等化学成分的方法,为其化学成分的全面表征提供了一种高效、快速的分析手段。 展开更多
关键词 当归 有机酸类 苯酞类 化学成分 超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术
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基于气相色谱-质谱联用技术的当归提取物化学成分研究 被引量：8
2
作者 张清清 冯媛 +4 位作者 杨贵雅 郭龙 李颢玥 李子伊 刘洋 《广东化工》 CAS 2021年第5期175-178,共4页
目的:评价不同溶剂和不同处理方法对当归提取物所含化学成分的影响。方法:采用超声辅助提取方法,分别选用甲醇和正己烷作为溶剂,在不同超声时间条件下提取当归化学成分。利用气相色谱-质谱联用技术结合NIST数据库、对照品及质谱裂解规... 目的:评价不同溶剂和不同处理方法对当归提取物所含化学成分的影响。方法:采用超声辅助提取方法,分别选用甲醇和正己烷作为溶剂,在不同超声时间条件下提取当归化学成分。利用气相色谱-质谱联用技术结合NIST数据库、对照品及质谱裂解规律等鉴定各提取物中成分,并计算指标成分的相对百分含量,综合评价提取方法。结果:通过综合评价及验证实验,可知采用甲醇超声提取15 min效果较好,共鉴定33个化合物,Z-藁本内酯的相对百分含量为46.70%。结论:本研究进一步明确当归所含化学成分,为其质量控制和药效物质研究提供参考。 展开更多
关键词 当归 气相色谱-质谱 超声法 化学成分
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互联网+联合PBL教学模式在中医药院校的教学实践初探 被引量：6
3
作者 刘兴超 李颢玥 +3 位作者 师新颖 张清清 周莉 李春花 《中国中医药现代远程教育》 2019年第7期153-156,共4页
近年来随着中医药事业的迅猛发展,社会对中医药人才的需求越来越多。但随着时代的进步与发展和高等教育的普及,传统教学模式难以满足社会对于精英、创造性人才的需求,这就要求我们必须进行教育教学改革,以培养优质中医药人才,促进中医... 近年来随着中医药事业的迅猛发展,社会对中医药人才的需求越来越多。但随着时代的进步与发展和高等教育的普及,传统教学模式难以满足社会对于精英、创造性人才的需求,这就要求我们必须进行教育教学改革,以培养优质中医药人才,促进中医药事业的发展。PBL改革为近年来教改中较为先进成熟的代表,其主要特色是以问题为向导进行教学,培养学生的自主创新能力,符合我们对于创造性人才的培养要求。而以"互联网+"时代背景为依托,PBL教学模式的独特价值将会被放大并充分利用。本文主要介绍"互联网+"联合PBL教学方式在中医药院校教学实践中的应用。 展开更多
关键词 互联网+ PBL 中医药院校 教学改革
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基于TLR4/NF-κB/MLCK通路探讨百合地黄汤治疗失眠伴肠道菌群失调小鼠的机制 被引量：1
4
作者 王雅静 杨伟丽 +4 位作者 刘艳蕊 李颢玥 韩世诚 张梦杰 王茜 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期681-693,共13页
目的基于TLR4/NF-κB/MLCK通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)及多因素刺激所致失眠伴肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法将84只KM小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组(地西泮,1.38 mg·kg^(-... 目的基于TLR4/NF-κB/MLCK通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)及多因素刺激所致失眠伴肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法将84只KM小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组(地西泮,1.38 mg·kg^(-1))、百合组(2.25 g·kg^(-1))、地黄组(2.25 g·kg^(-1))、百合地黄汤组(4.5 g·kg^(-1))。采用夹尾2 min、昼夜颠倒24 h、垫料潮湿24 h、45°鼠笼倾斜24 h、交替鼠笼24 h、禁食不禁水24 h、冷水浴3 min等多因素刺激4周结合PCPA腹腔注射2 d共同制备失眠小鼠模型。模型复制成功后,给予相应的药物治疗。采用高架十字迷宫系统观察小鼠的焦虑样行为;通过翻正反射实验观察睡眠潜伏期和睡眠持续时间;16s RNA测序法分析小鼠肠道菌群组成结构;液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测脑和结肠γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(Trp)、5-羟色氨酸(5-HTP)、5-羟色胺(5-HT)的浓度变化;免疫组织化学法检测结肠中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达情况;实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)检测结肠组织中基因白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、ZO-1、Occludin、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测结肠上皮组织中蛋白TLR4、NF-κB、磷酸化-核因子κB(p-NF-κB)、MLCK、肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化-肌球蛋白轻链(p-MLC)表达情况。结果与正常组小鼠比较,模型组小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域的距离、在开臂区域停留的时间明显缩短(P<0.05);睡眠潜伏期明显延长、睡眠持续时间明显缩短(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度降低(P<0.01);脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT浓度明显降低(P<0.01),Glu浓度明显升高(P<0.01);结肠中GABA、Glu浓度明显降低(P<0.01),Trp、5-HTP、5-HT浓度明显升高(P<0.01);结肠组织� 展开更多
关键词 百合地黄汤 失眠 肠道菌群 肠黏膜机械屏障 TLR4/NF-κB/MLCK信号通路 小鼠
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补肾活血方对肾虚血瘀型子宫内膜增生症大鼠的作用及机制研究
5
作者 李颢玥 王茜 郝蕾 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期623-632,共10页
目的探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、米非司酮组(12 mg·kg^(-1))及补肾活血方低、中... 目的探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、米非司酮组(12 mg·kg^(-1))及补肾活血方低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g·kg^(-1)),每组15只。采用灌胃羟基脲及戊酸雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH大鼠模型。造模成功后,各组按照设定剂量灌胃给药,每日1次,连续21 d。实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA法检测血清雌激素(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的水平;HE染色法观察子宫内膜组织病理形态变化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)蛋白表达水平;Western Blot法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、c AMP、T_(3)、T_(4)、TSH、ET-1水平及ET-1/NO比值均明显降低(P<0.05,P<0.01),c GMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);血液流变学各项指标及纤维蛋白原(FIB)含量均明显升高(P<0.05),凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)均明显延长(P<0.05);子宫指数及子宫内膜厚度显著升高(P<0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,补肾活血方组大鼠血清CORT、ACTH、c AMP、T_(3)、T_ 展开更多
关键词 补肾活血方 子宫内膜增生症 肾虚血瘀证 MMP-9/TIMP-1平衡 Bax Bcl-2 PTEN 大鼠
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桂枝茯苓丸调控多囊卵巢综合征大鼠MMP-9/TIMP-1平衡的研究 被引量：3
6
作者 李颢玥 王茜 +2 位作者 韩雪 石铖 郝蕾 《河北中医药学报》 2022年第4期1-6,共6页
目的:研究桂枝茯苓丸对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清及卵巢组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法:60只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、克罗米芬组、桂枝茯苓丸高、低剂量组;采... 目的:研究桂枝茯苓丸对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠血清及卵巢组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制物基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平的影响。方法:60只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、克罗米芬组、桂枝茯苓丸高、低剂量组;采用股骨内侧皮下注射胰岛素注射液和人绒毛膜促性腺激素(HCG)复制大鼠PCOS模型。连续治疗35 d后,测量体质量,收集血清、卵巢组织标本,采用酶联免疫法(ELISA)测定血清睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡成熟素(FSH)、MMP-9、TIMP-1的含量;光镜下观察卵巢组织的病理形态学变化;免疫组化法观察大鼠卵巢组织MMP-9、TIMP-1的表达情况。结果:与正常组相比,模型组体质量增加,血清T、LH、FSH、MMP-9水平升高,TIMP-1水平降低,卵巢可见窦腔明显扩大的囊性窦卵泡。与模型组相比,克罗米芬组、桂枝茯苓丸高、低剂量组体质量改善,血清T、LH、FSH、MMP-9水平均明显降低,TIMP-1水平升高,卵巢囊性窦卵泡减少,窦腔变小,各时期卵泡增多,黄体数目增多。结论:桂枝茯苓丸高、低剂量组均可明显改善PCOS大鼠症状,调控大鼠血清及卵巢组织中MMP-9、TIMP-1水平,且桂枝茯苓丸高剂量组疗效优于低剂量组。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 桂枝茯苓丸 月经不调 癥瘕 不孕 MMP-9 TIMP-1
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锦灯笼调控PPAR/JNK2通路防治药物性肝损伤的作用机制探讨 被引量：1
7
作者 李颢玥 刘晨旭 +4 位作者 石铖 韩世诚 郝蕾 张一昕 王茜 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期303-311,共9页
目的基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg^(-1))及锦灯笼高(6.67 g·kg^(-1))、低(1.67 g·kg^(-1))剂量组。采用对... 目的基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg^(-1))及锦灯笼高(6.67 g·kg^(-1))、低(1.67 g·kg^(-1))剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP,1000 mg·kg^(-1))溶液灌胃复制DILI大鼠模型,同时给予相应药物灌胃,每日1次,连续30 d。检测大鼠血清生化指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX);HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)的表达情况;免疫荧光检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达情况;Western Blot法检测肝组织c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)、磷酸化氨基末端激酶2(p-JNK2)蛋白表达情况;qRT-PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和JNK2的基因表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠血清ALT、AST、DBIL及TBIL水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α、IL-6及IFN-γ水平均显著升高(P<0.01);血清MDA水平显著升高(P<0.01),GSH、GSH-PX水平显著降低(P<0.01);大鼠肝组织的肝小叶结构被严重破坏,肝细胞排列紊乱,有明显的炎性细胞浸润,并出现不同程度的坏死和变性;大鼠肝组织MIP-1β蛋白表达量显著升高(P<0.01),MIP-2蛋白阳性表达显著增强(P<0.01),p-JNK2蛋白表达显著上调(P<0.01);大鼠肝组织PPARαmRNA表达显著下调(P<0.01),PPARγ、JNK2 mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型组相比,水飞蓟宾组和锦灯笼高、低剂量组大鼠血清ALT、AST、DBIL、TBIL、TNF-α、IL-6及IFN-γ水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清MDA水平显著降低(P<0.01),GSH、GSH-PX水平明显升高(P<0.05,P<0.01);肝损伤程度降低,肝细胞排列较为整齐,� 展开更多
关键词 锦灯笼 药物性肝损伤 对乙酰氨基酚 过氧化物酶体增殖物激活受体 c-Jun氨基末端激酶2 炎性因子 氧化应激 大鼠
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