IFITM3在原发性肝癌中的表达及其对MMP-9调控效应 被引量：11

1

作者 吴荣寿 邬林泉 +5 位作者 李科浩 李恩亮 冯潜 刘万伟 袁荣发 张惊玲 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期68-76,共9页

目的:探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的表达及作用。方法:用免疫组化与Western blot检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达;构建IFITM3小干扰RNA片段(psilencer3.1-sh IFITM3)... 目的:探讨干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的表达及作用。方法:用免疫组化与Western blot检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3以及基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达;构建IFITM3小干扰RNA片段(psilencer3.1-sh IFITM3)转染肝癌Hep G2细胞,用实时荧光定量PCR及Western blot法、CCK8法、Transwell试验和划痕试验分别检测细胞转染后IFITM3和MMP-9 m RNA及蛋白表达、增殖能力以及侵袭与迁移能力的变化。结果:与癌旁组织比较,肝癌组织中IFITM3与MMP-9的蛋白的阳性表达率与表达量均明显升高(81.67%vs.13.33%;88.33%vs.8.33%,均P<0.05);psilencer3.1-sh IFITM3转染后,Hep G2细胞IFITM3和MMP-9的m RNA与蛋白表达水平、细胞增值率均明显降低,穿膜细胞数明显减少,划痕融合速率明显减慢。以上定量指标间的差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:原发性肝癌中IFITM3表达增高,高表达的IFITM3可能通过调控MMP-9的表达而促进肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 干扰素诱导跨膜蛋白3 基质金属蛋白酶9

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敲除TSP-1对小鼠急性肝损伤保护作用的机制

2

作者 吴敏 冯伟珂 +6 位作者 占一姗 王剑巧 曾金娣 李科浩 张守华 陶强 占敏 《广东医学》 CAS 2024年第2期152-158,共7页

目的研究敲除血小板反应蛋白1(thrombospondin 1,TSP-1)在四氯化碳(CCl_(4))所致小鼠急性肝损伤中的保护作用。方法选取C57BL/6J小鼠16只,TSP-1基因敲除小鼠8只:C57BL/6J小鼠分为WT组和WT+CCl_(4)组,TSP-1基因敲除小鼠为TSP-1^(-/-)+CCl... 目的研究敲除血小板反应蛋白1(thrombospondin 1,TSP-1)在四氯化碳(CCl_(4))所致小鼠急性肝损伤中的保护作用。方法选取C57BL/6J小鼠16只,TSP-1基因敲除小鼠8只:C57BL/6J小鼠分为WT组和WT+CCl_(4)组,TSP-1基因敲除小鼠为TSP-1^(-/-)+CCl_(4)组;WT+CCl_(4)和TSP-1^(-/-)+CCl_(4)组给予0.5 mL CCl_(4)+9.5 mL/kg橄榄油进行腹腔注射建立急性肝损伤模型,WT组注射橄榄油10 mL/kg作为对照。通过HE染色以及血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)观察各组小鼠肝脏损伤情况及炎症反应程度;同时检测肝组织丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)的含量并通过免疫组化和TUNEL检测凋亡的变化。结果敲除TSP-1对CCl4诱导的急性肝损伤具有明显的改善作用,表现为血清AST、ALT、IL-6和TNF-α的降低和肝细胞坏死的减少,以及降低MDA含量和升高GSH含量,减少肝组织中凋亡及caspase-3的表达。结论敲除TSP-1对CCl_(4)诱导的小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抑制炎症、氧化应激和细胞凋亡相关。 展开更多

关键词 血小板反应蛋白1 四氯化碳 急性肝损伤

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应用脐带血单个核细胞修复小鼠皮肤缺损创伤的实验研究

3

作者 冯伟珂 黄承凤 +4 位作者 曾俊权 胡云 张守华 李科浩 陶强 《南昌大学学报（医学版）》 2024年第3期20-25,共6页

目的 探讨创面局部应用脐带血单个核细胞(UCB-MNCs)治疗皮肤缺损的效果及相关机制。方法 选取45只C57小鼠建立创面损伤模型后分为3组。实验组:先将0.5 mL的UCB-MNCs(细胞数:1×10^(9) mL^(-1))皮下于8~10 mm均匀注射在每只小鼠伤口... 目的 探讨创面局部应用脐带血单个核细胞(UCB-MNCs)治疗皮肤缺损的效果及相关机制。方法 选取45只C57小鼠建立创面损伤模型后分为3组。实验组:先将0.5 mL的UCB-MNCs(细胞数:1×10^(9) mL^(-1))皮下于8~10 mm均匀注射在每只小鼠伤口周围,再将0.5 mL的UCB-MNCs均匀注射在创面表面,共1次;阳性对照组:创口表面涂抹牛碱性成纤维细胞生长因子外用凝胶(商品名:贝复新);空白对照组:不做处理,伤口自然暴露。各组小鼠造模后第0、3、7及14天,采用Elisa技术检测血清内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β(TGF-β)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),HE和MASSON染色观察创面组织病理学情况。结果 所有小鼠均造模成功,与空白对照组和阳性对照组相比,实验组在造模后第3、7、14天血清VEGF、TGF-β和bFGF的表达水平显著升高(P<0.05)。术后第14天HE和MASSON染色结果显示实验组小鼠的创伤已全部愈合,且表皮修复状况良好,可以观察到部分炎症细胞的浸润;阳性对照组的小鼠部分表皮修复状况良好,但仍有一部分创伤没有完全愈合,肉芽组织的生长状况良好;空白对照组未完全愈合的创伤周围瘢痕组织增生明显,且出现明显的炎症细胞浸润以及部分创伤仍未愈合的现象。结论 UCB-MNCs修复小鼠的皮肤损失创伤,是通过促进细胞因子的分泌来促进皮肤缺损创伤的愈合。 展开更多

关键词 脐带血单个核细胞 创面愈合 血管内皮生长因子 转化生长因子-Β 碱性成纤维细胞生长因子 动物 实验 小鼠

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应用生物信息学探索神经母细胞瘤转移的关键基因

4

作者 张守华 孟肖振 +5 位作者 邹海波 冯丹 李科浩 李匡凡 占敏 徐晗 《实用临床医学（江西）》 CAS 2023年第4期15-21,共7页

目的利用生物信息学手段分析神经母细胞瘤(NB)基因表达数据集,挖掘和NB转移相关的关键基因。方法基于GEO数据库中的NB数据集GSE112447,利用在线分析工具GEO2R筛选差异表达基因,对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。通过STRING数据库构... 目的利用生物信息学手段分析神经母细胞瘤(NB)基因表达数据集,挖掘和NB转移相关的关键基因。方法基于GEO数据库中的NB数据集GSE112447,利用在线分析工具GEO2R筛选差异表达基因,对差异表达基因进行GO和KEGG富集分析。通过STRING数据库构建差异表达基因的蛋白质互作网络(PPI),分别应用Cytoscape中的MCC、DMNC和Stress算法筛选出前15个候选关键基因,取交集确定关键基因。最后利用UCSC Xena数据库分析关键基因表达与NB患者预后的相关性。结果共筛选出435个在NB转移和原发肿瘤组织间差异表达的基因,其中表达上调基因296个,表达下调基因139个。GO分析显示,差异表达基因与细胞黏附,趋化作用,炎症反应和补体激活等过程有关。KEGG通路分析显示,差异表达基因主要参与PI3K-Akt信号通路、IL-17信号通路和造血细胞调控信号通路等。唯一关键基因CCNB1的表达水平与NB患者的预后相关,其低表达与高生存率呈正相关(P<0.05)。结论CCNB1基因可能在NB转移过程中起重要作用,且与患者预后相关,可作为NB诊疗的新生物标志物。 展开更多

关键词 生物信息学 神经母细胞瘤 肿瘤转移 关键基因 预后分析

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KLF4调控MMP9对原发性肝癌的侵袭迁移能力的影响 被引量：4

5

作者 冯潜 石世代 +4 位作者 周勇 李恩亮 吴荣寿 李科浩 邬林泉 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第22期3025-3029,共5页

目的研究Krüppel样因子4(KLF4)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在原发性肝癌中的表达情况,探讨KLF4调节MMP9对原发性肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法收集原发性肝癌手术患者癌和癌旁组织标本,通过免疫组织化学、实时荧光定量PCR和免... 目的研究Krüppel样因子4(KLF4)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在原发性肝癌中的表达情况,探讨KLF4调节MMP9对原发性肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法收集原发性肝癌手术患者癌和癌旁组织标本,通过免疫组织化学、实时荧光定量PCR和免疫印迹试验(Western blot)检测50例肝癌组织及对应癌旁组织中KLF4和MMP9的表达情况;构建重组质粒,上调肝癌细胞(HepG2细胞系)的KLF4表达,检测MMP9mRNA及蛋白水平的表达情况;转染后的HepG2细胞运用Transwell侵袭试验和划痕试验观察侵袭和迁移能力的变化。结果相比癌旁组织,KLF4在肝癌组织中的表达明显降低(P<0.05),而MMP9的表达明显增高(P<0.05)。通过构建重组质粒,上调KLF4的表达,发现MMP9的mRNA和蛋白表达均降低,并影响HepG2细胞的侵袭和迁移能力。结论在原发性肝癌中,KLF4低表达,而MMP9高表达。在肝癌细胞中上调KLF4表达可引起MMP9表达下降,进而抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。 展开更多

关键词 KLF4 基质金属蛋白酶9 肝肿瘤 侵袭 迁移

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敲除TSP1通过氨基酸和糖代谢通路对阿霉素所致心肌损伤的作用

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作者 占敏 卓丰 +3 位作者 吴敏 李科浩 张守华 杨豆 《广东医学》 CAS 2023年第2期161-167,共7页

目的利用代谢组学方法阐明敲除血小板反应蛋白1(TSP1)通过调节小分子化合物的代谢,减轻阿霉素(ADM)致心肌损伤。方法以24只野生型C57BL/6小鼠和24只TSP1基因敲除(TSP1^(-/-))小鼠为实验对象,分为4组:WM组(n=12)、TSP1^(-/-)组(n=12)和WM... 目的利用代谢组学方法阐明敲除血小板反应蛋白1(TSP1)通过调节小分子化合物的代谢,减轻阿霉素(ADM)致心肌损伤。方法以24只野生型C57BL/6小鼠和24只TSP1基因敲除(TSP1^(-/-))小鼠为实验对象,分为4组:WM组(n=12)、TSP1^(-/-)组(n=12)和WM-ADM组(n=12)、TSP1^(-/-)-ADM组(n=12)。WM组和TSP1^(-/-)组小鼠腹腔注射生理盐水,WM-ADM组和TSP1^(-/-)-ADM组小鼠腹腔注射ADM以建立慢性心功能衰竭(CHF)模型。以血清生化[肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzymes,CK-MB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)]和心脏组织苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色为指标评价注射ADM后小鼠心肌损伤情况,以基于核磁共振(1HNMR)的代谢组学技术来研究4组小鼠血清中小分子代谢物的变化。结果血清生化和心脏组织HE染色显示,注射ADM后TSP1^(-/-)小鼠心脏组织损伤比野生小鼠明显减轻。代谢组学研究显示,敲除TSP1后明显影响小鼠体内的氨基酸代谢。野生型小鼠注射ADM后,血清亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、乳酸、丙氨酸、乙酸和丙酮酸等变化明显;TSP1^(-/-)小鼠注射ADM后上述血清代谢物水平明显回调。结论本研究发现TSP1^(-/-)小鼠可能通过调节氨基酸和糖代谢来减弱ADM造成的心肌损伤。 展开更多

关键词 TSP1 阿霉素 心肌损伤 代谢组学 氨基酸代谢

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沉默干扰素诱导跨膜蛋白3可抑制肝癌细胞HepG2增殖和侵袭 被引量：3

7

作者 吴荣寿 邬林泉 +3 位作者 李科浩 李恩亮 冯潜 张惊玲 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期244-249,共6页

目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IF... 目的研究干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)在原发性肝癌中的异常表达,探讨沉默IFITM3表达对肝癌细胞系Hep G2生物学特征的影响。方法通过Western blot和免疫组织化学染色法检测60例肝癌组织及对应癌旁组织中IFITM3的表达情况及相关性;构建IFITM3小干扰RNA片段(IFITM3 si-RNA),采用脂质体介导转染肝癌细胞(Hep G2细胞系),同时设置无义序列组和空白对照组,实时荧光定量PCR检测转染后IFITM3 m RNA的表达;CCK8(cell counting kit 8)检测转染后细胞增殖能力;Western blot检测IFITM3在蛋白水平的表达;Transwell实验和划痕实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化。结果和癌旁组织相比,IFITM3在肝癌组织中的明显高表达。与无义序列组和空白对照组比较,IFITM3 si-RNA转染组细胞IFITM3表达和细胞增值率降低,穿膜细胞数也明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。划痕实验也表明迁移能力降低。结论 IFITM3在原发性肝癌中高表达;IFITM3在肝癌细胞增殖和侵袭过程中发挥重要作用,有望成为原发性肝癌基因治疗的侯选靶点。 展开更多

关键词 肝癌 沉默 细胞增殖 干扰素诱导跨膜蛋白3 侵袭

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肝门胆管癌术中左右胆管成形后分别与空肠吻合11例临床研究 被引量：2

8

作者 李科浩 邬林泉 +4 位作者 殷香保 李恩亮 吴荣寿 邵江华 黄勇 《中国实用外科杂志》 CSCD 北大核心 2015年第12期1329-1332,共4页

目的探讨左右胆管成形后分别与空肠吻合术在BismuthII型肝门胆管癌手术治疗中的安全性和实用性。方法回顾性分析南昌大学第二附属医院肝胆外科2010年1月至2015年1月收治的11例BismuthⅡ型肝门胆管癌病例的临床资料和随访情况，均行胆管... 目的探讨左右胆管成形后分别与空肠吻合术在BismuthII型肝门胆管癌手术治疗中的安全性和实用性。方法回顾性分析南昌大学第二附属医院肝胆外科2010年1月至2015年1月收治的11例BismuthⅡ型肝门胆管癌病例的临床资料和随访情况，均行胆管癌根治性切除及左右胆管成形后分别与空肠端侧吻合。结果手术时间平均5h，术中出血平均400mL，术后3—6d进食，住院时间11～20d，无住院死亡病例，术后发生胆漏3例，腹腔感染2例，胸腔积液3例，经抗感染及穿刺引流治疗后症状缓解，未出现吻合口出血病例。随访时间3—60个月，有10例病人经过门诊复查和信访获得随访。复查方法为T管造影、CT、MRI检查。1例出现吻合口狭窄，考虑胆管癌复发，1例偶发胆道感染症状，抗生素治疗后情况改善，10例病人中位生存期29个月。结论BismuthⅡ型肝门部胆管癌切除肿瘤后，左右侧创面胆管残端数目较多且距离较远，可行左右胆管单独整形之后分别与空肠行端侧吻合术。 展开更多

关键词 肝门胆管癌 胆道重建 根治性切除 左右胆管分开整形

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AGR2调控IFITM3的表达促进肝癌细胞的增殖 被引量：2

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作者 冯潜 周勇 +4 位作者 石世代 李恩亮 吴荣寿 李科浩 邬林泉 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第10期1585-1591,共7页

目的:探讨重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2,AGR2)的表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制.方法:通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学检测40例肝癌患者癌组织和对应癌旁组织中AGR2基因、干... 目的:探讨重组人前梯度同源蛋白2(anterior gradient homolog 2,AGR2)的表达对肝癌细胞增殖能力的影响及其可能的作用机制.方法:通过实时荧光定量PCR、Western blot、免疫组织化学检测40例肝癌患者癌组织和对应癌旁组织中AGR2基因、干扰素诱导跨膜蛋白3(interferon-induced transmembrane protein 3,IFITM3)的表达情况,构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2,并将其转染至肝癌细胞中,运用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测AGR2 mRNA和蛋白的表达,CCK-8(cell counting kit 8)法检测细胞的增殖能力,利用流式细胞技术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测IFITM3的表达.结果:在原发性肝癌组织中AGR2,IFITM3呈现高表达;成功构建AGR2的过表达质粒pcDNA3.1-AGR2,成功构建稳定高表达AGR2的肝癌HepG2细胞.pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞中AGR2 mRNA和蛋白的表达水平明显高于阴性对照组和空白对照组.与阴性对照组比较,pcDNA3.1-AGR2转染组HepG2细胞的体外增殖能力和克隆形成能力明显升高,IFITM3蛋白的表达水平也随之升高.结论:上调AGR2可以增加IFITM3的表达,促进肝癌细胞的增殖. 展开更多

关键词 肝癌 细胞增殖 重组人前梯度同源蛋白2 干扰素诱导跨膜蛋白3

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干扰素诱导的跨膜蛋白在肿瘤中的研究进展 被引量：1

10

作者 石世代 周勇 +1 位作者 李科浩 邬林泉 《国际外科学杂志》 2015年第4期273-276,共4页

干扰素诱导的跨膜蛋白（IFITM）是一种近来发现的细胞内抗病毒蛋白家族,它能抑制多种有或者无胞膜病毒的复制而起到抗病毒作用;同时近期有研究显示IFITM3对人类多种肿瘤细胞及干细胞的迁移等起重要作用,但IFITM3在人类肿瘤发生、发展和... 干扰素诱导的跨膜蛋白（IFITM）是一种近来发现的细胞内抗病毒蛋白家族,它能抑制多种有或者无胞膜病毒的复制而起到抗病毒作用;同时近期有研究显示IFITM3对人类多种肿瘤细胞及干细胞的迁移等起重要作用,但IFITM3在人类肿瘤发生、发展和扩散转移的作用机制尚不明确.本文主要对IFITM3蛋白在人类肿瘤的研究进展及未来的研究方向作一综述. 展开更多

关键词 IFITM3蛋白 抗病毒药 细胞运动 肿瘤

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乙型肝炎相关性肝癌中Toll样受体4调控周期蛋白依赖激酶4/6对其增殖的影响

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作者 周勇 黄文峰 +5 位作者 冯潜 石世代 李恩亮 李科浩 吴荣寿 邬林泉 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第19期3029-3037,共9页

目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)对乙型肝炎相关性肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法:Western blot法检测36例乙型肝炎相关性肝癌患者组织及相应癌旁组织中TLR4、周期蛋白依赖激酶(cyclindependent kinase,CDK)4和CDK... 目的:探讨Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)对乙型肝炎相关性肝癌细胞增殖的影响及作用机制.方法:Western blot法检测36例乙型肝炎相关性肝癌患者组织及相应癌旁组织中TLR4、周期蛋白依赖激酶(cyclindependent kinase,CDK)4和CDK6的蛋白表达水平,并分析癌组织中TLR4与CDK4,CDK6之间的关联性.构建3个特定干扰TLR4的siRNA序列和一个阴性对照序列,通过脂质体转染肝癌细胞Hep-3B,Western blot法筛选出最佳干扰序列.Western blot法检测转染前后肝癌细胞中TLR4、CDK4和CDK6的蛋白表达水平;MTT比色法、平板克隆形成实验检测干扰TLR4表达后肝癌细胞增殖能力.结果:在乙型肝炎相关性肝癌患者组织中,TLR4、CDK4和CDK6蛋白的总体表达水平高于相应癌旁组织(P<0.05),且TLR4分别与CDK4、CDK6的表达呈正相关性(r_1=0.66,r_2=0.57).成功构建并筛选出最佳干扰序列TLR4-siRNA-03.转染TLR4-siRNA-03后,与Control组相比,TLR4-siRNA组中CDK4、CDK6蛋白表达均随之降低(P<0.05),肝癌细胞Hep-3B的生长速度也明显下降(P<0.05),TLR4-siRNA组克隆形成率(18.77%±4.61%)也明显下降(P<0.05).结论:在乙型肝炎相关性肝癌中TLR4可能通过调控CDK4、CDK6来影响其增殖. 展开更多

关键词 TOLL样受体4 周期蛋白依赖激酶4 周期蛋白依赖激酶6 乙型肝炎相关性肝癌 增殖

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