^(131)I-angiostatin在荷瘤小鼠体内的分布及放射受体显像 被引量：12

1

作者 袁梦晖 徐海峰 +4 位作者 邵秋菊 周润锁 张王峰 杨建 李福洋 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期905-907,F003,共4页

本实验研究131I- angiostatin在荷Lewis肺癌C-57小鼠体内的分布,并进行放射受体显像,为临床应用提供依据。Angiostatin用氯胺-T法行131标记后,尾静脉注入荷肺癌C-57小鼠体内,24、48、96、144h后进行放射受体显像,并于48、96、144h分批... 本实验研究131I- angiostatin在荷Lewis肺癌C-57小鼠体内的分布,并进行放射受体显像,为临床应用提供依据。Angiostatin用氯胺-T法行131标记后,尾静脉注入荷肺癌C-57小鼠体内,24、48、96、144h后进行放射受体显像,并于48、96、144h分批处死实验小鼠,测定心脏等11种脏器和肿瘤组织的单位重量放射性比值（T/NT）、各组织摄取百分数（％ID/g）。结果发现,131I-angiostatin尾静脉注射后,48h内以全身分布为主,96h后肿瘤部位显像,并呈高度特异性浓集。γ显像结果与体内分布结果一致,SPECT图像质量与T/NT值有关。本研究证实131I-angiostatin可以特异地与肺癌组织内血管内皮细胞上的受体结合,具有导向肺癌组织的作用。 展开更多

关键词 血管生成抑制剂 肺肿瘤 组织分布 放射受体显像 动物模型

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一步法从人血浆中制备天然血管生成抑制素 被引量：10

2

作者 李福洋 何鹏 +5 位作者 刘新平 张英起 杨静华 樊代明 药立波 fmmu.edu.cn 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期325-327,共3页

血管生成抑制素 (angiostatin)能特异地抑制新生血管生成 ,有潜在的临床应用价值 .利用亲和层析从人血浆中纯化纤溶酶原 ,并在原位进行弹性蛋白酶有限消化产生angiostatin片段 ,经过洗涤 ,然后用 0 2mol/L 6 氨基己酸溶液将angiostati... 血管生成抑制素 (angiostatin)能特异地抑制新生血管生成 ,有潜在的临床应用价值 .利用亲和层析从人血浆中纯化纤溶酶原 ,并在原位进行弹性蛋白酶有限消化产生angiostatin片段 ,经过洗涤 ,然后用 0 2mol/L 6 氨基己酸溶液将angiostatin特异性洗脱 .此改进使整个制备过程变得简单、快速和高效 . 展开更多

关键词 血管生成抑制素 抗肿瘤转移 一步亲和层析 血浆

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氧自由基对基因表达的调节机理 被引量：8

3

作者 李福洋 惠宏襄 《生命科学》 CSCD 1999年第A01期28-31,共4页

关键词 氧自由基 基因表达 调节机理

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抗人精浆蛋白单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆及序列分析 被引量：11

4

作者 武国军 郝晓柯 +4 位作者 白玉杰 张盈华 李福洋 季少平 范金水 《第四军医大学学报》 1998年第5期484-487,共4页

目的：获得鼠抗人精浆蛋白（γ－Sm）单抗可变区基因，为单链抗体的构建及表达奠定基础．方法：从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体（γ-Sm－McAb）的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA，经反转录、PCR分离获得了γ－Sm－McAb轻链可变区（VL）基... 目的：获得鼠抗人精浆蛋白（γ－Sm）单抗可变区基因，为单链抗体的构建及表达奠定基础．方法：从分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体（γ-Sm－McAb）的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA，经反转录、PCR分离获得了γ－Sm－McAb轻链可变区（VL）基因和重链可变区（VH）基因，分别克隆人pUC19质粒中，用全自动荧光DNA序列分析仪对VH，VL基因序列进行了分析．结果：E4B7VH基因由358bp组成，编码119个氨基酸，E4B7VL基因由326bp组成，编码108个氨基酸；从推导出的氨基酸序列分析证实E4B7VH，VL序列均符合小鼠Ig可变区的氨基酸序列特征．结论：所克隆基因与Internet中基因文库的所有已知基因比较，未查到相同基因，与小鼠免疫球蛋白可变区基因同源性最高． 展开更多

关键词 单克隆抗体 抗精浆蛋白 可变区基因 克隆 测序

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血管生长抑素在小鼠胚泡中的调节作用 被引量：9

5

作者 赵田夫 张键 +6 位作者 李晶 曹宇静 李素敏 周家喜 李福洋 药立波 段恩奎 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期778-783,共6页

血管生长抑素(angiostatin,AS)是一种新血管生成的抑制蛋白,它可以有效抑制内皮细胞的增殖、迁移和管状形态的产生,是肿瘤转移的有效抑制剂.肿瘤转移和胚胎植入具有惊人的相似性,AS对小鼠胚胎植入是否有作用迄今尚无报道.采用体外培养、... 血管生长抑素(angiostatin,AS)是一种新血管生成的抑制蛋白,它可以有效抑制内皮细胞的增殖、迁移和管状形态的产生,是肿瘤转移的有效抑制剂.肿瘤转移和胚胎植入具有惊人的相似性,AS对小鼠胚胎植入是否有作用迄今尚无报道.采用体外培养、RT PCR和蛋白质印迹等多种方法研究了AS对小鼠胚泡中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体KDR、基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)的影响.研究显示,AS下调了VEGF及其受体KDR、MMP 2和MMP 9的表达,而上调了TIMP 1和TIMP 2的表达.应用整合素αVβ3的特异性抑制剂Echistatin与AS共同处理胚泡,结果显示,Echistatin减弱了AS对MMP 2的下调作用及对TIMP 2的上调作用.以上结果提示:AS可能通过与整合素αVβ3相互作用调节胚泡中VEGF、MMPs和TIMPs的表达。 展开更多

关键词 血管生长抑素 小鼠 胚泡 调节作用 血管生成 肿瘤转移

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变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段的纯化及葡聚糖结合功能实验 被引量：7

6

作者 苏凌云 吴补领 +1 位作者 李福洋 卫克文 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2002年第7期358-360,共3页

目的 :纯化变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段。 方法 :蛋白质技术 :金属螯合亲和层析 ,葡聚糖结合实验。结果 :通过蛋白质技术及金属螯合亲和层析 ,纯化出可融性融合蛋白GBD。此蛋白可与α - 1,6键葡聚糖结合。结论 :通过基因重组... 目的 :纯化变形链球菌gbpA的葡聚糖结合区GBD肽段。 方法 :蛋白质技术 :金属螯合亲和层析 ,葡聚糖结合实验。结果 :通过蛋白质技术及金属螯合亲和层析 ,纯化出可融性融合蛋白GBD。此蛋白可与α - 1,6键葡聚糖结合。结论 :通过基因重组技术成功纯化出变形链球菌 展开更多

关键词 变形链球菌 gbpA 蛋白质纯化 葡聚糖结合 龋齿 疾病预防

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提高柱式胶回收试剂盒DNA回收效率的最佳条件 被引量：7

7

作者 苏明 窦科峰 +1 位作者 赵爱志 李福洋 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第6期505-508,共4页

目的　确定提高柱式胶回收试剂盒 DNA回收效率的最佳条件 .方法　回收的基本步骤遵循试剂盒附带的厂家说明 ,在此基础上 ,改变其中所用试剂的剂量 ,或者添加原试剂盒中没有的试剂 ,并在不同条件组合下分别进行 DNA回收 .电泳后 ,通过比... 目的　确定提高柱式胶回收试剂盒 DNA回收效率的最佳条件 .方法　回收的基本步骤遵循试剂盒附带的厂家说明 ,在此基础上 ,改变其中所用试剂的剂量 ,或者添加原试剂盒中没有的试剂 ,并在不同条件组合下分别进行 DNA回收 .电泳后 ,通过比较条带的亮度来比较不同条件下 DNA回收效率的大小 ,逐步确定最佳的胶回收条件 .结果　提高柱式胶回收试剂盒 DNA回收效率的最佳条件为 :切胶要尽量的小 ;每 l g胶用 6 0 0 μL的 S1;溶胶时间 :5 5℃ ,10 min;沉淀时加入 3/ 5总体积的异丙醇和 1/ 10总体积的乙酸钠 (3mol· L- 1 ,p H5 .2 ) ;沉淀时间 2 0 m in;沉淀温度为 2 5℃ (室温 ) ;用 T1液溶解效率高于用水溶 ;溶解时间为 2 0 m in (5 5℃ ) .这些最佳条件中 ,大部分都对原来的条件进行了改良 .结论　应用了改良后的胶回收条件后 ,胶回收的效率提高到原来的3～ 展开更多

关键词 柱式胶回收试剂盒 DNA 分离 提纯 抗体库

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一种新的丝氨酸蛋白酶ESP30的表达及其多克隆抗体的制备 被引量：5

8

作者 张莹莹 李福洋 +4 位作者 张文红 张健 黄勇 刘新平 药立波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期334-336,339,共4页

目的:在大肠杆菌中表达ESP30蛋白,并制备兔抗ESP30抗体。方法:从嗜水气单胞菌基因组中扩增ESP30基因序列,并克隆入非融合表达载体pDH2中,在温度诱导下,表达目的蛋白,以表达的ESP30作为免疫原免疫家兔制备抗ESP30抗血清,抗体效价及特异... 目的:在大肠杆菌中表达ESP30蛋白,并制备兔抗ESP30抗体。方法:从嗜水气单胞菌基因组中扩增ESP30基因序列,并克隆入非融合表达载体pDH2中,在温度诱导下,表达目的蛋白,以表达的ESP30作为免疫原免疫家兔制备抗ESP30抗血清,抗体效价及特异性分别用ELISA和Westernblot法鉴定。结果:在大肠杆菌中高效表达相对分子质量(Mr)约为66000的ESP30蛋白。ELISA法检测抗血清的效价可达到1∶128000,Westernblot分析抗血清可与原核表达的ESP30蛋白特异结合。结论:成功地制备兔抗ESP30的抗血清,为进一步研究ESP30蛋白的结构和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 嗜水气单胞菌 表达 抗体 兔

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白藜芦醇联合5-FU对人乳腺癌细胞系MCF7的促凋亡作用 被引量：5

9

作者 李燕 邢克飞 +3 位作者 李福洋 汪云 药立波 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第7期658-661,共4页

目的:研究白藜芦醇联合5FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用.方法:4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)与不同浓度的白藜芦醇或/和5FU共孵育48h,MTT法检测细胞存活率,并用相差显微镜观察细胞形态学改变.用流式细胞术(检测细... 目的:研究白藜芦醇联合5FU促进人乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用.方法:4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)与不同浓度的白藜芦醇或/和5FU共孵育48h,MTT法检测细胞存活率,并用相差显微镜观察细胞形态学改变.用流式细胞术(检测细胞凋亡相关指标AnnexinV/PI)和Hoechst33258染色检测细胞凋亡.结果:白藜芦醇能够不同程度地抑制4种人乳腺癌细胞系(MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37)的生长.白藜芦醇对MCF7,MDAMB231,SKBR3和Bcap37细胞的IC50(半数抑制浓度)分别为65,207,139和213μmol/L.单用5FU对MCF7细胞的IC50为13μmol/L,联合使用5FU和白藜芦醇的IC50分别为9μmol/L和3μmol/L.与单用组相比,65μmol/L白藜芦醇和13μmol/L5FU联合使用后,MCF7细胞AnnexinV水平升高.Hoechst33258荧光染色和流式细胞术分析MCF7细胞的结果一致.结论:白藜芦醇与5FU合用可协同促进MCF7细胞凋亡,提示白藜芦醇可能用作治疗乳腺癌的二线化疗药. 展开更多

关键词 白藜芦醇 化疗 细胞凋亡 乳腺癌

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基于VERICUT的数控刀具直径选择方法研究 被引量：5

10

作者 阮晓光 李福洋 +2 位作者 蔡安江 曹瀚心 马芳荣 《制造业自动化》 北大核心 2013年第3期63-65,81,共4页

以某连杆锻模的数控加工过程为例,用Cimatron在不同直径刀具下编程,通过VERICUT进行数控仿真加工,并对AUTO-DIFF模块的偏差数据进行统计分析来预判和比较在不同直径刀具下进行数控加工后的效果,为实际加工提供指导。并按照最优的参数在... 以某连杆锻模的数控加工过程为例,用Cimatron在不同直径刀具下编程,通过VERICUT进行数控仿真加工,并对AUTO-DIFF模块的偏差数据进行统计分析来预判和比较在不同直径刀具下进行数控加工后的效果,为实际加工提供指导。并按照最优的参数在三维数控工作台上进行实验加工,验证了仿真结果的正确性。 展开更多

关键词 CIMATRON VERICUT AUTO-DIFF 仿真加工

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人反义SOD2基因真核表达载体的构建与鉴定 被引量：1

11

作者 李福洋 惠宏襄 +1 位作者 莫简 王成济 《第四军医大学学报》 1997年第2期178-179,共2页

人反义ＳＯＤ２基因真核表达载体的构建与鉴定李福洋１惠宏襄１莫简２王成济１（第四军医大学：１生物化学与分子生物学教研室，２化学教研室西安７１００３３）关键词自由基超氧化物岐酶反义核酸表达载体中图号Ｑ２６自由基与机体的许... 人反义ＳＯＤ２基因真核表达载体的构建与鉴定李福洋１惠宏襄１莫简２王成济１（第四军医大学：１生物化学与分子生物学教研室，２化学教研室西安７１００３３）关键词自由基超氧化物岐酶反义核酸表达载体中图号Ｑ２６自由基与机体的许多生理，病理过程关系密切．近年来分... 展开更多

关键词 反义核酸 基因表达 载体 SOD

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噬菌体展示的小肽序列差异对肿瘤坏死因子-α诱导的细胞毒作用的影响 被引量：2

12

作者 刘新平 张晓光 +3 位作者 韩炯 李福洋 王吉村 药立波 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期142-144,共3页

目的　从噬菌体随机多肽库中筛选出与肿瘤坏死因子 α(TNF α)特异结合 ,并能阻断其生物活性的小肽 ,为建立一种新型的抗TNF α多肽药物奠定基础。方法　用突变体TNF α和天然型TNF α分别作为靶蛋白 ,用噬菌体随机多肽库进行多次淘筛 ... 目的　从噬菌体随机多肽库中筛选出与肿瘤坏死因子 α(TNF α)特异结合 ,并能阻断其生物活性的小肽 ,为建立一种新型的抗TNF α多肽药物奠定基础。方法　用突变体TNF α和天然型TNF α分别作为靶蛋白 ,用噬菌体随机多肽库进行多次淘筛 ,经序列测定及体外酶联免疫吸附法(ELISA)实验选出候选多肽 ,进行抗TNF α诱导的L92 9细胞毒作用。结果　筛选到的二个序列不同但有一定相关性的候选小肽 ,其中由天然型TNF α作为靶蛋白筛选出的 12肽具有抗TNF α诱导的L92 9细胞毒作用。结论　这些序列可以做为合成小肽TNF 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 肽库 类风湿性关节炎

原文传递

变形链球菌葡聚糖结合蛋白B的纯化 被引量：3

13

作者 苏凌云 吴补领 +1 位作者 李福洋 卫克文 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2002年第3期129-131,共3页

目的 :从变形链球菌S .mutansIngbritt (serotypec)培养液上清中纯化葡聚糖结合蛋白B。方法 :SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析。结果 :纯化出约 10 μg具有葡聚糖结合特性的GbpB蛋白。结... 目的 :从变形链球菌S .mutansIngbritt (serotypec)培养液上清中纯化葡聚糖结合蛋白B。方法 :SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析。结果 :纯化出约 10 μg具有葡聚糖结合特性的GbpB蛋白。结论 :通过SephadxG - 2 0 0凝胶 (α - 1,6键葡聚糖 )亲和层析和Q -SephroseFF离子交换层析纯化出变链菌葡聚糖结合蛋白B。 展开更多

关键词 变形链球菌 GbpB 层析 纯化 葡聚糖结合蛋白B

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人CXCR1基因Tet-on可调控载体的构建及其在NIH3T3中的表达 被引量：2

14

作者 史曼 药立波 +5 位作者 王立峰 李福洋 苏金 张健 李霞 刘新平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期280-282,共3页

目的构建CXCR1-pTREhyg可调控性真核表达载体,检测其在NIH3T3细胞内的表达情况。方法通过RT-PCR的方法从原代培养的类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞中克隆得到CXCR1的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTREhyg载体中。用脂质体将pTet-o... 目的构建CXCR1-pTREhyg可调控性真核表达载体,检测其在NIH3T3细胞内的表达情况。方法通过RT-PCR的方法从原代培养的类风湿性关节炎患者滑膜成纤维细胞中克隆得到CXCR1的全长基因,测序正确后将其亚克隆入pTREhyg载体中。用脂质体将pTet-on质粒和CXCR1-pTRE-hyg共转染入NIH3T3细胞,以不同浓度的强力霉素诱导,用Westernblot检测CXCR1蛋白表达水平。结果Westernblot显示,我们所构建的可调控性表达载体能在NIH3T3细胞内表达,不同浓度药物诱导的CXCR1表达水平明显不同;同时还观察到IL-8刺激后,NIH3T3细胞中Erk-1/2磷酸化水平升高。结论成功构建了CXCR1-pTREhyg真核表达载体,并可在NIH3T3细胞内表达。经IL-8刺激的转染NIH3T3细胞中Erk-1/2活性发生变化。为进一步观察CXCR1与类风湿性关节炎损伤之间的关系奠定了基础。 展开更多

关键词 CXCR1 可调控表达载体 类风湿性关节炎

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抗前列腺特异抗原单链抗体/人羧肽酶A融合基因的构建及表达 被引量：4

15

作者 武国军 郝晓柯 +5 位作者 白玉杰 张盈华 王禾 药立波 季少平 李福洋 《第四军医大学学报》 2000年第4期391-393,共3页

目的　构建抗前列腺特异抗原 (PSA)单链抗体(sc Fv) /人羧肽酶 A(h CPA)融合基因 ,为前列腺癌的抗体导向酶 -前体药物疗法奠定基础 .方法　在已克隆抗 PSA sc Fv和 h CPA基因的基础上 ,用加端 PCR分别在 sc Fv基因的 3′端和 h CPA基因... 目的　构建抗前列腺特异抗原 (PSA)单链抗体(sc Fv) /人羧肽酶 A(h CPA)融合基因 ,为前列腺癌的抗体导向酶 -前体药物疗法奠定基础 .方法　在已克隆抗 PSA sc Fv和 h CPA基因的基础上 ,用加端 PCR分别在 sc Fv基因的 3′端和 h CPA基因的 5′端加上部分连接肽 (linker)基因序列 ,回收后混合 ;应用重叠延伸拼接法 ,将抗 PSA sc Fv基因和 h CPA基因通过 linker序列串联为 sc Fv/h CPA融合基因 ;并将构建的融合基因克隆到融合表达载体 p GEX- 4T- 1中进行表达 .结果　序列测定结果表明 ,构建的抗 PSA sc Fv/h CPA融合基因中 sc Fv和 h CPA序列均正确 ,sc Fv和 h CPA间有 18bp的linker序列 ,推导的氨基酸序列为 GSGGSG,与设计的序列相符 .融合基因经 IPTG诱导表达重组蛋白并以 SDS- PAGE分析 ,在 Mr为 940 0 0左右出现一条新生蛋白带 ,表达量约占菌体总蛋白的 34% .结论　成功构建并原核表达了抗 PSAsc Fv/h 展开更多

关键词 单链抗体 羧肽酶A 融合基因 前列腺肿瘤 抗前列腺特异抗原

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基于数字图像相关方法的齿轮轴线平行度误差测量 被引量：4

16

作者 李福洋 张二亮 +1 位作者 朱子文 牛鹏辉 《现代制造工程》 CSCD 北大核心 2020年第11期7-12,共6页

以一级减速齿轮副为研究对象,基于数字图像相关方法,提出了一种齿轮轴线平行度误差的光学测量方法。结合刚体运动学原理,计算了齿轮轴运动的旋转矩阵和平移矩阵,将齿轮轴端面目标点的坐标变化转化为齿轮轴线的方向向量和转角,确定了齿... 以一级减速齿轮副为研究对象,基于数字图像相关方法,提出了一种齿轮轴线平行度误差的光学测量方法。结合刚体运动学原理,计算了齿轮轴运动的旋转矩阵和平移矩阵,将齿轮轴端面目标点的坐标变化转化为齿轮轴线的方向向量和转角,确定了齿轮轴的空间姿态。结果表明:基于数字图像相关方法可以实现齿轮轴线平行度误差的非接触测量;同时,根据主、从动轮的转角和传动比,还可进一步获得齿轮副的传动误差曲线。 展开更多

关键词 数字图像相关方法 轴线平行度 误差测量 齿轮传动

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浅谈设备维护保养在血液成分分离中的重要性 被引量：2

17

作者 冯琪瑛 李福洋 《青海医药杂志》 2012年第8期61-62,共2页

目的:针对我中心成分室仪器设备维护保养对血液成分制备的重要性及设备维护过程中存在的问题,作出分析。方法:对血液成分分离所用仪器设备进行维护与保养,并进行保养原则分析。结果:仪器保养维护到位,保证了合格优质血液产品发往临床。... 目的:针对我中心成分室仪器设备维护保养对血液成分制备的重要性及设备维护过程中存在的问题,作出分析。方法:对血液成分分离所用仪器设备进行维护与保养,并进行保养原则分析。结果:仪器保养维护到位,保证了合格优质血液产品发往临床。结论:提出维护维修应遵循的原则,提高大型仪器设备的完好率,最大限度降低仪器设备的故障率,有效地延长仪器的使用寿命,保证血液成分分离的质量安全。 展开更多

关键词 仪器设备 维护保养 成分分离 产品质量 重要性

原文传递

一种胶质瘤相关的酸性成纤维细胞生长因子mRNA同源物 被引量：2

18

作者 邓艳春 药立波 +4 位作者 王吉村 刘新平 聂晓燕 季少平 李福洋 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第6期504-507,共4页

目的　克隆胶质瘤相关基因 .方法　取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果　获... 目的　克隆胶质瘤相关基因 .方法　取胶质瘤患者新鲜肿瘤标本及肿瘤附近正常脑组织提取 m RNA,反转录成c DNA.采用基于 PCR的消减杂交法获得差异的 c DNA,并经多聚酶链反应扩增后克隆入 T载体测序 .用打点杂交法验证差异克隆 .结果　获得一胶质瘤相关的酸性成纤维生长因子基因同源物 .结论　该酸性成纤维生长因子基因同源物是酸性成纤维生长因子 m RNA的不同拼接产物 ,可能参与胶质瘤的形成 . 展开更多

关键词 神经胶质瘤 杂交 肿瘤相关基因 酸性成纤维细胞生长因子 MRNA

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内源性超氧阴离子自由基对食管癌Eca-109细胞癌基因表达的影响 被引量：2

19

作者 李福洋 惠宏襄 +4 位作者 王成济 王多宁 莫简 李健健 LarryW.Oberley 《第四军医大学学报》 1998年第4期365-369,共5页

观察内源性超氧阴离子自由基对癌基因表达的影响．方法：构建正、反义人MnSOD（SOD2）真核表达载体，转入食管瘤细胞Eca-109；通过升高或降低细胞内SOD2的水平来增加或减少细胞内O2-的清除从而改变细胞内O2-的水平；以RNA斑点杂交和免... 观察内源性超氧阴离子自由基对癌基因表达的影响．方法：构建正、反义人MnSOD（SOD2）真核表达载体，转入食管瘤细胞Eca-109；通过升高或降低细胞内SOD2的水平来增加或减少细胞内O2-的清除从而改变细胞内O2-的水平；以RNA斑点杂交和免疫细胞化学方法检测癌基因表达的变化，以流式细胞仪检测细胞周期变化．结果：基因转入细胞并表达．转染SOD2基因细胞内SOD2水平升高，Cu，Zn-SOD（SOD1）水平未变，细胞内O2-水平下降49％以上；bcl-2表达下调，p53，c-Ha-ras表达轻度上调；流式细胞仪检测S期细胞减少．转染反义SOD2细胞SOD2水平降低，但SOD1活力水平却升高，因而总SOD水平增加，细胞内O2-水平也降低32％以上；bcl-2，p53，ras表达均上调，S期细胞数变化不明显．结论：①通过转SOD2基因改变细胞内O2-水平的方法是可行的，但仍需改进；②细胞内O2-水平的变化可影响癌基因的表达，而且由转染SOD2基因引起细胞内O2-水平降低对Eca-109食管癌细胞的增殖表现出抑制作用． 展开更多

关键词 食管肿瘤 超氧阴离子 自由基 癌基因 基因表达

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特异性血管生成抑制素的制备及其抑制血管生成作用 被引量：2

20

作者 李福洋 何鹏 +4 位作者 刘新平 张英起 杨静华 樊代明 药立波 《第四军医大学学报》 1999年第10期832-834,共3页

目的： 从血浆中纯化制备有特异抑制血管生成活性的天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ 蛋白，为基础研究和应用研究打下基础．方法： 制备Ｌ－ｌｙｓｉｎｅ 偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析柱，从血浆中纯化纤溶酶原，用弹性蛋白酶在... 目的： 从血浆中纯化制备有特异抑制血管生成活性的天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ 蛋白，为基础研究和应用研究打下基础．方法： 制备Ｌ－ｌｙｓｉｎｅ 偶联的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析柱，从血浆中纯化纤溶酶原，用弹性蛋白酶在体外进行有限消化，再以Ｌ－ｌｙｓｉｎｅ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析纯化获得天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ 片段，通过体外血管内皮细胞生长抑制分析和体内鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验测定纯化蛋白的活性． 结果： 以Ｌ－ｌｙｓｉｎｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ从血浆中纯化得到单一成分的纤溶酶原蛋白，弹性蛋白酶有限消化后进一步的亲和层析纯化得到ａｎｇｉｏ－ｓｔａｔｉｎ 蛋白；该蛋白体外可抑制牛主动脉内皮细胞的生长，体内可抑制鸡胚尿囊膜血管生成． 结论： 该实验方法可纯化得到有活性的天然ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ 蛋白． 展开更多

关键词 血管生成 抑制物 蛋白纯化 制备

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