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吴茱萸碱对HepG2细胞毒性及其机制 被引量：6
1
作者 高亚东 朱安 +5 位作者 李璐迪 张涛 王硕 单丹萍 李盈姿 王旗 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1107-1114,共8页
目的:研究吴茱萸碱(evodiamine,EVO)的肝细胞毒性及其机制。方法:将0.04~25μmol/L EVO分别作用于HepG2细胞24、48和72 h,用细胞增殖及毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率。0.2、1和5μmol/L EVO处理HepG2细胞48 h,... 目的:研究吴茱萸碱(evodiamine,EVO)的肝细胞毒性及其机制。方法:将0.04~25μmol/L EVO分别作用于HepG2细胞24、48和72 h,用细胞增殖及毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞存活率。0.2、1和5μmol/L EVO处理HepG2细胞48 h,多功能酶标仪分别检测细胞培养上清液中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,以及总胆红素(total bilirubin,TBIL)含量。用多功能酶标仪检测HepG2细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。用分子对接探究EVO与凋亡、自噬和铁死亡相关蛋白结合情况。用线粒体膜电位荧光探针(superior alternative to JC-1,JC-10)和异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白/碘化丙啶(annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)对HepG2细胞进行染色,流式细胞仪分别检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡。用Western blot检测HepG2细胞凋亡相关蛋白caspase-9,caspase-3以及胆汁酸转运体胆盐输出泵(bile salt export pump,BSEP)和多耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)的表达水平。结果:0.04~25μmol/L EVO可降低HepG2细胞存活率,具有时间和剂量依赖关系。EVO处理HepG2细胞24、48和72 h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为85.3、6.6和4.7μmol/L。0.2、1和5μmol/L EVO作用HepG2细胞48 h,细胞培养上清液中ALT、AST、LDH、ALP活性升高,TBIL含量增加。EVO可降低细胞中SOD活性,增加MDA含量。分子对接结果显示EVO与凋亡相关蛋白结合情况较好,JC-10和Annexin V-FITC/PI染色发现EVO可降低MMP,增加细胞凋亡率。Western blot结果表明EVO可上调caspase-9剪切蛋白和caspase-3剪切蛋白表达,并下调caspase-3前体蛋白、BSEP和MRP2蛋白表达。结论:0.2、1和5μmol 展开更多
关键词 吴茱萸碱 脂质过氧化损伤 凋亡 胆汁淤积
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硫化汞纳米颗粒对秀丽隐杆线虫不同神经递质类型神经元的影响
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作者 李璐迪 李盈姿 王旗 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2024年第5期344-352,共9页
目的 探究硫化汞纳米颗粒(HgS-NP)暴露对秀丽隐杆线虫(简称线虫)不同神经递质类型神经元的影响。方法 采用野生型N2线虫以及绿色荧光蛋白特异性标记转运蛋白或生物合成酶的γ-氨基丁酸(GABA)能、谷氨酸(Glu)能、多巴胺(DA)能、乙酰胆碱(... 目的 探究硫化汞纳米颗粒(HgS-NP)暴露对秀丽隐杆线虫(简称线虫)不同神经递质类型神经元的影响。方法 采用野生型N2线虫以及绿色荧光蛋白特异性标记转运蛋白或生物合成酶的γ-氨基丁酸(GABA)能、谷氨酸(Glu)能、多巴胺(DA)能、乙酰胆碱(ACh)能和5-羟色胺(5-HT)能神经元的转基因线虫(EG1285,DA1240,BZ555,LX929和GR1366),通过固体暴露的方式,将同步化后的L4期线虫经不同浓度HgS-NP处理。(1) 5种转基因线虫暴露于HgS-NP 0(溶剂对照组),250,500和1000 mg·L^(-1)72 h,采用荧光显微镜观察转基因线虫不同神经递质类型神经元绿色荧光的表达。(2)野生型N2线虫暴露于HgS-NP 0(溶剂对照组)和1000 mg·L^(-1)72 h,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测33种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平。结果 (1)与同基因型溶剂对照组线虫相比,暴露于不同浓度HgS-NP后,EG1285线虫出现GABA能神经元胞体缩小、树突断裂和神经元缺失,神经元相对荧光强度显著降低(P<0.05);暴露于HgS-NP 1000 mg·L^(-1)后,DA1240线虫头部Glu能神经元缺失,相对荧光强度显著降低(P<0.01);然而,暴露于不同浓度HgS-NP后,BZ555、LX929和GR1366线虫的DA能、ACh能和5-HT能神经元形态及相对荧光强度均无明显改变。(2)与溶剂对照组相比,野生型N2线虫暴露于HgS-NP 1000 mg·L^(-1)后,仅编码非N-甲基-D-天冬氨酸类Glu受体的glr-7和glr-8的mRNA表达水平升高(P<0.05),其余31种GABA能和Glu能神经递质系统相关基因mRNA表达水平均无明显改变。结论 较高剂量的HgS-NP暴露72 h可损伤线虫的GABA能和Glu能神经元,而对DA能、ACh能和5-HT能神经元无明显影响。 展开更多
关键词 硫化汞纳米颗粒 神经元 神经递质 秀丽隐杆线虫
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儿童用中成药一捻金及其拆方对秀丽线虫幼虫生长和神经行为的影响 被引量：1
3
作者 吉宗慧 张文静 +4 位作者 李盈姿 张楠 高珊 李国君 王旗 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2022年第4期275-279,291,共6页
目的探究儿童用中成药一捻金及其拆方对秀丽线虫幼虫生长和神经行为的影响。方法以一捻金对秀丽线虫L1期幼虫生长影响的低剂量(4.50 mg/ml)作为一捻金实验剂量,各拆方组依据《中国药典》中组方比例混合制成相应的剂量。将秀丽线虫L1期... 目的探究儿童用中成药一捻金及其拆方对秀丽线虫幼虫生长和神经行为的影响。方法以一捻金对秀丽线虫L1期幼虫生长影响的低剂量(4.50 mg/ml)作为一捻金实验剂量,各拆方组依据《中国药典》中组方比例混合制成相应的剂量。将秀丽线虫L1期幼虫分别暴露于一捻金及其各拆方组48 h,检测一捻金及其拆方组对线虫生长(体长和体宽)和神经行为(摄食行为、排便行为和运动行为)的影响。结果在4.5 mg/ml的实验剂量下,与对照组相比,一捻金、去朱砂一捻金、炒牵牛子和炒牵牛子+朱砂组线虫的体长和体宽减小;去朱砂一捻金、炒牵牛子和炒牵牛子+朱砂组线虫的咽泵振动频率增高;一捻金、去朱砂一捻金、炒牵牛子和炒牵牛子+朱砂可导致线虫的平均排便循环时间缩短;炒牵牛子+朱砂可增高线虫的头部摆动频率;炒牵牛子组线虫的身体弯曲频率升高。结论一捻金(4.5 mg/ml)可延缓秀丽线虫幼虫生长,改变神经行为,该拆方剂量下的朱砂单独作用对线虫幼虫的生长和神经行为并无明显影响,而炒牵牛子可能是一捻金中影响线虫幼虫生长和神经行为的主要组分。 展开更多
关键词 一捻金 拆方 秀丽隐杆线虫 生长 神经行为
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