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番茄SlWRKY31基因启动子的克隆与逆境应答模式分析 被引量:11
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作者 高永峰 杨丰铭 +4 位作者 李琴中 张国燕 王丹 姚银安 刘继恺 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2155-2164,共10页
该研究以野生型番茄(Solanum lycopersicum)为材料,采用PCR技术克隆得到了番茄SlWRKY31基因起始密码子ATG上游启动子序列,并利用该启动子驱动GUS基因在野生型番茄中表达,对获得的转基因番茄采用不同胁迫处理后进行GUS染色和定量分析。... 该研究以野生型番茄(Solanum lycopersicum)为材料,采用PCR技术克隆得到了番茄SlWRKY31基因起始密码子ATG上游启动子序列,并利用该启动子驱动GUS基因在野生型番茄中表达,对获得的转基因番茄采用不同胁迫处理后进行GUS染色和定量分析。结果表明:(1)序列分析显示,该启动子全长1 849bp,含有多个与非生物胁迫和激素响应相关的顺式作用元件,主要包括热胁迫响应元件HSE、干旱诱导响应元件MBS、防卫和胁迫响应元件TC-rich repeats、创伤诱导响应元件WUN-motif、脱落酸(ABA)响应元件ABRE和水杨酸(SA)响应元件TCA-element。(2)实时荧光定量PCR结果显示,SlWRKY31基因呈组成型表达模式,且在叶和果实中表达量较高,茎中较低;在NaCl、甘露醇、SA、ABA和42℃高温的胁迫处理下,其表达量显著升高。(3)构建SlWRKY31启动子和GUS基因融合的植物表达载体,并通过农杆菌介导法将其转化野生型番茄,对获得的转基因番茄进行GUS组织化学染色分析结果显示,SlWRKY31基因在番茄的各个组织(根、茎、叶、花、果实和种子)中均有表达,表明SlWRKY31启动子是组成型表达启动子。(4)对转基因番茄在不同胁迫处理后的GUS染色和定量分析显示,SlWRKY31启动子显著受到NaCl、甘露醇、SA、ABA和42℃高温的诱导表达,说明该启动子是一个可以响应多种逆境胁迫的诱导型启动子。 展开更多
关键词 番茄 SlWRKY31启动子 逆境胁迫 β半乳糖苷酶 GUS染色分析
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胡杨油菜素内酯信号转导基因PeBZR1的克隆及诱导表达分析 被引量:2
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作者 刘燕 李涛涛 +2 位作者 李琴中 刘小凤 高永峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1576-1581,共6页
本研究以胡杨叶片为材料,采用RT-PCR法,从胡杨中克隆出了与拟南芥At BZR1基因同源的全长c DNA,命名为Pe BZR1。序列分析发现该基因包含一个长为954 bp的开放阅读框(ORF),编码317个氨基酸残基。系统进化树分析显示,胡杨Pe BZR1与毛果杨... 本研究以胡杨叶片为材料,采用RT-PCR法,从胡杨中克隆出了与拟南芥At BZR1基因同源的全长c DNA,命名为Pe BZR1。序列分析发现该基因包含一个长为954 bp的开放阅读框(ORF),编码317个氨基酸残基。系统进化树分析显示,胡杨Pe BZR1与毛果杨Pt BZR1亲缘关系最近。通过对干旱和盐胁迫下胡杨Pe BZR1基因表达模式的分析发现,干旱处理能够抑制Pe BZR1基因的表达,而在盐胁迫下,Pe BZR1基因的表达量保持相对稳定。以上结果为进一步研究Pe BZR1基因的功能,以及Pe BZR1介导的胡杨BR信号转导机制提供了科学依据。 展开更多
关键词 胡杨 PeBZR1 CDNA克隆 生物信息学分析 表达模式分析
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