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基于网络药理学技术研究桃红四物汤延缓成纤维细胞生长的分子靶标 被引量：12
1
作者 马进 李振万 +3 位作者 罗月中 江湧 匡忠生 谢宇晖 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期4120-4128,共9页
桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)作为活血化瘀方,对于延缓肾脏纤维化的进程有一定作用,但作为包含诸多单体成分的中药复方,应对复杂的病理过程,其研究方法的探讨和作用靶点的找寻一直是该方向的研究热点。活血化瘀法在阻滞Ig... 桃红四物汤(Taohong Siwu Decoction,THSWD)作为活血化瘀方,对于延缓肾脏纤维化的进程有一定作用,但作为包含诸多单体成分的中药复方,应对复杂的病理过程,其研究方法的探讨和作用靶点的找寻一直是该方向的研究热点。活血化瘀法在阻滞IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)纤维化进程方面有一定的临床疗效,但作用机制尚不明确。该研究先借助网络药理学方法,研究THSWD干预IgAN纤维化进程的有效活性成分,作用靶点及分子作用机制,在此基础上,通过离体实验,验证THSWD作用于3T3细胞对ERK因子表达的影响。通过中药系统药理学技术平台收集THSWD中的活性成分及作用靶点,筛选得到木犀草素、槲皮素等61个有效活性成分及240个作用靶点,与CTD数据库查找的IgAN相关靶点相交得到185个靶点。利用Cytoscape软件与STRING数据库构建"桃红四物汤-活性成分-靶点"网络和蛋白互作网络,筛选69个核心靶点;通过DAVID对核心靶点的GO富集分析和KEGG通路分析及进行细胞实验,结果表明,ERK因子是THSWD干预IgAN重要的因子,THSWD可以显著降低细胞活性、ERK1/2 mRNA表达、p-ERK1/2蛋白表达。该研究提示,THSWD可能通过影响ERK因子及其磷酸化水平,来延缓成纤维细胞生长。 展开更多
关键词 IGAN 桃红四物汤 血瘀 网络药理学 ERK BALB/c 3T3细胞
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β-细辛醚对缺氧损伤的PC12细胞NMDAR亚基表达的影响 被引量：5
2
作者 马进 李振万 江湧 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1015-1020,共6页
目的观察石菖蒲挥发油主要成分β-细辛醚对缺氧损伤的PC12细胞N-甲基-D-天冬氨酸受体(Nmethyl-D-aspartate receptor,NMDAR)亚基mRNA及蛋白表达的影响。方法将细胞分为正常组、模型组和治疗组。无血清培养基培养细胞为正常组,10 mmol... 目的观察石菖蒲挥发油主要成分β-细辛醚对缺氧损伤的PC12细胞N-甲基-D-天冬氨酸受体(Nmethyl-D-aspartate receptor,NMDAR)亚基mRNA及蛋白表达的影响。方法将细胞分为正常组、模型组和治疗组。无血清培养基培养细胞为正常组,10 mmol·L^-1Na2S2SO4无血清培养基培养细胞为模型组,1μmol·L^-1β-细辛醚+10 mmol·L^-1Na2S2SO4无血清培养基培养细胞为治疗组,各组均处理1 h。倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡率,Q-PCR法检测NMDAR亚基mRNA表达,Western Blot法检测NR1、NR2A、NR2B蛋白表达。结果与模型组比较,治疗组细胞形态呈现明显差异;细胞活性明显升高(P<0.01);凋亡率明显降低(P<0.01);NR2B mRNA表达明显升高(P<0.05),其他亚基mRNA表达的差异无统计学意义(P>0.05),扩增未得到NR3B基因的产物;NR1蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05),未检测到NR2A、NR2B蛋白表达。结论β-细辛醚对PC12细胞缺氧损伤的保护作用可能与NR2B mRNA表达升高有关。 展开更多
关键词 石菖蒲 Β-细辛醚 PC12细胞 缺氧损伤 NMDAR亚基 NR2B
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桃红四物汤影响ERK磷酸化表达延缓小鼠胚胎成纤维细胞生长的机理研究
3
作者 李振万 马进 +2 位作者 罗月中 匡忠生 江湧 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期806-814,共9页
目的探讨活血化瘀名方桃红四物汤(THSWD)减缓小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)生长和增殖可能的分子靶点及信号通路。方法在3T3细胞内分别过表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默bFGF以及用PD98059阻断细胞内ERK上游信号通路;然... 目的探讨活血化瘀名方桃红四物汤(THSWD)减缓小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3,3T3)生长和增殖可能的分子靶点及信号通路。方法在3T3细胞内分别过表达碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默bFGF以及用PD98059阻断细胞内ERK上游信号通路;然后观察桃红四物汤对细胞活性,细胞周期,bFGF、ERK1/2及p-ERK1/2基因或蛋白表达的影响。桃红四物汤含药血清培养基浓度为20%,作用时间48 h。结果与正常对照组比较,桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.01);G0/G1期占比升高(P<0.05,P<0.01),S期占比降低(P<0.05,P<0.01);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与bFGF过表达组比较,bFGF过表达+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比的差异无统计学意义(P>0.05);bFGF和ERK1/2基因表达降低(P<0.01);bFGF和p-ERK1/2蛋白表达降低(P<0.01),ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。与PD98059组比较,PD98059+桃红四物汤组的3T3细胞活性降低(P<0.05);G0/G1期占比升高(P<0.01),S期占比降低(P<0.01);ERK1/2基因表达的差异无统计学意义(P>0.05);ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达的差异无统计学意义(P>0.05)。由于bFGF基因的结构独特性及沉默引物设计的方法学缺陷,3T3细胞内未能沉默掉bFGF。结论桃红四物汤在3T3细胞中首先降低bFGF,进而降低ERK信号通路的标志性蛋白p-ERK的表达,减缓3T3细胞的增殖速度。 展开更多
关键词 桃红四物汤 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 细胞外调节蛋白激酶(ERK) 小鼠胚胎成纤维细胞(BALB/c 3T3 3T3) 过表达 PD98059
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