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利用基因扫描分析TCR Vβ亚家族的CDR3长度方法检测T细胞克隆性 被引量：42
1
作者 李扬秋 汪明春 吴幼华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期48-50,共3页
分析了健康人、Ｔ－ＡＬＬ外周血及Ｔ细胞株Ｍｏｌｔ－４和Ｊｕｒｋａｔ中ＴＣＲＶβＴ细胞的表达和克隆性。应用ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＴＣＲＶβ２４个亚家族的ＣＤＲ３，并经基因扫描和序列分析确定Ｔ细胞克隆性。结果表明健康人表达除Ｖ... 分析了健康人、Ｔ－ＡＬＬ外周血及Ｔ细胞株Ｍｏｌｔ－４和Ｊｕｒｋａｔ中ＴＣＲＶβＴ细胞的表达和克隆性。应用ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＴＣＲＶβ２４个亚家族的ＣＤＲ３，并经基因扫描和序列分析确定Ｔ细胞克隆性。结果表明健康人表达除Ｖβ２０外的多克隆Ｔ细胞；Ｔ－ＡＬＬ仅表达３～４个Ｖβ亚家族Ｔ细胞；部分呈寡克隆性；Ｍｏｌｔ－４和Ｊｕｒｋａｔ分别表达Ｖβ２和Ｖβ８单克隆Ｔ细胞。Ｔ－ＡＬＬ中存在克隆性生长Ｔ细胞。该方法是检测Ｔ细胞克隆性的敏感和精确的方法。 展开更多
关键词 基因扫描 T细胞 CDR3长度 克隆性 白血病
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实时定量PCR检测正常人外周血T细胞和胸腺细胞中sjTRECs水平 被引量：37
2
作者 李扬秋 杨力建 +5 位作者 陈少华 陈嘉愉 刘薇薇 王震 张玉平 吴秀丽 《现代临床医学生物工程学杂志》 CAS 2001年第6期397-400,共4页
目的　了解正常人外周血T细胞和胸腺细胞中信号结合T细胞受体删除DNA环 (sjTRECs)的含量 ,从而推测正常人中幼稚T细胞的含量和胸腺的输出功能 .方法　利用实时定量PCR和TaqMan方法检测 11例正常人外周血单个核细胞、7例儿童和 3例成人... 目的　了解正常人外周血T细胞和胸腺细胞中信号结合T细胞受体删除DNA环 (sjTRECs)的含量 ,从而推测正常人中幼稚T细胞的含量和胸腺的输出功能 .方法　利用实时定量PCR和TaqMan方法检测 11例正常人外周血单个核细胞、7例儿童和 3例成人胸腺细胞DNA中sjTRECs的水平 .结果　正常人中sjTRECs含量分别为 :8.83±4.81/ 10 0 0个外周血单个核细胞 ;2 7.31± 3.2 3/ 10 0 0个成人胸腺细胞和 170 .2 9± 5 9.5 2 / 10 0 0个儿童胸腺细胞 .结论　sjTRECs水平与年龄有关 ,正常人外周血中每 10 0 0个单个核细胞中约含 4. 展开更多
关键词 sjTRECs 幼稚T细胞 胸腺细胞 实时定量PCR
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胸腺输出功能的评价手段—T细胞受体重排删除环的定量分析 被引量：24
3
作者 李扬秋 韩素芳 杨力建 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期667-672,共6页
多年来 ,因缺乏合适的检测胸腺输出naiveT细胞的技术 ,未能明确胸腺输出功能。由于胸腺T细胞的分化始于T细胞受体 (TCR)基因的重排 ,在TCRα基因重排时 ,通过δRec和 ψJα基因片段重组形成染色体外DNA环而删除TCRδ基因 ,该删除环称为... 多年来 ,因缺乏合适的检测胸腺输出naiveT细胞的技术 ,未能明确胸腺输出功能。由于胸腺T细胞的分化始于T细胞受体 (TCR)基因的重排 ,在TCRα基因重排时 ,通过δRec和 ψJα基因片段重组形成染色体外DNA环而删除TCRδ基因 ,该删除环称为信号结合T细胞受体重排删除环 (sjTRECS)或TRECs。TRECs十分稳定 ,不扩增且随着细胞增殖而稀释 ,故近期研究认为对TRECs的定量检测可以直接地估计胸腺的输出功能。本文综述了TRECs定量分析在评价正常人和造血干细胞移植 ,血液肿瘤、HIV感染和自身免疫性疾病等等的胸腺输出功能中的作用。 展开更多
关键词 T细胞受体重排删除环 胸腺输出功能 定量PCR 基因 TCR
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CML病人TCR Vβ21寡克隆T细胞及其CDR3序列特点 被引量：21
4
作者 李扬秋 陈少华 +1 位作者 杨力建 祁明芳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期189-192,共4页
目的分析慢性粒细胞白血病 ( CML)病人的克隆性增殖 T细胞及其 CDR3序列的特点。方法利用 RT- PCR扩增 3例 CML 外周血单个核细胞中 2 4个 TCR Vβ基因的 CDR3,了解 TCR VβT细胞的分布。阳性产物进一步经基因扫描分析 ,了解其克隆性。... 目的分析慢性粒细胞白血病 ( CML)病人的克隆性增殖 T细胞及其 CDR3序列的特点。方法利用 RT- PCR扩增 3例 CML 外周血单个核细胞中 2 4个 TCR Vβ基因的 CDR3,了解 TCR VβT细胞的分布。阳性产物进一步经基因扫描分析 ,了解其克隆性。寡克隆的 PCR产物再进行序列分析。结果 3例病人仅存在 3～ 9个 TCR Vβ亚家族 T细胞 ,部分 Vβ亚家族T细胞呈寡克隆性增殖 ,Vβ2 1的寡克隆 T细胞见于全部的 3例病人中。结论 CML 病人外周血 TCR Vβ亚家族 T细胞出现倾斜性分布和克隆性增殖 ,这可能是 CML 中机体对恶性细胞所引起的特异性免疫反应 ,但对不同病人的 Vβ2 1寡克隆 T细胞序列分析并未能发现完全同源的 展开更多
关键词 T细胞克隆 慢性粒细胞白血病 TCRVβ21 CDR3序列
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重度苯中毒患者胸腺输出近期功能明显低下 被引量：18
5
作者 李扬秋 韩素芳 +4 位作者 杨力建 陈少华 周羽竝 陈嘉愉 刘薇薇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期114-117,共4页
本研究目的在于分析重度苯中毒患者外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环 (T cellreceptorexci sionDNAcircle ,TREC)的含量 ,从而了解其初始 (naive)T细胞的含量和胸腺近期输出功能。利用实时定量PCR和TaqMan方法检测 8例重度苯中毒... 本研究目的在于分析重度苯中毒患者外周血单个核细胞中T细胞受体删除DNA环 (T cellreceptorexci sionDNAcircle ,TREC)的含量 ,从而了解其初始 (naive)T细胞的含量和胸腺近期输出功能。利用实时定量PCR和TaqMan方法检测 8例重度苯中毒患者和 16例正常人外周血单个核细胞 (PBMNC)中TREC的水平。结果显示正常人中TREC含量为 :6 .6 9± 4 .79 10 0 0PBMNC ;而重度苯中毒患者则为 1.0 3± 0 .4 4 10 0 0PBMNC ,显著低于正常人TREC水平 (P <0 .0 1) ,并持续苯中毒的全过程 ,即使在外周血血象基本恢复正常时 ,TREC水平仍处于较低状态。结论 :重度苯中毒患者胸腺近期输出功能明显低下 ,苯中毒明显损伤T细胞免疫功能。 展开更多
关键词 苯中毒 T细胞受体删除DNA环 胸腺输出功能
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广东省清远地区人群α-地中海贫血基因型及临床表型特点 被引量：17
6
作者 黄利华 刘冬霞 +1 位作者 李伟明 李扬秋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期584-588,共5页
目的分析2014-2015年广东省清远地区5 063例疑诊地中海贫血样本中α-地贫基因型分布及其临床特点。方法采用单管多重聚合酶链反应法结合跨越断裂点PCR(gap-PCR)检测人群基因组DNA样本中3种α-珠蛋白基因缺失--^(SEA)、-α^(3.7)、-α^(4... 目的分析2014-2015年广东省清远地区5 063例疑诊地中海贫血样本中α-地贫基因型分布及其临床特点。方法采用单管多重聚合酶链反应法结合跨越断裂点PCR(gap-PCR)检测人群基因组DNA样本中3种α-珠蛋白基因缺失--^(SEA)、-α^(3.7)、-α^(4.2);采用PCR-反向点杂交法(PCR-RDB)技术检测3种常见的α-珠蛋白基因突变αWSα、αCSα、αQSα。结果 5 063例受检标本中,检出α-地贫基因1 735例,基因携带率为34.27%。α-珠蛋白基因缺失型α-地贫为1 598例(92.10%),其中以东南亚杂合子--~(^(SEA))/αα基因型最常见(1 265例,72.91%),其次为右缺失型杂合子-α^(3.7)/αα(233例,13.43%)和左缺失型杂合子-α^(4.2)/αα(97例,5.59%),而纯合子-α^(4.2)/-α^(4.2)为2例,双重杂合子-α^(3.7)/-α^(4.2)为1例。非缺失型α-地贫为80例(4.61%),包括αα^(WS)/αα37例、αα^(QS)/αα22例、αα^(CS)/αα20例及αα^(WS)/αα^(CS)1例。另外,双重杂合子-α^(3.7)/ααWS3例。血红蛋白H病(Hb H)为54例(3.11%),包括--^(SEA)/-α^(3.7)33例、--^(SEA)/-α^(4.2)16例、--^(SEA)/αα^(WS)4例、--^(SEA)/αα^(QS)1例。1 735例α地中海贫血中,静止型409例,轻型1 272例(血液学表现为轻度小细胞低色素贫血),Hb H病54例,临床表现为中重度贫血,可伴有肝脾肿大、黄疸等。结论广东省清远地区α-地中海贫血以东南亚杂合子--^(SEA)/αα基因型最常见,临床存在较多的轻型α-地贫患者,该地区人群婚配生育Hb H病或重型α-地贫患儿的概率较高。 展开更多
关键词 Α-地中海贫血 基因型 广东省
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急性白血病患者化疗前后外周血T细胞亚群检测的临床意义 被引量：17
7
作者 吴巨峰 李扬秋 +6 位作者 姚红霞 吴秀丽 黄昭前 王谷云 王华 饶诺 金丽华 《海南医学》 CAS 2011年第1期4-6,共3页
目的探讨急性白血病患者化疗前、后外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义。方法采用流式细胞术对30例急性白血病患者及18例正常人外周血T淋巴细胞亚群进行检测,并对急性白血病患者化疗前、后的结果进行分析比较。结果 30例急性白血病患者... 目的探讨急性白血病患者化疗前、后外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义。方法采用流式细胞术对30例急性白血病患者及18例正常人外周血T淋巴细胞亚群进行检测,并对急性白血病患者化疗前、后的结果进行分析比较。结果 30例急性白血病患者化疗前CD3+细胞、CD4+细胞含量和CD4+/CD8+比值均低于正常人对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后26例完全缓解者CD3+细胞、CD4+细胞含量及CD4++/CD8+比值水平回升,接近正常人对照组(P>0.05),与化疗前比较差异也均有统计学意义(P<0.05)。结论急性白血病患者细胞免疫功能明显受到抑制,检测T淋巴细胞亚群对急性白血病患者的免疫监测以及疗效、预后判断有一定临床意义。 展开更多
关键词 急性白血病 T淋巴细胞亚群
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苯接触工人外周血T细胞受体TCRV_β亚家族基因多态性分析 被引量：15
8
作者 陈嘉榆 刘薇薇 +4 位作者 黄振倩 巫进明 陈少华 杨力建 李扬秋 《中国工业医学杂志》 CAS 北大核心 2003年第3期148-151,共4页
目的　了解苯接触工人外周血TCRVβ 亚家族T细胞的分布及其克隆性 ,寻找防治苯中毒的免疫指标。方法　采用RT PCR扩增 6例不同工龄低浓度苯接触工人外周血单核细胞的TCRVβ2 4个亚家族的互补决定区 3(CDR3) ,产物进一步经基因扫描分析确... 目的　了解苯接触工人外周血TCRVβ 亚家族T细胞的分布及其克隆性 ,寻找防治苯中毒的免疫指标。方法　采用RT PCR扩增 6例不同工龄低浓度苯接触工人外周血单核细胞的TCRVβ2 4个亚家族的互补决定区 3(CDR3) ,产物进一步经基因扫描分析确定T细胞的克隆性 ,并与 8名健康人作对照。结果　 8名健康者表达全部Vβ 亚家族 ,PCR产物呈多峰图像 (多克隆 )。苯接触工人随工龄不同 ,外周血损伤的情况不同而出现Vβ 表达减少 ,PCR产物出现寡克隆或双克隆改变。结论　低浓度苯接触工人的外周血T细胞的TCRVβ 亚家族表达出现限制性 ,部分Vβ 亚家族呈克隆性增殖 ,可能由于苯损害T细胞而造成机体免疫的不同改变。 展开更多
关键词 苯中毒 TCR-Vβ基因 基因多态性 T细胞 免疫功能
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脐血中TCRVβ亚家族T细胞的分布和克隆性分析 被引量：14
9
作者 陈少华 李扬秋 +2 位作者 杨力建 张玉平 黎清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期662-665,共4页
目的 :了解正常脐血中TCRVβ亚家族T细胞的分布和克隆性。 方法 :利用RT -PCR分别扩增 13例正常脐血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解各Vβ亚家族的表达情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长... 目的 :了解正常脐血中TCRVβ亚家族T细胞的分布和克隆性。 方法 :利用RT -PCR分别扩增 13例正常脐血单个核细胞的TCRVβ 2 4个亚家族基因的CDR3,了解各Vβ亚家族的表达情况。阳性的PCR产物进一步经荧光素标记和基因扫描分析产物的CDR3长度 ,了解T细胞克隆性。 10例正常人外周血和T细胞株Molt- 4及Jurkat作为对照。结果 :正常脐血T细胞仅选择性表达 2 4个Vβ亚家族的 38 78%± 16 2 6 % ,以Vβ 3、5、8、9和 13为多见 ,而正常人外周血T细胞则表达全部 2 4个Vβ亚家族。基因扫描显示正常脐血和正常人外周血的全部PCR产物均呈多峰图象。结论 :正常脐血存在不完全TCRVβ亚家族T细胞 。 展开更多
关键词 脐血 TCR Vβ亚家族T细胞 RT-PCR方法 基因扫描分析 抗宿主病 T细胞受体 造血干细胞移植
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A20的免疫调节作用及其临床意义 被引量：14
10
作者 李扬秋 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第4期851-856,共6页
A20最初是作为肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导蛋白3(TNFA IP3)而鉴定的,它是炎症信号传导的中心调节因子———NF-κB抑制因子,在天然免疫和过继性免疫调节中发挥了重要作用。近期研究提示,A20是一个肿瘤抑制因子。A20缺失与炎症介导的自身... A20最初是作为肿瘤坏死因子α(TNFα)诱导蛋白3(TNFA IP3)而鉴定的,它是炎症信号传导的中心调节因子———NF-κB抑制因子,在天然免疫和过继性免疫调节中发挥了重要作用。近期研究提示,A20是一个肿瘤抑制因子。A20缺失与炎症介导的自身免疫性疾病和淋巴细胞肿瘤的发生发展关系密切。近期有关A20在免疫细胞中的表达特点和生物学功能,在天然免疫、体液和细胞免疫中的调节作用,在淋巴细胞肿瘤中缺失情况以及在自身免疫性疾病中的异常表达等等的研究进展提示:有必要深入认识A20的临床意义和探讨其在诱导免疫耐受、肿瘤免疫调节治疗和抗病毒治疗等方面的应用价值。 展开更多
关键词 A20 NF-κB抑制因子 免疫调节 淋巴细胞肿瘤 自身免疫性疾病 肿瘤抑制因子
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硒化麒麟菜多糖抑制人喉癌细胞株Hep-2增殖的作用 被引量：12
11
作者 白雪 林晨 +4 位作者 江振友 袁桂秀 沈伟哉 李扬秋 唐渝 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期249-252,共4页
目的通过比较研究海藻麒麟菜多糖粗提物、无机硒化合物-亚硒酸钠(Na2SeO3)及其共价化合物-硒化麒麟菜多糖对人喉癌细胞株Hep-2的作用,探索新的具有抗肿瘤活性的有机硒化合物。方法应用不同剂量的样品作用于Hep-2细胞株后,用MTT比色分析... 目的通过比较研究海藻麒麟菜多糖粗提物、无机硒化合物-亚硒酸钠(Na2SeO3)及其共价化合物-硒化麒麟菜多糖对人喉癌细胞株Hep-2的作用,探索新的具有抗肿瘤活性的有机硒化合物。方法应用不同剂量的样品作用于Hep-2细胞株后,用MTT比色分析法计算肿瘤抑制率。结果硒化多糖对Hep-2细胞的抑制率高于相同多糖浓度的麒麟菜多糖和相同硒浓度的亚硒酸钠(P<0.05)。硒化多糖的抑制率可高达71.53%,其多糖IC50与硒IC50分别为1805μg/ml和7.0μmol/L,分别低于麒麟菜多糖的多糖IC50(3034μg/ml)和亚硒酸钠的硒IC50(9.0μmol/L)。结论硒化麒麟菜多糖具有抗Hep-2细胞增殖的活性,其抑制作用明显优于亚硒酸钠及天然麒麟菜多糖的抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 硒化麒麟菜多糖 亚硒酸钠 HEP-2 抗肿瘤
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TCR Dβ-Jβ sjTRECs检测方法的建立和应用 被引量：12
12
作者 李扬秋 杨力建 +3 位作者 陈少华 韩素芳 张学利 许敏华 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期467-470,共4页
目的　建立检测TCRDβ JβsjTRECs的方法 ,并了解不同T细胞受体Dβ Jβ之间T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)在胸腺细胞和外周血T细胞中的形成情况。方法　利用巢式PCR分别扩增 10例正常人外周血单个核细胞和 3例正常胸腺细胞DNA中不同的D... 目的　建立检测TCRDβ JβsjTRECs的方法 ,并了解不同T细胞受体Dβ Jβ之间T细胞受体删除DNA环(sjTRECs)在胸腺细胞和外周血T细胞中的形成情况。方法　利用巢式PCR分别扩增 10例正常人外周血单个核细胞和 3例正常胸腺细胞DNA中不同的Dβ片段和Jβ重排时形成的sjTRECs的情况 ,PCR产物进一步进行克隆和序列分析以确定结合区的位置。结果　可检测到Dβ1与 5个Jβ1基因片段、Dβ2与 4个Jβ2基因片段分别形成的sjTRECs,其中以Dβ1 Jβ1S1、Dβ1 Jβ1S2和Dβ2 Jβ2S2的sjTRECs最常见 ,PCR产物经克隆和序列分析证实其形成Dβ JβsjTRECs的情况。 结论　成功地建立了检测Dβ Jβ sjTRECs的方法 ,为分析各TCRβ亚家族的sjTRECs含量和确定TCRβna 展开更多
关键词 TCR Dβ-Jβ sjTRECs 检测 T细胞受体 胸腺细胞 T细胞
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慢性粒细胞白血病相关的TCR VβT细胞的诱导及其限制性和克隆性分析 被引量：12
13
作者 张玉平 李扬秋 +3 位作者 陈少华 杨力建 王震 吴秀丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期330-334,共5页
目的:了解体外诱导CML细胞相关TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其杀伤性的情况。方法:采用混合淋巴细胞/白血病细胞培养法(MLTC)体外将CML细胞、K562细胞和bcr-abl多肽与供者外周血单个核细胞混合培养和扩增,利用RT-PCR-基因扫描技术分... 目的:了解体外诱导CML细胞相关TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其杀伤性的情况。方法:采用混合淋巴细胞/白血病细胞培养法(MLTC)体外将CML细胞、K562细胞和bcr-abl多肽与供者外周血单个核细胞混合培养和扩增,利用RT-PCR-基因扫描技术分析培养后T细胞的TCR Vβ谱系的限制性利用和克隆性增殖情况,并经LDH法分析诱导增殖T细胞的杀伤性。结果:经bcr-abl多肽、CML细胞和K562细胞诱导扩增1-2周后,供者外周血T细胞表达10-13个Vβ亚家族,在Vβ16和Vβ21出现克隆性增殖T细胞,在Vβ5和Vβ13出现寡克隆生长趋势T细胞。诱导扩增后的T细胞对CML和K562细胞具有特异性杀伤作用。结论:利用CML细胞、K562细胞和bcr-abl多肽可在体外诱导出CML细胞特异性CTL,该CTL可能为优势表达的Vβ亚家族克隆性T细胞。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 肽类 受体 抗原 T细胞 K562细胞
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免疫细胞疗法对苯中毒所致骨髓造血功能障碍的改善作用 被引量：12
14
作者 陈嘉榆 刘薇薇 +5 位作者 黄振倩 王晓怀 李扬秋 巫进明 吴绿波 杨德懋 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期244-246,共3页
目的　探讨免疫细胞疗法对苯引起的骨髓造血功能损伤的疗效。方法　抽取患者外周血 4 0～ 5 0ml,分离单个核细胞经白细胞介素 2、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)混合培养 6d ,收集形成的新免疫细胞并清除杂质后静脉回输给患者 ,... 目的　探讨免疫细胞疗法对苯引起的骨髓造血功能损伤的疗效。方法　抽取患者外周血 4 0～ 5 0ml,分离单个核细胞经白细胞介素 2、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)混合培养 6d ,收集形成的新免疫细胞并清除杂质后静脉回输给患者 ,治疗前后分别检测CD4 、CD8含量 ,重度苯中毒患者治疗前后均在右髂后上棘作骨髓穿刺涂片及骨髓病理检查。结果　 2 0例慢性苯中毒患者中9例重度中毒者 ,经免疫细胞治疗后外周血细胞数、骨髓涂片及骨髓活检结果全部恢复正常 ;在治疗前T细胞亚群检测CD4 、CD8比例倒置者 ,经治疗后恢复正常比例 ,治疗期间分别定期检测心、肝、肾功能未发现异常。对所有治疗患者进行追踪观察 (最长为 1年 3个月 ) ,骨髓造血功能均在正常范围内。结论　苯中毒所致的骨髓造血功能障碍与免疫功能紊乱有密切关系 ,采用免疫细胞治疗对恢复苯中毒引起的骨髓造血功能障碍有显著疗效。 展开更多
关键词 苯中毒 骨髓造血功能障碍 免疫细胞疗法 白细胞介素-2 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
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实时定量PCR分析CML患者胸腺近期输出功能 被引量：10
15
作者 耿素霞 李扬秋 +4 位作者 杨力建 陈少华 韩素芳 周羽竝 陈青山 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2004年第6期317-319,共3页
目的　了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法　利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 +... 目的　了解慢性粒细胞白血病 (CML)患者CD3+ 、CD4 + 和CD8+ 细胞中T细胞受体重排删除DNA环 (TRECs)的含量 ,从而推测CML患者的胸腺近期输出功能。方法　利用实时定量PCR(Taq Man)方法检测 8例CML患者外周血单个核细胞、3例CML患者CD4 + 和CD8+ 细胞中TRECs的水平。并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+ 细胞中TRECs水平。 9例正常人外周血作为对照。结果　CML患者中TRECs含量为 0 .1± 0 .2 2 / 10 0 0T细胞 ,明显低于正常人TRECs水平 (6 .84± 4 .71/ 10 0 0T细胞 ,P <0 .0 1)。其中 5例患者外周血单个核细胞中未能检测到TRECs ,经分选CD4 + 和CD8+ 细胞后 ,2例可以检测到低水平的TRECs。结论　本研究首先报道了CML患者TRECs水平情况 。 展开更多
关键词 TRECS 胸腺近期输出功能 慢性粒细胞白血病 实时定量PCR
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长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性及其限制性 被引量：11
16
作者 许超 廖继东 +2 位作者 柳菁 毛文哲 李扬秋 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1750-1754,共5页
背景:间充质干细胞具有多向分化能力、免疫调节能力,并可在体外进行长期培养扩增,但其体外长期培养的生物学活性变化特点及其限制性仍不十分清晰。目的:观察体外长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性变化特点及其限制性。方法:无菌收... 背景:间充质干细胞具有多向分化能力、免疫调节能力,并可在体外进行长期培养扩增,但其体外长期培养的生物学活性变化特点及其限制性仍不十分清晰。目的:观察体外长期培养人脐带间充质干细胞的生物活性变化特点及其限制性。方法:无菌收集剖宫产新生儿脐带,经胶原酶Ⅱ消化后,用黏附生长选择法获取人脐带间充质干细胞,胰酶消化传代;取第3代细胞进行流式分析,脂肪和成骨诱导鉴定;收集不同代的细胞分别用MTT法、流式细胞仪和爬片分析法检测细胞增殖活性、细胞周期、凋亡率及黏附能力。结果与结论:人脐带间充质干细胞的细胞表型CD105+/CD29+/CD44+/CD31-/CD34-/CD45-/HLADR-,可诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞;传代培养第3～23代细胞形态无明显变化,生长曲线基本一致,第28代后细胞增长缓慢;流式分析发现第33代细胞较第3代G0/G1减少17.9%、S+G2/M增加103.4%、细胞凋亡率增加316.7%,差异均有显著性意义(P<0.01),第3～18代细胞间G0/G1、S+G2/M、细胞凋亡率和黏附细胞数差异均无显著性意义(P>0.05)。提示在体外长期培养环境中,随着传代次数的递增,人脐带间充质干细胞的增殖及黏附能力下降,细胞凋亡率增加,总的生物活性呈逐渐下降趋势,其最佳生物活性期出现在培养第3～18代之间。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 培养 生物活性 限制性 脐带
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胸腺功能及其测定方法的研究进展 被引量：11
17
作者 耿素霞 李扬秋 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期427-430,共4页
胸腺是免疫系统的中枢控制器官,由于年龄相关的演化,其功能逐渐降低。本文从胸腺的发生、位置、结构、功能及其检测方法等几方面对其进行综述。
关键词 胸腺功能 T细胞 TRECS
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慢性粒细胞白血病患者外周血初始T细胞水平和T细胞受体Vβ谱系利用特点 被引量：10
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作者 耿素霞 李扬秋 +4 位作者 陈少华 杨力建 尹青松 吴秀丽 张学利 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期413-416,共4页
目的了解慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血初始(naive)T细胞的水平和T细胞受体(TCR)Vβ基因谱系利用和克隆性,从而了解CML患者的胸腺近期输出功能和TCRVβ亚家族T细胞增殖情况。方法采用实时定量PCR(TaqMan)方法检测20例CML患者外周血... 目的了解慢性粒细胞白血病(CML)患者外周血初始(naive)T细胞的水平和T细胞受体(TCR)Vβ基因谱系利用和克隆性,从而了解CML患者的胸腺近期输出功能和TCRVβ亚家族T细胞增殖情况。方法采用实时定量PCR(TaqMan)方法检测20例CML患者外周血单个核细胞中T细胞受体重排删除环(Tcellreceptorrearrangementexcisioncircles,TREC)的水平,并根据外周血中CD3阳性率计算CD3+细胞中TREC水平。利用逆转录PCR和基因扫描分析其中14例患者外周血单个核细胞的TCRVβ24个亚家族基因表达和克隆性。9名正常人外周血作为对照。结果CML患者外周血TREC含量(0.06±0.16/1000CD3+细胞)明显低于正常人(6.84±4.71/1000CD3+细胞,P<0.01)。14例CML患者外周血T细胞表达不同数量Vβ亚家族(1～12个),其中13例CML患者外周血中的一些Vβ亚家族出现克隆性T细胞,Vβ3,Vβ10,Vβ19,Vβ21和Vβ22亚家族的克隆性增殖多见。结论CML患者胸腺近期输出初始T细胞功能明显降低,但仍存在优势利用和克隆性增殖Vβ亚家族T细胞,提示尽管整体T细胞免疫功能低下,但对白血病细胞相关抗原仍具有一定特异性免疫反应的能力。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 外周血 T细胞 T细胞受体 Vβ谱系
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基因扫描分析CML病人外周血的T细胞克隆性 被引量：9
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作者 李扬秋 SiegertW SchmideCA 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期23-26,共4页
应用RT-PCR方法扩增12例CML病人外周血单个核细胞的T细胞受体(CR）Vβ24个亚家族基因的互补决定区3（CDR3），了解VβT细胞的分布情况，8例正常人和T细胞株K37作为对照。PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性。结果发现12例CML... 应用RT-PCR方法扩增12例CML病人外周血单个核细胞的T细胞受体(CR）Vβ24个亚家族基因的互补决定区3（CDR3），了解VβT细胞的分布情况，8例正常人和T细胞株K37作为对照。PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性。结果发现12例CML外周血中分别表达3－21Vβ亚家族T细胞，8例正常人则表达除Vβ20外的全部VβT细胞，K37细胞仅表达Vβ9。基因扫描分析显示12例CML中8例病人的部分Vβ亚家族PCR产物至一主峰图象，提示为克隆性生长的T细胞。推测这是宿主对白血病细胞相关抗原的一种直接反应。该方法有可能作为白血病特异性免疫治疗的临床研究的一种新的分子生物学研究方法。 展开更多
关键词 白血病 CML 外周血 T细胞克隆性 基因扫描
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慢性铅接触者胸腺输出近期功能的研究 被引量：10
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作者 刘薇薇 陈嘉榆 +4 位作者 杨志前 陈少华 杨力建 余卫 李扬秋 《中华劳动卫生职业病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期100-102,共3页
目的分析铅接触者外周血T细胞受体删除DNA环（TRECs）的含量，了解其初始T细胞含量和胸腺近期输出功能，从而研究其免疫功能的情况。方法采用实时定量PCR方法检测10例铅接触者外周血TRECs含量，与11例非铅接触者进行比较；采用双变量相... 目的分析铅接触者外周血T细胞受体删除DNA环（TRECs）的含量，了解其初始T细胞含量和胸腺近期输出功能，从而研究其免疫功能的情况。方法采用实时定量PCR方法检测10例铅接触者外周血TRECs含量，与11例非铅接触者进行比较；采用双变量相关分析法和偏相关分析法分析铅接触组TRECs水平与年龄、工龄、血铅、尿铅、血锌原卟啉（ZPP）和尿δ-氨基-γ-酮戊酸（δ-ALA）浓度的关系。结果10例铅接触者TRECs水平[（2．44±1．87）／1000]明显低于非铅接触者[（5．60±3．96）／1000]；TRECs水平与尿δ-ALA浓度呈负相关，有统计学意义（r=-0．754，P〈0．05），但控制血铅或尿铅因素后，TRECs水平与尿δ-ALA浓度则无相关性（P〉0．05）。结论铅对胸腺输出功能可能造成一定程度的损伤，且TRECs与血铅和尿铅存在相关性，提示低水平的铅接触早已损伤人体的免疫功能。 展开更多
关键词 铅 T淋巴细胞 免疫功能
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