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吉非替尼对斑马鱼胚胎发育及肿瘤耐药基因表达的影响 被引量：5
1
作者 胡荣英 舒莉萍 +3 位作者 何志旭 孙琮杰 李志操 金璐 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第32期4469-4472,共4页
目的研究吉非替尼对斑马鱼早期胚胎发育及abcb4肿瘤耐药基因表达的影响。方法实验动物采用斑马鱼,实验分为吉非替尼组、阿霉素和吉非替尼的混合液组、空白对照组。将吉非替尼稀释成不同浓度梯度的药液,分别处理受精后0.5~1.5h(0.5~1.5h... 目的研究吉非替尼对斑马鱼早期胚胎发育及abcb4肿瘤耐药基因表达的影响。方法实验动物采用斑马鱼,实验分为吉非替尼组、阿霉素和吉非替尼的混合液组、空白对照组。将吉非替尼稀释成不同浓度梯度的药液,分别处理受精后0.5~1.5h(0.5~1.5hpf)的斑马鱼胚胎,观察胚胎和幼鱼的死亡率、孵化率及畸形率变化。统计各浓度不同时间点的胚胎死亡率,计算出IC_(50)的数值;统计48hpf和72hpf的胚胎孵化率及120hpf的畸形率;收集不同组别的斑马鱼胚胎,通过实时荧光定量PCR,检测斑马鱼胚胎中abcb4基因的表达量。结果计算出吉非替尼在斑马鱼胚胎中的IC_(50)为16.18μmol/L。与对照组比较,高剂量吉非替尼(≥20μmol/L)显著抑制胚胎的孵化,并有明显的胚胎致死效应和致畸效应;吉非替尼组的斑马鱼胚胎abcb4基因的mRNA水平变化不显著,而阿霉素和吉非替尼的混合液组的abcb4基因的mRNA水平有明显变化(P<0.05)。结论吉非替尼对斑马鱼早期胚胎中abcb4肿瘤耐药基因的表达水平无明显影响(P>0.05),但是吉非替尼能逆转易耐药药物阿霉素的耐药作用,提示使用斑马鱼可以构建肿瘤耐药模型。 展开更多
关键词 斑马鱼 吉非替尼 发育毒性 abcb4 抗药性 多药
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CVVH前后稀释对不同分子量溶质清除的影响 被引量：5
2
作者 岑仲然 李志操 +2 位作者 唐颖 刘占国 常平 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期238-242,共5页
目的通过血液净化连续静脉一静脉血液滤过（CVVH）模式前、后稀释方法的体外试验，探讨前、后稀释对各种不同大小的溶质分子清除效率的影响。方法建立等容CVVH前、后稀释及CVVH单循环（无稀释）对照体外试验装置，比较不同分子量物质钾... 目的通过血液净化连续静脉一静脉血液滤过（CVVH）模式前、后稀释方法的体外试验，探讨前、后稀释对各种不同大小的溶质分子清除效率的影响。方法建立等容CVVH前、后稀释及CVVH单循环（无稀释）对照体外试验装置，比较不同分子量物质钾（K＋）、肌酐（Cr）、万古霉素（vancomycin）、胰岛素（insulin）和白细胞介素-6（IL-6）的清除率，实验重复4次（／Z=4）。结果CVVH后稀释法对K＋、Cr、万古霉素和胰岛素清除率明显高于前稀释；CVVH前、后稀释对IL-6清除无差别；对照组胰岛素和IL-6实验结束时明显降低。结论CVVH后稀释总体上对各种不同分子量物质清除率高于前稀释，但随着分子量的增大，两者间的差别缩小；对照组提示实验用滤器对胰岛素及IL-6有吸附作用。 展开更多
关键词 连续静脉一静脉血液滤过(CVVH) 清除率 钾(K+) 肌酐(Cr) 万古霉素 胰岛素 白细胞介素-6(IL一6)
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红系祖细胞在造血缺陷斑马鱼体内的移植 被引量：6
3
作者 李志操 黄波 +5 位作者 向文碧 孙琮杰 吴西军 周艳华 何志旭 舒莉萍 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第5期84-89,共6页
目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射... 目的评估红系祖细胞在先天原始造血缺陷cloche^(-/-)突变体斑马鱼体内的移植效果。方法收集绿色荧光标记红系祖细胞的转基因系zTg(gata1:EGFP)斑马鱼胚胎,制备成单细胞悬液,经流式细胞仪分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,利用显微注射技术将gata1^+细胞移植到42hpf的cloche^(-/-)突变体斑马鱼心脏中,采用体视荧光显微镜追踪观察移植后的红系祖细胞在cloche^(-/-)突变体斑马鱼中的表达情况。结果成功分选出携带绿色荧光的gata1^+细胞,并在移植后2 h可观察到携带绿色荧光的gata1^+细胞逐渐增殖扩散且16 h持续有绿色荧光表达。结论红系祖细胞有重建造血的潜力,为进一步研究红系祖细胞移植后的功能鉴定提供实验依据。 展开更多
关键词 红系祖细胞 斑马鱼 移植 cloche^-/-突变
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汉防己甲素联合化疗药物在斑马鱼体内逆转多药耐药的研究 被引量：1
4
作者 向文碧 李志操 +4 位作者 周栋珍 周艳华 吴西军 何志旭 舒莉萍 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第5期1-6,共6页
目的探讨汉防己甲素对斑马鱼胚胎早期发育及多药耐药基因abcb4表达的影响及其机制。方法通过药物毒性实验分析汉防己甲素药液处理后斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、心率和畸形率情况。取斑马鱼胚胎设置分组:空白对照组、阿霉素药液处理组... 目的探讨汉防己甲素对斑马鱼胚胎早期发育及多药耐药基因abcb4表达的影响及其机制。方法通过药物毒性实验分析汉防己甲素药液处理后斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、心率和畸形率情况。取斑马鱼胚胎设置分组:空白对照组、阿霉素药液处理组、长春碱药液处理组、汉防己甲素药液处理组、汉防己甲素和阿霉素混合药液处理组及汉防己甲素和长春碱混合药液处理组,每组胚胎用药液处理至第5天后取50尾用于实验。通过实时荧光定量PCR检测abcb4基因的表达情况,罗丹明123实验检测胚胎的外排功能,分析耐药程度。结果低剂量汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,高剂量汉防己甲素对胚胎孵化有抑制作用,并有致畸致死作用;实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比abcb4基因的mRNA在阿霉素和长春碱药液单独使用时表达增高,而在汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时表达降低;罗丹明123实验结果显示,阿霉素和长春碱单独使用时斑马鱼体内产生耐药,而汉防己甲素联合阿霉素、长春碱使用时耐药程度降低。结论汉防己甲素对斑马鱼胚胎毒性较低,且汉防己甲素能逆转物阿霉素和长春碱的耐药作用,对提高治疗效果有重要意义。 展开更多
关键词 汉防己甲素 多药耐药 abcb4 斑马鱼
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心血管发育相关基因mpx在斑马鱼早期胚胎发育中的表达
5
作者 向文碧 周栋珍 +5 位作者 李志操 周艳华 张鹏 崔冬冰 何志旭 舒莉萍 《贵州医科大学学报》 CAS 2020年第5期526-530,615,共6页
目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶... 目的:探讨斑马鱼体内髓样特异性过氧化物酶(mpx)在胚胎发育过程中的表达模式。方法:按Trizol法提取斑马鱼总RNA后逆转录成cDNA,再以cDNA为模板RT-PCR扩增mpx基因片段;用基因重组技术构建pCS2^+-mpx重组质粒后将质粒酶切线性化,T3聚合酶制备mpx反义RNA探针,用全胚胎原位杂交检测mpx基因的表达。结果:成功构建了pCS2^+-mpx重组质粒,原位杂交结果显示在24 hpf,mpx基因在斑马鱼胚胎中间细胞团表达;从24 hpf开始,mpx基因在斑马鱼胚胎卵黄囊表面、心脏和轴向脉管系统中高表达,一直持续到72 hpf;尤其是在72 hpf,mpx基因在整个胚胎头部、卵黄囊表面、尾部中弥散表达。结论:mpx基因在斑马鱼心血管系统发育的时间和部位中都有表达,mpx基因可能参与调控斑马鱼心血管系统发育。 展开更多
关键词 斑马鱼 心血管疾病 早期胚胎发育 mpx基因 全胚胎原位杂交 心血管
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Irx5a基因过表达对斑马鱼胚胎早期造血的影响
6
作者 金璐 李燕 +4 位作者 李志操 吴西军 周艳华 何志旭 舒莉萍 《实验动物与比较医学》 CAS 2017年第4期309-314,共6页
目的探讨易洛魁族同源盒5a(Irx5a)基因对斑马鱼胚胎早期造血相关转录调控因子的影响。方法于斑马鱼胚胎1细胞受精卵期,显微注射Irx5a-EGFPmRNA斑马鱼胚胎作为实验组、显微注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA斑马鱼胚胎作为实验对照组、... 目的探讨易洛魁族同源盒5a(Irx5a)基因对斑马鱼胚胎早期造血相关转录调控因子的影响。方法于斑马鱼胚胎1细胞受精卵期,显微注射Irx5a-EGFPmRNA斑马鱼胚胎作为实验组、显微注射增强型绿色荧光蛋白(EGFP)mRNA斑马鱼胚胎作为实验对照组、野生型斑马鱼作为空白对照组,应用qPCR检测相关造血转录调控因子在斑马鱼胚胎受精后9 h(9 hpf)、12 h、18 h、24 h和30 h时相的表达水平。结果实时荧光定量PCR结果表明,在原始造血转录因子1mo2、scl中,实验组从9hpf^24hpf较另外两组间明显减低;在定向造血转录因子中,c-myb实验组从12 hpf^24 hpf较另外两组间明显减低,runxl实验组从9 hpf^30 hpf较另外两组间明显减低;髓系造血转录因子pu.1和红系造血转录调控因子gata-1实验组从9 hpf^30 hpf较另外两组间明显减低,且差异有统计学意义。结论 Irx5a基因在斑马鱼原始造血、成体造血、红系造血、髓系造血的重要转录调控因子中发挥着抑制作用。 展开更多
关键词 斑马鱼 5a(Irx5a) 造血转录调控因子
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FANUC系统车床维修
7
作者 李志操 《机械工人（冷加工）》 2004年第10期75-75,共1页
关键词 FANUC系统 数控机床 车床 数控化 维修 机械制造业 机械工业 必由之路 高新技术 高科技
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