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应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究 被引量:16
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作者 布日额 李宝 +2 位作者 马波 王君伟 Ulrich Neumann 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期199-203,共5页
利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅Ig... 利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1:200,检测血清的最适稀释度是1:400,阳性判定标准为OD492≥0.20,且P/N≥2.0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清,其抗体滴度在1:400~1:51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因重组原核表达产物 间接-ELISA Dot—ELISA
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鹅细小病毒不同毒株VP3基因的序列分析比较 被引量:12
2
作者 李宝 齐岩 +1 位作者 马波 王君伟 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期430-433,共4页
分别将GPV 4个分离株通过PCR技术 ,从病毒基因组DNA中扩增出病毒衣壳蛋白VP3完整基因片段 ,并与PMD18_T质粒载体连接 ,转化到感受态大肠秆菌TG1中 ,提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后 ,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明 :VP3基... 分别将GPV 4个分离株通过PCR技术 ,从病毒基因组DNA中扩增出病毒衣壳蛋白VP3完整基因片段 ,并与PMD18_T质粒载体连接 ,转化到感受态大肠秆菌TG1中 ,提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后 ,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明 :VP3基因全长 16 0 5bp ,编码 5 34个氨基酸。不同毒株主要结构蛋白VP3基因同源性较高(95 .6 4 %~ 99.81% )。但强弱毒株间也存在一定差异。 展开更多
关键词 鹅细小病毒 VP3基因 克隆 序列分析
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鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗不同佐剂的免疫效果试验 被引量:11
3
作者 曹绘 李宝 +1 位作者 李漫 方维焕 《浙江畜牧兽医》 2015年第6期1-3,共3页
为评价鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗不同佐剂的免疫效果,选用Marcol 52、T1和SNB白油及S71油佐剂与鸡新城疫病毒和禽流感病毒混合制成灭活疫苗,免疫适龄SPF鸡,比较不同佐剂对鸡的安全性及新城疫和禽流感的血凝抑制(HI)抗体水... 为评价鸡新城疫和禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗不同佐剂的免疫效果,选用Marcol 52、T1和SNB白油及S71油佐剂与鸡新城疫病毒和禽流感病毒混合制成灭活疫苗,免疫适龄SPF鸡,比较不同佐剂对鸡的安全性及新城疫和禽流感的血凝抑制(HI)抗体水平。结果表明,4种佐剂疫苗的安全性、稳定性良好;应用T1白油佐剂的灭活疫苗,免疫SPF鸡产生的新城疫和禽流感HI抗体水平优于其他佐剂,免疫后2周检测新城疫和禽流感的抗体水平均合格,确定为最佳白油佐剂。 展开更多
关键词 鸡新城疫 禽流感 灭活疫苗 佐剂优化
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兽用冻干疫苗耐热保护剂的研究——鸡传染性支气管炎冻干活疫苗耐热保护剂试验 被引量:9
4
作者 张云浦 冯丽秋 +9 位作者 于作利 崔京春 董雅文 张君 李宝 陈培军 胡瑛瑛 邬立权 丁国义 杨晓丽 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第6期1-4,共4页
本试验以水解乳蛋白、乳糖、硫脲、多聚蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP K90 )等为主要材料 ,配 A组保护剂 ,并加 B组保护剂 (国内常规的蔗糖脱脂乳 )和 C组保护剂 (国外疫苗保护剂 )分别与鸡传染性支气管炎病毒 (IBV H1 2 0、H52、HK肾型 ... 本试验以水解乳蛋白、乳糖、硫脲、多聚蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP K90 )等为主要材料 ,配 A组保护剂 ,并加 B组保护剂 (国内常规的蔗糖脱脂乳 )和 C组保护剂 (国外疫苗保护剂 )分别与鸡传染性支气管炎病毒 (IBV H1 2 0、H52、HK肾型 )弱毒原液 ,按一定比例配苗 ,采取特定的冻干曲线制备的试验疫苗 ,在不同温度下保存后测定效价变化情况。试验证实 ,A组保护剂耐热保护性能最好 ,在 2~ 8℃条件下有效保存期达 2年以上 ,达到国外同类产品水平。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎 弱毒活疫苗 保护剂
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猪链球菌活疫苗的研制 被引量:2
5
作者 高云飞 苏亚君 +2 位作者 李宝 张金平 郭兴福 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期228-230,共3页
采用ST171菌种 ,经过肉汤培养后 ,加入适当保护剂 ,制成猪链球菌病活疫苗。经过安全性、免疫效力等试验证明具有良好的免疫原性和保护力。
关键词 链球菌病 活疫苗 保护力
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常规动物用活疫苗冻干保护剂的改良初探 被引量:7
6
作者 陈果亮 杜元钊 +2 位作者 管清江 李宝 郭景露 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2007年第10期28-29,共2页
目前国内动物用活疫苗仍然以5%蔗糖脱脂奶作为冻干保护剂,其冻干外型稳定,易溶性良好,成本低廉,但其耐热性能差,对病毒的保护作用较差。本试验以鸡新城疫Lasota冻干活疫苗为例,分别以不同浓度的海藻糖取代蔗糖,进行冻干保护性试验,结果... 目前国内动物用活疫苗仍然以5%蔗糖脱脂奶作为冻干保护剂,其冻干外型稳定,易溶性良好,成本低廉,但其耐热性能差,对病毒的保护作用较差。本试验以鸡新城疫Lasota冻干活疫苗为例,分别以不同浓度的海藻糖取代蔗糖,进行冻干保护性试验,结果表明海藻糖在2%以上时,对病毒的保护效果明显优于5%蔗糖脱脂奶组,证明其具有很好的应用前景。 展开更多
关键词 冻干活疫苗 海藻糖 保护剂
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浙江地区猪圆环病毒2型检测及遗传变异分析 被引量:8
7
作者 徐丽华 蓝胜芝 +5 位作者 余斌 李军星 张鹏超 李宝 苏菲 袁秀芳 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第11期1970-1977,共8页
为了掌握浙江地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)流行病学特点和遗传变异情况,应用PCR检测方法,对2018年浙江地区猪场采集的临床疑似病料进行PCV2检测,并对部分阳性病料进行全基因扩增、克隆、序列测定和ORF 2遗传进化... 为了掌握浙江地区猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)流行病学特点和遗传变异情况,应用PCR检测方法,对2018年浙江地区猪场采集的临床疑似病料进行PCV2检测,并对部分阳性病料进行全基因扩增、克隆、序列测定和ORF 2遗传进化树分析。结果显示:329份临床疑似样品中,PCV2阳性率27.4%(90/329),其中宁波地区阳性率最高,为52%;保育猪和肥育猪阳性率最高,分别为38.8%(64/165)和68.8%(11/16)。选取7份病料进行全基因组扩增,每个毒株随机挑选3个或4个阳性克隆进行序列测定,共得到22个毒株进行遗传变异分析。22株病株同源性为93.3%~99.8%,与16个参考毒株同源性为93.5%~99.8%。根据遗传进化树分析,22个毒株分别处于3个分支,其中6株PCV2a,6株PCV2b,10株PCV2d,说明目前浙江地区PCV2d是优势毒株。ORF 2遗传进化树分析显示,ORF 2核苷酸同源性较全基因组核苷酸同源性低,3个分支分别处于PCV2b、PCV2d和PCV2e,预示浙江地区流行毒株可能在向PCV2e转变。本研究掌握了PCV2在浙江地区的流行动态,为浙江省PCV2疫苗株的选择和疫苗研发提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 全基因组 ORF 2基因 流行病学调查 遗传变异分析
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牛病毒性腹泻病毒P20和P14基因的克隆及序列分析 被引量:6
8
作者 李慧昕 王君伟 +3 位作者 李宝 韩先杰 何海娟 李昭春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期124-129,共6页
参考GenBank中BVDVOregonC2 4V株的基因组序列设计两对引物 ,利用套式PCR方法扩增P2 0基因 ,扩增出预期 5 2 5bp的目的片段。扩增产物克隆至pMD18_T载体 ,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列OregonC2 4V比... 参考GenBank中BVDVOregonC2 4V株的基因组序列设计两对引物 ,利用套式PCR方法扩增P2 0基因 ,扩增出预期 5 2 5bp的目的片段。扩增产物克隆至pMD18_T载体 ,经酶切鉴定获得阳性重组质粒并对其进行测序。测序结果与参考序列OregonC2 4V比较 ,二者的核苷酸同源性仅为 80 95 % ,推导氨基酸同源性为 87 5 0 %。测序结果经NCBI上的Blast(Http :/www ncbi nlm nih gov/BLAST/ )同源性比较 ,克隆得到的基因与Osloss株同源性最高 ,核苷酸同源性为93 6 5 % ,推导氨基酸同源性为 95 83%。根据P2 0的测序结果 ,参照GenBank中BVDVOsloss株设计一对引物 ,扩增P14基因 ,经同源性比较 ,扩增的P14基因与Osloss株核苷酸同源性为 94 77% ,推导氨基酸同源性为 95 10 % ,通过系统发生分析 ,推测P2 展开更多
关键词 牛病毒性腹泻病毒 P20基因和P14基因 克隆 序列分析
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昌乐西瓜产业发展回顾与展望 被引量:7
9
作者 赵平 康振友 +3 位作者 张冰慧 王义国 李宝 李霞 《农业科技通讯》 2021年第6期44-46,182,共4页
从种植规模、主栽品种、栽培模式、标准化生产、品牌发展等方面简要回顾了山东省昌乐县西瓜产业的发展历史。指出产业中存在品牌效应相对薄弱、生产成本逐年增加、优质西瓜占比较低、销售渠道较为单一、产业链条有待完善等问题。从加快... 从种植规模、主栽品种、栽培模式、标准化生产、品牌发展等方面简要回顾了山东省昌乐县西瓜产业的发展历史。指出产业中存在品牌效应相对薄弱、生产成本逐年增加、优质西瓜占比较低、销售渠道较为单一、产业链条有待完善等问题。从加快产业科技创新、优化西瓜种植结构、培育壮大企业品牌、拓宽产品销售渠道、健全社会化服务体系、挖掘地理人文优势等方面对产业发展进行了展望。 展开更多
关键词 西瓜 产业发展 展望 昌乐
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禽流感(H9亚型)油乳剂灭活疫苗的研究 被引量:1
10
作者 韩正博 刘芳悦 +6 位作者 郭兴福 马世华 邬立权 李宝 胡海军 戴秀莉 潘兴广 《中国兽药杂志》 2001年第6期4-7,共4页
将 H9亚型禽流感病毒尿囊液 ,经甲醛灭活 ,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗物理性状良好 ,接种鸡无不良反应 ,接种疫苗后 1 4d,禽流感病毒 HI GMT(Log2 )为 7.7~ 7.8,2 1 d为 8.9~ 9.3 ,于接种疫苗后 1 4、2 1、3 0、6 0 d攻... 将 H9亚型禽流感病毒尿囊液 ,经甲醛灭活 ,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗物理性状良好 ,接种鸡无不良反应 ,接种疫苗后 1 4d,禽流感病毒 HI GMT(Log2 )为 7.7~ 7.8,2 1 d为 8.9~ 9.3 ,于接种疫苗后 1 4、2 1、3 0、6 0 d攻击同型禽流感病毒 ,接种疫苗鸡全部获得保护。现地实验取得了良好地免疫效果 ,证明制备的油乳剂灭活疫苗安全 ,免疫原性良好。 展开更多
关键词 禽流感 灭活疫苗 H9亚型 油乳剂 免疫原性
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黑龙江省和河北省鸡新城疫病毒分离株的遗传变异分析 被引量:1
11
作者 韩正博 闫丽辉 +9 位作者 曹殿军 刘培欣 李宝 姜力 杨爽 戴秀莉 柴华 郑世民 潘兴广 史同瑞 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第3期169-176,共8页
   利用 RT PCR 技术扩增出了 4 株 NDV 分离株(HeB 4 99, HeB 5 99、HeB 6 02 和HLJ 10 02)F基因539 bp的片段,将该片段克隆到 pMD 18 T载体上。经酶切分析、质粒 PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得了4株 NDV分离株 F基因部分片段...    利用 RT PCR 技术扩增出了 4 株 NDV 分离株(HeB 4 99, HeB 5 99、HeB 6 02 和HLJ 10 02)F基因539 bp的片段,将该片段克隆到 pMD 18 T载体上。经酶切分析、质粒 PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得了4株 NDV分离株 F基因部分片段的重组质粒。同源性分析显示,4株分离毒株的核苷酸序列具有 95.9%~100%的同源性,与 LaSota的核苷酸序列同源性为81.0%~81.8%,与F48E9的核苷酸序列同源性达85.8%~89.3%。推导氨基酸序列分析表明,4个毒株F蛋白的裂解位点氨基酸组成为112RRQKRF117,具有强毒株裂解位点氨基酸组成特点,与ICPI和MDT测定结果相吻合。73株NDV毒株的系统发育进化树分析表明,HeB 4 99、HeB 5 99、HeB 6 02和HLJ 10 02均归属于基因Ⅶ型。 展开更多
关键词 新城疫病毒 F基因 遗传变异分析
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亮嫁妆
12
作者 李宝 《学习之友》 2024年第3期14-15,共2页
传统婚礼,女方家无论贫富都要陪送嫁妆。简单的,在迎娶当日伴随迎亲队伍一同起送;丰厚的,则在迎娶前一天专门举行送妆仪式。娘家陪送越丰厚,仪式越铺张,越能提高新妇日后在婆家的地位。嫁妆丰厚程度以“堂”论高低,全堂的六十四抬,半堂... 传统婚礼,女方家无论贫富都要陪送嫁妆。简单的,在迎娶当日伴随迎亲队伍一同起送;丰厚的,则在迎娶前一天专门举行送妆仪式。娘家陪送越丰厚,仪式越铺张,越能提高新妇日后在婆家的地位。嫁妆丰厚程度以“堂”论高低,全堂的六十四抬,半堂的三十二抬。一抬基本上就是一件物品。臂如家具,桌椅箱柜有多少件就是多少抬,衣箱不管内装多少衣料,也是一拾。 展开更多
关键词 传统婚礼 嫁妆 仪式
原文传递
全胚制备鸡成纤维细胞生产鸡传染性法氏囊病双价活疫苗的试验 被引量:3
13
作者 齐铁英 李宝 +5 位作者 韩明香 杨文革 于作利 吴金 张凤强 郭兴福 《中国兽药杂志》 2001年第3期31-32,共2页
采用传统法和全胚法制备鸡成纤维单层细胞 ,生产了鸡的传染性法氏囊病双价活疫苗。传统法和全胚法制备的细胞苗的效价无明显差异 (TCID50 /ml) ,配置的双价活疫苗效价也无明显差异 (EID50 /羽 )。全胚法可简化生产工序 ,鸡胚利用率比传... 采用传统法和全胚法制备鸡成纤维单层细胞 ,生产了鸡的传染性法氏囊病双价活疫苗。传统法和全胚法制备的细胞苗的效价无明显差异 (TCID50 /ml) ,配置的双价活疫苗效价也无明显差异 (EID50 /羽 )。全胚法可简化生产工序 ,鸡胚利用率比传统法提高了 展开更多
关键词 成纤维细胞 上皮细胞 肝细胞 鸡传染性法氏囊病 双价活疫苗 全胚法 制备
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一种新的鸡痘鹌鹑化弱毒疫苗生产工艺改进试验——绒毛尿囊膜渗透法 被引量:3
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作者 齐琳 韩名香 +8 位作者 齐铁英 刘春菊 王莉娟 李宝 南锡 王春伟 王雪菲 王芳 张亚华 《中国兽药杂志》 2005年第11期50-52,共3页
采用一种新的鸡胚绒毛尿囊膜接种方法,即绒毛尿囊膜渗透法来制备鸡痘鹌鹑化弱毒活疫苗。此法不必做人工气室,减少了鸡胚早死率及人为污染率,减化了生产工艺并使鸡胚利用率大大提高。
关键词 人工气室 绒毛尿囊膜接种法 绒毛尿囊膜渗透法
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礼法社会的政治秩序──唐宋以来民族认同史反思 被引量:3
15
作者 李宝 《北京社会科学》 CSSCI 1996年第1期48-56,共9页
礼法社会的政治秩序──唐宋以来民族认同史反思李宝臣中国古代社会自唐宋以后,就其社会、国家的管理方式而言。已步入成熟的礼法社会,而并非通常人们判定的人治社会。在当代国人深感法制不健全所带来的种种麻烦与困难的时候,一进行... 礼法社会的政治秩序──唐宋以来民族认同史反思李宝臣中国古代社会自唐宋以后,就其社会、国家的管理方式而言。已步入成熟的礼法社会,而并非通常人们判定的人治社会。在当代国人深感法制不健全所带来的种种麻烦与困难的时候,一进行历史反思,就极易接受中国古代社会是... 展开更多
关键词 民族认同 政治秩序 礼制 礼法文化 法精神 八股文 礼法制度 王夫之 道统 社会集团
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大学物理教学与高中新课改的衔接研究 被引量:4
16
作者 朱文霞 李宝 王乐新 《黑龙江教育(理论与实践)》 2017年第4期79-80,共2页
我国高中已经开始全面实施新课程改革,这给后续大学物理教学带来了很大冲击,传统教学模式不能满足发展要求,如何正确把握学生物理基础,如何开展有效大学物理课程的教学,怎样解决大学物理教学与中学教学的衔接成为大学物理教学必须要面... 我国高中已经开始全面实施新课程改革,这给后续大学物理教学带来了很大冲击,传统教学模式不能满足发展要求,如何正确把握学生物理基础,如何开展有效大学物理课程的教学,怎样解决大学物理教学与中学教学的衔接成为大学物理教学必须要面对的课题。针对新课改标准下高中物理内容、目标及形式的变化,本文提出了加强大学物理与高中物理教学衔接的措施,以期通过教学方面的改进,让学生更好地适应大学物理的学习。为提高学生科学素养,积极探索物理发展前沿奠定了基础。 展开更多
关键词 物理课程标准 大学物理 教学 衔接
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昌乐县春季小型西瓜品种比较试验 被引量:4
17
作者 李宝 赵平 +3 位作者 唐巨信 王义国 刘德胜 孟祥晓 《农业科技通讯》 2021年第4期154-157,共4页
以引进的12个西瓜品种为试验材料,在昌乐县进行品种比较试验。选取单瓜重、果皮厚度、中心果肉可溶性固形物含量、近皮果肉可溶性固形物含量4个农艺性状应用灰色关联分析方法进行综合评价,以筛选适合当地种植的品种。试验结果显示,灰色... 以引进的12个西瓜品种为试验材料,在昌乐县进行品种比较试验。选取单瓜重、果皮厚度、中心果肉可溶性固形物含量、近皮果肉可溶性固形物含量4个农艺性状应用灰色关联分析方法进行综合评价,以筛选适合当地种植的品种。试验结果显示,灰色关联度排序前3位的品种分别是圣颖3K、珍田小兰、京豹,表明这3个品种的综合性状最优,可在昌乐地区进一步推广种植。 展开更多
关键词 小型西瓜 品种 比较 昌乐
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黑龙江省部分市县猪绦虫蚴和犬绦虫感染情况调查 被引量:2
18
作者 曲河 孙耀堂 +5 位作者 李宝 刘伟 孙玉霞 姜力 兰丽 于作利 《中国兽医科技》 CSCD 2000年第4期13-14,共2页
对来自黑龙江省 17个市、县的 15 6头猪进行了绦虫蚴感染情况调查 ,并对其中 5个市、县的 5 0头犬进行了绦虫感染情况调查。结果 ,细颈囊尾蚴、棘球蚴、猪囊尾蚴的感染率分别为 5 0 .6%、4.5 %和 3 .2 % ;犬泡状带绦虫、细粒棘球绦虫的... 对来自黑龙江省 17个市、县的 15 6头猪进行了绦虫蚴感染情况调查 ,并对其中 5个市、县的 5 0头犬进行了绦虫感染情况调查。结果 ,细颈囊尾蚴、棘球蚴、猪囊尾蚴的感染率分别为 5 0 .6%、4.5 %和 3 .2 % ;犬泡状带绦虫、细粒棘球绦虫的感染率分别为 2 4.0 %和 4.0 %。 展开更多
关键词 猪绦虫蚴 犬绦虫 人畜共患病 疫情调查 寄生虫病
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鸡新城疫、鸡传染性支气管炎(肾型)、鸡产蛋下降综合症三联灭活苗的研制 被引量:1
19
作者 苏雅君 高云飞 +2 位作者 郭志波 李宝 郭兴福 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2001年第5期20-21,共2页
采用NDLaSota株、IB肾型株和EDS76株接种鸡胚、鸭胚 ,收集尿囊液 ,加甲醛溶液灭活后 ,按一定比例与油相混合 ,制成油包水型油乳剂灭活苗。用 3~ 6周龄易感雏鸡进行安全性试验、免疫效力试验 ,注射部位吸收良好 ,免疫 3~ 4周后 ,ND和I... 采用NDLaSota株、IB肾型株和EDS76株接种鸡胚、鸭胚 ,收集尿囊液 ,加甲醛溶液灭活后 ,按一定比例与油相混合 ,制成油包水型油乳剂灭活苗。用 3~ 6周龄易感雏鸡进行安全性试验、免疫效力试验 ,注射部位吸收良好 ,免疫 3~ 4周后 ,ND和IB的保护率均可达到 70 %以上。鸡产蛋下降综合症的HI抗体可达到 7log2以上 。 展开更多
关键词 灭活苗 鸡新城疫 鸡传染性支气管炎 鸡产蛋下降综合症
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西学东渐与明代社会特征 被引量:1
20
作者 李宝 《北京社会科学》 CSSCI 1994年第2期99-105,108+107,共9页
西学东渐与明代社会特征李宝臣在世界文明发展史的不同类型中,明朝历史以其特殊的地位引人注目。公元1368-1644年,跨越四个世纪历近300年的明代正处在世界历史巨变之期。这是中国历史进程的重要时刻。国际格局已在明朝人... 西学东渐与明代社会特征李宝臣在世界文明发展史的不同类型中,明朝历史以其特殊的地位引人注目。公元1368-1644年,跨越四个世纪历近300年的明代正处在世界历史巨变之期。这是中国历史进程的重要时刻。国际格局已在明朝人的不知不觉中发生着质变。当朱元璋定... 展开更多
关键词 明代社会 利玛窦 耶稣会士 西学 政治参与 科举制 海上贸易 郑和下西洋 职能分化 中央集权
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