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通脑灵合剂治疗急性出血性中风的临床研究 被引量：20
1
作者 杨廷光 孙益平 +16 位作者 符为民 周晓红 吴明华 汪永胜 王顺贤 陈四清 韦宏庆 时永华 余江毅 郦永平 曹理璞 钱玉良 李如英 张彪 薛均 常宁 倪良玉 《中国中医急症》 1998年第3期99-101,共3页
通脑灵合剂具有化瘀止血、通腑醒脑之功效，以该制剂治疗急性出血性中风200例，与西药对照组100例做对比观察，结果显示：通脑灵组临床治愈率29％，显效率49．5％，有效率15．5％，总有效率94％；对照组临床治愈率13％，显效率48％，有... 通脑灵合剂具有化瘀止血、通腑醒脑之功效，以该制剂治疗急性出血性中风200例，与西药对照组100例做对比观察，结果显示：通脑灵组临床治愈率29％，显效率49．5％，有效率15．5％，总有效率94％；对照组临床治愈率13％，显效率48％，有效率26％，总有效率87％。两组疗效有显著性差异（P＜0．01）。进一步的分析表明该制剂具有促进颅内血肿吸收，改善脑部供血，提高脑血管弹性及改善血液流变性等作用。 展开更多
关键词 通脑灵合剂 急性 出血性 中风 中医药疗法
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黄芪和大青叶治疗小鼠病毒性心肌炎的对比研究 被引量：11
2
作者 李小青 张国成 +2 位作者 许东亮 卫文峰 李如英 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2003年第5期439-442,共4页
目的通过中药单剂黄芪、大青叶治疗小鼠病毒性心肌炎(VMC)的疗效观察,探讨VMC的有效治疗措施。方法Balb/C小鼠给予柯萨奇病毒B3(CVB3)稀释液腹腔注射后,随机分为感染对照组、黄芪治疗组和大青叶治疗组,于CVB3感染后第3,5,7,10,14,21天... 目的通过中药单剂黄芪、大青叶治疗小鼠病毒性心肌炎(VMC)的疗效观察,探讨VMC的有效治疗措施。方法Balb/C小鼠给予柯萨奇病毒B3(CVB3)稀释液腹腔注射后,随机分为感染对照组、黄芪治疗组和大青叶治疗组,于CVB3感染后第3,5,7,10,14,21天分批处死,作HF染色,比较各组小鼠心肌病变积分,并行心肌组织病毒分离。于感染后第7天各组小鼠电镜观察心肌细胞超微结构改变。结果 黄芪治疗组自CVB3感染后第5～21天、大青叶治疗组在CVB3感染后第5灭和7天时,其心肌病变积分较感染对照组明娃减轻(P<0.05)。而大青叶治疗组CVB3感染后第10～21天心肌病变积分与感染对照组比较差异无显著性(P>0.05)。电镜观察发现感染对照组小鼠心肌细胞线粒体肿胀、嵴断裂、肌浆网扩张、肌丝溶解,治疗组上述病变轻,且大青叶治疗组可见大量溶酶体。病毒分离结果娃示3组小鼠CVB3感染后第3天即可分离出病毒,阳性率均为66.7％,第5～10天3组均为100％,第14天感染组病毒分离阳性率为33 3％,治疗组均未分离到病毒,第21天时3组均未分离出病毒。不同时问点的3组间病毒分离阳性率差异无显著性(P>0.05)。结论 黄芪具有保护心肌的作用。大青叶在CVB3感染早期对VMC的病理改变具有显著影响. 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 黄芪 大青叶 中药
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百乐眠胶囊治疗失眠症肝郁阴虚证的临床研究 被引量：18
3
作者 邹建东 贾云 +2 位作者 李如英 姜亚军 顾锡镇 《世界中医药》 CAS 2014年第4期460-462,共3页
目的:评价百乐眠胶囊对失眠症肝郁阴虚证的改善作用。方法:采用随机、双盲双模拟、平行对照、多中心临床研究方法纳入10家医院454例失眠症肝郁阴虚证患者。治疗组342例服用试验药百乐眠胶囊和天王补心丸模拟剂,对照组112例服用对照药天... 目的:评价百乐眠胶囊对失眠症肝郁阴虚证的改善作用。方法:采用随机、双盲双模拟、平行对照、多中心临床研究方法纳入10家医院454例失眠症肝郁阴虚证患者。治疗组342例服用试验药百乐眠胶囊和天王补心丸模拟剂,对照组112例服用对照药天王补心丸和百乐眠胶囊模拟剂。连续4周为1个疗程,观察时间为5周。结果:匹兹堡睡眠质量指数积分的变化及中医证候疗效治疗组均优于对照组,组间差异具有统计学意义。结论:百乐眠胶囊治疗失眠症肝郁阴虚证具有较好的疗效及安全性。 展开更多
关键词 百乐眠胶囊 失眠症 肝郁阴虚证
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脑梗塞中医辨证现代化初探——311例回顾性临床资料分析 被引量：17
4
作者 郦永平 符为民 +5 位作者 奚肇庆 李如英 张华强 闵捷 陈启光 恽振先 《中国中医急症》 2000年第6期264-265,共2页
关键词 脑梗塞 中医药疗法 中医辩证 现代化
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儿童血液系统肿瘤合并细菌真菌感染的临床研究 被引量：15
5
作者 杨欣伟 张国成 +4 位作者 曹玉红 沈青 牛永春 李如英 黄莹 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期221-223,共3页
目的　探讨儿童血液系统肿瘤合并细菌、真菌感染的因素及其感染病原学特点,为临床防治提供科学依据。方法　采用回顾性调查方法对第四军医大学西京医院儿科1 994～2 0 0 2年收治的2 84例血液系统肿瘤患儿进行调查,对其感染率、感染部位... 目的　探讨儿童血液系统肿瘤合并细菌、真菌感染的因素及其感染病原学特点,为临床防治提供科学依据。方法　采用回顾性调查方法对第四军医大学西京医院儿科1 994～2 0 0 2年收治的2 84例血液系统肿瘤患儿进行调查,对其感染率、感染部位、感染相关危险因素、病原菌的特点进行了分析。结果　细菌、真菌感染发生率为45 .42 % ,感染病死率为3 1. 78%。感染部位以上呼吸道为主,占感染例次数的43. 41 % ,其次为胃肠道、下呼吸道、口腔、皮肤软组织等;医院内细菌、真菌感染的危险因素包括:住院时间长、白细胞数<1 . 0×1 0 9/L、应用化疗药物及激素、使用广谱抗生素等。致病菌以革兰阴性菌为主,占51. 0 4% ;革兰阳性菌占2 6. 0 4% ,真菌占2 2 . 92 %。药敏实验显示:革兰阴性菌对舒普深普遍敏感,对氨苄青霉素、头孢唑林不同程度耐药,对部分第3代头孢菌素耐药性增加;革兰阳性菌对万古霉素敏感,对青霉素、红霉素、苯唑青霉素、克林霉素部分产生耐药。结论　细菌、真菌感染与疾病本身、住院时间、患儿免疫力低下、应用化疗药物及激素、抗生素等多种因素密切相关。病原菌的耐药率呈增加趋势,故加强保护性隔离措施、合理应用抗生素显得尤为重要。 展开更多
关键词 血液 肿瘤 医院感染 抗生素
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急性脑梗死合并肺部感染危险因素、转归及防治措施的临床分析 被引量：14
6
作者 李如英 吴明华 +1 位作者 张秀胜 吴文涛 《实用临床医药杂志》 CAS 2012年第24期26-28,共3页
目的探讨急性脑梗死合并肺部感染的危险因素、转归及防治措施。方法回顾性分析本院收治的775例急性脑梗死患者的临床资料,根据是否合并肺部感染分为感染组238例和非感染组537例。分析肺部感染发生率与年龄、基础疾病、病情轻重及转归的... 目的探讨急性脑梗死合并肺部感染的危险因素、转归及防治措施。方法回顾性分析本院收治的775例急性脑梗死患者的临床资料,根据是否合并肺部感染分为感染组238例和非感染组537例。分析肺部感染发生率与年龄、基础疾病、病情轻重及转归的关系。结果高龄、基础疾病多、脑干梗死、大面积脑梗死者肺部感染率及病死率明显升高。结论加强基础护理,控制危险因素,早期、合理、有效使用抗生素,可有效降低急性脑梗死合并肺部感染的发生率。 展开更多
关键词 急性脑梗死 肺部感染 危险因素 转归 防治措施
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主观量表评价原发性失眠症中药疗效的特性分析 被引量：14
7
作者 常诚 姜亚军 +3 位作者 邹建东 李如英 陆海芬 骆守真 《河北中医》 2006年第11期829-830,共2页
关键词 主观评量表 匹兹堡睡眠质量指数量表 睡眠损害量表 里兹睡眠评估问卷 入睡 睡眠障碍
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静脉用阿齐霉素治疗呼吸道感染疗效分析 被引量：12
8
作者 张国成 陈彩平 +3 位作者 成胜权 李如英 丁翠玲 曹玉红 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期357-358,共2页
目的观察静脉用阿齐霉素(抒罗康)治疗呼吸道感染的疗效及安全性。方法采用随机对照研究,试验组予注射用阿齐霉素10mg/(kg·d)静脉滴注,对照组注射头孢唑啉钠或红霉素,疗程5d。观察两组有效率和不良反应发生率。结果阿齐霉素组总有... 目的观察静脉用阿齐霉素(抒罗康)治疗呼吸道感染的疗效及安全性。方法采用随机对照研究,试验组予注射用阿齐霉素10mg/(kg·d)静脉滴注,对照组注射头孢唑啉钠或红霉素,疗程5d。观察两组有效率和不良反应发生率。结果阿齐霉素组总有效率为100.0%,头孢唑啉钠和红霉素对照组总有效率分别为88.6%和65.0%,各组疗效比较均有显著性差异(P均<0.05),不良反应发生率阿齐霉素组和红霉素组分别为7.6%和15.0%,两组比较有显著差异(P<0.05)。结论静脉用阿齐霉素治疗呼吸道感染疗效肯定,不良反应少。 展开更多
关键词 阿齐霉素 红霉素 呼吸道感染 儿童
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缺氧缺血性脑病新生儿血清胶质纤维酸性蛋白检测及其临床意义 被引量：11
9
作者 曹玉红 张光运 +3 位作者 成胜权 钱新宏 李如英 丁翠玲 《中国新生儿科杂志》 CAS 2013年第2期102-104,共3页
目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的变化及其临床意义。方法选择2010—2011年本院新生儿科住院的足月HIE患儿为观察组,母婴同室的健康足月新生儿为对照组,采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法,对两组新生儿... 目的探讨缺氧缺血性脑病(HIE)新生儿血清胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的变化及其临床意义。方法选择2010—2011年本院新生儿科住院的足月HIE患儿为观察组,母婴同室的健康足月新生儿为对照组,采用酶联免疫吸附试验双抗体夹心法,对两组新生儿进行血清GFAP测定,并比较观察组和对照组、不同程度HIE组之间以及有后遗症组与无后遗症组新生儿血清GFAP水平有无差异。结果 HIE患儿发病第1、3、7天血清GFAP水平(μg/L)均高于对照组(P<0.01);发病第3天GFAP水平高于第7天[(2.46±1.98)比(1.52±1.19),P<0.05]。重度HIE组GFAP高于中度组和轻度组,中度组高于轻度组(P均<0.01);后遗症组GFAP含量明显高于无后遗症组[1天:(3.90±0.77)比(1.19±0.63),3天:(5.03±1.51)比(1.37±0.75),7天:(3.11±0.70)比(0.87±0.57),P<0.01]。结论 HIE新生儿血清GFAP含量增加与疾病严重程度及预后相关,检测HIE新生儿血清GFAP变化,有助于判定疾病严重程度及评估患儿的预后。 展开更多
关键词 缺氧缺血 脑 婴儿 新生 胶质纤维酸性蛋白
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多发性抽动症的临床及视频脑电图分析 被引量：10
10
作者 杨欣伟 张国成 +4 位作者 沈青 黄莹 曹玉红 李如英 郭武玲 《中国儿童保健杂志》 CAS 2005年第4期357-358,共2页
【目的】探讨多发性抽动症(tourettesyndrome,TS)的视频脑电图改变及其的临床特点、病因及治疗,为临床防治提供科学依据。【方法】对48例TS患儿进行视频脑电监测并结合临床资料分析结果。【结果】视频脑电图异常21例(43.8%),其中轻度异... 【目的】探讨多发性抽动症(tourettesyndrome,TS)的视频脑电图改变及其的临床特点、病因及治疗,为临床防治提供科学依据。【方法】对48例TS患儿进行视频脑电监测并结合临床资料分析结果。【结果】视频脑电图异常21例(43.8%),其中轻度异常15例,大多表现为基本节律紊乱,慢波多于同龄儿童,α波指数减少等非特异性变化;中度异常5例,表现为弥漫性慢波、有尖波、棘波、棘慢波综合;重度异常1例,表现为各导出现较多的棘波和棘慢波综合。【结论】视频脑电检查既可长时间地监测脑电情况,又可同步监测患者临床特征,为临床医生充分认识TS提供可靠依据。 展开更多
关键词 多发性抽动症 视频脑电图
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美国LFC低阶煤提质联产油技术新进展 被引量：10
11
作者 李青松 李如英 +1 位作者 马志远 陈金庆 《中国矿业》 北大核心 2010年第12期82-87,共6页
本文回顾了美国LFC技术的发展历程,重点介绍了LFC技术以及在该技术基础上改进的CCI技术的工艺,并简要介绍了LFC技术在中国的应用及发展。通过与国际同类技术比较,结合我国劣质煤资源现状,综合分析认为,LFC及其改进的技术可作为成熟先进... 本文回顾了美国LFC技术的发展历程,重点介绍了LFC技术以及在该技术基础上改进的CCI技术的工艺,并简要介绍了LFC技术在中国的应用及发展。通过与国际同类技术比较,结合我国劣质煤资源现状,综合分析认为,LFC及其改进的技术可作为成熟先进的煤提质转油技术,推动我国低阶煤加工工业发展。 展开更多
关键词 低阶煤 褐煤 煤提质 煤转油 LFC
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新型冠状病毒肺炎疫情期间加强儿童发热门诊流程的管理指引(第一版) 被引量：11
12
作者 张国成 程小宁 +25 位作者 丁辉 石曌玲 李如英 符州 陈强 赵东赤 金润铭 聂国明 鲁继荣 刘长山 赵德育 潘家华 封志纯 史源 夏正坤 郑成中 蒋瑾瑾 王君霞 郑跃杰 尚云晓 向伟 徐保平 申昆玲 王天有 杨永弘 陆权 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第2期97-104,共8页
新型冠状病毒肺炎(NCP)为乙类传染病,按照甲类传染病预防和控制。近期,儿童NCP病例逐渐增多,儿童发热门诊成为阻击疫情的第一关口。加强儿童发热门诊流程的管理,对于及早发现疑似患儿,早隔离,早治疗和预防发生交叉感染十分重要。本文依... 新型冠状病毒肺炎(NCP)为乙类传染病,按照甲类传染病预防和控制。近期,儿童NCP病例逐渐增多,儿童发热门诊成为阻击疫情的第一关口。加强儿童发热门诊流程的管理,对于及早发现疑似患儿,早隔离,早治疗和预防发生交叉感染十分重要。本文依据国家卫生健康委员会的有关诊疗、防控方案,基于各省市专家发热门诊的诊疗经验,提出了发热门诊防控策略,并从优化流程、预防交叉感染、医务人员的卫生防护及消毒等方面,详细概述了普通发热患儿与疑似患儿的预检分诊、疑似患儿、确诊患儿的诊治流程、处理原则和具体措施,为NCP情期加强发热门诊的管理及预防交叉感染提出了实用性的建议。 展开更多
关键词 新型冠状病毒 新型冠状病毒肺炎 儿童 发热门诊 流程 管理
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个性化健康宣教对初产妇母乳喂养及新生儿护理能力的影响 被引量：11
13
作者 李如英 刘飞艳 +2 位作者 李亚静 屈蕾 李敏 《临床医学研究与实践》 2021年第19期154-156,共3页
目的探讨个性化健康宣教对初产妇母乳喂养及新生儿护理能力的影响。方法选取2018年4月至2020年4月于我院分娩的120例初产妇作为研究对象,将其随机分为对照组和观察组,各60例。对照组行常规护理,观察组在对照组基础上行个性化健康宣教。... 目的探讨个性化健康宣教对初产妇母乳喂养及新生儿护理能力的影响。方法选取2018年4月至2020年4月于我院分娩的120例初产妇作为研究对象,将其随机分为对照组和观察组,各60例。对照组行常规护理,观察组在对照组基础上行个性化健康宣教。比较两组的护理效果。结果护理后,两组的母乳喂养和新生儿护理知识评分均升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。观察组的EPDS评分及抑郁率低于对照组,LATCHES评分及母乳喂养成功率高于对照组(P<0.05)。观察组的新生儿喂养、新生儿沐浴、新生儿抚触及臀部脐部护理评分均高于对照组(P<0.05)。观察组的护理满意度高于对照组(P<0.05)。结论个性化健康宣教可有效提高初产妇的母乳喂养率及新生儿护理能力,减轻抑郁情绪,提高护理满意度。 展开更多
关键词 个性化健康宣教 初产妇 母乳喂养 新生儿护理能力
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川崎病的临床特征与早期诊断 被引量：9
14
作者 钱新宏 焦西英 +4 位作者 黄莹 潘凯丽 李如英 付蓉 丁翠玲 《山西医科大学学报》 CAS 2006年第6期638-640,共3页
目的探讨川崎病的临床特征及早期诊断的可能性。方法回顾分析90例川崎病患儿的主要临床表现及实验室资料。结果川崎病急性期最常见的临床症状依次是发热(100%)、球结膜充血(83.3%)、皮疹(81.1%)、唇红干裂(80.0%)、手足硬肿(66.7%)、颈... 目的探讨川崎病的临床特征及早期诊断的可能性。方法回顾分析90例川崎病患儿的主要临床表现及实验室资料。结果川崎病急性期最常见的临床症状依次是发热(100%)、球结膜充血(83.3%)、皮疹(81.1%)、唇红干裂(80.0%)、手足硬肿(66.7%)、颈部淋巴结肿大(50.0%)及肛周潮红脱皮(33.3%);外周血白细胞总数、中性粒细胞绝对计数、血沉及C反应蛋白升高者分别为87.8%,82.2%,88.9%及83.3%。结论川崎病急性期主要的临床表现是发热伴皮肤黏膜损害,肛周潮红脱皮有助于早期诊断。外周血中性粒细胞增高伴中毒颗粒,血沉及C反应蛋白明显升高对川崎病的早期诊断有重要参考价值。 展开更多
关键词 黏膜皮肤淋巴结综合征 临床表现 诊断
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小儿B19病毒感染相关性重症血液病51例 被引量：8
15
作者 张国成 曹玉红 +5 位作者 廖清奎 李如英 陈彩平 许东亮 钱新宏 李飚 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期74-77,共4页
目的探讨B19病毒感染相关性小儿重症血液病的临床特征与治疗。方法回顾性总结51例小儿B19病毒感染相关性重症血液病的临床资料 ,分析其治疗与预后。结果检测B19抗原或抗体阳性加B19DNA阳性 ,确定为B19病毒感染的重症血液病患儿51例中 ,... 目的探讨B19病毒感染相关性小儿重症血液病的临床特征与治疗。方法回顾性总结51例小儿B19病毒感染相关性重症血液病的临床资料 ,分析其治疗与预后。结果检测B19抗原或抗体阳性加B19DNA阳性 ,确定为B19病毒感染的重症血液病患儿51例中 ,急性血小板减少性紫癜32例 ,急性再生障碍性贫血9例 (包括纯红细胞再生障碍性贫血3例 ) ,急性白血病合并重度贫血6例 ,溶血性贫血并发急性再障危象3例 ,噬血细胞综合征1例 ;所有患儿均重度或极重度血细胞减少 ,38例合并内脏出血 ,12例合并细菌或真菌感染。经应用大剂量丙种球蛋白 ,同时加强对症治疗与支持疗法、防治严重并发症 ,结果好转和治愈48例 (94.12 % ) ,死亡3例 (5.88 % )。结论B19病毒感染相关性小儿重症血液病应加强抗病毒及止血的治疗。 展开更多
关键词 感染 人细小病毒B19 诊断 治疗
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符为民教授治疗脑病经验精要 被引量：8
16
作者 李如英 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2015年第10期17-19,共3页
符为民教授是第五批全国名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,潜心研究中医脑病30余年,辨治特色鲜明。符为民教授辨证上突出辨虚实、辨痰瘀、辨脏腑三个抓手;治疗上,则注重治瘀、治痰、调脏腑气机三个层面。并研制了"脑血通&qu... 符为民教授是第五批全国名老中医药专家学术经验继承工作指导老师,潜心研究中医脑病30余年,辨治特色鲜明。符为民教授辨证上突出辨虚实、辨痰瘀、辨脏腑三个抓手;治疗上,则注重治瘀、治痰、调脏腑气机三个层面。并研制了"脑血通"颗粒、安脑颗粒、通脑灵合剂等制剂,应用临床,收效颇佳。 展开更多
关键词 脑病 中医药疗法 名医经验
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再生障碍性贫血患者造血细胞因子的研究 被引量：8
17
作者 李如英 钱新宏 +3 位作者 郑跃杰 张国成 焦西英 李佐华 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第4期371-372,共2页
关键词 再生障碍性贫血 细胞因子 造血细胞因子
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不同病室新生儿医院内感染的特点 被引量：8
18
作者 李如英 曹玉红 牛永春 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期805-806,共2页
目的　探讨不同病室新生儿医院内感染的特点及防治。方法　对 1996年 6月～ 2 0 0 2年 6月我院母婴同室新生儿病房及新生儿监护病房住院新生儿 5 2 8例进行医院感染的对比研究。结果　 1.5 2 8例新生儿医院内感染率为 5 .1% (2 7/5 2 8... 目的　探讨不同病室新生儿医院内感染的特点及防治。方法　对 1996年 6月～ 2 0 0 2年 6月我院母婴同室新生儿病房及新生儿监护病房住院新生儿 5 2 8例进行医院感染的对比研究。结果　 1.5 2 8例新生儿医院内感染率为 5 .1% (2 7/5 2 8) ;母婴同室新生儿院内感染率为 5 .5 % (14 /2 5 5 ) ,高于新生儿监护病房的院内感染4 .76 % (13/2 73) (P >0 4 .76 % (13/2 73) (P >0 .0 5 )。 2 .住院 >2周的感染率 (8.5 5 % ,2 0 /2 34)高于住院 1周感染率 (2 .38% ,7/2 94 ) ;低出生体重 (<2kg)的新生儿医院内感染率为 9.6 2 % (5 /5 2 ) ,高于体重≥ 4kg新生儿院内感染率 (4.76 % ,2 /42 ) ,但两组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 3.医院内感染的病原体主要为细菌、霉菌、支原体及病毒感染。 4 .新生儿医院内感染的疾病主要有上呼吸道感染、肺炎、鹅口疮、皮肤感染、结膜炎。结论　不同新生儿病室院内感染的发生率及因素不同。母婴同室增加新生儿院内感染的机率 。 展开更多
关键词 婴儿 新生儿 医院感染 病原体 病室
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床旁超声检查在早产儿PICC尖端定位中的应用 被引量：7
19
作者 程功梅 何金孝 +1 位作者 桑林 李如英 《上海护理》 2016年第5期44-45,共2页
外周静脉置入中心静脉导管（peripherallyinsertedcentralcatheter，PICC）因能较好地保护外周静脉，且留置时间长，操作危险性小、创伤小，而广泛应用于早产儿救治中。
关键词 PICC尖端定位 早产儿 床旁超声检查
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人β-防御素4基因在HEK293细胞中的转染表达 被引量：6
20
作者 曹玉红 成胜权 +3 位作者 张光运 钱新宏 李如英 丁翠玲 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2012年第10期1020-1023,共4页
目的人β-防御素4(humanβ-defensin 4,HBD 4)对多种病原菌有杀伤作用。HBD4的自然表达水平极低,体外获得难度较大且价格昂贵。利用基因工程技术生产重组的HBD4成为研究的焦点。文中旨在构建HBD4真核表达载体,探讨真核细胞表达HBD4的可... 目的人β-防御素4(humanβ-defensin 4,HBD 4)对多种病原菌有杀伤作用。HBD4的自然表达水平极低,体外获得难度较大且价格昂贵。利用基因工程技术生产重组的HBD4成为研究的焦点。文中旨在构建HBD4真核表达载体,探讨真核细胞表达HBD4的可行性。方法用PCR法从已构建的重组克隆载体pMD18-T/HBD4中扩增出HBD4全长编码基因,克隆入真核表达载体pEGFP-N2,构建pEGFP-N2/HBD4重组真核表达载体;通过脂质体转染法将pEGFP-N2/HBD4导入HEK293细胞,采用RT-PCR、荧光显微镜、Western blot检测HBD4的mRNA和蛋白表达情况,并对表达的HBD4进行抗菌活性的初步研究。结果构建的重组真核表达载体pEGFP-N2/HBD4,经酶切鉴定、测序,证实插入的序列与Genebank中的HBD4基因序列完全相同。将pEGFP-N2/HBD4转染HEK293细胞,在转染细胞检测到HBD4mRNA表达。荧光显微镜下可在细胞膜及细胞质中观察到绿色荧光。Western blot分析显示:在pEGFP-N2/HBD4转染的HEK293细胞及细胞培养液中检测到了HBD4蛋白的表达。Kirby—Bauer纸片扩散法证实表达的HBD4蛋白对铜绿假单胞菌具有较强的杀伤作用。结论成功构建了HBD4基因的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达出具有抗菌活性的HBD4多肽。 展开更多
关键词 人β-防御素4 基因克隆 真核表达载体 基因转染
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