改良一步法制备人外周血白细胞线粒体DNA 被引量：12

1

作者 贾立明 叶明福 +7 位作者 刘丽红 孙玉兰 孙恒文 谢启超 李军果 钱桂生 房殿春 胡义德 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第15期1407-1409,共3页

目的　建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法　 5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果　获得的mtDNA样品... 目的　建立从少量外周血中提取白细胞线粒体DNA(mtDNA)的快速、简便方法。方法　 5 8份抗凝血静置后取白细胞层 ,采用碱变性法裂解细胞 ,酚 氯仿 异戊醇抽提 ,RNA酶消化后再抽提及沉淀 ,PCR扩增产物电泳鉴定。结果　获得的mtDNA样品不存在蛋白质等污染 ,用特异性mtDNAPCR引物从 5 8例核酸样品中均能扩增出 15 2 8bp的mtDNA基因片段。结论　改良一步法是一种省时、经济、实用、重复性好。 展开更多

关键词 线粒体DNA 白细胞 抽提

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375例宫颈病变患者高危型人乳头瘤病毒感染的研究 被引量：9

2

作者 李军果 李力 +3 位作者 郭建新 郑英如 郑秀惠 钟小林 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第9期935-936,939,共3页

目的探讨高危型人乳头瘤病毒（high—risk Human papillomavirus，hr-HPV）感染与宫颈病变的关系。方法选择2005年1月～2006年6月间在本科住院患者375例，采用第2代杂交捕获试验（HC-Ⅱ）进行hr-HPV DNA的检测，手术切除或阴道镜下定位... 目的探讨高危型人乳头瘤病毒（high—risk Human papillomavirus，hr-HPV）感染与宫颈病变的关系。方法选择2005年1月～2006年6月间在本科住院患者375例，采用第2代杂交捕获试验（HC-Ⅱ）进行hr-HPV DNA的检测，手术切除或阴道镜下定位活检，以病理学结果为确诊标准。结果hr-HPV检测阳性169例，阳性率45．07％，各种病理类型的宫颈病变中hr-HPV感染率分别为：慢性宫颈炎14．67％（55／229）；宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）50．00％（18／36），包括CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ；宫颈癌（uterine cervix cancer，UCC）87．27％（96／110），包括宫颈鳞癌和宫颈腺癌。随着宫颈病变严重程度的增加，hr-HPV的感染率也增高，它们之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。结论hr-HPV感染与宫颈病变严重程度密切相关；HC-Ⅱ检测hr-HPV有助于UCC及癌前病变的早期筛查和诊断。 展开更多

关键词 宫颈病变 人乳头瘤病毒 第2代杂交捕获试验

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p16^INK4a蛋白在宫颈疾病中的表达特点及其与HPV感染的关系 被引量：7

3

作者 李军果 李力 +2 位作者 郭建新 高奉浔 赵雯 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期928-931,共4页

目的研究伴有高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,hr-HPV)感染及无hr-HPV感染的宫颈癌(cervical cancer,CC)、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义,探... 目的研究伴有高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,hr-HPV)感染及无hr-HPV感染的宫颈癌(cervical cancer,CC)、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义,探讨宫颈癌及癌前病变中p16INK4a蛋白表达与HPV感染的相关性。方法应用免疫组化方法检测126例宫颈疾病(CC40例,CIN67例和宫颈炎19例)组织中p16INK4a蛋白的表达,其中,hr-HPV(+)宫颈疾病89例(CC32例,CIN48例和宫颈炎9例),hr-HPV(-)宫颈疾病37例(CC8例,CIN19例和宫颈炎10例),进行半定量分析及统计学检验。结果40例CC中,p16INK4a全部阳性表达;48例hr-HPV(+)和19例hr-HPV(-)CIN中,p16INK4a阳性表达分别为39例和12例;9例hr-HPV(+)和10例hr-HPV(-)宫颈炎组织中,p16INK4a阳性表达均为4例。hr-HPV(+)或hr-HPV(-)宫颈炎、宫颈上皮内瘤变和宫颈癌组织中p16INK4a蛋白表达水平均依次升高。CC和CIN中p16INK4a蛋白表达与hr-HPV感染相互间无显著相关性(P>0.05)。结论细胞周期抑制蛋白p16INK4a在CC及癌前病变中过表达,且与hr-HPV感染无关,提示p16INK4a蛋白在宫颈癌的发生、发展中所起的作用和作用机制可能与其在其他恶性肿瘤中不同。检测p16INK4a蛋白表达有助于CC的早期诊断。 展开更多

关键词 宫颈癌 免疫组织化学 HPV 蛋白 P16^INK4A

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非小细胞肺癌p14^(ARF) p16^(INK4a)蛋白共表达及其临床意义 被引量：6

4

作者 李军果 胡义德 +5 位作者 叶明福 谢启超 高丽莉 孙玉兰 杨永峰 钱海洪 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第18期1021-1024,共4页

目的:探讨p14ARF、p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达、意义及相关关系。方法:采用免疫组织化学SP方法对103例NSCLC组织中p14ARF和p16INK4a蛋白的表达进行检测。结果:103例NSCLC组织中p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性率分别... 目的:探讨p14ARF、p16INK4a蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达、意义及相关关系。方法:采用免疫组织化学SP方法对103例NSCLC组织中p14ARF和p16INK4a蛋白的表达进行检测。结果:103例NSCLC组织中p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性率分别为70.87%和43.69%,差异有显著性(P<0.01)。其中35例p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性,共阴性率达33.98%(35/103),鳞癌中共阴性率明显高于其它组织类型(P<0.01)。p14ARF、p16INK4a蛋白表达阴性相互间无显著相关性(P>0.05)。临床Ⅲ+Ⅳ期病例两种蛋白表达阴性率明显高于临床Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05)。结论:NSCLC组织p14ARF、p16INK4a蛋白表达共阴性具有明显的组织学类型特异性,两种蛋白阴性表达是各自独立的事件。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 免疫组织化学 蛋白表达 P14^ARF P16^INK4A

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多种试管婴儿技术与妊娠期高血压的相关性研究 被引量：6

5

作者 李军果 周国萍 《中国医刊》 CAS 2016年第9期71-74,共4页

目的探讨不同试管婴儿技术对妊娠期高血压疾病的影响及相关性。方法选取本院2013年6月至2015年6月收治的经试管婴儿技术受孕且终止妊娠的不孕患者600例。按照受精方式的不同分为常规体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization,IVF）组... 目的探讨不同试管婴儿技术对妊娠期高血压疾病的影响及相关性。方法选取本院2013年6月至2015年6月收治的经试管婴儿技术受孕且终止妊娠的不孕患者600例。按照受精方式的不同分为常规体外受精-胚胎移植（in vitro fertilization,IVF）组（342例）,卵胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）组（258例）,按照胚胎转移周期的不同分为新鲜周期进行胚胎移植（简称Fresh）组（407例）,冷冻周期胚胎移植（frozen-thawed embryo transfer,FT）组（193例）。分析不同组患者不孕不育的原因,并分析不同试管婴儿技术对妊娠期高血压疾病的影响。结果所有患者中,管性致不孕的患者有335例,子宫内膜异位患者有75例,排卵障碍有41例,夫精异常患者有136例,其他原因7例,不明原因6例。各组中管性因素导致不孕不育的比例最大,分别为IVF组66.7%,ICSI组41.5%,Fresh组52.1%,FT组63.7%。IVF组患者妊娠期高血压的发病率（2.3%）低于ICSI组（5.8%）,差异具有显著性（χ~2=4.8167,P=0.0282）;IVF组患者子痫前期的发病率（4.97%）低于ICSI组（5.04%）,但差异无显著性（χ~2=0.0014,P=0.9698）。Fresh组妊娠期高血压的发病率（3.93%）与FT组（3.63%）接近,差异无显著性（χ~2=0.0329,P=0.8561）;Fresh组子痫前期的发病率（4.91%）低于FT组（5.18%）,差异无显著性（χ~2=0.0197,P=0.8884）。结论 ICSI受精技术有增加妊娠期高血压疾病的风险,而胚胎进行移植前是否进行冻融与妊娠期高血压无关。 展开更多

关键词 试管婴儿 妊娠期高血压 受精方式 冻融

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细胞周期调控基因INK4a-ARF与肿瘤 被引量：6

6

作者 李军果 孙玉兰 胡义德 《国外医学（肿瘤学分册）》 2004年第2期99-102,共4页

INK4a ARF基因功能的失活与该基因位点的缺失、点突变和 5′ CpG岛异常甲基化密切相关。由于INK4a ARF基因编码的抑癌蛋白 p16 INK4a、p14 ARF分别对cyclinD CDK4 pRb E2F和MDM2 p5 3通路具有关键性调控功能 ,提示其将成为肿瘤基因治... INK4a ARF基因功能的失活与该基因位点的缺失、点突变和 5′ CpG岛异常甲基化密切相关。由于INK4a ARF基因编码的抑癌蛋白 p16 INK4a、p14 ARF分别对cyclinD CDK4 pRb E2F和MDM2 p5 3通路具有关键性调控功能 ,提示其将成为肿瘤基因治疗的重要靶点。 展开更多

关键词 细胞周期 调控基因 INK4a—ARF 肿瘤 基因治疗

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103例非小细胞肺癌p16^(INK4a)蛋白表达及其临床意义 被引量：4

7

作者 胡义德 李军果 +3 位作者 叶明福 贾立明 高丽莉 孙玉兰 《重庆医学》 CAS CSCD 2004年第11期1709-1711,共3页

目的　研究p16 INK4a蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学S P方法检测10 3例NSCLC癌组织标本中 p16 INK4a蛋白表达 ,同时以 2 0例肺部炎症病变组织做对照。结果　 10 3例标本中 ,p16 INK4a阳性表达... 目的　研究p16 INK4a蛋白在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其临床意义。方法　应用免疫组织化学S P方法检测10 3例NSCLC癌组织标本中 p16 INK4a蛋白表达 ,同时以 2 0例肺部炎症病变组织做对照。结果　 10 3例标本中 ,p16 INK4a阳性表达5 8例 ,阴性表达 4 5例 ,表达阴性率为 4 3.6 9% ,其中鳞癌、腺癌、肺泡癌中p16 INK4a表达阴性率分别为 5 8.82 % (2 0 / 34)、39.39%(13/ 33)、33.33% (12 / 36 ) ,且鳞癌与肺泡癌之间p16 INK4a表达阴性率差异有显著意义 (P <0 .0 1)。临床Ⅲ +Ⅳ期病例p16 INK4a蛋白表达阴性率为 6 0 .71% ,明显高于临床Ⅰ +Ⅱ期病例 (35 .14 % ) ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。结论　p16 INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌中常见 ,提示p16 INK4a蛋白表达异常在肺鳞癌的发生、发展中起重要作用 ,它有可能成为预测肺癌患者病程进展的指标之一。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 免疫组织化学 蛋白表达 P16^INK4A

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非小细胞肺癌INK4a和ARF基因甲基化与其蛋白共表达关系的探讨 被引量：3

8

作者 高丽莉 胡义德 +3 位作者 李军果 谢启超 孙恒文 胡中华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期130-133,共4页

目的:分析INK4a和ARF基因启动子甲基化与其蛋白共表达之间的关系。方法:选择前期实验中p14ARF和p16INK4a蛋白共表达阴性的非小细胞肺癌(NSCLC)患者35例,共表达阳性的NSCLC患者20例作为研究对象,分别称为(p14+p16)阴性组和(p14+p16)阳性... 目的:分析INK4a和ARF基因启动子甲基化与其蛋白共表达之间的关系。方法:选择前期实验中p14ARF和p16INK4a蛋白共表达阴性的非小细胞肺癌(NSCLC)患者35例,共表达阳性的NSCLC患者20例作为研究对象,分别称为(p14+p16)阴性组和(p14+p16)阳性组。运用甲基化特异性PCR(MSP)方法对两组患者癌组织INK4a和ARF基因启动子的甲基化状态进行检测。结果:(p14+p16)阴性组有18例发生INK4a基因甲基化,(p14+p16)阳性组有2例发生INK4a基因甲基化,两组差异有显著意义(P<0.01)。(p14+p16)阴性组有8例发生ARF基因启动子甲基化,(p14+p16)阳性组有2例发生ARF基因启动子甲基化,两组差异无显著意义(P>0.05)。INK4a和ARF基因异常甲基化相互之间无显著相关性(P>0.05)。结论:NSCLC患者肺癌组织INK4a基因甲基化是导致p16INK4a蛋白表达阴性的重要机制;INK4a和ARF基因甲基化可能是相对独立的事件。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 INK4a基因 ARF基因 甲基化 甲基化特异性PCR

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HPV16E7基因沉默对宫颈癌细胞系CaSki细胞增殖的影响 被引量：2

9

作者 李军果 李力 《肿瘤学杂志》 CAS 2012年第1期29-33,共5页

[目的]探讨脂质体转染HPV16E7 siRNA对人宫颈癌CaSki细胞增殖的影响。[方法]人工合成抑制HPV16E7基因的siRNA片段,通过脂质体转染到CaSki细胞内,显微镜下观察其形态学变化;流式细胞术检测各组细胞周期变化;RT-PCR检测HPV16E7 mRNA的表达... [目的]探讨脂质体转染HPV16E7 siRNA对人宫颈癌CaSki细胞增殖的影响。[方法]人工合成抑制HPV16E7基因的siRNA片段,通过脂质体转染到CaSki细胞内,显微镜下观察其形态学变化;流式细胞术检测各组细胞周期变化;RT-PCR检测HPV16E7 mRNA的表达;Western blot检测HPV16E7蛋白表达。[结果]转染siRNA后的CaSki细胞,细胞增殖受到显著抑制,HPV16E7 mRNA表达显著下降,HPV16E7蛋白水平显著下降。[结论]应用RNA干扰靶向抑制HPV16E7基因可以显著抑制CaSki细胞增殖。 展开更多

关键词 HPV16E7 SIRNA 宫颈肿瘤

原文传递

非小细胞肺癌Bmi-1、p16^(INK4a)、p14^(ARF)蛋白表达关系研究 被引量：1

10

作者 胡义德 李军果 +5 位作者 胡中华 朱勇 宋宗昌 黄虎 张明慧 文荃 《中华肺部疾病杂志（电子版）》 CAS 2008年第1期95-98,共4页

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)Bmi-1、p16INK4a、p14ARF蛋白表达之间的关系。方法首先采用免疫组织化学S-P方法对123例NSCLC癌组织中p16INK4a和p14ARF蛋白的表达进行检测。然后,以p16INK4a和p14ARF蛋白表达共阴性和共阳性的NSCLC患者癌... 目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)Bmi-1、p16INK4a、p14ARF蛋白表达之间的关系。方法首先采用免疫组织化学S-P方法对123例NSCLC癌组织中p16INK4a和p14ARF蛋白的表达进行检测。然后,以p16INK4a和p14ARF蛋白表达共阴性和共阳性的NSCLC患者癌组织样本为研究对象,分别称为(p16+p14)阴性组和(p16+p14)阳性组,再采用免疫组织化学S-P方法对这些病例癌组织中Bmi-1蛋白的表达进行检测。结果123例NSCLC标本中p16INK4a、p14ARF表达阴性率分别为40.65%(50/123)和72.36%(89/123),两种蛋白表达阴性率差异有非常显著的意义(P<0.01);其中有39例p16INK4a、p14ARF蛋白表达共阴性,表达共阴性率高达31.71%(39/123);还有24例p16INK4a、p14ARF蛋白表达共阳性,表达共阳性率为19.51%(24/123)。(p16+p14)阴性组中有28例显示强阳性或阳性表达Bmi-1蛋白,阳性率达71.79%(28/39),其余11例显示弱阳性或阴性表达Bmi-1蛋白,仅占28.21%(11/39),两者差异有显著意义(P<0.05);(p16+p14)阳性组中有5例显示强阳性或阳性表达Bmi-1蛋白,阳性率仅为20.83%,其余19例显示弱阳性或阴性表达Bmi-1蛋白,占79.17%,两者差异有显著意义(P<0.05)。相关分析结果显示,本组NSCLC癌组织Bmi-1与p16INK4a、p14ARF蛋白表达相互之间有显著相关性(P<0.05)。结论NSCLC癌组织中p16INK4a、p14ARF蛋白表达有较高的阴性率,其原因与Bmi-1蛋白的过表达密切相关。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 免疫组织化学 蛋白表达 BMI-1 P16INK4A P14ARF

原文传递

细胞周期抑制蛋白p16^(INK4a)在宫颈病变中的异常表达 被引量：1

11

作者 李军果 李力 +3 位作者 高奉浔 李增鹏 肖华亮 林俐 《肿瘤学杂志》 CAS 2008年第2期105-108,共4页

[目的]探讨宫颈癌(UCC)、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义。[方法]应用免疫组化方法检测126例宫颈病变(UCC50例、CIN57例和宫颈炎19例)组织中p16INK4a蛋白的表达,进行半定量分析及统计学检验。[结果]50... [目的]探讨宫颈癌(UCC)、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈炎中p16INK4a蛋白表达水平的变化及意义。[方法]应用免疫组化方法检测126例宫颈病变(UCC50例、CIN57例和宫颈炎19例)组织中p16INK4a蛋白的表达,进行半定量分析及统计学检验。[结果]50例UCC中,p16INK4a全部阳性表达;57例CIN中,p16INK4a阳性表达41例,阳性表达率为71.93%,其中CINⅠ,CINⅡ,CINⅢp16INK4a阳性表达率分别为36.84%(7/19)、81.82%(18/22)、100.00%(16/16),且三者间差异有显著性(P<0.05)。19例宫颈炎组织中,p16INK4a阳性表达8例,阳性表达率为42.11%。p16INK4a蛋白在宫颈炎、CIN和UCC组织中表达水平依次升高,且差异有显著性(P<0.05)。[结论]UCC及癌前病变中p16INK4a阳性表达明显高于良性病变。p16INK4a在UCC及癌前病变中过表达,提示其在UCC发生、发展中起重要作用。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 免疫组织化学 P16^INK4A

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p16^(INK4a)和p14^(ARF)蛋白在宫颈癌和肺癌中的差异表达 被引量：1

12

作者 李军果 李力 +2 位作者 胡义德 徐野 郭哓玲 《肿瘤学杂志》 CAS 2010年第10期813-816,共4页

[目的]研究宫颈癌和肺癌中p16INK4a和p14ARF蛋白表达水平的差异及意义。[方法]应用免疫组化方法检测50例宫颈癌和127例肺癌组织中p16INK4a和p14ARF蛋白表达。[结果]50例宫颈癌中,p16INK4a和p14ARF蛋白全部阳性表达;127例肺癌中,p16INK4a... [目的]研究宫颈癌和肺癌中p16INK4a和p14ARF蛋白表达水平的差异及意义。[方法]应用免疫组化方法检测50例宫颈癌和127例肺癌组织中p16INK4a和p14ARF蛋白表达。[结果]50例宫颈癌中,p16INK4a和p14ARF蛋白全部阳性表达;127例肺癌中,p16INK4a和p14ARF蛋白阳性表达率分别为61.42%和30.79%;宫颈癌和肺癌中p16INK4a和p14ARF蛋白表达差异均有显著性(P<0.01)。[结论]p16INK4a和p14ARF蛋白在宫颈癌中过表达,而在肺癌中缺失表达。提示p16INK4a和p14ARF蛋白在宫颈癌和肺癌的发生发展中所起的作用和作用机制可能不同。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 肺肿瘤 免疫组织化学 P16INK4A P14ARF

原文传递

咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护 被引量：2

13

作者 邱实 李军果 +2 位作者 邱倩 陈辉 相子民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第40期5979-5985,共7页

背景:咖啡酸苯乙酯可抑制大鼠脑损伤后的脂质过氧化和脑损伤,但是在帕金森细胞模型中,5-脂氧酶和白三烯的变化规律,以及咖啡酸苯乙酯是否通过抑制鱼藤酮诱导的5-脂氧酶和白三烯变化而发挥对帕金森样损伤的保护作用,仍有待进一步研究。目... 背景:咖啡酸苯乙酯可抑制大鼠脑损伤后的脂质过氧化和脑损伤,但是在帕金森细胞模型中,5-脂氧酶和白三烯的变化规律,以及咖啡酸苯乙酯是否通过抑制鱼藤酮诱导的5-脂氧酶和白三烯变化而发挥对帕金森样损伤的保护作用,仍有待进一步研究。目的:探讨咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的保护作用,同时观察5-脂氧酶是否参与帕金森细胞模型的损伤。方法:(1)取生长状态良好的PC12细胞,分5组培养,分别以0,0.01,0.1,1,10μmol/L鱼藤酮干预,24,48 h后,观察细胞形态及活性变化,选择最佳诱导帕金森细胞模型的鱼藤酮浓度;24 h后,Western法检测5-脂氧酶表达,ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量;(2)取生长状态良好的PC12细胞,分6组培养,以正常培养的细胞为空白对照,其余5分别加入0,0.01,0.1,1,10μmol/L咖啡酸苯乙酯预处理30 min,之后加入1μmol/L鱼藤酮,24 h后,检测细胞活性,ELISA法检测半胱氨酰白三烯生成释放量。结果与结论:(1)0.1-10μmol/L鱼藤酮可诱导PC12细胞损伤,1μmol/L鱼藤酮处理24 h后的细胞形态和细胞存活率变化适度明显,所以选择该条件作为鱼藤酮诱导PC12细胞帕金森样损伤的细胞模型;(2)鱼藤酮呈浓度依赖性增加5-脂氧酶的表达与半胱氨酰白三烯的生成释放;(3)1-10μmol/L咖啡酸苯乙酯可降低鱼藤酮诱导的PC12细胞半胱氨酰白三烯生成释放量增加,呈浓度依赖性抑制鱼藤酮诱导的PC12细胞存活率降低;(4)结果表明,5-脂氧酶参与鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤作用,咖啡酸苯乙酯对鱼藤酮诱导帕金森细胞模型的损伤有明显保护作用。 展开更多

关键词 实验动物 神经损伤与修复动物模型 咖啡酸苯乙酯 5-脂氧酶 国家自然科学基金

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不同HPV感染状态宫颈癌细胞中INK4a表达研究

14

作者 李军果 李力 +1 位作者 徐野 郭晓玲 《肿瘤学杂志》 CAS 2011年第2期81-83,共3页

[目的]探讨不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中INK4a基因的表达情况。[方法]提取细胞总RNA,应用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测宫颈癌细胞CaSki(HPV16感染)、HeLa(HPV18感染)、C-33A(无HPV感染)中INK4a表达水平。[结果]不同HPV感染... [目的]探讨不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中INK4a基因的表达情况。[方法]提取细胞总RNA,应用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测宫颈癌细胞CaSki(HPV16感染)、HeLa(HPV18感染)、C-33A(无HPV感染)中INK4a表达水平。[结果]不同HPV感染状态的宫颈癌细胞CaSki(0.3967±0.0491),HeLa(0.5567±0.1037),C-33A(0.5633±0.0722)中INK4amRNA表达无明显差异(P>0.05)。[结论]不同HPV感染状态的宫颈癌细胞中INK4a表达规律趋于一致。检测INK4a基因表达对于宫颈癌的早期诊断和筛查具有重要意义。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 INK4a基因 HPV RT-PCR CASKI HELA C-33A

原文传递

p14^(ARF)和p16^(INK4a)蛋白共表达状态对非小细胞肺癌术后放化疗及生存的影响

15

作者 高丽莉 胡义德 +2 位作者 李军果 钱频 钱桂生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1039-1041,共3页

目的　探讨p14 ARF蛋白和p16 INK4a蛋白共表达状态对非小细胞肺癌 (NSCLC)术后放化疗及生存的影响。方法　选择经免疫组化SP法检测出的p14 ARF和p16 INK4a蛋白共表达阴性的NSCLC患者 35例 ,共表达阳性患者 2 0例 ,比较两组的临床病理特... 目的　探讨p14 ARF蛋白和p16 INK4a蛋白共表达状态对非小细胞肺癌 (NSCLC)术后放化疗及生存的影响。方法　选择经免疫组化SP法检测出的p14 ARF和p16 INK4a蛋白共表达阴性的NSCLC患者 35例 ,共表达阳性患者 2 0例 ,比较两组的临床病理特征并随访其术后放化疗情况和生存时间。结果　两组患者年龄、肿瘤分期、分化程度、术后复发转移及术后放化疗差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ,而性别、吸烟指数、组织学类型差异显著 (P <0 0 1) ;共表达阴性组患者术后 2、3年及总生存率较阳性组显著降低 (P <0 0 5 )。结论　p14 ARF和p16 INK4a蛋白共表达状态是影响NSCLC病人放化疗及远期生存的因素之一。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 p14^ARF蛋白 p14^ARF蛋白 放化疗 敏感性

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野生型INK4a/ARF基因共转染对A549细胞药物敏感性的影响

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作者 谢启超 胡义德 +3 位作者 刁鑫伟 钱桂生 李军果 王玲俐 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1045-1048,共4页

目的　研究野生型INK4a/ARF基因共转染对人肺腺癌A5 4 9细胞药物敏感性的影响。方法　利用阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将含有人全长野生型INK4a/ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3 p16 INK4a和pcDNA3 p14 ARF同时导入该基因位点缺... 目的　研究野生型INK4a/ARF基因共转染对人肺腺癌A5 4 9细胞药物敏感性的影响。方法　利用阳离子脂质体介导的基因转染技术 ,将含有人全长野生型INK4a/ARF基因的真核表达重组质粒pcDNA3 p16 INK4a和pcDNA3 p14 ARF同时导入该基因位点缺失的人肺腺癌A5 4 9细胞系中 ,确定其编码的蛋白p16 INK4a和p14 ARF稳定表达 ;在设立空白组和空质粒转染组的情况下 ,用 5种不同作用机制的常用肺癌化疗药物 (阿霉素、顺铂、拓朴替康、诺维本和紫杉醇 )作用于转染前后的细胞 ,利用MTT法测定各种不同药物的 5 0 %抑制浓度(IC50 ) ,并测定在该浓度作用下转染细胞的凋亡指数。结果　转染INK4a/ARF基因后 ,A5 4 9细胞对阿霉素和顺铂的IC50 值显著降低 (P <0 0 5 ) ,而拓朴替康、诺维本和紫杉醇的IC50 值无明显变化 (P >0 0 5 ) ;阿霉素和顺铂诱导的凋亡指数也明显高于其他 3种药物。结论　恢复p16 INK4a和p14 ARF蛋白的表达可改变A5 4 9细胞对部分化疗药物的敏感性。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 INK4a/ARF基因 转染 微生物敏感性试验

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细胞周期专职调控基因INK4a-ARF与妇科肿瘤

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作者 李军果 李力 《国外医学（妇产科学分册）》 2007年第4期223-225,共3页

INK4a-ARF基因是新近发现的抑癌基因,包含两个重叠基因:INK4a和ARF,编码产物p16INK4a和p14ARF蛋白,分别对cyclinD-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能,且在大部分恶性肿瘤中缺失表达,其功能失活的机制主要包括该基因的缺失... INK4a-ARF基因是新近发现的抑癌基因,包含两个重叠基因:INK4a和ARF,编码产物p16INK4a和p14ARF蛋白,分别对cyclinD-CDK4-pRb-E2F和MDM2-p53通路具有关键性调控功能,且在大部分恶性肿瘤中缺失表达,其功能失活的机制主要包括该基因的缺失、突变和甲基化。但在妇科肿瘤如宫颈癌及外阴癌中p16INK4a和p14ARF蛋白过表达,提示INK4a-ARF基因在妇科肿瘤发生发展中所起的作用可能与其在其他肿瘤中所起的作用不同,将成为妇科肿瘤检测与预后判断的标志性基因之一。就INK4a-ARF基因与妇科肿瘤关系的研究进展综述。 展开更多

关键词 细胞周期 基因调节 抑癌基因 妇科肿瘤

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肺癌INK4a-ARF基因研究进展

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作者 李军果 叶明福 胡义德 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第6期542-544,共3页

关键词 肺癌 P14^ARF 蛋白 CDK4 MDM2 发生发展 基因研究 调控 P16^INK4A 细胞周期

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聚乙烯醇-卟啉新型纳米颗粒的制备及其光热特性

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作者 李军果 王全晖 +2 位作者 史海江 宋宗昌 罗焱 《重庆医学》 CAS 北大核心 2017年第35期4901-4903,4907,共4页

目的将一定比例的脱镁叶绿酸引入聚乙烯醇-硫辛酸聚合物中,分析其理化性质及光热特性。方法采用"一步法"合成聚乙烯醇-硫辛酸-脱镁叶绿酸(PLP)聚合物,激光粒径测定仪测定PLP纳米颗粒(PLPN)的粒径、多分散系数和ζ电位,电镜下... 目的将一定比例的脱镁叶绿酸引入聚乙烯醇-硫辛酸聚合物中,分析其理化性质及光热特性。方法采用"一步法"合成聚乙烯醇-硫辛酸-脱镁叶绿酸(PLP)聚合物,激光粒径测定仪测定PLP纳米颗粒(PLPN)的粒径、多分散系数和ζ电位,电镜下观察形态,分光光度法和热成像仪初步探索其体外荧光和光热特性;建立卵巢癌裸鼠模型,行初步的体内实验评价。结果合成的PLP聚合物在水相中自组装形成规则的球状纳米颗粒,电镜下呈紧密的球状结构,平均粒径、多分散系数和ζ电位分别为(22.92±9.00)nm、0.117±0.056和(-25.43±0.77)mV;PLPN在磷酸盐缓冲液(PBS)中的荧光强度明显低于十二烷基硫酸钠(SDS)溶液(P<0.05),而近红外光照后温度明显高于SDS溶液(P<0.05);在荷瘤裸鼠模型中,PLPN可靶向聚集在肿瘤部位,近红外光激发后能明显提高肿瘤部位的温度,并能杀伤肿瘤细胞。结论 PLPN发射红色荧光,能靶向聚集在肿瘤部位并行活体显像,且在体内外均具有显著的光热转换特性,在体内能有效抑制肿瘤的生长。 展开更多

关键词 聚乙烯醇 脱镁叶绿酸 纳米粒子 光热转换 卵巢肿瘤

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HPV16 E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒的构建及表达 被引量：2

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作者 郑秀惠 李力 +4 位作者 郭建新 郑英如 李军果 林爽 陈竹钦 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期40-42,共3页

目的构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增HPV16 E6E7片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,构... 目的构建可作为DNA疫苗的包含人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6E7与C3d3融合基因真核表达质粒,并在体外进行表达和鉴定。方法采用PCR技术扩增HPV16 E6E7片段,将该片段插入到pMDT-18载体中后,亚克隆至真核表达载体pSG.SS.C3d3.YL和pSG.SS.YL,构建E6E7与C3d3融合基因及E6E7表达质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL和pSG.SS.E6E7.YL。经限制性酶切鉴定和DNA序列测定后,将重组质粒pSG.SS.E6E7.C3d3.YL、pSG.SS.E6E7.YL转染COS-7细胞,用Western blot及免疫细胞化学技术检测其表达。结果经酶切、DNA测序及转染真核细胞后表达产物的鉴定结果显示,重组质粒构建成功。结论构建的质粒可在真核细胞内正确表达,为其作为DNA疫苗诱导免疫效应的动物实验打下了基础。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 C3D3 DNA疫苗

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