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m6A去甲基化酶ALKBH5在肝细胞癌发生发展中的功能作用
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作者 李倚南 吴俊艺 +4 位作者 吴嘉艺 曾振鑫 傅仰楷 王锦绣 严茂林 《肝胆胰外科杂志》 CAS 2024年第4期218-226,共9页
目的探讨m6A去甲基化酶ALKBH5在肝细胞癌(HCC)发生发展中的功能作用。方法分析公共数据库(TCGA、CPTAC)中ALKBH5在肝癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达情况。采用qRT-PCR检测ALKBH5在正常肝细胞LO2和肝癌细胞系HepG2、Hep3B和Huh7中的表达... 目的探讨m6A去甲基化酶ALKBH5在肝细胞癌(HCC)发生发展中的功能作用。方法分析公共数据库(TCGA、CPTAC)中ALKBH5在肝癌和癌旁组织中的mRNA和蛋白表达情况。采用qRT-PCR检测ALKBH5在正常肝细胞LO2和肝癌细胞系HepG2、Hep3B和Huh7中的表达;采用siRNA干扰技术和慢病毒技术构建稳定敲减的肝癌细胞株,并检测ALKBH5 mRNA及蛋白质水平的干扰效率;随后通过CCK-8、平板克隆、细胞划痕及Transwell等实验研究ALKBH5对HCC增殖活性及迁移、侵袭能力的影响。结果对TCGA、CPTAC数据库分析显示,相比于癌旁组织,ALKBH5在肝癌组织中的mRNA[(5.78±0.62)vs(5.41±0.25)]和蛋白表达[(0.09±0.35)vs(-0.01±0.16)]水平呈高表达。ALKBH5在正常肝细胞系LO2(1.0±0.1)中的表达显著低于肝癌细胞Hep3B(1430.7±103.9)、Huh7(1515.6±162.4)和HepG2(311.0±29.6)。通过慢病毒法成功构建ALKBH5稳定敲减的Hep3B、Huh7肝癌细胞株。抑制ALKBH5的表达后,Hep3B和Huh7细胞的增殖活性、迁移和侵袭能力均明显减弱(P<0.05)。结论ALKBH5在肝癌细胞中呈高表达,低表达ALKBH5后,对HCC的恶性生物学行为具有抑制作用,但是ALKBH5在HCC中其他的生物学功能及其关联的调控网络仍需进一步探讨。 展开更多
关键词 肝细胞癌 N6-甲基腺苷 RNA去甲基化酶 ALKBH5 细胞增殖
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