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Single cell atlas of developing mouse dental germs reveals populations of CD24^(+)and Plac8^(+)odontogenic cells 被引量:5
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作者 Yaofeng Wang Yifan Zhao +18 位作者 Shubin Chen Xiaoming Chen Yanmei Zhang Hong Chen Yuansong Liao Jiashu Zhang Di Wu Hongxing Chu Hongying Huang Caixia Wu Shijuan Huang Huichao Xu Bei Jia Jie Liu Bo Feng Zhonghan Li Dajiang Qin Duanqing Pei Jinglei Cai 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2022年第11期1154-1169,共16页
The spatiotemporal relationships in high-resolution during odontogenesis remain poorly understood.We report a cell lineage and atlas of developing mouse teeth.We performed a large-scale(92,688 cells)single cell RNA se... The spatiotemporal relationships in high-resolution during odontogenesis remain poorly understood.We report a cell lineage and atlas of developing mouse teeth.We performed a large-scale(92,688 cells)single cell RNA sequencing,tracing the cell trajectories during odontogenesis from embryonic days 10.5 to 16.5.Combined with an assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,our results suggest that mesenchymal cells show the specific transcriptome profiles to distinguish the tooth types.Subsequently,we identified key gene regulatory networks in teeth and bone formation and uncovered spatiotemporal patterns of odontogenic mesenchymal cells.CD24^(+)and Plac8^(+)cells from the mesenchyme at the bell stage were distributed in the upper half and preodontoblast layer of the dental papilla,respectively,which could individually induce nonodontogenic epithelia to form tooth-like structures.Specifically,the Plac8^(+)tissue we discovered is the smallest piece with the most homogenous cells that could induce tooth regeneration to date.Our work reveals previously unknown heterogeneity and spatiotemporal patterns of tooth germs that may lead to tooth regeneration for regenerative dentistry. 展开更多
关键词 Single cell RNA-seq Dental germ development Spatiotemporal pattern ODONTOGENESIS CD24^(+)odontogenic cells Plac8^(+)odontogenic cells
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聚乙烯编织物Coverlys TF150^(®)覆盖对‘蜜光’葡萄果实品质的影响 被引量:2
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作者 李中 唐美玲 +4 位作者 郑秋玲 刘明慧 康慧 高振 杜远鹏 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1073-1084,共12页
以欧美杂交种葡萄‘蜜光’为试材,探究聚乙烯(PE)编织物Coverlys TF150^(®)材质的避雨棚膜对树冠和果实微域环境及果实品质的影响。连续两年的试验结果表明:CoverlysTF150^(®)透光率比聚烯烃(PO)膜低11.91%,降低了果面微域温... 以欧美杂交种葡萄‘蜜光’为试材,探究聚乙烯(PE)编织物Coverlys TF150^(®)材质的避雨棚膜对树冠和果实微域环境及果实品质的影响。连续两年的试验结果表明:CoverlysTF150^(®)透光率比聚烯烃(PO)膜低11.91%,降低了果面微域温湿度,缓解了高温和强光胁迫。Coverlys TF150^(®)覆盖提高了成熟期果实大小、可溶性固形物、花色苷、总酚、类黄酮和黄烷醇含量,降低了可滴定酸含量。2020和2021年果实百粒质量分别增加2.15%和2.46%,果实可溶性固形物含量分别提高3.70%和3.04%,果实可滴定酸分别降低17.90%和10.53%,果实花色苷含量分别提高18.33%和11.91%,总酚含量分别提高23.30%和13.07%,类黄酮含量分别提高24.00%和19.43%,黄烷醇含量分别提高18.20%和15.58%。CoverlysTF150^(®)覆盖提高了葡萄果实中萜烯类香气物质含量,尤其是里那醇含量,降低了C6醛类如己醛的含量。 展开更多
关键词 葡萄 避雨栽培 聚乙烯编织物Coverlys TF150^(®) 微域环境 果实品质
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避雨棚膜Coverlys TF150■对葡萄植株生长发育及光合特性的影响 被引量:1
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作者 李中 刘明慧 +4 位作者 唐美玲 郑秋玲 徐鲁成 高振 杜远鹏 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1171-1179,共9页
【目的】探究避雨棚膜Coverlys TF150■对葡萄植株生长发育及光合特性的影响。【方法】以1年生巨峰和赤霞珠葡萄盆栽自根苗为试材,在盆栽苗上方设置Coverlys TF150■和PO膜材料避雨棚。【结果】与PO膜相比,Coverlys TF150■降低了光照度... 【目的】探究避雨棚膜Coverlys TF150■对葡萄植株生长发育及光合特性的影响。【方法】以1年生巨峰和赤霞珠葡萄盆栽自根苗为试材,在盆栽苗上方设置Coverlys TF150■和PO膜材料避雨棚。【结果】与PO膜相比,Coverlys TF150■降低了光照度,透射率比PO膜低8.82%,降低了08:00和16:00赤霞珠和巨峰叶片最大光化学效率(F_(v)/F_(m))和光合能力,缓解了强光胁迫对葡萄造成的伤害,10:00—14:00 Coverlys TF150■下赤霞珠和巨峰叶片F_(v)/F_(m)降幅较小,增加了叶绿素吸收的光能用于光化学反应的比例,有利于电子传递的进行;显著提高了10:00—14:00赤霞珠和巨峰叶片净光合速率(P_(n)),缓解了“光合午休”,净光合速率日变化面积分别比PO膜高13.80%和14.39%,胞间二氧化碳浓度(C_(i))、气孔导度(G_(s))以及蒸腾速率(T_(r))均有一定程度的提升;Coverlys TF150■显著提高了赤霞珠和巨峰叶片质量、面积和叶绿素含量及植株生物量,促进了新梢生长,提高了根冠比与枝条可溶性糖含量、淀粉含量。【结论】Coverlys TF150■较PO膜提高了葡萄叶片光合能力,减轻了“光合午休”,有利于葡萄植株生长发育,促进了枝条贮藏营养的积累。 展开更多
关键词 葡萄 避雨棚膜 光合作用 叶绿素荧光 生物量 生长发育
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基于PiggyBac转座系统的低溢漏诱导型Tet-On过表达体系的建立及应用
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作者 张柏权 李中 殷旖珂 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期165-172,共8页
为避免诱导基因稳定表达的Tet-On诱导表达系统溢漏表达,实现简便且高效的外源基因稳定诱导表达,本研究拟在Tet-On调控的转录水平基础上,将基于稳定配体Shield-1的不稳定结构域FK506结合蛋白引入目的基因的N端,从蛋白水平控制其本底表达... 为避免诱导基因稳定表达的Tet-On诱导表达系统溢漏表达,实现简便且高效的外源基因稳定诱导表达,本研究拟在Tet-On调控的转录水平基础上,将基于稳定配体Shield-1的不稳定结构域FK506结合蛋白引入目的基因的N端,从蛋白水平控制其本底表达水平.为验证该系统的效果,本研究以荧光蛋白TdTomato为报告基因,经流式分析结果证明优化后的体系较原体系的溢漏表达在蛋白水平上降低7倍左右.将该系统应用于基于小鼠胚胎干细胞的体外牙向分化模型,在诱导因子Dox和稳定配体Shield-1的协同作用下,诱导表达牙齿发育相关转录因子Hand2提高了牙向分化诱导的完成度. 展开更多
关键词 PiggyBac转座系统 Tet-on诱导型过表达系统 溢漏表达 不稳定结构域 稳定配体Shield-1
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基于核酶的自剪切sgRNA及其在基因编辑中的应用 被引量:4
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作者 单策 李中 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期345-350,共6页
为减少在CRISPR/Cas9基因编缉系统中,sgRNA通常由Ⅲ型启动子持续转录产生,Ⅲ型启动子不易控制,sgRNA持续表达又容易产生细胞毒性这一缺陷,本文拟建立由Ⅱ型启动子转录,并由内含子中释放sgRNA的方法.我们在sgRNA的两端设计了三种"核... 为减少在CRISPR/Cas9基因编缉系统中,sgRNA通常由Ⅲ型启动子持续转录产生,Ⅲ型启动子不易控制,sgRNA持续表达又容易产生细胞毒性这一缺陷,本文拟建立由Ⅱ型启动子转录,并由内含子中释放sgRNA的方法.我们在sgRNA的两端设计了三种"核酶-sgRNA-核酶"的组合,通过核酶的自剪切作用实现sgRNA的释放.实验结果表明,HHRz-sgRNA-HDVRz的设计能够正确的从内含子中释放sgRNA,并且该sgRNA在构建的copGFP敲除模型中能够实现有效的基因编辑.这一发现证明在哺乳动物细胞中利用Ⅱ型启动子,在核酶和内含子剪切的协助下可以实现sgRNA的表达,这为Cas9和sgRNA整合在一个Ⅱ型启动子之下实现组织特异性和药物诱导性表达提供了基础. 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9系统 内含子 核酶 sgRNA
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不同葡萄品种叶片对温光胁迫的生理响应 被引量:1
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作者 李中 张成超 +2 位作者 翟衡 高振 杜远鹏 《中国果树》 北大核心 2022年第2期43-47,59,共6页
以欧亚种(美乐、品丽珠)、欧美杂交种(夏黑)以及种间杂交种(香百川、福克、摩尔多瓦)葡萄为试材,进行不同温度(34、40.5、47℃)与光强(800、1200、1600μmol·m^(-2)·s^(-1))组合处理,测定叶片的荧光参数。结果表明:强光(1600... 以欧亚种(美乐、品丽珠)、欧美杂交种(夏黑)以及种间杂交种(香百川、福克、摩尔多瓦)葡萄为试材,进行不同温度(34、40.5、47℃)与光强(800、1200、1600μmol·m^(-2)·s^(-1))组合处理,测定叶片的荧光参数。结果表明:强光(1600μmol·m^(-2)·s^(-1))与47℃温度组合时,Y(Ⅱ)(PSⅡ有效量子效率)、Pm(光系统Ⅰ最大量子产额)、φPo(PSⅡ最大光化学效率)、ΨEo(吸收光能用于电子传递的量子产额)、ETo/CSo(单位面积叶面积上吸收的光能用于电子传递的能量)、Plabs(光合性能指数)均显著降低,VJ(J点的相对可变荧光)、NPQ(非光化学淬灭系数)均显著提高;欧亚种(美乐、品丽珠)的Y(Ⅱ)、Pm、Plabs、ETo/CSo、φPo和ΨEo均显著高于其他品种,香百川的NPQ显著高于其他品种。综上,种间杂交种(香百川、福克、摩尔多瓦)耐高温和强光的能力较弱,欧美杂交种(夏黑)居中,欧亚种(美乐、品丽珠)耐高温和强光的能力较强。 展开更多
关键词 葡萄 品种 叶片 高温 强光 叶绿素荧光
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根区高温胁迫下不同空气温度对葡萄叶片PSⅡ活性的影响及恢复情况 被引量:1
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作者 王浩 李中 +5 位作者 徐鲁成 王明 康慧 姚玉新 杜远鹏 高振 《中国果树》 北大核心 2022年第4期23-28,52,共7页
为明确不同空气温度协同根区高温胁迫对葡萄叶片PSⅡ活性及其恢复的影响,以胁迫处理前生长环境30/25℃气温/根区温度为对照(CK),设置30/35℃(T1)、35/35℃(T2)、40/35℃(T3)气温/根区温度3个处理,处理完成后在30/35℃的环境中进行3 h的... 为明确不同空气温度协同根区高温胁迫对葡萄叶片PSⅡ活性及其恢复的影响,以胁迫处理前生长环境30/25℃气温/根区温度为对照(CK),设置30/35℃(T1)、35/35℃(T2)、40/35℃(T3)气温/根区温度3个处理,处理完成后在30/35℃的环境中进行3 h的暗恢复。结果表明,相较于CK 3个处理叶片PSⅡ的活性均显著下降,气温越高PSⅡ受到的损伤越严重,其中以T3处理最为明显。经过3 h暗恢复后T1、T2处理PSⅡ活性恢复明显;暗恢复后T3处理F_(v)/F_(m)、RC/CS_(m)、W_(k)、ABS/CS_(m)、TR_(o)/CS_(m)均有明显的回升,另外Y(NO)值相较于恢复前显著下降,而Y(NPQ)值较恢复前上升,表明T3处理PSⅡ活性也有一定的恢复,但φ_(Eo)、V_(j)、ET_(o)/CS_(m)无明显的回升趋势。综上,T1、T2、T3处理均显著降低了葡萄叶片PSⅡ的活性,在适宜气温下经过3 h的暗恢复后,T1、T2处理PSⅡ活性能较快恢复,而T3处理PSⅡ受体侧受到的损伤在短时间内不能够恢复。 展开更多
关键词 葡萄 根区高温 叶绿素荧光 PSⅡ活性
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基于CRISPR/Cpf1系统下的诱导型多基因激活体系的建立
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作者 黄秋月 李中 殷旖珂 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期160-164,共5页
为开发高效率的内源多基因激活工具,利用CRISPR/Cpf1系统能够促使pre-crRNA中多个crRNA自我剪切和释放的特性,将As/Fn/LbCpf1的核酸酶区域定点突变形成dCpf1,并在C端和N端分别引入了VPR三元转录激活域和不稳定结构域(DD-domain)、四环... 为开发高效率的内源多基因激活工具,利用CRISPR/Cpf1系统能够促使pre-crRNA中多个crRNA自我剪切和释放的特性,将As/Fn/LbCpf1的核酸酶区域定点突变形成dCpf1,并在C端和N端分别引入了VPR三元转录激活域和不稳定结构域(DD-domain)、四环素控制的操纵子,构建了TRE3G-DD-dCpf1-VPR激活系统.结果显示,Oct4基因的转录水平提升高达104倍,且Myod1、Oct4基因的转录水平分别在Dox和TMP单药的控制下,能够实现不同程度的转录水平的提升,在加双药的条件下Myod1、Oct4基因可分别提高80、120多倍.证明该系统能够通过靶向DNA快捷、高效的进行诱导内源性多基因激活. 展开更多
关键词 CRISPR/Cpf1系统 诱导性 多基因激活
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