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银屑病患者Th17和Treg细胞及其相关细胞因子的表达 被引量:19
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作者 杨婷婷 王青 +2 位作者 李志 敬爱 《检验医学》 CAS 2015年第7期715-719,共5页
目的探讨银屑病患者辅助性T细胞17(Th17)和调节性T(Treg)细胞及其相关因子表达的临床意义。方法用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测维甲酸相关... 目的探讨银屑病患者辅助性T细胞17(Th17)和调节性T(Treg)细胞及其相关因子表达的临床意义。方法用流式细胞术检测28例轻度和25例重度银屑病患者及25名健康对照者外周血中Th17和Treg细胞的比例;用逆转录聚合酶链反应(PCR)检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和抗人叉头状转录因子(Foxp3)mRNA的表达;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆Th17和Treg相关细胞因子白细胞介素17(IL-17)和转化生长因子β(TGF-β)的水平。结果与健康对照组比较,银屑病患者组Th17细胞比例、RORγt的mRNA水平及IL-17的浓度显著上升,且重度组显著高于轻度组(P<0.05);而重度银屑病患者Treg细胞、Foxp3 mRNA和血浆TGF-β浓度均较健康对照组和轻度组显著降低(P<0.05)。结论 Th17和Treg细胞的比例及其相关因子的表达可作为银屑病病情进展的标志。 展开更多
关键词 辅助性T细胞17 调节性T细胞 银屑病
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HGT KAPs基因家族在辽宁绒山羊皮肤毛囊中的表达研究 被引量:7
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作者 金梅 王瑞 +3 位作者 王婧 敬爱 赵凤琴 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2017年第2期40-46,共7页
为进一步探索高甘氨酸/酪氨酸角蛋白关联蛋白基因家族(HGT KAPs)与辽宁绒山羊羊绒品质——绒毛纤维直径的关系,本研究运用半定量RT-PCR检测KAP6-1.2、KAP6.2、KAP7.1、KAP8.1和KAP8.2在皮肤及各组织中的表达,通过原位杂交对其进行定位分... 为进一步探索高甘氨酸/酪氨酸角蛋白关联蛋白基因家族(HGT KAPs)与辽宁绒山羊羊绒品质——绒毛纤维直径的关系,本研究运用半定量RT-PCR检测KAP6-1.2、KAP6.2、KAP7.1、KAP8.1和KAP8.2在皮肤及各组织中的表达,通过原位杂交对其进行定位分析,采用实时荧光定量PCR检测兴盛期、退行期基因的相对表达量。结果表明:5个基因特异地表达于皮肤,在初、次级毛囊的皮质层、内根鞘中有明显的表达信号。KAP6-1.2和KAP8.1在兴盛期初次级毛囊的表达量差异不显著,KAP6.2在兴盛期、退行期初级毛囊的表达量均高于次级毛囊,而KAP7.1、KAP8.2在兴盛期次级毛囊的表达量高于初级毛囊,而退行期与之相反。因此推测,HGT KAPs基因家族在调控辽宁绒山羊绒毛纤维直径方面具有重要的作用,是编码羊绒结构蛋白的基因。 展开更多
关键词 辽宁绒山羊 HGT KAPs基因 RT-PCR 原位杂交 实时荧光定量PCR
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当前高师本科生物教育专业实验教学存在的问题及对策 被引量:7
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作者 敬爱 姜长阳 《教育教学论坛》 2013年第5期242-244,共3页
为加强高师生物教育专业本科学生的实验教学,提出了目前高师生物教育专业实验教学存在的问题,以及产生的原因,指出了解决问题的对策。并对实验教学采用多项技能考试法,用一种材料做多个实验等解决方法进行了探索研究,取得了较理想的成果。
关键词 高师 生物教育 实验教学 问题
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ToMMV病残体中病毒存活力及其传病作用
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作者 郭雨晴 +4 位作者 丁爱芳 敬爱 杨柳 季英华 李硕 《江西农业学报》 CAS 2024年第2期41-46,共6页
因番茄斑驳花叶病毒(ToMMV)寄主范围广,传染性和致病力强,以ToMMV为对象,对其产生的植株病残体进行了病毒分布和存活时间检测、侵染活性分析以及传毒作用测试。结果表明:烟草植株病残体的叶、茎、根中均含有病毒,ToMMV可在病残体存活较... 因番茄斑驳花叶病毒(ToMMV)寄主范围广,传染性和致病力强,以ToMMV为对象,对其产生的植株病残体进行了病毒分布和存活时间检测、侵染活性分析以及传毒作用测试。结果表明:烟草植株病残体的叶、茎、根中均含有病毒,ToMMV可在病残体存活较长时间,病死枯叶室温存放90 d后病毒依然存在,且仍保持侵染活性,刀片刮划枯叶模拟农事操作接毒后发现病残体具有传毒作用;ToMMV可在病残体中长时间保持侵染活力,田间病残体很可能会成为下茬作物的初侵染源;土壤无直接传毒作用,但混有病残体的土壤也可成为初侵染源,且沾染在农具表面的离体病毒依然可以在一定时间内维持侵染活力,成为潜在的初侵染源。综上,清除植株病残体(减少初侵染源)是预防和控制ToMMV传播和扩散的重要环节,生产上应给予充分重视。 展开更多
关键词 番茄斑驳花叶病毒 病残体 存活力 传病作用
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被动吸烟对小白鼠睾丸形态学上的影响 被引量:5
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作者 张永芳 敬爱 +2 位作者 张迪 张春雨 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第6期51-52,55,共3页
以研究被动吸烟对小白鼠睾丸形态学上的影响为题,探究其对人体睾丸的影响。实验用香烟的烟雾来染毒小白鼠30d,最后对小白鼠进行解剖,取出其睾丸并制成石蜡切片,观察和分析被动吸烟对小白鼠睾丸形态学上的影响。结果表明,睾丸生精小管间... 以研究被动吸烟对小白鼠睾丸形态学上的影响为题,探究其对人体睾丸的影响。实验用香烟的烟雾来染毒小白鼠30d,最后对小白鼠进行解剖,取出其睾丸并制成石蜡切片,观察和分析被动吸烟对小白鼠睾丸形态学上的影响。结果表明,睾丸生精小管间的结缔组织变薄且不完整,各级生精细胞均遭到不同程度的破坏,出现有头无尾的畸形精子,睾丸间质细胞模糊甚至消失,支持细胞结构变得松散。同时还发现,睾丸的受损程度与染毒频率成正比的现象。 展开更多
关键词 被动吸烟 小白鼠 睾丸
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基于原子发射光谱法的钠气溶胶在线监测装置工程化应用研究
6
作者 王荣东 杜海鸥 +4 位作者 杨燕婷 王国芝 韩新梅 申凤阳 《核科学与工程》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期437-442,共6页
钠气溶胶是钠冷快堆出现钠泄漏及钠火工况时产生的特征性产物,空气中存在的极早期微量钠气溶胶监测对相关事故监测和事故处置意义重大。为了解决工程应用领域钠气溶胶在线监测手段空白问题,研制了一款基于原子发射光谱法的钠气溶胶在线... 钠气溶胶是钠冷快堆出现钠泄漏及钠火工况时产生的特征性产物,空气中存在的极早期微量钠气溶胶监测对相关事故监测和事故处置意义重大。为了解决工程应用领域钠气溶胶在线监测手段空白问题,研制了一款基于原子发射光谱法的钠气溶胶在线监测装置,并以该装置为主体设计了一套面向工程应用的探测系统,并开展了少量真实钠气溶胶环境、钠泄漏钠火工况下的系统运行试验。结果表明,钠气溶胶在线监测系统对真实钠燃烧产生的钠气溶胶同样具有采样和分析检测功能,采样设计满足探测器分析需求,监测系统对钠火产生的钠气溶胶响应迅速、灵敏,具备早期探测钠泄漏、钠火的能力,并实现了联锁报警等系统功能,具备了工程化应用前景和条件。 展开更多
关键词 钠气溶胶 在线监测 工程应用 探测系统
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钠基纳米流体中钠原子吸附行为特性模拟计算
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作者 李春晖 +3 位作者 阿不都赛米·亚库甫 张智刚 王荣东 矫彩山 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1912-1919,共8页
钠基纳米流体利用过渡金属纳米颗粒吸附钠原子的性质,有效降低了钠原子的反应性,进而有效抑制钠火及钠水事故严重性,但目前相关吸附行为及规律尚不明确。研究基于密度泛函理论和电子结构分析,计算分析了钛、铁和铜纳米团簇(TM_(n),TM=Ti... 钠基纳米流体利用过渡金属纳米颗粒吸附钠原子的性质,有效降低了钠原子的反应性,进而有效抑制钠火及钠水事故严重性,但目前相关吸附行为及规律尚不明确。研究基于密度泛函理论和电子结构分析,计算分析了钛、铁和铜纳米团簇(TM_(n),TM=Ti、Fe、Cu,n=2~13)及其与钠原子间形成复合物(Na-TM_(n))的结构和性质,分析了TM_(n)的稳定性以及其与Na原子间相互作用。结果表明,Ti_(n)具有最高的稳定性,但其吸附钠原子的能力低于Fe_(n)和Cu_(n)。钠原子主要通过范德华作用吸附于TM_(n)表面,且两者间的电荷转移行为使得TM_(n)带负电荷。 展开更多
关键词 钠冷快堆 纳米流体 过渡金属 计算化学 团簇
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宏病毒组测序检测豆蚜田间种群病毒种类
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作者 靳道然 +3 位作者 敬爱 季英华 孙枫 李硕 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2023年第3期191-198,共8页
为探究蚜虫体内携带的病毒种类,采集江苏地区豆蚜田间种群,鉴定种类后,提取豆蚜总RNA,以片段化的mRNA为模板构建测序文库,利用宏病毒组测序技术检测分析豆蚜体内的病毒种类,并对获得的2个新病毒进行检测鉴定。结果显示,测序数据经拼接... 为探究蚜虫体内携带的病毒种类,采集江苏地区豆蚜田间种群,鉴定种类后,提取豆蚜总RNA,以片段化的mRNA为模板构建测序文库,利用宏病毒组测序技术检测分析豆蚜体内的病毒种类,并对获得的2个新病毒进行检测鉴定。结果显示,测序数据经拼接、比对和分类注释,最终共得到病毒序列177条,与24种病毒序列一致或同源性较高,包括5种植物病毒(属于5个病毒科)和19种昆虫病毒(涉及9个科和6种暂未分类病毒);对植物病毒中测序丰度最高的种类进行基因检测,获得序列经Blast比对,与其同源性较高的病毒均来自细胞质弹状病毒属,并且它们具有相同的保守区,确定该病毒为一种新的细胞质弹状病毒,暂命名为Aphis craccivoraassociated rhabdovirus(AcARV);基于病毒L蛋白系统进化分析显示,AcARV与水稻条纹花叶病毒(RSMV)构成最小分支,说明这2种病毒在进化上最为近缘;鉴定的多数昆虫病毒种类在蚜虫中鲜有报道;通过RT-PCR和蛋白免疫印迹在豆蚜体内均检测出昆虫病毒(HiPV)衣壳蛋白VP1,证实了HiPV对豆蚜的感染,这是首次在蚜虫体内发现HiPV,HiPV豆蚜分离物VP1基因与日本、江苏灰飞虱分离物核苷酸同源性分别为95.5%,99.0%。研究结果表明,豆蚜体内携带多种植物病毒,并含有一种新的弹状病毒AcARV,同时,豆蚜体内昆虫病毒种类非常丰富,HiPV可感染蚜虫。 展开更多
关键词 豆蚜 病毒种类 宏病毒组测序 细胞质弹状病毒 HiPV病毒
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原核表达c-myc蛋白的多克隆抗体制备 被引量:3
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作者 孙慧慧 敬爱 +1 位作者 李文哲 《安徽农学通报》 2011年第1期56-58,共3页
探讨利用小鼠制备抗人c-myc蛋白多克隆抗体的方法。利用含PET28a/c-myc质粒的E.coliBL21,对c-myc蛋白进行原核表达,并进行纯化。Western Blot结果只出现一条62KDa大小的特异性目的蛋白条带。用原核表达的c-myc蛋白抗原免疫5只Balb/c小鼠... 探讨利用小鼠制备抗人c-myc蛋白多克隆抗体的方法。利用含PET28a/c-myc质粒的E.coliBL21,对c-myc蛋白进行原核表达,并进行纯化。Western Blot结果只出现一条62KDa大小的特异性目的蛋白条带。用原核表达的c-myc蛋白抗原免疫5只Balb/c小鼠,最终免疫后的第7d采血,并对其血清效价进行ELISA(Enzyme-linked im-munosorbnent assay)测定,抗血清达1∶640000。本实验结果为c-myc单克隆抗体制备和肿瘤诊断试剂盒的研发提供基础实验数据。 展开更多
关键词 c—myc 免疫 ELISA
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C-myc单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:3
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作者 孙慧慧 王旭 +6 位作者 王惠国 谭建华 敬爱 马彪 刘庆平 李文哲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期688-691,共4页
目的制备与鉴定鼠抗C-myc蛋白单克隆抗体。方法利用C-myc蛋白做免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA法筛选、有限稀释法克隆、单克隆抗体Ig亚型鉴定,获得2株能够稳定分泌抗C-myc特异性抗... 目的制备与鉴定鼠抗C-myc蛋白单克隆抗体。方法利用C-myc蛋白做免疫原免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,经间接ELISA法筛选、有限稀释法克隆、单克隆抗体Ig亚型鉴定,获得2株能够稳定分泌抗C-myc特异性抗体的杂交瘤细胞株,再将杂交瘤细胞注射入小鼠腹腔诱使小鼠产生腹水。结果获得2株可稳定分泌抗C-myc抗体的杂交瘤细胞株,命名为SHH-1H11,SHH-2A9,Ig亚型分别为IgG1亚类和IgM。细胞培养上清效价分别为1:10240、1:5 120;小鼠腹水效价分别为1:64 000、1:32 000。结论制备的C-myc单克隆抗体仅与C-myc蛋白反应,与其他蛋白没有交叉反应,表明获得的单克隆抗体的特异性很高。 展开更多
关键词 C-MYC 单克隆抗体 制备 鉴定
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桥本甲状腺炎患者外周血Th17与Th1细胞及其相关因子表达水平研究 被引量:3
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作者 杨婷婷 敬爱 +2 位作者 李志 徐维家 《国际检验医学杂志》 CAS 2012年第23期2830-2831,共2页
目的研究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中Th17与Th1细胞及其因子的表达情况及其意义。方法流式细胞方法检测42例HT患者和20例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Th1细胞的比例,ELISA检测血清中相关细胞因子IL-17及IFN-γ的含量。结... 目的研究桥本甲状腺炎(HT)患者外周血中Th17与Th1细胞及其因子的表达情况及其意义。方法流式细胞方法检测42例HT患者和20例健康对照者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17和Th1细胞的比例,ELISA检测血清中相关细胞因子IL-17及IFN-γ的含量。结果 HT患者PBMC中Th17比例显著高于对照组(P<0.01),Th1细胞也高于对照组(P<0.05);此外,HT患者血清中IL-17和IFN-γ的含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Th17和Th1细胞可能在HT发病机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 甲状腺炎 自身免疫性 T淋巴细胞亚群 血液
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快堆严重事故钠燃烧过程裂变产物释放模拟试验研究
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作者 王荣东 姚泽文 +3 位作者 阿不都赛米·亚库甫 韩新梅 张显 《核安全》 2023年第3期60-66,共7页
钠燃烧过程产生的裂变产物及钠气溶胶迁移是快堆严重事故重要的源项之一。本研究对钠燃烧过程裂变产物随钠蒸汽和钠气溶胶迁移的行为进行分析,针对钠蒸发作用下裂变产物释放、钠燃烧作用下裂变产物释放以及气相空间气溶胶迁移行为分别... 钠燃烧过程产生的裂变产物及钠气溶胶迁移是快堆严重事故重要的源项之一。本研究对钠燃烧过程裂变产物随钠蒸汽和钠气溶胶迁移的行为进行分析,针对钠蒸发作用下裂变产物释放、钠燃烧作用下裂变产物释放以及气相空间气溶胶迁移行为分别提出了物理模型,并在确定计算方法的基础上通过CFD软件建模进行了仿真计算,最后通过开展小规模钠燃烧试验,获取了真实钠燃烧过程裂变产物沉降数据,对计算模型进行了修正和补充。试验数据与仿真计算结果表明,气溶胶迁移模型能够较好地表征裂变产物及钠气溶胶迁移行为,钠燃烧作用下裂变产物的释放系数为10-3时计算结果与试验结果较吻合。 展开更多
关键词 钠燃烧 钠气溶胶 裂变产物 迁移系数
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钠冷快堆严重事故钠燃烧过程裂变产物释放概念模型建立
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作者 邵一穷 王荣东 +3 位作者 张显 姚泽文 阿不都赛米·亚库甫 《科技资讯》 2023年第7期201-204,共4页
钠冷快堆严重事故分析是了解事故进程与进行事故预防的重要手段。该文以钠冷快堆严重事故工况下伴随着钠燃烧过程的放射性裂变产物释放为研究对象,通过对物理过程、物理模型进行分析,建立了钠燃烧过程中裂变产物释放的概念模型,在此基础... 钠冷快堆严重事故分析是了解事故进程与进行事故预防的重要手段。该文以钠冷快堆严重事故工况下伴随着钠燃烧过程的放射性裂变产物释放为研究对象,通过对物理过程、物理模型进行分析,建立了钠燃烧过程中裂变产物释放的概念模型,在此基础上,进一步讨论了影响钠气溶胶颗粒与裂变产物释放、扩散、沉降行为的因素与规律。 展开更多
关键词 钠冷快堆 严重事故 模型 裂变产物 钠气溶胶
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利用小RNA深度测序技术检测灰飞虱病毒种类 被引量:1
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作者 张璐婕 +2 位作者 敬爱 周益军 李硕 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期281-288,共8页
灰飞虱是一种重要农业害虫,作为病毒介体,可以传播多种植物病毒引起水稻、小麦和玉米等粮食作物病毒病害。目前对于灰飞虱体内昆虫病毒种类尚缺乏系统认识,难以开展利用昆虫病毒防治灰飞虱相关研究工作。为挖掘灰飞虱体内昆虫病毒资源,... 灰飞虱是一种重要农业害虫,作为病毒介体,可以传播多种植物病毒引起水稻、小麦和玉米等粮食作物病毒病害。目前对于灰飞虱体内昆虫病毒种类尚缺乏系统认识,难以开展利用昆虫病毒防治灰飞虱相关研究工作。为挖掘灰飞虱体内昆虫病毒资源,本文通过小RNA深度测序技术对灰飞虱所携带的病毒种类进行分析鉴定。结果显示,测序数据比对得到13种病毒,涉及8个病毒科和2种未分类病毒。除占据优势的水稻条纹病毒外,其余均为专性寄生的昆虫病毒,包括5种正链RNA病毒、2种单链DNA病毒和5种双链DNA病毒。在这些病毒中,发现了一种与果蝇A病毒较相似的新病毒,克隆出其依赖RNA的RNA聚合酶(RdRP)基因1-1 932位核酸序列,经Blast比对和系统进化分析,在氨基酸序列中发现RdRP掌型亚结构域保守区呈现复制酶置换四体病毒科(Permutotetraviridae)病毒所具有的"C-A-B"排列样式,确定该病毒是一种新的类复制酶置换四体病毒,暂命名为Laodelphax striatellus permutotetra-like virus(LsPLV)。这是首次在半翅目昆虫中发现类复制酶置换四体病毒。本研究表明灰飞虱体内昆虫病毒种类较为丰富,为今后利用昆虫病毒生物防治灰飞虱奠定了基础。 展开更多
关键词 灰飞虱 昆虫病毒 小RNA深度测序 类复制酶置换四体病毒
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钠雾火试验结果及与雾火程序计算的比较分析 被引量:3
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作者 王国芝 杜海鸥 +2 位作者 王荣东 石文涛 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期432-438,共7页
钠雾火试验在一个体积为2.4 m^3的封闭容器内进行,用于分析雾状钠火的热动力学后果。250℃的液态钠在电磁泵的驱动下经过直径为2.4mm的喷头呈液滴喷出形成雾状钠火,喷头与容器底部的距离为1.35m,钠喷射流量约14.85g/s,喷射持续78s,试验... 钠雾火试验在一个体积为2.4 m^3的封闭容器内进行,用于分析雾状钠火的热动力学后果。250℃的液态钠在电磁泵的驱动下经过直径为2.4mm的喷头呈液滴喷出形成雾状钠火,喷头与容器底部的距离为1.35m,钠喷射流量约14.85g/s,喷射持续78s,试验测得容器内的气体在78s时达到最高压力41kPa,113s时达到最高温度190℃。将试验数据和利用基于雾状钠火计算程序(NACOM)编制的计算程序计算得到的数据进行了对比和分析。结果表明:当将钠喷射的流量修正为3.83g/s、容器壁的总传热系数修正为9.6 W/(m^2·K)时,钠喷射期间,计算压力大于试验压力,钠喷射结束后,计算的压力变化曲线和试验所得的压力变化曲线吻合较好;而计算所得的温度曲线和试验测得的温度曲线有较大差异,理论上容器内的温度在第78s时达到最大值303℃,分析认为是因为热电偶测量的温度存在滞后现象。 展开更多
关键词 快堆 钠雾火 燃烧
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灰飞虱内生病毒HiPV外壳蛋白VP1多克隆抗体的制备及在病毒检测中的应用 被引量:1
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作者 许春玲 +2 位作者 敬爱 周益军 李硕 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期823-829,共7页
【目的】前期发现水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)可与介体灰飞虱Laodelphax striatellus体内的HiPV病毒(Himetobi P virus,HiPV)互作。本研究旨在制备HiPV外壳蛋白VP1的多克隆抗体,并评估其在HiPV病毒检测中的可用性,以为深入研究... 【目的】前期发现水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)可与介体灰飞虱Laodelphax striatellus体内的HiPV病毒(Himetobi P virus,HiPV)互作。本研究旨在制备HiPV外壳蛋白VP1的多克隆抗体,并评估其在HiPV病毒检测中的可用性,以为深入研究HiPV-RSV和HiPV-灰飞虱的互作机制提供技术支持。【方法】以RT-PCR方法从灰飞虱成虫体内扩增HiPV主要外壳蛋白基因VP 1,然后将VP 1基因亚克隆至原核表达载体pET-32a中,构建表达载体pET-VP 1。将重组质粒转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3),经IPTG诱导、Ni 2+-NTA亲和层析纯化,获得重组蛋白,免疫新西兰大白兔,制备抗体。【结果】从灰飞虱体内克隆到774 bp的HiPV外壳蛋白基因VP 1,经原核表达、纯化,获得分子量约47.5 kD的融合蛋白,免疫新西兰大白兔后获得VP1多克隆抗体。该抗体间接ELISA效价达1∶819 200,与HiPV外壳蛋白VP1有特异性反应,而与灰飞虱蛋白无交叉反应。利用该多克隆抗体建立了检测单头灰飞虱成虫体内HiPV的Western blot和免疫捕获RT-PCR方法,检测结果显示HiPV在携带和不携带RSV的灰飞虱高亲和性群体内均广泛存在。【结论】利用制备的HiPV的VP1多克隆抗体可特异性检测灰飞虱体内HiPV。本研究为HiPV病毒的快速检测以及HiPV-RSV互作、HiPV-灰飞虱互作研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 灰飞虱 HiPV病毒 VP1基因 原核表达 多克隆抗体 病毒检测
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大连地区白头鹎的调查 被引量:1
17
作者 敬爱 姜长阳 《辽宁大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第4期361-364,共4页
为了研究并保护白头鹎,调查采用踏查法、数据分析法等方法,对大连地区的白头鹎进行了调查研究.结果表明:在数量上,白头鵯已成为大连地区以人为邻的第二大留鸟,在大连地区能够正常繁殖.并且正在由南(大连)向北(普兰店)不断入侵.已经成功... 为了研究并保护白头鹎,调查采用踏查法、数据分析法等方法,对大连地区的白头鹎进行了调查研究.结果表明:在数量上,白头鵯已成为大连地区以人为邻的第二大留鸟,在大连地区能够正常繁殖.并且正在由南(大连)向北(普兰店)不断入侵.已经成功入侵到大连的白头鵯是益鸟,未见入侵带来的危害或灾难. 展开更多
关键词 白头鹎 调查 大连地区
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摩托车尾气对小鼠睾丸组织形态的影响 被引量:1
18
作者 张迪 敬爱 +2 位作者 张永芳 张春雨 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第1期55-56,共2页
为研究摩托车尾气对小鼠睾丸形态的影响,用不同摩托车的尾气染毒小鼠4周后,取出睾丸制成组织切片,观察并分析睾丸组织结构的变化。结果表明,试验组睾丸生精小管内的生精细胞变得很稀疏,管腔内发现畸形精子,且精子数量减少,并有出血现象... 为研究摩托车尾气对小鼠睾丸形态的影响,用不同摩托车的尾气染毒小鼠4周后,取出睾丸制成组织切片,观察并分析睾丸组织结构的变化。结果表明,试验组睾丸生精小管内的生精细胞变得很稀疏,管腔内发现畸形精子,且精子数量减少,并有出血现象。生精小管之间的结缔组织结构变薄且不完整,其间质细胞也明显减少。还发现不同种类摩托车的尾气,对睾丸组织结构的影响也不同。 展开更多
关键词 摩托车尾气 睾丸 形态学 小鼠
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慢病毒介导小鼠K26/KAP26.1基因过表达对相关基因的调控作用 被引量:1
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作者 金梅 康琳 +3 位作者 孙东禹 敬爱 赵凤琴 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1893-1903,共11页
【目的】利用慢病毒介导过表达技术,明确小鼠K26和KAP26.1基因过表达后对角蛋白关联蛋白基因KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1和对骨形态发生蛋白基因BMP-4、BMPR-IB的影响,探究小鼠绒毛细度变化的影响机制,达到人为调控(如慢病毒载体技... 【目的】利用慢病毒介导过表达技术,明确小鼠K26和KAP26.1基因过表达后对角蛋白关联蛋白基因KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1和对骨形态发生蛋白基因BMP-4、BMPR-IB的影响,探究小鼠绒毛细度变化的影响机制,达到人为调控(如慢病毒载体技术)使相关基因过表达,改善动物绒毛品质的目的,为哺乳动物绒毛细度调控的研究奠定理论基础,【方法】试验在辽宁省生物技术与分子药物研发重点实验室完成,小白鼠采自大连医科大学实验动物中心,选取出生后5周龄昆明种雄鼠。在Genebank查找到小鼠基因K26(Gene ID:NM_001033397)及KAP26.1(Gene ID:NM_027105.2)序列,根据目的基因序列设计引物,将质粒转入生长状态良好的293T细胞,构建小鼠K26和KAP26.1基因慢病毒过表达载体,将含有目的基因K26及KAP26.1的慢病毒表达载体分别转染小鼠皮肤成纤维细胞,用荧光显微镜观察其转染情况,确定慢病毒表达载体转染成功后,从病毒感染后的细胞中抽提总RNA,将RNA反转录成c DNA后放入Eppendorf Realplex荧光定量PCR仪,检测K26和KAP26.1基因过表达对KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1、BMP-4和BMPR-IB基因表达的影响。【结果】经RT-PCR检测,证明小鼠慢病毒载体p Lenti6.3-K26-IRES-EGFP和p Lenti6.3-K26.1-IRES-EGFP构建成功。经荧光场对比,发现目的慢病毒载体转染293T细胞72h时转染率最高。经PCR检测,证实包装好的目的慢病毒K26及KAP26.1转染小鼠成纤维细胞72 h后转染成功。经RT-PCR检测与SPSS Statistics 19软件分析目的基因表达量与阳性对照组(空载体质粒组,BLACK)、阴性对照组(小鼠表皮成纤维细胞,NC)表达量之间的显著性差异,发现K26基因过表达会导致KAP26.1基因上调,反之亦然,说明K26和KAP26.1基因之间存在一定的协同作用;K26和KAP26.1基因过表达后,均能导致KAP6.2、KAP7.1、KAP8.2、KAP11.1基因下调;K26基因过表达能使BMP-4基因表现为上调,而BMPR-IB基因表现为 展开更多
关键词 慢病毒介导 K26/KAP26.1基因 角蛋白关联蛋白基因 BMP信号通路
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血管内皮细胞黏附分子胞外区基因真核表达载体构建及表达 被引量:1
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作者 武翼 +1 位作者 敬爱 李文哲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期156-160,共5页
目的构建并表达血管内皮细胞黏附分子(VCAM-1)胞外区基因真核表达载体。方法从小鼠NIH/3T3细胞提取总RNA,以其为模板通过RT-PCR扩增VCAM-1胞外区(D1-D4结构域)cDNA。利用PCR获得VCAM-1胞外区基因,连接pMD19-T载体,进行基因序列测序。将V... 目的构建并表达血管内皮细胞黏附分子(VCAM-1)胞外区基因真核表达载体。方法从小鼠NIH/3T3细胞提取总RNA,以其为模板通过RT-PCR扩增VCAM-1胞外区(D1-D4结构域)cDNA。利用PCR获得VCAM-1胞外区基因,连接pMD19-T载体,进行基因序列测序。将VCAM-1 D1-D4目的片段插入到真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Nuc中,构建重组真核表达质粒pIRES2-AcGFP1-Nuc-VCAM-1。经双酶切鉴定VCAM-1胞外区基因真核表达载体构建的成功与否。利用脂质体把pIRES2-AcGFP1-Nuc-VCAM-1导入至人B淋巴性白血病细胞株(Raji)内。结果基因测序结果表明成功扩增出VCAM-1胞外区基因,双酶切鉴定表明重组的真核表达质粒pIRES2-AcGFP1-Nuc-VCAM-1构建成功。Western blot结果显示导入pIRES2-AcGFP1-Nuc-VCAM-1质粒的Raji细胞中VCAM-1高表达。细胞结合实验表明,表达的VCAM-1与前B细胞(70Z/3)表面的VLA-4特异性结合。结论 VCAM-1真核表达载体构建及表达成功,为前B细胞克隆形成机理以及为B细胞分化发育研究提供实验依据。 展开更多
关键词 血管内皮细胞黏附分子 真核表达载体 真核表达
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