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氨基酸与葡萄酒中氨基甲酸乙酯的关系研究 被引量：6
1
作者 张颖 刘国新 +1 位作者 朱柳杨 张健 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第9期296-300 313,313,共6页
氨基甲酸乙酯是发酵食品中广泛存在的"2A"类致癌物,可由氨甲酰化合物和乙醇反应生成。葡萄汁中的氨基酸经酿酒酵母的氮代谢后,可生成氨甲酰化合物,进而形成氨基甲酸乙酯。为了研究氨基酸与葡萄酒中氨基甲酸乙酯的关系,本文构... 氨基甲酸乙酯是发酵食品中广泛存在的"2A"类致癌物,可由氨甲酰化合物和乙醇反应生成。葡萄汁中的氨基酸经酿酒酵母的氮代谢后,可生成氨甲酰化合物,进而形成氨基甲酸乙酯。为了研究氨基酸与葡萄酒中氨基甲酸乙酯的关系,本文构建了氨基酸缺失的模拟葡萄汁,比较了他们和正常模拟葡萄汁经主发酵后的氨基甲酸乙酯和尿素含量,并采用N15同位素示踪确认了氨基酸对氨基甲酸乙酯的贡献。结果表明:磷酸氢二铵单独作为氮源发酵不会产生氨基甲酸乙酯,用其替代缺失的氨基酸不会影响正常发酵过程;缺失精氨酸的模拟葡萄汁发酵后,尿素和氨基甲酸乙酯含量明显减少,而缺失其它氨基酸对二者无显著影响。N15同位素示踪证明精氨酸胍基的氮原子参与了氨基甲酸乙酯的合成。本文为发酵食品危害物的前体挖掘提供了新的思路,也为气质联用仪辨识同位素提供了方法借鉴。 展开更多
关键词 氨基酸 氨基甲酸乙酯 尿素 葡萄酒 模拟葡萄汁 同位素示踪
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产赭曲霉毒素A黑曲霉的PCR法检测 被引量：5
2
作者 张健 王小霞 +3 位作者 朱柳杨 高强 高慧梅 张颖 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期2530-2538,共9页
【目的】快速检测产赭曲霉毒素A（OTA）的黑曲霉。【方法】根据黑曲霉（Aspergillus niger）CBS513.88中An15g07920基因编码聚酮合酶的酰基转移酶（AT）域设计引物,建立针对产OTA黑曲霉的聚合酶链式反应（PCR）检测方法。【结果】对72... 【目的】快速检测产赭曲霉毒素A（OTA）的黑曲霉。【方法】根据黑曲霉（Aspergillus niger）CBS513.88中An15g07920基因编码聚酮合酶的酰基转移酶（AT）域设计引物,建立针对产OTA黑曲霉的聚合酶链式反应（PCR）检测方法。【结果】对72株曲霉属菌株（黑曲霉、炭黑曲霉、赭曲霉、佩特曲霉、寄生曲霉和塔宾曲霉）进行检测,发现产OTA的黑曲霉能够扩增出特异性条带,而产OTA的其它菌株不能扩增出条带;检测出3株假阳性的产OTA黑曲霉,实时定量PCR分析此3株菌中An15g07920的同源基因表达情况,发现在产毒条件下可正常表达,排除了因基因无法表达导致假阳性的可能。本方法的检测灵敏度为25 pg的DNA含量,在污染所试农产品孢子浓度大于4.0×10^4–4.0×10^5个/g时可有效检测出产毒菌株。【结论】本方法虽会产生4%的假阳性结果,但是仍可作为产毒黑曲霉有效的快速检测方法,并在农产品污染产毒黑曲霉时进行有效预警。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 黑曲霉 聚合酶链式反应 检测
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黑曲霉中生物合成赭曲霉毒素A的非核糖体肽合成酶基因的鉴定 被引量：4
3
作者 陈美榕 张梦薇 +2 位作者 刘舒雯 朱柳杨 张健 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期556-565,共10页
赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是国际癌症研究机构认定的"2B"类致癌物。黑曲霉Aspergillus niger是美国食品药品监督局认可的食品安全菌。然而近年来陆续发现某些黑曲霉菌株能够产生OTA,这会对人类健康构成潜在威胁。阐明黑... 赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)是国际癌症研究机构认定的"2B"类致癌物。黑曲霉Aspergillus niger是美国食品药品监督局认可的食品安全菌。然而近年来陆续发现某些黑曲霉菌株能够产生OTA,这会对人类健康构成潜在威胁。阐明黑曲霉生物合成OTA的关键基因有助于理解OTA生物合成机制,这对OTA污染的防控具有重要意义。本研究克隆了产OTA黑曲霉中非核糖体肽合成酶(NRPS)编码基因(An15g07910),并对其进行了生物信息学分析,在此基础上采用同源重组的方法敲除了该基因,获得了一株性能稳定的敲除突变株Δnrps。与野生株相比,Δnrps突变株的表型在CYA培养基中并无明显改变,但在7d培养期间完全失去了合成赭曲霉毒素α(ochratoxinα,OTα)和OTA的能力,而赭曲霉毒素β(ochratoxinβ,OTβ)的合成不受影响。在野生株培养过程中,该nrps基因前4d表达量逐渐增大,并在第4天达到最高,随后基因表达量逐渐下降并趋于稳定,这与OTA的含量变化基本一致。结果表明该nrps基因(An15g07910)参与OTA的生物合成,其编码的NRPS可能负责催化苯丙氨酸部分和二氢异香豆素部分的交联。 展开更多
关键词 黑曲霉 赭曲霉毒素A 非核糖体肽合成酶 基因敲除 实时定量PCR 高效液相色谱
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黑曲霉产赭曲霉毒素A合成培养基的设计及产毒优化 被引量：3
4
作者 朱柳杨 陈浩宇 +4 位作者 李敏 朱晓娟 高慧梅 张颖 张健 《中国酿造》 CAS 北大核心 2017年第2期127-130,共4页
针对目前没有适合黑曲霉产赭曲霉毒素A(OTA)全合成培养基的现状,进行黑曲霉产OTA合成培养基的设计,并优化高产OTA培养条件,以期为黑曲霉产OTA代谢和产毒机制的研究提供基础。通过碳源、氮源的筛选确定黑曲霉产OTA合成培养基的成分,利用... 针对目前没有适合黑曲霉产赭曲霉毒素A(OTA)全合成培养基的现状,进行黑曲霉产OTA合成培养基的设计,并优化高产OTA培养条件,以期为黑曲霉产OTA代谢和产毒机制的研究提供基础。通过碳源、氮源的筛选确定黑曲霉产OTA合成培养基的成分,利用高效液相色谱-荧光检测法检测此培养基在不同时间、pH、温度条件下OTA的产量,确定产OTA最佳培养条件。结果表明,培养基成分为FeSO_4·7H_2O 0.01 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L,Na_2HPO_4·2H_2O 0.5 g/L,KCl 1.0 g/L,葡萄糖100 g/L,苯丙氨酸0.3 g/L。培养条件为初始pH值为7,培养温度25℃,培养时间8 d。在此条件下黑曲霉产OTA产量最高,为4.19μg/g,菌体生物量为3.4 g。 展开更多
关键词 赭曲霉毒素A 黑曲霉 合成培养基 培养条件
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阿魏侧耳胞外多糖生物活性初步研究 被引量：2
5
作者 王晶 常世民 +2 位作者 闫训友 张琨 朱柳杨 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期1433-1437,共5页
本文研究了阿魏侧耳液体发酵胞外多糖的生物活性.液体深层发酵和乙醇萃取法制备阿魏侧耳胞外多糖,小鼠经灌胃给药,采用血液分析仪、体外孵育等方法,测定血液中白细胞数量、腹腔巨噬细胞吞噬能力和免疫器官指数;利用显微观察、细胞计数... 本文研究了阿魏侧耳液体发酵胞外多糖的生物活性.液体深层发酵和乙醇萃取法制备阿魏侧耳胞外多糖,小鼠经灌胃给药,采用血液分析仪、体外孵育等方法,测定血液中白细胞数量、腹腔巨噬细胞吞噬能力和免疫器官指数;利用显微观察、细胞计数和纸片琼脂法等研究阿魏侧耳胞外多糖对肿瘤细胞、细菌和真菌生长的影响.结果表明：与对照组相比,灌胃100和200 mg/kg的阿魏侧耳胞外多糖可显著提高小鼠血液白细胞数量（P＜0.05）、增加免疫器官指数（P＜0.05）和增强巨噬细胞吞噬能力（P＜0.05）;40 ～ 80 g/L阿魏侧耳胞外多糖对枯草芽孢杆菌的生长有一定的抑制作用;5～ 80 mg/L阿魏侧耳胞外多糖对体外培养的人胃癌细胞和人宫颈癌细胞的存活无明显影响作用.因此,一定浓度阿魏侧耳胞外多糖可提高小鼠的免疫能力,抑制枯草芽孢杆菌的生长,但对其他供试细菌、真菌和体外培养的肿瘤细胞的生长无明显影响作用. 展开更多
关键词 阿魏侧耳 胞外多糖 免疫能力 癌细胞 细菌
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