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烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究 被引量：12
1
作者 王晓川 李川 +3 位作者 单菲 王文婷 朱旭国 姜笃银 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期201-206,共6页
目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质（DADM）作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法（1）取12只Wistar大鼠，其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤（以下称烧伤）创面，分别于伤后1、2、3d（每时相点3只）取创面全厚皮肤，用2．5g／L胰蛋白酶-体... 目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质（DADM）作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法（1）取12只Wistar大鼠，其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤（以下称烧伤）创面，分别于伤后1、2、3d（每时相点3只）取创面全厚皮肤，用2．5g／L胰蛋白酶-体积分数0．5％Triton X-100行脱细胞处理制成DADM，相应称为DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d；余下3只大鼠不致伤，同法制备ADM作为对照。对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测（极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系）。（2）另取64只Wistar大鼠，按随机数字表法分为ADM组、DADM．1d组、DADM-2d组、DADM-3d组，每组16只。于各大鼠背部制作-2．0cm×1．8cm大小皮瓣，将前述ADM和DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d切制成1．8cm×1．5cm大小后分别埋植于皮瓣下。术后1、3、5、9周，每组每时相点取4只大鼠，肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化，并对埋植物行组织学观察。对数据行单因素方差分析及t检验。结果（1）新鲜制备的各DADM呈乳白色，质地柔软有弹性，韧性较ADM弱。光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在，DADM胶原纤维增粗程度不均匀，排列紊乱，嗜伊红性增强。各DADM微生物学检测结果均为阴性。DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较，差异均无统计学意义（F值为0．088-3．591，P值均大于0．05）；其中DADM-3d此4项指标值最高，分别为（13．0±2．4）MPa、（61±4）N、（173±7）％、（45．7±2．0）％。ADM此4项指标各为（19．0±2．6）MPa、（95±4）N、（201±5）％、（62．5±2．2）％，与3种DADM两两比较均偏高（t值为6．42±17．125。P值均小于0．01）。（2）埋植术后1周，各组大鼠创面元渗出或红肿，埋植物未收缩或卷曲；创面有炎性细胞浸润并有Fb及� 展开更多
关键词 烧伤 细胞外基质 变性真皮 脱细胞真皮基质 创面修复
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聚乙二醇共沉复溶双水相法提纯氯过氧化物酶的条件研究 被引量：4
2
作者 朱旭国 许甜甜 +3 位作者 杜宁 李焱 卢轶 陈军 《上海师范大学学报（自然科学版）》 2010年第4期415-420,共6页
来源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯过氧化物酶是一种用途广泛的氧化酶,由于它在生物合成过程中浓度积累低、活力稳定性差,高纯度酶提纯过程回收率低,价格昂贵等原因限制了氯过氧化物酶的应用.利用亲水聚合物PEG6000在高离子强度... 来源于海洋真菌Caldariomyces fumago的氯过氧化物酶是一种用途广泛的氧化酶,由于它在生物合成过程中浓度积累低、活力稳定性差,高纯度酶提纯过程回收率低,价格昂贵等原因限制了氯过氧化物酶的应用.利用亲水聚合物PEG6000在高离子强度下失水沉淀夹带酶蛋白特点,结合PEG/（NH4）2SO4双水相萃取得到高浓度酶蛋白,再经Sephadex G-75柱层析纯化可得到高纯度酶样品.结果显示：60%饱和度的（NH4）2SO4溶液可使PEG6000夹带沉淀出总酶活力95%的氯过氧化物酶,酶在PEG/（NH4）2SO4双水相系统中上下相分配率k可以达到0.228以下,回收率达到65.2%,纯度提高了7.4倍,柱层析后酶纯度只略有提高,总回收率稍有下降.研究结果为低浓度生物活性物质的高效率提取提供了新的途径. 展开更多
关键词 氯过氧化物酶 共沉淀 双水相系统 提取纯化
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海洋真菌Caldariomyces fumago产氯过氧化物酶的双水相提纯条件 被引量：1
3
作者 陈军 杜宁 +3 位作者 许甜甜 夏志华 张书翠 朱旭国 《生物加工过程》 CAS CSCD 2010年第6期46-51,共6页
采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱层析纯化获得高纯度酶试样。结果显示:氯过氧化物酶与PEG... 采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱层析纯化获得高纯度酶试样。结果显示:氯过氧化物酶与PEG共沉淀总活力回收率达85.5%,酶在优化的PEG/磷酸盐双水相系统中上下相分配系数k在0.341以下,酶活力回收率达到69.1%,纯度提高了21.57倍,柱层析可使酶纯度进一步提高到24.79倍,总回收率为37.75%。 展开更多
关键词 Caldariomyces fumago 氯过氧化物酶 双水相 萃取
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