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低温产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及纤维素酶学性质 被引量:56
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作者 穆春雷 武晓森 +4 位作者 李术娜 马鸣超 李俊 沈德龙 宝成 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1193-1201,共9页
【目的】筛选一株低温产纤维素酶菌株并进行鉴定,初步探索其酶学性质,为微生物肥料生产筛选菌种资源。【方法】常温条件下,采用CMC-刚果红染色法初筛纤维素降解菌株。采用低温条件诱导的方法,筛选耐低温且产纤维素酶能力最强的菌株,经... 【目的】筛选一株低温产纤维素酶菌株并进行鉴定,初步探索其酶学性质,为微生物肥料生产筛选菌种资源。【方法】常温条件下,采用CMC-刚果红染色法初筛纤维素降解菌株。采用低温条件诱导的方法,筛选耐低温且产纤维素酶能力最强的菌株,经形态学、生理生化特征试验、ITS序列等方面分析系统分类地位。单因素试验确定温度、pH及金属离子对纤维素酶活力的影响。【结果】从秸秆还田土壤中分离出一株在13°C低温环境下高效分解纤维素的真菌M11,鉴定M11为草酸青霉(Penicillium oxalicum)。发酵试验表明:以玉米秸秆粉为唯一碳氮源,13°C、200 r/min摇床发酵培养9 d时,纤维素酶活力最高为33.08 U/mL。对其酶学性质初步研究表明:该酶最适pH为5.0,最适反应温度为20°C,在5°C?20°C间酶活力仍能保持在90%以上。【结论】Penicillium oxalicum M11是一株高效的纤维素降解菌株,在低温条件下可分泌纤维素酶且活性显著,具有潜在的开发价值。 展开更多
关键词 低温 诱导 筛选 鉴定 纤维素酶
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解淀粉芽孢杆菌MN-8对玉米秸秆木质纤维素的降解 被引量:46
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作者 李红亚 李术娜 +3 位作者 王树香 王全 薛茵茵 宝成 《应用生态学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1404-1410,共7页
微生物降解木质纤维素既是生物质资源化利用中的关键问题,也是亟需解决的难点问题.本文在前期获得木质素降解菌——解淀粉芽孢杆菌MN-8菌株的基础上,进一步研究该菌株对玉米秸秆木质纤维素的降解作用.研究利用玉米秸秆粉-MSM培养基对MN-... 微生物降解木质纤维素既是生物质资源化利用中的关键问题,也是亟需解决的难点问题.本文在前期获得木质素降解菌——解淀粉芽孢杆菌MN-8菌株的基础上,进一步研究该菌株对玉米秸秆木质纤维素的降解作用.研究利用玉米秸秆粉-MSM培养基对MN-8菌株进行固态发酵,监测发酵过程中木质纤维素酶活力和木质纤维素含量变化情况,并通过傅立叶红外光谱(FTIR)和气质联用色谱(GC/MS)对木质纤维素的降解情况及产物进行分析.结果表明:解淀粉芽孢杆菌MN-8菌株可产生木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶、纤维素酶和半纤维素酶等木质纤维素降解酶,在发酵10~16 d陆续达到酶活力峰值,最高酶活力分别为55.0、16.7、45.4和60.5 U·g-1.发酵24 d后,玉米秸秆中木质素、纤维素和半纤维素的降解率可分别达到42.9%、40.6%和27.1%.FTIR光谱数据表明,玉米秸秆发酵后木质素、纤维素和半纤维素的特征吸收峰强度均有一定程度的下降,表明木质纤维素被部分降解.GC/MS分析结果也证实,解淀粉芽孢杆菌MN-8能有效降解秸秆木质纤维素.MN-8菌株可断裂玉米秸秆木质素单体之间的连接键β-O-4,将秸秆木质素解聚为苯丙胺、苯丙酮和苯丙酸等保留木质素苯丙烷结构的单体化合物,并将部分单体化合物进一步氧化为Cα羰基化合物,如2-氨基-1-苯丙酮和紫丁香基苯乙酮等.在对纤维素和半纤维素降解产物的GC/MS分析中发现,降解产物包含葡萄糖、甘露糖和半乳糖等多种单糖化合物以及甲酸、乙酸、丙酸、1,1-乙二醇和3-羟基丁酸等代谢产物.表明解淀粉芽孢杆菌MN-8对秸秆木质纤维素表现出强降解作用,且该作用依赖于菌株产木质纤维素降解酶的能力. 展开更多
关键词 芽孢杆菌 玉米秸秆 木质纤维素 生物降解
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不同施肥处理对玉米产量及土壤酶活性的影响 被引量:42
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作者 武晓森 周晓琳 +3 位作者 曹凤明 宝成 赵同凯 沈德龙 《中国土壤与肥料》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期44-49,共6页
分析了不同施肥处理对玉米产量和土壤养分的影响,以及不同生育期内土壤纤维素酶、脲酶和过氧化氢酶的动态变化。结果表明,5个不同施肥处理产量均高于CK;秸秆配施无机肥加秸秆腐熟剂(FS)处理和有机肥配施70% NPK(OF)处理的效果最佳,有机... 分析了不同施肥处理对玉米产量和土壤养分的影响,以及不同生育期内土壤纤维素酶、脲酶和过氧化氢酶的动态变化。结果表明,5个不同施肥处理产量均高于CK;秸秆配施无机肥加秸秆腐熟剂(FS)处理和有机肥配施70% NPK(OF)处理的效果最佳,有机无机复合肥(OI2)、有机无机复合肥(OI1)和常规无机肥(CF)处理次之,不施肥处理(CK)最低。FS处理较常规施肥处理提高了4.87%,有机肥配施70%常规无机肥(OF)处理较常规施肥处理的产量提高了3.39%。施肥处理均能提高3种酶的活性,并且表现出较强规律性:土壤过氧化氢酶在玉米拔节期出现活性高峰,土壤纤维素酶和土壤脲酶在玉米大喇叭口期出现活性高峰;FS处理在各个时期的酶活性较高。综上所述,秸秆还田配施化肥加秸秆腐熟剂有利于增加土壤酶活性与土壤养分含量,提高作物产量。 展开更多
关键词 秸秆 秸秆腐解菌剂 产量 土壤酶活性 土壤养分
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贝莱斯芽孢杆菌3A3-15生防和促生机制 被引量:41
4
作者 刘雪娇 李红亚 +2 位作者 李术娜 宝成 高同国 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第3期302-310,共9页
为揭示贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)3A3-15生防和促生作用相关机理,采用9对特异性引物对其抑菌基因和促生长基因进行PCR检测,并分别通过Sackowski法、Schwyn和Neiland法检测其分泌吲哚乙酸(IAA)和嗜铁素能力,通过高效液相色谱-... 为揭示贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)3A3-15生防和促生作用相关机理,采用9对特异性引物对其抑菌基因和促生长基因进行PCR检测,并分别通过Sackowski法、Schwyn和Neiland法检测其分泌吲哚乙酸(IAA)和嗜铁素能力,通过高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)分析其发酵液抑菌成分,采用平板对峙实验和孢子萌发抑制实验分析该菌株的抑菌机理.结果表明,贝莱斯芽孢杆菌3A3-15中的抑菌基因包括yndJ、srfAB、ituC、bamC和fenD,促生长基因包括ysnE和dhbC.该菌株分泌嗜铁素能力较强,A_s/A_r值达到0.238,鉴定其抑菌物质为C14~C15 surfactinA,且贝莱斯芽孢杆菌3A3-15的次生代谢物能导致病原菌(尖孢镰刀菌)菌丝扭曲、膨大、畸形,对其孢子萌发抑制作用较强,抑制率达93.2%.以上结果说明贝莱斯芽孢杆菌3A3-15具有较好的生防和促生潜力,是防治尖孢镰刀菌引起的大豆根腐病的潜在菌株. 展开更多
关键词 贝莱斯芽孢杆菌 生防作用 促生作用
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草莓花药愈伤组织的形成及形态发生 被引量:19
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作者 周毓君 宝成 +1 位作者 郭明申 梁伯璠 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期119-122,共4页
草莓花药培养通过愈伤组织分化形成小植株。单核花粉发育途径有二:1.营养细胞发育途径(A型),只形成多核花粉,最终解体。2.花粉均等分裂途径(B型),花粉第一次分裂形成两个均等的细胞,继续分裂形成多细胞花粉,多细胞花粉撑破花粉壁后,发... 草莓花药培养通过愈伤组织分化形成小植株。单核花粉发育途径有二:1.营养细胞发育途径(A型),只形成多核花粉,最终解体。2.花粉均等分裂途径(B型),花粉第一次分裂形成两个均等的细胞,继续分裂形成多细胞花粉,多细胞花粉撑破花粉壁后,发育形成愈伤组织。药隔细胞易脱分化,由其分裂形成的愈伤组织与花粉起源的愈伤组织从颜色、质地等方面不易区别。不定芽和不定根是独立发生的,芽属外起源,根属内起源。 展开更多
关键词 草莓 花药培养 愈伤组织 形态发生
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神经内镜微创手术与小骨窗开颅显微手术治疗幕上高血压脑出血效果比较研究 被引量:35
6
作者 宝成 万鹏 《山西医药杂志》 CAS 2018年第13期1581-1583,共3页
高血压脑出血为临床常见病、多发病。该疾病具有变化迅速、起病急以及致残率高的特征,疾病主要以幕上出血最为常见。外科手术为治疗该疾病的常见方式,外科手术能够全面祛除水肿,减少颅内压,缓解占位效应,进而全面恢复神经元功能情... 高血压脑出血为临床常见病、多发病。该疾病具有变化迅速、起病急以及致残率高的特征,疾病主要以幕上出血最为常见。外科手术为治疗该疾病的常见方式,外科手术能够全面祛除水肿,减少颅内压,缓解占位效应,进而全面恢复神经元功能情况,进而减少并预防病理性损害,全面改善患者的临床预后 。和以往相比,我国医学技术取得了突破性进展,神经内镜微创手术也已经被广泛应用到临床之中,实施神经内镜微创手术,能够全面清除病患颅内脑血肿,其具有恢复快、用时短,以及创伤轻微等特征,进而被广泛应用到临床,不失为高血压性脑出血新型治疗方式 。为了全面分析神经内镜微创手术与小骨窗开颅显微手术治疗幕上高血压脑出血的临床疗效,本研究选择2015年1月至2018年1月我院收治的105例患者为研究对象分别使用上述方式治疗,现将结果报告如下。 展开更多
关键词 幕上高血压脑出血 小骨窗开颅 手术治疗 微创手术 神经内镜 高血压性脑出血 临床预后 外科手术
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产芽孢木质素降解菌MN-8的筛选及其对木质素的降解 被引量:34
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作者 李红亚 李术娜 +2 位作者 王树香 王全 宝成 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期324-333,共10页
【目的】分离、筛选产芽孢的高效木质素降解细菌,并进一步研究其对木质素的降解作用,为木质素微生物降解规模化应用提供理论依据。【方法】采用苯胺蓝(Azure-B)变色圈法,结合木质素降解酶活力测定从牛粪中分离筛选出产芽孢的木质素降解... 【目的】分离、筛选产芽孢的高效木质素降解细菌,并进一步研究其对木质素的降解作用,为木质素微生物降解规模化应用提供理论依据。【方法】采用苯胺蓝(Azure-B)变色圈法,结合木质素降解酶活力测定从牛粪中分离筛选出产芽孢的木质素降解菌。通过形态特征观察、生理生化试验、16S rDNA以及gyrB序列分析对其中活性最强的菌株进行种属鉴定。利用菌株进行玉米秸秆堆积发酵,监测发酵过程中木质素过氧化物酶(LiP)酶活力、锰过氧化酶(MnP)酶活力以及玉米秸秆中木质素含量的变化,考察菌株对玉米秸秆木质素的降解作用。利用气相色谱-质谱联用(GC/MS)方法对菌株发酵后玉米秸秆中的木质素降解产物进行分析,推测菌株对木质素的降解机制。【结果】分离筛选到一株活性较高的产芽孢的木质素降解细菌MN-8,经形态特征观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,鉴定菌株MN-8属于芽孢杆菌属(Bacillus)。利用16S rDNA序列分析发现MN-8菌株与地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)和解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)同源性均高于99%。而基于gyrB序列构建的系统发育树显示,该菌株与解淀粉芽孢杆菌同源性最高,为99%。因此确定MN-8菌株为解淀粉芽孢杆菌。在玉米秸秆堆积发酵16 d后木质素降解率可达24%;发酵的6—8 d及10—12 d两个阶段内,分别出现MnP酶活力及LiP的产酶高峰期,相对应两个阶段内秸秆木质素的降解最为显著;GC/MS分析显示菌株MN-8可将玉米秸秆中木质素降解成4-羟基-3,5二甲氧基苯乙酮等芳香族类化合物及短链脂肪酸类等小分子物质。【结论】高效木质素降解菌解淀粉芽孢杆菌MN-8可以通过断裂木质素单体之间的连接键β-O-4,高效降解秸秆木质素成为小分子芳香族化合物等物质,且其对秸秆木质素的降解依赖于LiP及MnP的产生。 展开更多
关键词 木质素降解 芽孢杆菌 筛选 鉴定 降解特性
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高效纤维素降解菌短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)T-7的筛选、鉴定及降解能力的研究 被引量:34
8
作者 张立静 李术娜 宝成 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第7期112-118,共7页
为了得到一株具有降解纤维素性能的产芽孢菌株,并获得菌株发挥最大降解特性所需的最佳培养条件。采用加热富集芽孢菌及刚果红脱色圈的初筛方法,从菜地土壤、动物粪便、青贮饲料等样品中分离筛选出41株能够降解纤维素的产芽孢细菌。采用3... 为了得到一株具有降解纤维素性能的产芽孢菌株,并获得菌株发挥最大降解特性所需的最佳培养条件。采用加热富集芽孢菌及刚果红脱色圈的初筛方法,从菜地土壤、动物粪便、青贮饲料等样品中分离筛选出41株能够降解纤维素的产芽孢细菌。采用3,5-二硝基水杨酸比色定糖法(DNS)进行菌株纤维素酶活测定,得到的菌株T-7具有显著的降解能力,纤维素酶活力达1678.89U/mL。通过形态观察鉴定、生理生化实验和16S rDNA序列分析对其进行种属鉴定,鉴定T-7菌株为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。研究了供试菌株T-7的降解工艺,以10亿活菌/1kg的接种量接入玉米秸秆,并且添加辅助碳氮源2%蔗糖+2%尿素时,在发酵8天后对秸秆中纤维素的降解率达40.34%。研究结果为纤维素的生物降解发掘了新的菌种资源,并为秸秆的大规模降解利用奠定了基础。 展开更多
关键词 芽孢 纤维素 筛选 鉴定 降解能力
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棉花黄萎病拮抗细菌LC-04菌株的抗菌蛋白产生条件研究 被引量:26
9
作者 李术娜 杜红方 +2 位作者 袁洪水 张元亮 宝成 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期233-237,共5页
LC-04菌株是从棉花叶部组织中分离出的一株类芽孢杆菌,其发酵液上清液的硫酸铵沉淀物对大丽轮枝菌V-190菌株的生长具有明显的拮抗作用,实验证明发酵液中含有蛋白质类抗菌物质。LC-04菌株的适宜发酵条件为:在pH7的LBG培养基中于30℃,180 ... LC-04菌株是从棉花叶部组织中分离出的一株类芽孢杆菌,其发酵液上清液的硫酸铵沉淀物对大丽轮枝菌V-190菌株的生长具有明显的拮抗作用,实验证明发酵液中含有蛋白质类抗菌物质。LC-04菌株的适宜发酵条件为:在pH7的LBG培养基中于30℃,180 r.min-1摇床振荡培养48 h,用70%硫酸铵对LC-04菌株发酵液上清液进行盐析,可以沉淀最多的抗菌蛋白。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 拮抗细菌 发酵 抗菌蛋白
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棉花黄萎病拮抗细菌的筛选与抗菌物分析 被引量:31
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作者 袁洪水 马平 +2 位作者 李术娜 胡明 宝成 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2007年第6期436-439,共4页
对21株芽孢杆菌属细菌分别进行了摇瓶震荡培养,其发酵液上清液用硫酸铵盐析,杯碟法测定了沉淀物对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)的拮抗活性,并对其中6株具有较强抑菌活性菌株的抗菌物进行了蛋白酶稳定性、热稳定性等分析。结... 对21株芽孢杆菌属细菌分别进行了摇瓶震荡培养,其发酵液上清液用硫酸铵盐析,杯碟法测定了沉淀物对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)的拮抗活性,并对其中6株具有较强抑菌活性菌株的抗菌物进行了蛋白酶稳定性、热稳定性等分析。结果显示,BDT-25、JJ-5、DHT-12、80b-2、DHT-13和JJ-134菌株的抑菌活性较高;6株拮抗细菌发酵液沉淀物均对氯仿敏感,抗菌物溶液经蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶处理后活性丧失或显著下降,对温度也较敏感,认为这些抗菌物质为蛋白或多肽类物质。拮抗菌株产生的抗菌蛋白通过抑制大丽轮枝菌孢子萌发和使菌丝体原生质凝集而抑制其生长。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 拮抗细菌 筛选
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不同施肥处理对农田土壤微生物区系和功能的影响 被引量:31
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作者 武晓森 杜广红 +6 位作者 穆春雷 马鸣超 周晓琳 赵同凯 宝成 李洪杰 沈德龙 《植物营养与肥料学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期99-109,共11页
本研究采用DGGE和Biolog两种方法,研究了五种不同施肥处理对土壤微生物区系组成和功能的影响。采用UPGMA对DGGE试验结果进行聚类分析得出,小麦季中不施肥对照(T1)和常规氮磷钾肥(T2)聚为一类,相似性为41%,常规氮磷钾肥+秸秆还田(T4)和... 本研究采用DGGE和Biolog两种方法,研究了五种不同施肥处理对土壤微生物区系组成和功能的影响。采用UPGMA对DGGE试验结果进行聚类分析得出,小麦季中不施肥对照(T1)和常规氮磷钾肥(T2)聚为一类,相似性为41%,常规氮磷钾肥+秸秆还田(T4)和常规氮磷钾肥+秸秆还田+秸秆腐熟剂(T5)聚为一类,相似性为52%,而70%常规氮磷钾肥+有机肥(T3)单独聚为一类;玉米季也得到类似的结果,只是T1和T2的相似性为68%,T4和T5相似性达78%,而T3依然归为一类,这说明不同施肥处理间土壤微生物区系存在相似性。经过切胶测序及BLAST比对,发现大多为不可培养细菌,可培养细菌中多为芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属。Biolog试验采用主成份分析得出,T1和T2土壤微生物功能类似,T4和T5土壤微生物也具有相似的功能,而T3则单独分为一类。其中,T5和T4的土壤细菌群落对底物碳源的代谢活性最强,T3处理次之,T2和T1最低。通过这两种不同试验方法的分析可以看出,不同施肥处理对土壤微生物区系和功能的影响存在关联性。 展开更多
关键词 施肥 微生物区系 DGGE BIOLOG
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番茄灰霉病拮抗细菌的筛选与X-75菌株鉴定 被引量:31
12
作者 王伟 李术娜 +4 位作者 李红亚 郝志敏 王全 王树香 宝成 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期307-312,共6页
采用琼脂平板扩散法筛选对番茄灰霉菌具有拮抗作用的细菌,经过对200株分离自土壤的细菌菌株进行初筛、复筛后,得到了1株具有较高拮抗活性的菌株X-75。对该菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),... 采用琼脂平板扩散法筛选对番茄灰霉菌具有拮抗作用的细菌,经过对200株分离自土壤的细菌菌株进行初筛、复筛后,得到了1株具有较高拮抗活性的菌株X-75。对该菌株进行形态观察和生理生化特征分析,初步将其鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),将其16SrDNA序列与GenBank中已知标准菌株的16SrDNA序列进行比对,并用Neighbor-joining方法构建X-75菌株进化树,结果表明,X-75与标准菌株AB245422 Bacillus velezensis聚于同一分支,同源性最高,达99.93%;利用番茄离体叶片对X-75菌株的防效进行初步检测,结果表明X-75菌株对番茄灰霉病菌具有明显的拮抗作用。 展开更多
关键词 番茄 灰霉菌 芽孢杆菌 拮抗作用
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外源lea3基因转化紫花苜蓿的研究 被引量:25
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作者 王瑛 宝成 +2 位作者 孙毅 张琳宇 罗建平 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期249-252,260,共5页
将来源于大麦的lea3基因通过基因枪法导入紫花苜蓿栽培品种“中苜一号”的胚性愈伤组织中,经过膦丝菌素类除草剂(PPT)的4次筛选获得抗性愈伤组织,诱导分化后共获得21株抗性再生植株。经叶片涂抹除草剂试验和lea3基因的PCR分子检测证明,l... 将来源于大麦的lea3基因通过基因枪法导入紫花苜蓿栽培品种“中苜一号”的胚性愈伤组织中,经过膦丝菌素类除草剂(PPT)的4次筛选获得抗性愈伤组织,诱导分化后共获得21株抗性再生植株。经叶片涂抹除草剂试验和lea3基因的PCR分子检测证明,lea3基因已整合到紫花苜蓿的基因组中。与对照植株相比,获得的转基因植株具有显著增强的耐盐能力,表明遗传转化lea3基因可用于苜蓿抗旱耐盐新品种的选育。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 胚性愈伤组织 lea3基因 转化
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草莓灰霉病菌的培养、毒素提取及生物测定 被引量:12
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作者 宝成 梁伯璠 +1 位作者 周毓君 郭明申 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期239-243,共5页
草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea Persoon)在25℃、pH3~4的Peberdy培养基中生长良好,并可产生引起草莓愈伤组织细胞死亡的毒素。产生毒素的高峰期为静置培养20天。灰霉菌发酵液中的毒素可用氯仿进行提取,经提取后的毒素液在269nm处有吸... 草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea Persoon)在25℃、pH3~4的Peberdy培养基中生长良好,并可产生引起草莓愈伤组织细胞死亡的毒素。产生毒素的高峰期为静置培养20天。灰霉菌发酵液中的毒素可用氯仿进行提取,经提取后的毒素液在269nm处有吸收峰。本研究建立了利用草莓愈伤组织细胞的荧光活性测定毒力的方法。 展开更多
关键词 草莓 灰霉病菌 毒素 灰霉病 真菌
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棉花黄萎病拮抗蛋白的分离与纯化 被引量:24
15
作者 周艳芬 杜红方 +2 位作者 袁洪水 张元亮 宝成 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2007年第2期98-101,共4页
从棉花叶组织中分离到的类芽孢杆菌(Paenibacillus)LC105菌株对棉花黄萎病病原菌大丽轮枝菌具有明显的拮抗作用。该菌株发酵液分别用过滤、高压灭菌及有机溶剂处理,初步证明对大丽轮枝菌产生拮抗作用的物质为蛋白质。LC105菌株发酵液经... 从棉花叶组织中分离到的类芽孢杆菌(Paenibacillus)LC105菌株对棉花黄萎病病原菌大丽轮枝菌具有明显的拮抗作用。该菌株发酵液分别用过滤、高压灭菌及有机溶剂处理,初步证明对大丽轮枝菌产生拮抗作用的物质为蛋白质。LC105菌株发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析及Sephacryl S-100凝胶层析分离纯化,得到了分子量为27 kDa的抗菌蛋白。 展开更多
关键词 棉花黄萎病 大丽轮枝菌 类芽孢杆菌 抗菌蛋白 分离纯化
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外植体及激素对SANDITI紫花苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响 被引量:19
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作者 肖荷霞 王瑛 +2 位作者 高峰 蒋继志 宝成 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期47-52,共6页
以SANDITI紫花苜蓿无菌苗下胚轴、茎、叶3种不同外植体为试材,在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明,SANDIT最佳外植体为下胚轴,最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2 0mg/L+6-BA0 5mg/L。15d继代1次,或适当降低2,... 以SANDITI紫花苜蓿无菌苗下胚轴、茎、叶3种不同外植体为试材,在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织。结果表明,SANDIT最佳外植体为下胚轴,最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D2 0mg/L+6-BA0 5mg/L。15d继代1次,或适当降低2,4-D浓度,提高6-BA或KT浓度,可以降低愈伤组织褐化率。愈伤组织在6-BA0 5mg/L,NAA0 1mg/L,GA31 0mg/L,YE250mg/L,CH250mg/L的MS培养基上,可获得较高的分化率。 展开更多
关键词 激素 紫花苜蓿 愈伤组织 外植体 分化率 褐化率 牧草
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杜仲氨基酸成份的研究 被引量:12
17
作者 王俊丽 陈丕铃 宝成 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 1994年第2期80-82,共3页
本文借助氨基酸自动分析仪对杜仲离体培养愈伤组织、树叶、树皮中氨基酸含量进行了系统研究,共检测出16种氨基酸,其总含量为41.49~208.22mg/g,其中包括7种必需氨基酸。
关键词 杜仲 氨基酸 体外培养 愈伤组织
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高效毛细管电泳法测定姜黄中姜黄素类化合物 被引量:22
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作者 刘保启 胡孝忠 +2 位作者 王玉春 宝成 丁良 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期109-111,共3页
用高效毛细管电泳法测定姜黄中姜黄素类化合物的含量 ;姜黄素类化合物毛细管电泳谱图的峰面积和浓度具有良好的线性关系 ;方法的精密度RSD为1.12 %~2.47 % (n=5) ,平均回收率为97.5 %~98.1%。
关键词 中药 姜黄 姜黄素类化合物 含量测定 高效毛细管电泳法
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荧光标记金针菇原生质体融合 被引量:7
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作者 成亚利 宝成 +2 位作者 李亮亮 燕克勤 李庆余 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期331-333,共3页
以金针菇(Flmmulina velutipes)为材料,经异硫氨酸荧光素(FIC)标记的金针菇单核W19菌株的原生质体与未经标记的单核Y7菌株的原生质体在聚乙二醇(PEG)的诱导下进行融合,利用显微操纵仪直接挑取一个带有荧光而另一个不具荧光的原... 以金针菇(Flmmulina velutipes)为材料,经异硫氨酸荧光素(FIC)标记的金针菇单核W19菌株的原生质体与未经标记的单核Y7菌株的原生质体在聚乙二醇(PEG)的诱导下进行融合,利用显微操纵仪直接挑取一个带有荧光而另一个不具荧光的原生质体对,培养后,根据融合形成的汉核菌丝具有“锁状连合”这一形态学特征选择、鉴定融合菌株,酯酶同工酶电泳分析结果表明,融合菌株具双亲互补酶带。经测定,多数融合菌株菌丝生长速度和生物量较亲株高,且出菇正常。 展开更多
关键词 金针菇 荧光标记 原生质体融合 食用菌
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白菜黑斑病拮抗细菌Bacillus velezensis DL-59的筛选鉴定及田间防效实验 被引量:26
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作者 杜淑涛 李术娜 宝成 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期51-56,共6页
以白菜黑斑病致病菌芸薹链格孢为测试菌,采用改良的琼脂平板扩散的筛选方法,从土壤中筛选出一株拮抗活性较高的产芽孢细菌。通过对其进行形态观察、生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定其种属,同时通过室内、田间防治实验测定其防治效... 以白菜黑斑病致病菌芸薹链格孢为测试菌,采用改良的琼脂平板扩散的筛选方法,从土壤中筛选出一株拮抗活性较高的产芽孢细菌。通过对其进行形态观察、生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定其种属,同时通过室内、田间防治实验测定其防治效果。结果表明:从土壤中分离到200株细菌,初筛获得具有拮抗作用的菌株20株,经过复筛获得一株具有较高拮抗活性的产芽孢细菌DL-59。该菌株的抑菌圈直径达到23 mm。鉴定该菌株为Bacillus velezensis。田间防治实验DL-59菌剂的病指防效达到79.07%,对白菜黑斑病具有一定的防治作用。此菌株为芽孢杆菌,芽孢对菌剂的仓储期具有重要意义。 展开更多
关键词 拮抗细菌 筛选 鉴定 16S RDNA 防治效果
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