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苦参碱衍生物ZS10基于PI3K/AKT信号通路诱导人肝癌细胞BEL-7402凋亡 被引量：3
1
作者 王湘 张森 +3 位作者 韩科研 曾攀科 李雪娇 王立升 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期116-124,共9页
目的探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路。方法采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC 50;采用DAPI染色法,观察BEL-7... 目的探讨新型苦参碱衍生物ZS10抑制BEL-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡的信号通路。方法采用有机合成的方法,合成ZS10;采用MTT法,分析在作用时间分别为24、48、72 h时,ZS10对BEL-7402细胞增殖的抑制作用,计算IC 50;采用DAPI染色法,观察BEL-7402细胞状态;采用克隆形成法,观察BEL-7402细胞集落形成情况;采用流式细胞仪观察BEL-7402细胞周期阻滞情况和凋亡情况;采用Western blot法检测PI3K-AKT通路及相关蛋白表达水平。结果获得新型苦参碱衍生物ZS10,并进行了结构表征;MTT结果表明,ZS10作用于BEL-7402细胞48 h,IC 50为(6.62±1.11)μmol·L^(-1);DAPI染色结果表明,给药浓度升高,细胞核发生明显改变;克隆形成结果表明,ZS10明显抑制BEL-7402细胞的集落形成;流式细胞术结果表明,ZS10诱导BEL-7402细胞凋亡并阻滞S期。Western blot结果显示,ZS10在浓度为0~8μmol·L^(-1)时,对PI3K/AKT通路及其相关蛋白具有调节作用,并呈剂量依赖性。与对照组比较,给药组PI3K、AKT、p-AKT和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平均明显降低,促凋亡蛋白Bax表达水平均明显升高,周期蛋白Cyclin D1和CDK2表达水平均明显降低,迁移蛋白EGFR、N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高。结论ZS10对肝癌细胞BEL-7402的生长、增殖具有抑制作用。 展开更多
关键词 苦参碱衍生物ZS10 BEL-7402细胞 迁移 周期 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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菥蓂正丁醇部位抑制TLR-4/NF-κB信号通路抗脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎症反应作用研究 被引量：4
2
作者 曾攀科 王湘 +1 位作者 李雪娇 王立升 《药物评价研究》 CAS 2021年第10期2148-2154,共7页
目的研究菥蓂Thlaspi arvense水提醇沉部位、正丁醇部位的抗炎活性以及正丁醇部位的作用机制。方法将菥蓂水提物经过乙醇、正丁醇萃取后制得菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位。采用MTT法确定水提醇沉部位、正丁醇部位(15.625、31.25、62.5... 目的研究菥蓂Thlaspi arvense水提醇沉部位、正丁醇部位的抗炎活性以及正丁醇部位的作用机制。方法将菥蓂水提物经过乙醇、正丁醇萃取后制得菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位。采用MTT法确定水提醇沉部位、正丁醇部位(15.625、31.25、62.5、125、250、500、1000μg/mL)对RAW264.7细胞的毒性。采用脂多糖(LPS)1μg/mL诱导RAW264.7细胞产生炎性反应,建立体外炎症细胞模型。Griess法检测水提醇沉部位、正丁醇部位(7.8125、15.625、31.25、62.5、125、250、500、1000μg/mL)对LPS诱导RAW264.7细胞后NO释放量的影响;ELISA法检测水提醇沉部位、正丁醇部位(125、250、500μg/mL)对白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)释放量的影响;Western Blotting法检测正丁醇部位(125、250、500μg/mL)对环氧合酶-2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)、核因子-κB(NF-κB)p-P65、Toll样受体4(TLR-4)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)蛋白表达的影响。结果菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位质量浓度在1000μg/mL以下时对RAW264.7细胞几乎无毒性作用。与模型组比较,菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位62.5、125、250、500、1000μg/mL组NO释放量显著下降(P<0.01);菥蓂水提醇沉部位、正丁醇部位125、250、500μg/mL组IL-6、TNF-α的分泌量显著降低(P<0.01),且正丁醇部位作用优于水提醇沉部位;菥蓂正丁醇部位500μg/mL组的iNOS和250、500μg/mL组COX-2、IL-1β、NF-κB p-P65、TLR-4、p-IκBα蛋白表达量显著降低(P<0.01),作用均呈浓度相关性。结论菥蓂正丁醇部位显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌以及COX-2、iNOS蛋白的表达,其抗炎作用机制可能与抑制TLR-4/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 菥蓂 水提醇沉部位 正丁醇部位 TLR-4/NF-κB 抗炎 脂多糖 RAW264.7细胞
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基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响 被引量：3
3
作者 曾攀科 王立升 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第23期71-78,共8页
目的:研究基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:采用分子对接和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱衍生物C4(0、1、2、4、8μmol·L^(-1))对热休克蛋白90(Hsp90)的调控作用;... 目的:研究基于热休克蛋白90靶点的苦参碱衍生物C4对非小细胞肺癌细胞迁移、侵袭及凋亡的影响。方法:采用分子对接和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测苦参碱衍生物C4(0、1、2、4、8μmol·L^(-1))对热休克蛋白90(Hsp90)的调控作用;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测衍生物C4(0、0.25、0.5、1、2、4、8、16μmol·L^(-1))对非小细胞肺癌A549细胞活力的影响;采用克隆形成实验检测衍生物C4(0、2、4、8μmol·L^(-1))对A549细胞增殖能力的影响;采用细胞划痕实验检测衍生物C4(0、2、4、8μmol·L^(-1))对A549细胞迁移能力的影响;采用Transwell实验检测衍生物C4(0、2、4、8μmol·L^(-1))对A549细胞侵袭能力的影响;采用流式细胞术检测衍生物C4(0、2、4、8μmol·L^(-1))对A549细胞凋亡能力的影响;采用Western blot检测衍生物C4(0、1、2、4、8μmol·L^(-1))对A549细胞蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、表皮生长因子受体(EGFR)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、p-PI3K、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X基因(Bax)、B细胞淋巴瘤2相关的细胞死亡激动剂(Bad)蛋白表达量的影响。结果:衍生物C4能有效地与Hsp90蛋白通过水介导的氢键网络与天冬氨酸-51(ASN-51)、甘氨酸-135(GLY-135)、苯丙氨酸-138(PHE-138)的残基相互作用,和PHE-138苯环之间的π-π堆积相互作用有助于增强其亲和力,与空白组比较,衍生物C4可以明显的下调A549细胞内Hsp90蛋白表达(P<0.05,P<0.01);与空白组比较,衍生物C4可以明显降低细胞活力(P<0.05,P<0.01);给药24、48、72 h,衍生物C4对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(12.32±0.14)、(7.79±0.16)、(3.26±0.09)μmol·L^(-1);与空白组比较,衍生物C4(2、4、8μmol·L^(-1))使A549细胞克隆形成能力明显下降(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;与空白组比较,衍生物C4可以明显抑制A549细胞的迁移、侵袭能力(P<0.05,P<0.01),其中浓度在8μmol·L^(-1)时效果最为显 展开更多
关键词 苦参碱 苦参碱衍生物C4 非小细胞肺癌 热休克蛋白90(Hsp90) 磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路
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基于网络药理学探究苦参防治宫颈癌的分子机制 被引量：1
4
作者 曾攀科 武欣郁 +1 位作者 王湘 王立升 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期502-509,共8页
目的基于网络药理学探究苦参防治宫颈癌的分子机制。方法通过搜索中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取苦参的主要活性成分,并预测分析其主要靶点。通过在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库获取宫颈癌的主要靶点。将两者共有的交集靶点导入STR... 目的基于网络药理学探究苦参防治宫颈癌的分子机制。方法通过搜索中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取苦参的主要活性成分,并预测分析其主要靶点。通过在线人类孟德尔遗传(OMIM)数据库获取宫颈癌的主要靶点。将两者共有的交集靶点导入STRING平台构建蛋白质互相作用(PPI)网络,利用Cytoscape 3.7.1进行可视化分析。通过Metascape平台进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。将富集结果利用微生信网在线作图工具分析制作气泡图和柱状图。利用Cytoscape 3.7.1生成靶点-通路网络。选择对应靶点数目最多的单体化合物槲皮素处理宫颈癌Hela细胞,采用MTT法检测槲皮素对Hela活力的影响,并用流式细胞术检测槲皮素对Hela凋亡情况的影响。结果筛选得到苦参有效成分45个,其中与宫颈癌疾病相关的有槲皮素、木犀草素等14个活性成分,作用靶点包括肿瘤抑制因子p53(TP53)、蛋白激酶B(AKT)1、表皮生长因子受体(EGFR)、G1/S-特异性周期蛋白-D1(CCND1)、Erb-b2受体酪氨酸激酶2(ERBB2)等,主要涉及的通路包括磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-AKT信号通路、p53信号通路。体外细胞实验显示,与空白对照组相比,槲皮素(10~80μmol·L^(-1))组Hela细胞生存率逐渐降低,细胞凋亡率逐渐增加,呈浓度依赖性(P<0.05)。结论苦参通过槲皮素、木犀草素等活性成分作用于TP53、AKT1、EGFR等靶点发挥抗宫颈癌的作用,其机制与调控PI3K/AKT和p53等信号通路有关。 展开更多
关键词 苦参 网络药理学 宫颈肿瘤 药理作用分子作用机制(中药) 槲皮素
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热休克蛋白90在非小细胞肺癌中的研究进展 被引量：1
5
作者 曾攀科 王湘 王立升 《国际呼吸杂志》 2021年第20期1584-1589,共6页
肺癌是较为常见的癌症,也是致死率最高的癌症之一,其中非小细胞肺癌(NSCLC)发病率占总发病率80%以上,治疗效果不佳且存活率较低。热休克蛋白90(HSP90)是在遗传上具有高度保守特点的热休克蛋白成员之一。HSP90作为一种分子伴侣,在其底物... 肺癌是较为常见的癌症,也是致死率最高的癌症之一,其中非小细胞肺癌(NSCLC)发病率占总发病率80%以上,治疗效果不佳且存活率较低。热休克蛋白90(HSP90)是在遗传上具有高度保守特点的热休克蛋白成员之一。HSP90作为一种分子伴侣,在其底物蛋白进行正确折叠再折叠中起到重要作用。HSP90在肿瘤的发生、发展和预后中发挥着重要的作用,近年来以HSP90为靶点来治疗NSCLC是目前治疗的重要方法之一,本文就热休克蛋白90在NSCLC的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 热休克蛋白质类 癌 非小细胞肺 治疗结果
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lncRNA作为ceRNA在疾病中的研究进展 被引量：1
6
作者 曾攀科 尹凡 +1 位作者 李畅 李慧瑾 《科技视界》 2019年第10期192-193,共2页
lncRNA作为ceRNA在多种疾病中发挥作用,例如在膀胱癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等各种肿瘤细胞中均存在。lncRNA可能成为治疗和诊断各种恶性肿瘤的靶点。因此对于此长链非编码RNA的进行深入研究可以更加充分了解肿瘤的发病机制,达到对肿瘤基... lncRNA作为ceRNA在多种疾病中发挥作用,例如在膀胱癌、肺癌、肝癌、乳腺癌等各种肿瘤细胞中均存在。lncRNA可能成为治疗和诊断各种恶性肿瘤的靶点。因此对于此长链非编码RNA的进行深入研究可以更加充分了解肿瘤的发病机制,达到对肿瘤基因的有效控制具有非常重要的临床意义。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 恶性肿瘤 竞争性内源RNA
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