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肢体缺血性溃疡患者膝下动脉血运的重建 被引量：6
1
作者 谢辉 叶猛 +3 位作者 薛冠华 陈佳俭 曾庆坛 张岚 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第9期746-749,共4页
目的分类分析重症肢体缺血（critical limb ischemia，CLI）性溃疡膝下动脉血管腔内治疗的临床效果。方法对2011年6月至2013年6月间成功实施angiosome概念指导下膝下动脉血运重建的CLI缺血性溃疡患者152例（152条下肢）的临床资料行回... 目的分类分析重症肢体缺血（critical limb ischemia，CLI）性溃疡膝下动脉血管腔内治疗的临床效果。方法对2011年6月至2013年6月间成功实施angiosome概念指导下膝下动脉血运重建的CLI缺血性溃疡患者152例（152条下肢）的临床资料行回顾性研究，根据踝下流出道数（runoff），术后造影伤口呈色（wound blush，WB）情况，angiosome血运重建方式，足部动脉弓情况等不同条件分组．比较各分组临床疗效的差异。结果12个月再干预率（reintervention or amputation，RAO）runoff0组高于runoff〉1组（P〈0．05）和runoff1组（P〈0．05），差异有统计学意义。18个月保肢率WB（＋）组显著高于WB（-）组（P〈0．05），差异有统计学意义。12个月溃疡愈合率、18个月保肢率间接供血无侧支（indirect revascularization without collaterals，IRw）组均低于直接供血（direct revascularization，DR）组（P〈0．05）和间接供血经侧支（indirect revascularization through collaterals，IRc）组（P〈0．05），差异有统计学意义。12个月RAO率IRw组均高于DR组（P〈0．05）和IRC组（P〈0．05），差异有统计学意义。12个月溃疡愈合率、18个月保肢率无足部动脉弓（non—pedal arch，NPA）组均低于完全足部动脉弓（complete pedal arch，CPA）组（P〈0．05）和不完全足部动脉弓（incomplete pedal arch，IPA）组（P〈0．05）差异有统计学意义。12个月RAO率NPA组均高于CPA组（P〈0．05）和IPA组（P〈0．05）。结论WB（＋）者有较高的保肢率，但并没有增加溃疡愈合率。IRc血运重建可以获得与DR血运重建相当的溃疡愈合率和保肢率。CPA与IPA患者溃疡愈合率和保肢率均优于NPA者。 展开更多
关键词 肢体缺血 腿溃疡 血管内操作
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动脉粥样斑块内微小核糖核酸-199a抑制单核细胞炎性反应 被引量：4
2
作者 曾庆坛 郝长宁 +3 位作者 阚科佳 吴圣俊 齐昊喆 张岚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2688-2690,共3页
目的探讨动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞高表达的微小RNA（miRNA，miR）-199a-3p对外周血单核细胞趋化及炎性因子表达的影响及其机制。方法运用免疫组织荧光和原位杂交技术分析下肢动脉粥样硬化斑块表达及分布；收集并提取动脉粥样硬化患... 目的探讨动脉粥样硬化斑块中巨噬细胞高表达的微小RNA（miRNA，miR）-199a-3p对外周血单核细胞趋化及炎性因子表达的影响及其机制。方法运用免疫组织荧光和原位杂交技术分析下肢动脉粥样硬化斑块表达及分布；收集并提取动脉粥样硬化患者外周血中外泌体，透射电镜观察其形态并确定所携带的miR-199a-3p水平；miR-199a-3pmimics转染刺激单核细胞，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测并分析其受体极迟抗原（VLA-4）、淋巴细胞功能相关抗原（LFA）-1及炎性因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6的表达。结果斑块内巨噬细胞miR-199a-3p表达上调[阳性细胞比例：对照组（2．3430±0．2821）％，实验组（6．9680±0．5901）％，P〈0．01]，并以外泌体形式分泌到外周血中，抑制单核细胞趋化因子受体和炎性因子表达。结论动脉粥样斑块内的巨噬细胞通过miR-199a-3p外泌体抑制外周血中单核细胞趋化和炎性因子释放，减少巨噬细胞浸润和泡沫细胞的形成。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 外泌体 微小核糖核酸 单核细胞
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重症肢体缺血缺血性溃疡膝下动脉影像学特征分析 被引量：3
3
作者 谢辉 叶猛 +3 位作者 薛冠华 陈佳佺 曾庆坛 张岚 《中国血管外科杂志（电子版）》 2015年第3期175-180,共6页
目的探讨重症肢体缺血(CLI)缺血性溃疡患者影像资料中膝下动脉病变的分布特点及侧支循环特点。方法回顾性分析2011年6月至2013年6月间成功实施angiosome概念指导下膝下动脉血运重建的152例(152条患肢)CLI缺血性溃疡患者的术前膝下动脉... 目的探讨重症肢体缺血(CLI)缺血性溃疡患者影像资料中膝下动脉病变的分布特点及侧支循环特点。方法回顾性分析2011年6月至2013年6月间成功实施angiosome概念指导下膝下动脉血运重建的152例(152条患肢)CLI缺血性溃疡患者的术前膝下动脉造影影像学资料,糖尿病组患者106例和非糖尿病组46例,对两组患者膝下动脉病变受累数量、缺血溃疡区域angiosome位置分布、膝下动脉侧支循环状况以及足部动脉弓的情况进行统计。结果 CLI缺血性溃疡患者溃疡高发于足底外侧支动脉angiosome(P<0.05)。糖尿病组与非糖尿病组间溃疡分布比较,差异无显著统计学意义(P>0.05)。糖尿病组膝下动脉受累数多于非糖尿病组(P<0.05),血管受累分布差异无统计学意义(P>0.05)。糖尿病组膝下动脉PA受累率(69.8%)低于ATA(89.6%)和PTA(98.1%),差异有统计学意义(P<0.05);非糖尿病组膝下动脉PA受累率(56.5%)低于ATA(80.0%)和PTA(87.0%),差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者膝下动脉多支受累高于单支受累(P<0.05)。糖尿病组3支小腿动脉病变多于非糖尿病组(P<0.05);非糖尿病组1支小腿病变多于糖尿病组(P<0.05)。糖尿病组足部动脉受累数多于非糖尿病组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者足部动脉受累分布差异无统计学意义(P>0.05)。膝下动脉Jenali侧支评分Jenali 0级糖尿病组少于非糖尿病组(P<0.05),Jenali 3级糖尿病组明显多于非糖尿病组(P<0.05)。CLI缺血性溃疡患者腓动脉前穿支-胫前或胫后动脉连接出现率最高(P<0.05)。糖尿病组腓动脉前穿支-胫前或胫后动脉连接出现率低于非糖尿病组(P<0.05),其它动脉连接两组间差异无统计学意义。结论 CLI缺血性溃疡合并糖尿病患者较非糖尿病患者膝下动脉受累更为严重,侧支循环建立差;溃疡分布及血管受累分布特点并无明显差异。 展开更多
关键词 重症肢体缺血 缺血性溃疡 糖尿病 膝下动脉
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降低/消除诱导性多能干细胞致瘤性的研究进展
4
作者 曾庆坛 阚科佳 +2 位作者 齐昊喆 吴圣俊 张岚 《血管与腔内血管外科杂志》 2015年第Z1期199-202,共4页
诱导性多能干细胞,即i PSC(Induced Pluripotent Stem Cell),是指通过基因重新编排方法,对已成熟分化的细胞进行诱导,得到具有类似胚胎干细胞(ESC,Embryonic Stem Cell)的多向分化潜能性细胞。随着i PSCs诱导技术的不断发展,基因治疗为... 诱导性多能干细胞,即i PSC(Induced Pluripotent Stem Cell),是指通过基因重新编排方法,对已成熟分化的细胞进行诱导,得到具有类似胚胎干细胞(ESC,Embryonic Stem Cell)的多向分化潜能性细胞。随着i PSCs诱导技术的不断发展,基因治疗为突破疾病的传统疗法提供了无限可能。而i PSC应用到临床基因治疗之前,需要进行一系列标准化的检测,对其稳定性(stability)。 展开更多
关键词 致瘤性 纤维细胞 诱导因子 重编程 PSCs 诱导性多能干细胞
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慢病毒介导Yes相关蛋白基因过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞增殖
5
作者 张雪 郝长宁 +5 位作者 严泽振 陈佳全 吴圣俊 曾庆坛 阚科佳 张岚 《中华实验外科杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期751-754,共4页
目的探讨慢病毒介导Yes相关蛋白（YAP）过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞（miPSC-EC）增殖的机制。方法诱导小鼠诱导性多能干细胞（miPSC）为内皮细胞（EC），慢病毒介导质粒pPGK-2Flag-YAP转染miPSC-EC，嘌呤霉素筛选出稳... 目的探讨慢病毒介导Yes相关蛋白（YAP）过表达促小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞（miPSC-EC）增殖的机制。方法诱导小鼠诱导性多能干细胞（miPSC）为内皮细胞（EC），慢病毒介导质粒pPGK-2Flag-YAP转染miPSC-EC，嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株miPSC-EC/YAP。Western blot验证YAP是否成功转染miPSC-EC，并检测转染YAP后miPSC-EC内人第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）等蛋白的表达，同时应用噻唑蓝（MTT）比色法检测YAP对miPSC-EC增殖的影响。结果miPSC诱导分化所得细胞形态符合EC特征，几乎都表达EC标志血小板内皮细胞黏附分子（CD31）。Western blot结果显示，转染YAP的miPSC-EC中YAP高表达（未转染细胞YAP几乎不表达），miPSC-EC/YAP组较未转染组PTEN相对表达量明显降低（0.635±0.017比0.879±0.034, P=0.023），p-Akt/相对表达量显著升高（0.450±0.025比0.073±0.018, P=0.007）。同步化之后24、48、72 h，miPSC-EC/YAP组吸光度（A）值较未转染组显著增加（0.113±0.004比0.077±0.004，P=0.000；0.368±0.010比0.199±0.006，P=0.000；0.716±0.004比0.418±0.018，P=0.000）。结论成功诱导miPSC为EC，建立过表达YAP的细胞株miPSC-EC/YAP。过表达YAP抑制PTEN的表达，提高Akt磷酸化。YAP可能通过参与磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路促进miPSC-EC的增殖。 展开更多
关键词 Yes相关蛋白 诱导性多能干细胞 内皮细胞 磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B
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慢病毒介导的miPSC-EC YAP基因过表达及稳定感染细胞系的建立
6
作者 张雪 郝长宁 +5 位作者 曾庆坛 阚科佳 陈佳全 吴圣俊 严泽振 张岚 《中国血管外科杂志（电子版）》 2016年第1期28-33,共6页
目的建立稳定过表达Yes相关蛋白(YAP)的小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞(miP SC-EC)系,为miP SC-EC过表达YAP基因的体内外实验研究奠定基础。方法将模板质粒(p CMV-Flag-YAP2-5SA)改建成慢病毒表达质粒(p PGK-2Flag-YAP2-Puro);将... 目的建立稳定过表达Yes相关蛋白(YAP)的小鼠诱导性多能干细胞来源的内皮细胞(miP SC-EC)系,为miP SC-EC过表达YAP基因的体内外实验研究奠定基础。方法将模板质粒(p CMV-Flag-YAP2-5SA)改建成慢病毒表达质粒(p PGK-2Flag-YAP2-Puro);将慢病毒表达质粒与包装质粒组成共包装系统转染293FT细胞;包装慢病毒,收集病毒原液,超滤浓缩,测定滴度。诱导miP SC分化为EC,观察其形态特征,并行组织化学鉴定。包装好的慢病毒感染miP SC-EC,嘌呤霉素筛选稳定感染的细胞系miP SC-EC/YAP,并用RT-PCR及Western blot方法验证。结果慢病毒表达质粒(p PGK-2Flag-YAP2-Puro)构建成功,并成功包装YAP基因过表达慢病毒,滴度达到1.2×109 TU/ml。miP SC诱导分化所得细胞符合EC形态特征,几乎都表达EC标志CD31。转染YAP的miP SC-EC中YAP m RNA表达水平较未转染细胞明显升高,YAP蛋白高表达(未转染细胞中YAP蛋白几乎不表达)。结论成功构建YAP基因慢病毒过表达载体,诱导miP SC分化为EC,成功建立YAP基因稳定感染细胞系miP SC-EC/YAP。 展开更多
关键词 Yes相关蛋白 慢病毒 诱导性多能干细胞 内皮细胞
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