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离体培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报 被引量:20
1
作者 张树珍 +4 位作者 张银东 郑学勤 陈惠吟 刘北洋 郑楷 《热带作物学报》 CSCD 1997年第2期15-20,共6页
研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴渍)1d可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细... 研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴渍)1d可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细胞染色体数为2n=72,未见嵌合现象,对照的2n=36。 展开更多
关键词 橡胶树 体细胞 离体培养 多倍体无性系 无性系
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抗菌肽基因转化辣椒的研究 被引量:15
2
作者 张银东 唐跃东 《华南热带农业大学学报》 2000年第1期1-4,共4页
以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3~ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1~ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5~ 1m... 以“雪峰”为转基因材料 ,建立了以子叶为外殖体 ,直接分化成苗的离体再生体系 ,其各阶段的培养基分别为 :(1 )芽分化培养基 :MS +BA 3~ 5mg/L +IAA 2mg/L ;(2 )芽伸长培养基 :MS +BA 1~ 2mg/L ;(3)生根培养基 :1 /2MS +IAA 0 .5~ 1mg/L。利用农杆菌介导的三亲交配法将抗菌肽基因CecropinB ,CecropinD导入辣椒 ,获得了再生植株 ,经PCR和Southern杂交检测 ,表明目的基因已整合到辣椒核基因组中 。 展开更多
关键词 细菌病 辣椒 抗菌肽基因 转基因育种 抗病育种
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大花蕙兰的组织培养 被引量:15
3
作者 张树珍 +2 位作者 张银东 郑学勤 陈惠吟 《热带作物研究》 1995年第4期26-28,共3页
大花蕙兰的茎尖先诱导形成原球茎,再通过原球茎→原球茎→丛生芽→完整植株,可在短期内获得大量种苗。在原球茎或丛生芽的继代增殖过程中,在培养基中加入0.5~1.0g/L活性炭,可抑制培养物产生红色的多酚氧化物,从而提高繁... 大花蕙兰的茎尖先诱导形成原球茎,再通过原球茎→原球茎→丛生芽→完整植株,可在短期内获得大量种苗。在原球茎或丛生芽的继代增殖过程中,在培养基中加入0.5~1.0g/L活性炭,可抑制培养物产生红色的多酚氧化物,从而提高繁殖速度。 展开更多
关键词 大花蕙兰 组织培养
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核酶基因转化番木瓜的研究 被引量:19
4
作者 赵志英 周鹏 +1 位作者 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1998年第2期20-26,共7页
利用核酶(Ribozyme,Rib.)基因转化番木瓜(CaricapapayaL.)探索培育抗番木瓜环斑病毒(PapayaRingspotVirus,PRV)品种的新途径。用三亲交配法将切割PRVRNA的Rib.基因的表达载体(P35s/NPTⅡ,Rib.)转入农杆菌LBA4404,采用... 利用核酶(Ribozyme,Rib.)基因转化番木瓜(CaricapapayaL.)探索培育抗番木瓜环斑病毒(PapayaRingspotVirus,PRV)品种的新途径。用三亲交配法将切割PRVRNA的Rib.基因的表达载体(P35s/NPTⅡ,Rib.)转入农杆菌LBA4404,采用农杆菌介导转化将Rib.基因和NPTⅡ基因导入番木瓜细胞的核基因组中。其培养的外植体在含有Kan.100μg/mL,Carb.500μg/mL的选择培养基上产生抗性的愈伤组织,并通过体胚途径再生植株。经DNAdotblot,Southernblot分子杂交检测证明,Rib.基因已整合到番木瓜再生植株的核基因组中。RNAdotblot分析和攻毒试验结果表明,核酶基因在转基因植株中获得了表达,转基因番木瓜植株对PRV具有一定的抗性。 展开更多
关键词 番木瓜 核酶基因 基因转化 转基因植株 检测
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抗菌肽B基因的点突变及在昆虫细胞中的表达 被引量:12
5
作者 吴代飞 +3 位作者 张银东 彭存智 黄亚东 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1999年第3期54-59,共6页
抗菌肽B基因经PCR定点突变技术改造后,克隆到杆状病毒转移载体pAcGP67B中的信号肽位点上,随后与野生AcNPV-DNA共转染Sf9细胞,经空斑筛选、PCR检测证实获得含该基因的重组病毒。重组病毒在Sf9细胞中扩... 抗菌肽B基因经PCR定点突变技术改造后,克隆到杆状病毒转移载体pAcGP67B中的信号肽位点上,随后与野生AcNPV-DNA共转染Sf9细胞,经空斑筛选、PCR检测证实获得含该基因的重组病毒。重组病毒在Sf9细胞中扩增并表达抗菌肽B基因。取含表达产物的细胞培养液检测其生物活性表明:改造过的抗菌肽B基因在Sf9细胞中获得初步表达,且表达的分泌型产物对EscherichiacoliK12D31有抑菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽 PCR 杆状病毒 SF9细胞 表达
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番木瓜叶片再生植株初探 被引量:13
6
作者 周鹏 郑学勤 《热带作物研究》 1992年第4期35-42,共8页
以穗中红成龄叶片及种子实生苗叶片为材料,通过愈伤组织诱导胚状体和不定芽再生植株。成龄叶片在MS~*+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖、实生苗叶片在MS~*+kT0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖或MS~*+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖... 以穗中红成龄叶片及种子实生苗叶片为材料,通过愈伤组织诱导胚状体和不定芽再生植株。成龄叶片在MS~*+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖、实生苗叶片在MS~*+kT0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖或MS~*+2,4-D1.0mg/L+3%~4%蔗糖上培养3~4周均获得质量良好、产量较高的愈伤组织;以MS~*+BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+ADS40mg/L+CH0.5g/L+GA_30.5mg/L+3%蔗糖继代愈伤组织效果较佳,但成龄叶片的愈伤组织出现坏死现象;已获得实生苗叶片胚状体及不定芽,且在一定的培养条件下诱得了植株,成龄叶片仅获得根状物,没有其他结果。本研究旨在为基因工程转化抗病毒基因提供细胞工程方面的转化途径和技术,具有重要的现实意义。 展开更多
关键词 番木瓜 叶片 再生植株
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几丁质酶和抗菌肽D双价基因转化茄子的研究 被引量:10
7
作者 邹克琴 张银东 +2 位作者 王金宇 吴代飞 《热带作物学报》 CSCD 2001年第2期57-61,共5页
在建立茄子的组织培养及遗传转化体系的基础上,以根癌农杆菌为介导,采用叶盘法将几丁质酶和抗菌肽D双价基因转入茄子,分别获得6株KanR植株。对KanR植株进行点杂交、PCR扩增等分子检测。结果表明,目的基因已整合进茄子... 在建立茄子的组织培养及遗传转化体系的基础上,以根癌农杆菌为介导,采用叶盘法将几丁质酶和抗菌肽D双价基因转入茄子,分别获得6株KanR植株。对KanR植株进行点杂交、PCR扩增等分子检测。结果表明,目的基因已整合进茄子核基因组中。 展开更多
关键词 几丁质酶基因 抗菌肽D基因 遗传转化 茄子 双价基因
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番木瓜快繁技术的研究 被引量:9
8
作者 周鹏 郑学勤 《热带作物研究》 1992年第1期52-57,51,共7页
本研究以穗中红番木瓜品种为材料,比较系统地研究了通过实生苗顶芽、成龄植株侧芽直接产生丛生芽的微繁技术。芽增殖的初始培养物在MS~*+BA 0.5mg/l+NAA 0.2mg/l+3%蔗糖培养基上获得,MS~*+BA 0.5mg/l+NAA 0.1mg/l+ADS(腺嘌呤硫酸盐)40m... 本研究以穗中红番木瓜品种为材料,比较系统地研究了通过实生苗顶芽、成龄植株侧芽直接产生丛生芽的微繁技术。芽增殖的初始培养物在MS~*+BA 0.5mg/l+NAA 0.2mg/l+3%蔗糖培养基上获得,MS~*+BA 0.5mg/l+NAA 0.1mg/l+ADS(腺嘌呤硫酸盐)40mg/l+GA_30.5~1.0mg/l+3%蔗糖与MS~*+KT 0.5mg/l+NAA 0.1mg/l+GA_3 0.5~1.0mg/l+3%蔗糖两种培养基交替继代,对幼芽长期保持较高的繁殖系数和正常化生长很有利,采用1/2 MS~*+KT 0.2mg/1+IBA 1.0mg/l+2%蔗糖+AC(活性炭)2 g/l培养基催根则获得较理想的效果。本研究为大量生产杂种一代(F^1)优质品种无性系和杂优单选品种无性系化提供了配套的繁殖技术,同时亦为试管苗的大田推广提供了理论依据。 展开更多
关键词 番木瓜 繁殖
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香蕉CMV—BH外壳蛋白基因转化香蕉的研究初报 被引量:6
9
作者 张银东 张锡炎 +1 位作者 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1995年第S1期19-25,共7页
将香蕉CMV(黄瓜花叶病毒)—BH外壳蛋白基因克隆到能在植物里表达的P(0224)载体上,然后再将此基因连同35S启动子和NOS终止子克隆到另一植物表达载体p(B121)的HindⅢ位点,构成一个既有选择标记的NPⅡ... 将香蕉CMV(黄瓜花叶病毒)—BH外壳蛋白基因克隆到能在植物里表达的P(0224)载体上,然后再将此基因连同35S启动子和NOS终止子克隆到另一植物表达载体p(B121)的HindⅢ位点,构成一个既有选择标记的NPⅡ基因,又有报告基因GUS的嵌合基因表达载体,且每个基因都有各自的启动子和终止子。利用基因枪将带有NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS基因的质粒载体导人香蕉试管苗的幼芽中,培养2d后检测GUS基因的表达,观察到不同细胞层次都有x-Gluc反应。 展开更多
关键词 NPTⅡ-CMV-BH-Cp-GUS嵌合基因载体 基因枪法 香蕉试管苗幼芽 X-Gluc反应
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中石化典型地区气化炉渣基础物性分析研究 被引量:12
10
作者 杨宏泉 孙志刚 +4 位作者 曲江山 张建波 李少鹏 李会泉 《洁净煤技术》 CAS 北大核心 2021年第3期101-108,共8页
随着煤炭资源高值转化技术的不断开发与升级,气化渣是我国近年来产生的重要固废,年产生量巨大,对环境造成严重的污染。针对气化渣的资源属性,目前以低端建工建材和高端陶瓷等铝硅复合材料制备两大方面为主,但随着我国基础设施建设日趋完... 随着煤炭资源高值转化技术的不断开发与升级,气化渣是我国近年来产生的重要固废,年产生量巨大,对环境造成严重的污染。针对气化渣的资源属性,目前以低端建工建材和高端陶瓷等铝硅复合材料制备两大方面为主,但随着我国基础设施建设日趋完善,建工建材利用日趋饱和,因此气化渣高值转化利用成为当前的研究热点。但因缺乏对气化渣自身元素/物质组成的稳定性、赋存状态等方面的认识,目前多数复合材料制备处于实验室研究阶段,尚不足以实现工业化生产。以中石化不同地区气化渣为原料,分别考察不同地区细渣/粗渣的元素组成、物质组成、微观形貌及元素赋存形态,明确气化渣以铝硅酸盐玻璃体(约40%)和无定型碳颗粒(5%~50%)为主,铝硅含量总量在40%左右,铁钙含量在20%~40%,大部分钙铁与其形成共熔体,少部分钙铁单独存在;细渣和粗渣的主要区别在于粗渣颗粒含碳量(5%~20%)比细渣(20%~50%)低,细颗粒含碳量高,粗颗粒玻璃相反应活性高于细渣。 展开更多
关键词 气化渣 元素组成 物质组成 微观形貌 元素赋存
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橡胶树遗传多样性RAPD分析技术各参数选定的研究 被引量:5
11
作者 张银东 彭存智 +1 位作者 郑学勤 《热带作物研究》 1997年第4期20-24,共5页
用两种不同的方法提取橡胶叶片总DNA,结果表明:以SDS法提取的DNA更能满足对橡胶树进行大量RAPD分析的要求,其PCR扩增产物稳定,分别以不同的复性温度、变性和复性时间、循环数、DNA模板量和不同的Tag酶量进行比较实验.结果表明:以9... 用两种不同的方法提取橡胶叶片总DNA,结果表明:以SDS法提取的DNA更能满足对橡胶树进行大量RAPD分析的要求,其PCR扩增产物稳定,分别以不同的复性温度、变性和复性时间、循环数、DNA模板量和不同的Tag酶量进行比较实验.结果表明:以94℃变性1min和36℃复性1min、72℃延伸2min,DNA模板量为25~100ng,Tag酶量为1~1.5U.共进行45个循环为最适的PCR参数,能够得到清晰的扩增条带,且重复结果稳定一致。 展开更多
关键词 橡胶树 遗传多样性 技术参数
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香荚兰细胞培养及产香兰素研究初报 被引量:6
12
作者 张树珍 +2 位作者 郑学勤 陈惠吟 昝丽梅 《热带作物学报》 CSCD 1999年第1期44-48,共5页
香荚兰的幼茎在MS+BA1μg/mL+NAA5μg/mL培养基上培养40d,其表面形成白色、块状的愈伤组织。愈伤组织在MS+2,4-D1μg/mL+BA1μg/mL+NAA4μg/mL+2.5%sucrose的半固体培养基上快速增殖培养,培养4周后培养物的重量增加7... 香荚兰的幼茎在MS+BA1μg/mL+NAA5μg/mL培养基上培养40d,其表面形成白色、块状的愈伤组织。愈伤组织在MS+2,4-D1μg/mL+BA1μg/mL+NAA4μg/mL+2.5%sucrose的半固体培养基上快速增殖培养,培养4周后培养物的重量增加7倍左右;在相同培养基的悬浮培养中,培养4周后培养物的重量增加6~8倍。从不同的培养物中分离出香兰素并测定其含量。 展开更多
关键词 香荚兰 细胞培养 香兰素
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番茄种质的随机扩增多态性DNA指纹分析 被引量:1
13
作者 张树珍 郑学勤 +2 位作者 郑楷 昝丽梅 《热带农业科学》 2000年第2期8-12,共5页
建立番茄的RAPD反应体系。从 65个随机引物中筛选出 5个 (H11,H15,K6,G3,G5)建立 10个番茄种质的RAPD指纹图谱 ,共产生 4 8条带 ,大小在 30 0~ 30 0 0bp之间 ,其中 ,2 3条带 ( 4 8% )为公共带 ,2 5条带 ( 52 % )具有多态性。结果表明 ... 建立番茄的RAPD反应体系。从 65个随机引物中筛选出 5个 (H11,H15,K6,G3,G5)建立 10个番茄种质的RAPD指纹图谱 ,共产生 4 8条带 ,大小在 30 0~ 30 0 0bp之间 ,其中 ,2 3条带 ( 4 8% )为公共带 ,2 5条带 ( 52 % )具有多态性。结果表明 ,G1与S2 。 展开更多
关键词 番茄 种质 品种 RAPD 指纹分析
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根癌土壤杆菌介导的咖啡转化 被引量:3
14
作者 冯勤 杨美珠 +3 位作者 郑学勤 潘乃穟 陈章良 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期255-260,共6页
用五种不同的根癌土壤杆菌转化咖啡栽培品种小粒种的成熟胚培养物,筛选出对咖啡侵染力较强的菌株GV3111(pTiB6S3)和A281(pTiB0542)。在无激素的MS培养基(MSD)上得到淡黄色、松脆、生长迅速的瘤性愈伤组织,继代培养4—6周后,产生大量的... 用五种不同的根癌土壤杆菌转化咖啡栽培品种小粒种的成熟胚培养物,筛选出对咖啡侵染力较强的菌株GV3111(pTiB6S3)和A281(pTiB0542)。在无激素的MS培养基(MSD)上得到淡黄色、松脆、生长迅速的瘤性愈伤组织,继代培养4—6周后,产生大量的畸胎芽。转化体经Opine检测,分别含有特异的章鱼碱或农杆碱。GV3111转化体的DNA分子杂交结果表明,在咖啡的基因组内有T-DNA的插入。用带有GUS基因和NPT Ⅱ基因的双元载体系统pBI121/GV3111和pBI121/A281转化咖啡子叶,转化后第三天可以检测到GUS基因的瞬时表达。在含卡那霉素(Kanamyvin,Km)的MS选择培养基上,得到抗性愈伤组织,这些愈伤组织仍能检测到GUS基因的表达。 展开更多
关键词 根癌土壤杆菌 咖啡 遗传转化
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利用Taq DNA聚合酶反转录cDNA第一链的研究 被引量:1
15
作者 张银东 彭存智 +1 位作者 郑学勤 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期79-82,共4页
应用TaqDNA聚合酶(ThermusaquaticusDNApolymerase)直接对RNA进行反转录成cDNA第一链,然后用特异引物进行PCR扩增,结果表明,反转录达到AMV逆转录酶的效果,且可能得到比AMV逆... 应用TaqDNA聚合酶(ThermusaquaticusDNApolymerase)直接对RNA进行反转录成cDNA第一链,然后用特异引物进行PCR扩增,结果表明,反转录达到AMV逆转录酶的效果,且可能得到比AMV逆转录酶更完整的cDNA第一链。 展开更多
关键词 TAQDNA聚合酶 逆转录 cDNA第一链
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依兰香细胞离体培养及其精油成分分析 被引量:2
16
作者 张树珍 +2 位作者 张银东 郑学勤 陈惠吟 《热带作物学报》 CSCD 1998年第1期34-41,共8页
以依兰香(Canangaodorata)的花瓣及雄蕊群为外植体,在1/2MS+2,4-D1-2+Kt0.2的培养基上分别诱导出白色和红色的两种愈伤组织,建立了依兰香细胞的大量培养(包括固体培养,悬浮培养及发酵罐培养)体系和单细胞克隆,通过化学... 以依兰香(Canangaodorata)的花瓣及雄蕊群为外植体,在1/2MS+2,4-D1-2+Kt0.2的培养基上分别诱导出白色和红色的两种愈伤组织,建立了依兰香细胞的大量培养(包括固体培养,悬浮培养及发酵罐培养)体系和单细胞克隆,通过化学方法进行高产油细胞系的初步筛选,从培养细胞中分离出依兰油,对油成分作了详细的分析。 展开更多
关键词 依兰香 细胞培养 单细胞克隆 精油成分分析
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双价抗菌肽基因表达载体的构建 被引量:1
17
作者 张银东 金小平 +2 位作者 彭存智 郑学勤 《热带作物学报》 CSCD 1994年第S1期61-66,共6页
将人工合成的抗菌肽D基因和抗菌肽B基因克隆到同一植物表达载体pBⅠ121,且各自具有其35s启动子和Nos终止子。先将抗菌肽D基因及其启动子和终止子克隆到pB121HindⅢ位点获得pECVⅠ重组子。然后将抗菌肽B基... 将人工合成的抗菌肽D基因和抗菌肽B基因克隆到同一植物表达载体pBⅠ121,且各自具有其35s启动子和Nos终止子。先将抗菌肽D基因及其启动子和终止子克隆到pB121HindⅢ位点获得pECVⅠ重组子。然后将抗菌肽B基因克隆到pECVⅠ的BamHⅠ位点,经Agarosegel检测和酶切鉴定获得具有抗菌肽D,抗菌肽B基因的双价基因表达载体pECVⅡ。 展开更多
关键词 抗菌肽D基因 抗菌肽B基因 双价抗菌肽基因植物表达载体
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香荚兰体细胞培养再生植株的研究 被引量:1
18
作者 张树珍 +2 位作者 郑学勤 陈惠吟 咎丽梅 《热带作物学报》 CSCD 1995年第S1期44-48,共5页
香荚兰幼茎在MS+BA1+NAA5培养基上培养40d,其表面形成白色、团状的愈伤组织,这类愈伤组织可继代培养而增殖。愈伤组织在MS+BA2-3+NAA(0.5)培养基上培养30d后形成许多颗粒状原球茎,原球茎可进一步... 香荚兰幼茎在MS+BA1+NAA5培养基上培养40d,其表面形成白色、团状的愈伤组织,这类愈伤组织可继代培养而增殖。愈伤组织在MS+BA2-3+NAA(0.5)培养基上培养30d后形成许多颗粒状原球茎,原球茎可进一步继代增殖。将原球茎接种在1/2MS+BA1+IBA(0.5)培养基上培养约30d,原球茎即可发育形成小植株,小植株进一步增殖形成丛生芽。无根苗在1/2MS+1AA1培养基上培养20d后生根,移栽成活率达100%。 展开更多
关键词 香荚兰 组织培养 愈伤组织 原球茎 再生植株
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香兰素在香荚兰植物体中的分布 被引量:1
19
作者 张树珍 +2 位作者 郑学勤 陈惠吟 昝丽梅 《热带作物研究》 1997年第4期69-70,共2页
用气相色谱法分别对香荚兰幼苗的气生根、茎干、叶片及成龄植株的气生根、茎干、叶片、幼果及成熟果荚进行香兰素含量的测定。结果表明,在香荚兰植株的不同器官组织中,均有香兰素的存在,其含量由高到低的顺序为:成熟果荚、幼果、气... 用气相色谱法分别对香荚兰幼苗的气生根、茎干、叶片及成龄植株的气生根、茎干、叶片、幼果及成熟果荚进行香兰素含量的测定。结果表明,在香荚兰植株的不同器官组织中,均有香兰素的存在,其含量由高到低的顺序为:成熟果荚、幼果、气生根、叶片、茎干。 展开更多
关键词 香荚兰植物 香兰素 分布
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中粒种咖啡叶片离体培养的研究 被引量:1
20
作者 张锡炎 郑学勤 《热带作物研究》 1990年第2期17-21,共5页
本文报道诱导中粒种咖啡叶片产生愈伤组织、胚状体以及再生小植株的方法。试验表明,诱导产生愈伤组织的关键激素是2,4-D和Kt,最有利于胚状体分化和小植株再生的培养基分别为MS+Kt2.0毫克/升+GA_30.5毫克/升+NAA0.2毫克/升和MS+GA_31.0毫... 本文报道诱导中粒种咖啡叶片产生愈伤组织、胚状体以及再生小植株的方法。试验表明,诱导产生愈伤组织的关键激素是2,4-D和Kt,最有利于胚状体分化和小植株再生的培养基分别为MS+Kt2.0毫克/升+GA_30.5毫克/升+NAA0.2毫克/升和MS+GA_31.0毫克/升+IAA 0.5毫克/升。 展开更多
关键词 咖啡 中粒种 叶片 离体培养
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