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高致病性猪蓝耳病综合防控体会 被引量:3
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作者 李智丽 马静云 +1 位作者 喜多 丁改法 《中国动物保健》 2011年第11期44-47,共4页
2007年农业部证实高致病性猪蓝耳病是由猪繁殖与呼吸综合症病毒变异株引起、多种病原混合感染的一种急性高致病性疫病,又称"猪高热病"。本文从发病原因、流行病学分析、临床症状、剖检变化和综合防控措施等方面进行了综述。
关键词 高致病性猪蓝耳病 综合防控
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猪流行性腹泻病毒COE基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析 被引量:2
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作者 磨健悦 孙宝丽 +5 位作者 魏钟艳 喜多 志良 谢青梅 毕英佐 马静云 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期503-508,共6页
为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE基因在原核表达载体pET-32a(+)中的表达产物,并检测表达产物的生物活性,根据猪流行性腹泻病毒COE基因的全序列设计引物,以pCMV-PEDVCOE质粒作为模板,通过PCR扩增得到COE基因编码区的序列,将其克隆至含... 为了获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)COE基因在原核表达载体pET-32a(+)中的表达产物,并检测表达产物的生物活性,根据猪流行性腹泻病毒COE基因的全序列设计引物,以pCMV-PEDVCOE质粒作为模板,通过PCR扩增得到COE基因编码区的序列,将其克隆至含有6×His tag的原核表达载体pET-32a(+)中进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE分析和Western-blot鉴定,并用Ni-NTA亲和层析柱纯化,以此纯化产物为包被抗原建立了ELISA检测方法,并用该方法对39份感染PEDV猪血清进行了检测。结果显示,COE基因在大肠杆菌中经IPTG诱导表达,获得与预期分子质量相符的融合蛋白条带。经Western-blot检测,该蛋白能与Anti-PEDV单克隆抗体发生特异性反应。该融合蛋白纯化、复性后的质量浓度为0.7mg/mL。采用以融合COE蛋白为包被抗原建立的ELISA对39份PEDV感染猪血清的检测结果都为阳性,说明该融合蛋白具备作为包被抗原建立ELISA抗体检测方法的潜力。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 COE基因 原核表达 生物活性
原文传递
猪IL-6基因在毕赤酵母中的表达及生物活性鉴定
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作者 磨健悦 孙宝丽 +4 位作者 陆金成 喜多 谢青梅 毕英佐 马静云 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期86-89,共4页
为了快捷、大量地表达猪白细胞介素-6(IL-6)蛋白,试验采用PCR的方法,以含猪IL-6全基因的重组质粒p MD19-T-IL-6为模板扩增猪IL-6成熟蛋白基因,构建真核重组表达载体p PICZαΑ-IL-6,转化毕赤酵母野生株X-33进行分泌表达,并进行表达蛋白... 为了快捷、大量地表达猪白细胞介素-6(IL-6)蛋白,试验采用PCR的方法,以含猪IL-6全基因的重组质粒p MD19-T-IL-6为模板扩增猪IL-6成熟蛋白基因,构建真核重组表达载体p PICZαΑ-IL-6,转化毕赤酵母野生株X-33进行分泌表达,并进行表达蛋白的初步处理和活性鉴定。结果表明:SDS-PAGE可检测到预期的蛋白条带,诱导表达24,48,72,96 h后,分泌IL-6蛋白分别占总蛋白的76.1%、83.4%、84.6%、89.6%。第96小时时,猪IL-6表达产物浓度约为0.94 g/L。Western-blot试验证实,重组猪IL-6蛋白与兔抗猪IL-6多克隆抗体发生特异性反应。猪IL-6表达产物浓度为10.5 mg/L时对猪外周血淋巴细胞具有促进增殖作用,浓度为105.0 mg/L时则具有抑制作用。 展开更多
关键词 白细胞介素-6(IL-6) 真核表达 生物活性 毕赤酵母
原文传递
一例猪流行性腹泻发病及处置案例分析
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作者 喜多 晁行周 +2 位作者 张显浩 王鼎涵 梁敏 《猪业科学》 2022年第10期77-79,共3页
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征,日龄越小,症状越严重,死亡率甚至高达90... 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性肠道传染病,以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征,日龄越小,症状越严重,死亡率甚至高达90%~100%,对养猪业造成严重的经济损失。2010年以来中国多地发生PED,主要原因为毒株发生了变异,分析发现,流行毒株与经典的CV777毒株S和M基因有较大变异,提示疫苗使用需选择流行毒株制备的疫苗。本文针对广东某猪场在2022年5月份暴发PED的典型案例进行总结分析如下。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻 流行毒株 养猪业 哺乳仔猪 疫苗使用 肠道传染病 PEDV 致死率
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猪流行性腹泻病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
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作者 喜多 魏钟艳 +4 位作者 李智丽 孙宝丽 谢青梅 毕英佐 马静云 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期16-20,共5页
【目的】建立2种猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体间接ELISA检测方法.【方法】分别以GD-1株PEDV灭活全病毒和原核表达的COE融合蛋白作为包被抗原,确定最佳ELISA条件,检验其重复性、特异性等,并进行临床应用.【结果和结论】确定了2种ELISA方... 【目的】建立2种猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体间接ELISA检测方法.【方法】分别以GD-1株PEDV灭活全病毒和原核表达的COE融合蛋白作为包被抗原,确定最佳ELISA条件,检验其重复性、特异性等,并进行临床应用.【结果和结论】确定了2种ELISA方法的最佳条件,重复性试验显示变异系数分别小于4.60%和5.30%,特异性试验检测口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清均为阴性,并具有良好的稳定性和较长的保存期.临床样品检测结果显示,223份血清样品总阳性率分别为97.3%(217/223)和98.6%(220/223),2种方法检测的阳性率相近,具有良好的检出率和很高的符合率,为PEDV的抗体检测及流行病学调查提供了一种技术手段. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 COE蛋白 ELISA 抗体检测
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猪瘟的综合防控体会
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作者 李智丽 喜多 丁改法 《中国动物保健》 2012年第3期31-33,共3页
猪瘟是一种高度接触性传染病,世界动物卫生组织(OIE)曾将其列为A类16种法定传染病之一。本文从猪瘟的病原学、流行病学分析、临床症状、剖检变化和综合防控措施等方面进行了综述。
关键词 猪瘟 综合防控
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猪场设施改造中“风机+水帘”通风系统常见问题及解决方案
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作者 晁行周 梁敏 +4 位作者 邓素军 张显浩 曹长福 喜多 陈燕珊 《广东畜牧兽医科技》 2021年第6期21-22,31,共3页
非洲猪瘟对我国养猪业带来巨大打击,目前缺乏有效的治疗手段,生物安全是防控非洲猪瘟唯一有效的方法。我国目前有超过43%养户为中小养户,其猪舍大多为传统敞开式猪舍,复产需要进行升级和密闭改造,使用"风机+水帘"通风模式。... 非洲猪瘟对我国养猪业带来巨大打击,目前缺乏有效的治疗手段,生物安全是防控非洲猪瘟唯一有效的方法。我国目前有超过43%养户为中小养户,其猪舍大多为传统敞开式猪舍,复产需要进行升级和密闭改造,使用"风机+水帘"通风模式。部分饲养人员不清楚如何正确使用"风机+水帘"通风模式,出现降温效果不理想问题,影响生产成绩。本文主要从猪舍密封性、风机数量/水帘面积、水帘用水、日常维护等方面进行分析,提高传统猪舍"风机+水帘"使用效果。 展开更多
关键词 传统猪舍 非洲猪瘟预防 升级改造 风机 水帘
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