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水痘-带状疱疹病毒IgG抗体ELISA定量检测方法的优化、验证及应用 被引量：1
1
作者 周志军 陈克金 +9 位作者 林连珍 李娟 王敏 陈丽梅 程爽 罗敏华 曾双迎 李陶敬 胡勇 李策生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期973-979,共7页
目的 优化水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)IgG抗体效价ELISA定量检测方法,进行验证后用于健康人群中高效价VZV-IgG血浆筛选。方法 选用德国维润赛润研发有限公司VZV-IgG间接ELISA试剂盒,将第1代VZV人免疫球蛋白国际标准... 目的 优化水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)IgG抗体效价ELISA定量检测方法,进行验证后用于健康人群中高效价VZV-IgG血浆筛选。方法 选用德国维润赛润研发有限公司VZV-IgG间接ELISA试剂盒,将第1代VZV人免疫球蛋白国际标准品(NIBSC编号:W1044)稀释至2 IU/mL作为标准品,采用4参数拟合曲线建立定量ELISA法,确定其最佳线性范围;对优化后的方法进行精密度、准确度验证。用建立的方法检测国药集团武汉血液制品有限公司辖属10个浆站1 962份人血浆样品VZV-IgG抗体效价,以及部分批次人免疫球蛋白制剂。结果 标准曲线线性范围为16.25~2 000 mIU/mL,批内精密度CV为1.3%~10.6%,批间精密度CV为4.270%~7.636%,批内准确度为92.30%~111.02%,批间准确度为98.4%~104.88%;样品添加试验显示,添加样品的实测值为理论值的95.79%~111.03%。1 962份人血浆样本的阳性率为94.29%,效价大于3 000 mIU/mL占比1.02%。不同种类人免疫球蛋白制剂中VZV-IgG抗体效价均较低,且均高于静注人免疫球蛋白(pH 4)。结论 优化后的VZV-IgG定量检测方法可用于健康人群VZV-IgG筛查,自然感染的健康献浆员的VZV-IgG抗体阳性率高,但效价低,需进行疫苗免疫获得合格的高效价血浆。 展开更多
关键词 水痘-带状疱疹病毒 IGG ELISA 阳性率 效价
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静注COVID-19人免疫球蛋白(pH4)原料血浆筛选用试剂盒(ELISA)的确定及其定量检测方法的建立、验证及应用 被引量：5
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作者 周志军 邢延涛 +10 位作者 梁小龙 肖龙 曾双迎 李璞 邓琨 王月 喻剑虹 李陶敬 胡勇 韩韧 李策生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1344-1351,共8页
目的通过比较特异性、敏感度、线性范围对目前市售的5家新型冠状病毒IgG抗体检测试剂盒(厂家A、B、C、D、E)进行筛选,建立定量检测方法并验证,用于静注COVID-19人免疫球蛋白(pH4)所需原料血浆的检测。方法将已知有中和活性的新型冠状病... 目的通过比较特异性、敏感度、线性范围对目前市售的5家新型冠状病毒IgG抗体检测试剂盒(厂家A、B、C、D、E)进行筛选,建立定量检测方法并验证,用于静注COVID-19人免疫球蛋白(pH4)所需原料血浆的检测。方法将已知有中和活性的新型冠状病毒康复者恢复期血浆作为内控标准品,进行2倍系列稀释共7个稀释度(S1~S7),按照5个厂家试剂盒说明书操作,比较最高浓度S1的吸光值,用四参数拟合曲线比较5家试剂盒的线性范围;用候选的3家试剂盒初步建立定量检测方法并检测部分有代表性的阴性和阳性样本,比较结果的相关性;综合考虑选定一家试剂盒,将内控标准品进行系列稀释检测,确定其稀释度赋值,拟合标准曲线建立定量检测方法,并验证其线性范围、准确度和精密度,用于建立血浆筛查的模式。结果内控标准品的线性范围显示,厂家A可用倍比6个稀释度,S1吸光值为2.8;厂家B可用5个倍比稀释度,S1吸光值为2.4;厂家C可用5个倍比稀释度,S1吸光值为1.4;厂家D可用倍比3个稀释度,S1吸光值为3.3;厂家E可用5个倍比稀释度,S1吸光值为3.3。线性范围相近的厂家A、B、E试剂盒利用内控标准品建立了定量检测方法,曲线的决定系数R^(2)和各稀释度的回收率均符合要求,厂家A检测有代表性的阴性样本本底较高,特异性不好;3家试剂盒与中和试验检测有代表性的阳性样本结果的相关性均>0.9。选定用厂家B试剂盒,用其3个批次试剂盒4次检测的内控标准品的稀释度赋值为32,四参数拟合曲线线性成立,稀释度的线性范围为1~16,R^(2)>0.99,准确度、精密度符合要求。建立了单孔检测的筛浆模式,确定了复测样品的稀释度。结论厂家B试剂盒优化为定量检测试剂盒,经验证后可用于静注COVID-19人免疫球蛋白原料血浆的筛选。 展开更多
关键词 原料血浆 静注COVID-19人免疫球蛋白 定量ELISA 验证 筛查模式
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新冠病毒奥密克戎株感染前后血浆中的抗体变化与分布
3
作者 周志军 岳胜兰 +10 位作者 彭焱 刘俊 邬云芬 邓琨 张云 李娟 陈克金 李策生 曾双迎 胡勇 张金 《中国输血杂志》 CAS 2023年第7期578-583,共6页
目的通过ELISA和假病毒中和实验检测奥密克戎株感染前后代表性混合血浆的SARS-CoV-2-IgG水平及针对不同病毒株的中和抗体,了解抗体变化规律及中和抗体分布,确定能用于新冠特免(静脉注射COVID-19人免疫球蛋白)制备的血浆最佳采集时间段... 目的通过ELISA和假病毒中和实验检测奥密克戎株感染前后代表性混合血浆的SARS-CoV-2-IgG水平及针对不同病毒株的中和抗体,了解抗体变化规律及中和抗体分布,确定能用于新冠特免(静脉注射COVID-19人免疫球蛋白)制备的血浆最佳采集时间段。方法建立SARS-CoV-2-IgG的ELISA定量检测方法并进行线性范围、准确度和精密度验证;检测25名献浆者奥密克戎感染后20~40 d的单人份康复期血浆SARS-CoV-2-IgG效价,按照效价结果制备了2组混合血浆小样WP1(1000~2000 EIU/mL)和WP2(2000~4000 EIU/mL),并检测其不同病毒株(原型株、BA.1、BA.2、BA.4/5、BF.7、BQ.1.1)假病毒中和效价,确定不同病毒株中和抗体的反应性分布。检测公司下属14个浆站采集的奥密克戎株感染前后的代表性混浆的SARS-CoV-2-IgG效价,包括2022年12月—2023年5月不同浆站不同时间段采集的奥密克戎康复者血浆(OP)和2022年3—12月采集的奥密克戎感染前的正常合并血浆(VN),根据结果分析献浆者感染奥密克戎株前后SARS-CoV-2-IgG差异及随时间变化规律。结果以内控参考品B2为标准品(效价100 EIU/mL),SARS-CoV-2-IgG的线性范围在6.25~200 EIU/mL,批内准确度在81.793%~106.985%之间,批内精密度在1.100%~13.000%之间,批内总误差在2.988%~22.679%;批间准确度在90.788%~96.893%之间,批间精密度在4.870%~6.272%之间,批间总误差在9.192%~15.399%。假病毒中和抗体的结果显示,WP系列混浆中和抗体效价排序为原型株>BA.2>BA.4/5>BF.7≈BQ.1.1>BA.1,WP1和WP2两者各项检测结果的相关性高(Pearson r=0.9311,P=0.0023),说明奥密克戎感染后康复期血浆中不同病毒株中和抗体效价分布基本稳定。与奥密克戎大规模感染前康复期血浆G128相比,血浆中奥密克戎株的抗体效价明显提高,其中BA.2抗体与原型株抗体的比例由感染前的26.9%上升到感染后的82.6%~87.5%。奥密克戎感染前VN系列检测结果<100 EIU/mL,奥密克戎感染后 展开更多
关键词 新型冠状病毒奥密克戎株 SARS-CoV-2-IgG效价 中和抗体效价 抗体变化和分布
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低温乙醇法在人血白蛋白工业化生产中的应用
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作者 陈勤 高斌 +1 位作者 王敏 曾双迎 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2023年第6期25-28,共4页
本文详细讨论了低温乙醇法在人血白蛋白工业化生产中的应用。首先,介绍了乙醇法的基本原理,探讨了乙醇作为蛋白质沉淀剂的机理以及低温对乙醇沉淀法的影响及原因。然后,概述了人血白蛋白的工业化生产过程,包括人血白蛋白的生物化学特性... 本文详细讨论了低温乙醇法在人血白蛋白工业化生产中的应用。首先,介绍了乙醇法的基本原理,探讨了乙醇作为蛋白质沉淀剂的机理以及低温对乙醇沉淀法的影响及原因。然后,概述了人血白蛋白的工业化生产过程,包括人血白蛋白的生物化学特性、常规提取与纯化流程以及工业化生产过程中的常见问题与挑战。接着,详细讲述了低温乙醇法在人血白蛋白工业化生产中的应用,包括实施步骤、优势、对工业化生产效率和产品质量的影响等。最后,探讨了低温乙醇法在人血白蛋白生产中的限制与挑战,以及预期的技术改进、新技术出现和未来应用。 展开更多
关键词 乙醇沉淀法 人血白蛋白 工业化生产 提取与纯化 技术改进
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COVID-19康复者恢复期血浆及COVID-19静注人免疫球蛋白的IgG亚类检测分析 被引量：3
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作者 邢延涛 韩韧 +12 位作者 梁小龙 曾双迎 黄锡安 彭焱 高斌 王霖慧 周志军 梅峰 吴强 喻剑虹 胡勇 何彦林 李策生 《国际生物制品学杂志》 CAS 2021年第4期181-185,共5页
目的探讨COVID-19康复者恢复期血浆及COVID-19静注人免疫球蛋白(human intravenous immunoglobulin,IVIG)(COVID-19-IVIG)IgG及亚类的水平。方法选择2020年2月至3月国药集团武汉血液制品有限公司采集的COVID-19康复者恢复期血浆及制备的... 目的探讨COVID-19康复者恢复期血浆及COVID-19静注人免疫球蛋白(human intravenous immunoglobulin,IVIG)(COVID-19-IVIG)IgG及亚类的水平。方法选择2020年2月至3月国药集团武汉血液制品有限公司采集的COVID-19康复者恢复期血浆及制备的COVID-19-IVIG作为研究组,选择健康者单采血浆及IVIG作为对照组。采用免疫比浊法检测并比较免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)及IgG亚类水平。分析COVID-19-IVIG中IgG亚类与其他蛋白之间的相关性。结果健康者单采血浆的IgG3、IgG4水平显著高于恢复期血浆(P<0.05),但IgG1、IgG2水平差异无统计学意义(P>0.05)。恢复期血浆IgM水平与血型〔相关系数(r)=0.649〕、抗体效价(r=0.696)呈正相关(P<0.05),IgG1(r=0.745)、IgG2(r=0.952)水平与IgG呈正相关(P<0.05)。COVID-19-IVIG的IgG1/∑^(4)_(i)=1 IgGn显著高于恢复期血浆(t=3.633,P<0.05),而IgG4/∑^(4)_(i)=1 IgGn显著低于康复者混合血浆(t=-4.899,P<0.05),两组间IgG2/∑^(4)_(i)=1 IgGn和IgG3/∑^(4)_(i)=1 IgGn差异无统计学意义(t值分别为-0.974和-0.280,P值均大于0.05)。COVID-19-IVIG与IVIG的IgG亚类分布差异无统计学意义(P>0.05)。在COVID-19-IVIG中,仅IgG2水平与α2巨球蛋白呈负相关(P<0.05)。结论恢复期血浆IgG亚类水平与健康者单采血浆有一定差异。COVID-19-IVIG制备过程中存在IgG亚类水平的变化,COVID-19-IVIG IgG亚类齐全,与IVIG IgG亚类水平相近。 展开更多
关键词 新型冠状病毒肺炎 康复者恢复期血浆 免疫球蛋白G 免疫球蛋白亚类
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