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表达猪流感病毒血凝素基因的重组腺病毒的构建及免疫原性分析 被引量:3
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作者 汪思钧 廖明 +3 位作者 任涛 张春红 黄忠 汉威 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期78-83,共6页
通过细菌内同源重组的方法成功构建了表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。首先将血凝素基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP上,与腺病毒基因组质粒pAdenoVatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183菌株,经细菌内同源重... 通过细菌内同源重组的方法成功构建了表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。首先将血凝素基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdenoVator-CMV5-IRES-GFP上,与腺病毒基因组质粒pAdenoVatorΔE1/E3共转化大肠杆菌BJ5183菌株,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd-HA-GFP。将该重组质粒转染293细胞以包装重组腺病毒。根据报告基因GFP的表达及Western-blot分析,证明获得了可正确表达猪流感病毒血凝素的重组腺病毒rAd-HA-GFP。重组腺病毒经一次性腹腔注射接种昆明鼠,2周后可检测到血凝抑制抗体,并且抗体至少可以持续12周,证实重组腺病毒介导表达的血凝素蛋白具有良好的免疫原性,可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。 展开更多
关键词 猪流感病毒 血凝素基因 重组腺病毒
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表达猪生长激素基因的重组腺病毒的构建及对猪生长的促进效果观察 被引量:2
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作者 汉威 张春红 +2 位作者 黄忠 阮良基 林洁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期592-596,共5页
利用复制缺陷型重组腺病毒作为基因表达载体,将猪生长激素(pGH)基因直接转导到猪体内细胞,研究猪生长激素基因在猪体内的促生长作用。用同源重组的方法,构建含pGH基因的重组腺病毒(Ad-pGH)。将其感染293细胞和PK-15细胞,均可检测到pGH。... 利用复制缺陷型重组腺病毒作为基因表达载体,将猪生长激素(pGH)基因直接转导到猪体内细胞,研究猪生长激素基因在猪体内的促生长作用。用同源重组的方法,构建含pGH基因的重组腺病毒(Ad-pGH)。将其感染293细胞和PK-15细胞,均可检测到pGH。用1 mL此重组腺病毒(1010TCID50)一次性肌肉注射60日龄的杂交长白猪。结果表明,试验组的猪平均增重比对照组的猪增加37%(注射后第4周)和19%(注射后第6周);饲料报酬提高28%(注射后第4周)和18%(注射后第6周)。试验结果证明,由重组腺病毒表达的pGH具有生物学活性,在猪体内起到明显的促进生长的作用。重组腺病毒介导的pGH基因在猪体内的表达可维持约4周。 展开更多
关键词 猪生长激素 重组腺病毒 猪体试验
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重组猪γ-干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究 被引量:2
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作者 黄忠 黄元 +1 位作者 阮良基 汉威 《广东农业科学》 CAS CSCD 2008年第9期98-102,共5页
采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明... 采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-blot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明,重组猪γ-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对猪肾传代细胞(PK-15)的攻击;而在动物试验中,重组猪γ-干扰素可明显提高猪伪狂犬疫苗的免疫效果。 展开更多
关键词 猪γ-干扰素(PoIFN-γ) 重组毕赤酵母 基因表达
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植物蛋白磷酸化的检测方法 被引量:2
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作者 朱丹 汉威 +1 位作者 李媛 任东涛 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期76-82,共7页
蛋白磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,几乎参与植物所有生命过程的调节。蛋白磷酸化过程主要指在蛋白激酶的催化作用下,将三磷酸腺苷(ATP)上的γ位磷酸基团转移到底物蛋白特定氨基酸残基上的过程。底物蛋白上被磷酸化的常见氨... 蛋白磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰方式,几乎参与植物所有生命过程的调节。蛋白磷酸化过程主要指在蛋白激酶的催化作用下,将三磷酸腺苷(ATP)上的γ位磷酸基团转移到底物蛋白特定氨基酸残基上的过程。底物蛋白上被磷酸化的常见氨基酸有丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸,磷酸基团与氨基酸中的羟基通过酯键连接。该文详细描述了几种常用的蛋白质体外及体内磷酸化的检测方法及注意事项。 展开更多
关键词 蛋白磷酸化 蛋白激酶 植物
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