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中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立 被引量:15
1
作者 马鸣潇 李明 +4 位作者 袁春颖 李鹏飞 张轶博 苏玉虹 祖乙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期425-427,共3页
目的建立中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法。方法参照已发表的中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)基因序列,针对其结构蛋白基因设计1对特异性引物,提取感染CSBV的囊状幼虫RNA,反转录为cDNA,以其为模板,进行PCR扩增,对检测方法进行优化,验证该方法的... 目的建立中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法。方法参照已发表的中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)基因序列,针对其结构蛋白基因设计1对特异性引物,提取感染CSBV的囊状幼虫RNA,反转录为cDNA,以其为模板,进行PCR扩增,对检测方法进行优化,验证该方法的特异性及敏感性,并对31份临床样品进行检测。结果所建立的CSBVRT-PCR检测方法特异性和敏感性良好,以含CSBV结构蛋白基因的重组质粒为模板,最低可检出10pgDNA。临床症状诊断和电镜观察均为阴性的22份样品经RT-PCR检测,有2份扩增出目的条带。结论已建立了中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法,为CSBV检测、流行病学调查及动物模型的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病毒 反转录聚合酶链式反应 特异性 敏感性
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小尾寒羊简介 被引量:7
2
作者 祖乙 卢秀芳 《中国草食动物》 2003年第3期50-51,共2页
关键词 小尾寒羊 产地 区域分布 生态条件 生产性能
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辽宁地区中华蜜蜂囊状幼虫病的RT—PCR检测 被引量:9
3
作者 李明 马鸣潇 +4 位作者 张轶博 苏玉虹 祖乙 周晨阳 张大利 《畜牧兽医科技信息》 2008年第12期26-27,共2页
蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病。通过RT-PCR方法,我们在辽宁地区检测出了该病,并且辽宁地区的蜂囊状幼虫病病毒与早期我国在广东地区检测到的中蜂囊状幼虫病病毒基因序列有所不同,推测中蜂囊状幼虫病病毒可能存在地... 蜜蜂的囊状幼虫病是中华蜜蜂常见且危害严重的疾病。通过RT-PCR方法,我们在辽宁地区检测出了该病,并且辽宁地区的蜂囊状幼虫病病毒与早期我国在广东地区检测到的中蜂囊状幼虫病病毒基因序列有所不同,推测中蜂囊状幼虫病病毒可能存在地区的差异性。 展开更多
关键词 辽宁地区 蜜蜂 囊状幼虫病 RT—PCR检测
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猪巴氏杆菌病病原的分离与鉴定 被引量:6
4
作者 李冰 祖乙 赵金梅 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第11期115-117,共3页
关键词 猪巴氏杆菌病 血清型鉴定 病原菌 分离 多杀性巴氏杆菌 锦州地区 琼脂扩散法 上升趋势
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动物性食品卫生学实践教学改革探索 被引量:6
5
作者 刘永华 祖乙 +4 位作者 刘秀萍 杨松 唐雨顺 唐峰 寇叙 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第11期159-160,共2页
动物性食品卫生学是以兽医学和公共卫生学的理论为基础的综合性应用学科。具有鲜明的专业特点。首先,动物性食品卫生学涉及面非常广泛,与动物解剖学、兽医病理学、兽医微生物学、家畜传染病学、家畜寄生虫学、分析化学、兽医公共卫生等... 动物性食品卫生学是以兽医学和公共卫生学的理论为基础的综合性应用学科。具有鲜明的专业特点。首先,动物性食品卫生学涉及面非常广泛,与动物解剖学、兽医病理学、兽医微生物学、家畜传染病学、家畜寄生虫学、分析化学、兽医公共卫生等有着密切的联系;其次,动物性食品卫生学具有很强的专业性、技术性、应用性和实践性;第三,动物性食品卫生学作为公共卫生的一门重要课程,是食品安全及卫生监管的重要发展方向。 展开更多
关键词 食品卫生学 动物性 实践教学改革 公共卫生学 兽医微生物学 家畜传染病学 家畜寄生虫学 兽医公共卫生
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鸡源嗜酸乳杆菌对蛋雏鸡生长性能、肠道微生物菌群及吸收功能的影响 被引量:6
6
作者 唐峰 王建发 +5 位作者 刘秀萍 唐雨顺 刘永华 寇叙 祖乙 李冰 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2013年第15期73-77,共5页
试验旨在研究鸡源嗜酸乳杆菌对蛋雏鸡生长性能和肠道微生物菌群的影响。选用1日龄海蓝褐蛋用雏鸡120只,随机分成2组,每组3个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂普通商品化的雏鸡颗粒料,试验组日粮是在对照组日粮中均匀混合添加1%嗜酸乳杆... 试验旨在研究鸡源嗜酸乳杆菌对蛋雏鸡生长性能和肠道微生物菌群的影响。选用1日龄海蓝褐蛋用雏鸡120只,随机分成2组,每组3个重复,每个重复20只鸡。对照组饲喂普通商品化的雏鸡颗粒料,试验组日粮是在对照组日粮中均匀混合添加1%嗜酸乳杆菌冻干粉,试验周期40 d。分别于试验第10、20、30、40天测定各组的日增重和饲料增重比,从每组中随机取8只测定回肠内容物中乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌和沙门氏菌的数量以及回肠中钠-葡萄糖共转运载体1(SGLT1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)和小肽转运蛋白1(PepT1)mRNA的水平。结果表明:基础日粮中添加嗜酸乳杆菌冻干粉后,对雏鸡具有促进生长的作用;可提高雏鸡肠道乳酸杆菌和双歧杆菌的数量,减少大肠杆菌和沙门氏菌在肠道内的定植和增殖,可提高SGLT1和PepT1 mRNA转录水平,进而提高对葡萄糖和小肽的吸收。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 生长性能 肠道菌群 吸收功能 雏鸡
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口蹄疫病毒三价复合多表位佐剂DNA疫苗构建及其免疫原性 被引量:6
7
作者 马鸣潇 金宁一 +4 位作者 尹革芬 鲁会军 李昌 金扩世 祖乙 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期514-519,共6页
以O型、A型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1全基因和AsiaI型FMDV两个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因作为主要免疫原基因,以来源于非结构蛋白3ABC和结构蛋白VP4上的3个Th2细胞表位基因作为辅助基因,构建了O型、A型和Asia1... 以O型、A型口蹄疫病毒(FMDV)结构蛋白VP1全基因和AsiaI型FMDV两个基因拓扑型的结构蛋白VP1基因上的5个抗原表位基因作为主要免疫原基因,以来源于非结构蛋白3ABC和结构蛋白VP4上的3个Th2细胞表位基因作为辅助基因,构建了O型、A型和Asia1型FMDV复合多表位基因工程疫苗表达盒OAAT,在此基础上,以金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)为基因佐剂,通过分子设计构建了SEA与OAAT融合表达基因。将构建好的表达盒OAAT与SEA融合表达基因克隆至真核表达载体PVAX1PCMV启动子下游,构建了口蹄疫三价基因佐剂DNA疫苗pEA。经Western blotting和IFA检测,目的蛋白在Hela细胞中获得正确表达。小鼠免疫实验表明,pA和pEA免疫组的血清抗体均能分别与O型、A型和AsiaI抗原反应,与对照组相比差异较显著,且pEA免疫组和灭活疫苗免疫组抗体水平均显著高于pA免疫组;同时pA和pEA免疫小鼠细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10较对照组显著提高,且pEA免疫组的IL-2、IFN-γ和IL-4水平明显高于pA免疫组。用O/NY00和Asia1/YNBS/58株FMDV进行豚鼠攻毒免疫保护试验,结果表明O型和Asia1型FMDV二联灭活疫苗免疫组均获得完全保护,pA免疫组均获得2/4保护,pEA免疫组均获得3/4保护,而pVAX1和PBS免疫组完全没有保护。实验结果表明,SEA与OAAT融合表达蛋白具有较好免疫原性,且SEA可以作为DNA疫苗的有效基因佐剂。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 金黄色葡萄球菌肠毒素A SEA DNA疫苗
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猪链球菌的分离与鉴定 被引量:5
8
作者 祖乙 史丽华 徐晓丽 《现代畜牧兽医》 2007年第12期36-38,共3页
文章对分离的4株猪源链球菌进行了鉴定,其形态、染色、培养及生化特性均符合链球菌的特点。用链球菌乳胶分型诊断液检测上述分离株,均不在其检测范围,即不属于链球菌兰氏分群的A~G群,但它们凝集猪链球菌2型抗血清。分离株对小鼠不致病... 文章对分离的4株猪源链球菌进行了鉴定,其形态、染色、培养及生化特性均符合链球菌的特点。用链球菌乳胶分型诊断液检测上述分离株,均不在其检测范围,即不属于链球菌兰氏分群的A~G群,但它们凝集猪链球菌2型抗血清。分离株对小鼠不致病,而对家兔则可致病。 展开更多
关键词 猪链球菌 分离与鉴定
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动物医学专业本科生导师制人才培养模式探索 被引量:4
9
作者 王宏军 周铁忠 +4 位作者 蒋红 李冰 王术德 祖乙 苏玉虹 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期166-167,共2页
为了全面推进素质教育,培养适应社会需求的动物医学人才,畜牧兽医学院在教改实践中不断探索新路子,于2007年9月份遴选部分教师试点动物医学专业本科生导师制。在试点过程中,逐步确定本科生导师的基本条件、导师工作职责、培养方案,制订... 为了全面推进素质教育,培养适应社会需求的动物医学人才,畜牧兽医学院在教改实践中不断探索新路子,于2007年9月份遴选部分教师试点动物医学专业本科生导师制。在试点过程中,逐步确定本科生导师的基本条件、导师工作职责、培养方案,制订导师聘任和管理制度。结果表明:本科生导师制的实施取得了显著的成效,学生在导师的指导下,科研创新和实践能力有了显著提高;在科研中拓展了思维,锻炼了意志,学会了总结分析和论文写作,考研的学生明显增多,学术氛围越来越浓,同时也培养了勤奋实践精神,实践能力普遍提高。 展开更多
关键词 动物医学 本科生 导师制 科研能力
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病死动物无害化处理罐及其配套技术的研究与应用 被引量:4
10
作者 祖乙 《中国猪业》 2015年第4期52-54,共3页
为了解决病死动物无害化处理问题,笔者团队研究开发了能够在自然温度条件下,利用生物发酵法对病死动物及相关动物产品进行无害化处理的"病死动物无害化处理罐"设备。本文详细阐述了病死动物无害化处理罐的组成结构、技术特征... 为了解决病死动物无害化处理问题,笔者团队研究开发了能够在自然温度条件下,利用生物发酵法对病死动物及相关动物产品进行无害化处理的"病死动物无害化处理罐"设备。本文详细阐述了病死动物无害化处理罐的组成结构、技术特征、技术指标和性能优势,具体介绍了病死动物无害化处理罐处理病死动物的过程及加快动物尸体腐败速度等综合配套技术方法。 展开更多
关键词 病死动物无害化处理罐 病死动物 无害化处理 综合配套技术
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单增李斯特菌定量检测方法研究 被引量:3
11
作者 杨松 祖乙 刘永华 《中国农学通报》 CSCD 2012年第23期85-89,共5页
为了建立针对动物性产品的快速、准确、定量检测单增李斯特菌的方法。根据GenBank中单增李斯特菌hlyA基因序列设计引物,以普通PCR产物10倍比例稀释液为标准品,进行Real-timePCR定量检测方法的研究。以单增李斯特菌hly基因为目标的Real-t... 为了建立针对动物性产品的快速、准确、定量检测单增李斯特菌的方法。根据GenBank中单增李斯特菌hlyA基因序列设计引物,以普通PCR产物10倍比例稀释液为标准品,进行Real-timePCR定量检测方法的研究。以单增李斯特菌hly基因为目标的Real-timePCR反应制得标准曲线方程为Y=-3.311X+41.162,相关系数R2=0.991,扩增效率E=96.528%。通过特异性和灵敏度试验,确定Real-timePCR检测方法特异性好、灵敏度高,最低检出剂量达到29个菌/mL。Real-timePCR检测单增李斯特菌具有快速、灵敏、高效的优点,适宜于食品中单增李斯特菌污染的调查及监测。 展开更多
关键词 李斯特菌 REAL-TIME PCR 定量检验
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中蜂囊状幼虫病毒VP1基因的优化表达及其免疫原性分析 被引量:3
12
作者 张皓淳 宋立先 +4 位作者 万红霞 马鸣潇 祖乙 费东亮 钟义 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2015年第5期468-474,共7页
目的原核表达优化的中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)的VP1基因,并分析其免疫原性。方法根据大肠埃希菌密码子偏爱性对野生型CSBV VP1(wt VP1)基因进行优化(opti VP1),将基因wt VP1和opti VP1分别克隆至p GEX-6P-1原核表... 目的原核表达优化的中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)的VP1基因,并分析其免疫原性。方法根据大肠埃希菌密码子偏爱性对野生型CSBV VP1(wt VP1)基因进行优化(opti VP1),将基因wt VP1和opti VP1分别克隆至p GEX-6P-1原核表达系统,构建原核表达质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1,分别转化E.coli BL21,经IPTG诱导表达,并对诱导温度、IPTG终浓度及诱导时间进行优化,诱导蛋白经Western blot鉴定;重组蛋白经GSH-琼脂糖凝胶层析纯化;分别用PBS、纯化的GST标签蛋白、纯化的重组蛋白及CSBV纯化病毒免疫小鼠,经间接ELISA法检验各组小鼠的血清抗体效价。结果优化后的VP1基因序列降低了密码子影响指数,提高了密码子适应指数;质粒p GEX-6P-wt VP1和p GEX-6P-opti VP1经鉴定证明构建正确;最佳诱导表达条件为:IPTG终浓度0.8 mmol/L,30℃,220 r/min诱导8 h;诱导表达蛋白占菌体总蛋白百分比由wt VP1菌株(5.49±0.30)%提高至opti VP1菌株(59.7±0.51)%,纯化后纯度可达0.5 mg/ml;兔抗GST标签抗体及兔抗CSBV血清均与优化后的重组蛋白发生特异性反应;重组蛋白组小鼠二免后可产生较高水平抗体,明显高于PBS组和GST标签蛋白组(P<0.05)。结论通过密码子优化实现了CSBV结构基因VP1的高效表达,表达蛋白可诱导小鼠机体产生特异性抗体,具有良好的免疫原性,为探讨CSBV感染的分子发病机制和制备抗CSBV病毒的多克隆抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病毒 VP1结构蛋白 原核表达 免疫原性
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动物医学专业实践教学“611”模式的探索与实践 被引量:3
13
作者 李冰 祖乙 刘孝刚 《中国科教创新导刊》 2012年第25期44-45,共2页
动物医学专业是一个实践性及应用性极强的专业,实践教学在本科人才培养过程中具有重要的地位和作用。为了提高实验教学效果,对实验教学模式进行了改革,构建了"611"实践教学模式,即三个阶段四个模块。同时根据各阶段的特点,对实践教学... 动物医学专业是一个实践性及应用性极强的专业,实践教学在本科人才培养过程中具有重要的地位和作用。为了提高实验教学效果,对实验教学模式进行了改革,构建了"611"实践教学模式,即三个阶段四个模块。同时根据各阶段的特点,对实践教学内容和方法进行了改革创新。在完善实践教学体系、提高学生的综合素质、促进师资队伍建设和产学研一体化建设方面都取得了明显的成效。 展开更多
关键词 动物医学专业 实践教学 611模式
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冷冻食品中单核细胞增生性李斯特菌的分离鉴定 被引量:3
14
作者 杨松 刘永华 祖乙 《中国动物检疫》 CAS 2010年第3期54-55,共2页
随机从锦州市的超市中采集速冻食品,通过细菌的增菌、分离纯化、生化鉴定确定是单核细胞增生性李斯特菌。通过细菌的血清学鉴定确定其血清分型。通过本研究了解单增李斯特菌在速冻食品中的污染情况,为防治疾病提供依据。
关键词 单核细胞增生性李斯特菌 分离鉴定 动物性食品
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中蜂囊状幼虫病毒结构蛋白VP2的密码子优化表达及其免疫原性研究 被引量:5
15
作者 李芳兵 费东亮 +6 位作者 张皓淳 胡影 魏东 张鹤 岳金金 马鸣潇 祖乙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期231-237,共7页
利用生物信息学软件对编码中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP2结构蛋白的密码子进行优化来提高VP2蛋白表达量,并进行免疫原性研究确定VP2蛋白的免疫原性。通过对17株囊状幼虫病毒(SBV)和7株中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的VP2... 利用生物信息学软件对编码中蜂囊状幼虫病毒(Chinese sacbrood virus,CSBV)VP2结构蛋白的密码子进行优化来提高VP2蛋白表达量,并进行免疫原性研究确定VP2蛋白的免疫原性。通过对17株囊状幼虫病毒(SBV)和7株中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)的VP2基因序列进行比对,选取代表毒株(GenBank:HM237361.1)CSBV-LN株VP2基因作为参考序列,并用在CSBV所有毒株中保守性相对较强的氨基酸替换CSBV-LN株VP2对应位置的氨基酸,通过在线软件(http://www.jcat.de/和http://genomes.urv.es/OPTIMIZER/)对其密码子进行优化,构建原核表达质粒pET-28a-optiVP2,并转化入BL21(DE3)中,进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Westren blot鉴定正确后,将表达蛋白纯化并免疫至白来杭母鸡,对免疫鸡的抗体水平和淋巴细胞增值指数进行检测,研究CSBV VP2蛋白的免疫原性。同时,收集免疫后鸡蛋制备卵黄抗体,经纯化再与CSBV相互作用后,接种于3日龄蜜蜂幼虫,观察接种后幼虫死亡率,研究卵黄抗体中和CSBV病毒能力。结果显示,优化后的optiVP2能够在大肠杆菌中高效表达,其表达产物具有良好免疫原性,表达产物接种白来杭母鸡可诱导产生抗体,制备的卵黄抗体具有中和CSBV的作用。本实验实现了CSBV结构基因VP2在原核系统的高效表达,鸡免疫实验表明其具有良好免疫原性,并且可诱导鸡产生保护作用中和抗体,为进一步开发防治CSBV的生物制剂提供了帮助。 展开更多
关键词 中蜂囊状幼虫病毒(CSBV) VP2基因 系统进化 密码子优化 原核表达
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谈养鸡生产中慢性呼吸道病的诊断与防治 被引量:2
16
作者 祖乙 《畜牧兽医科技信息》 2008年第8期102-103,共2页
鸡慢性呼吸道病(CRD)是养鸡生产中的常见病多发病,是由鸡败血支原体(霉形体)引起一种慢性呼吸道传染病。其特征为病鸡咳嗽,鼻窦肿胀,流鼻液,气喘并有呼吸罗音,幼鸡生长发育不良,母鸡产蛋减少,疾病发展缓慢,病程较长,可在... 鸡慢性呼吸道病(CRD)是养鸡生产中的常见病多发病,是由鸡败血支原体(霉形体)引起一种慢性呼吸道传染病。其特征为病鸡咳嗽,鼻窦肿胀,流鼻液,气喘并有呼吸罗音,幼鸡生长发育不良,母鸡产蛋减少,疾病发展缓慢,病程较长,可在鸡群中长期蔓延,常并发其他细菌性或病毒性传染病而致使病情加剧,死亡率增高。 展开更多
关键词 鸡慢性呼吸道病 养鸡生产 慢性呼吸道传染病 防治 诊断 鸡败血支原体 病毒性传染病 发育不良
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异麦芽低聚糖的研究进展 被引量:2
17
作者 祖乙 《现代畜牧兽医》 2005年第6期50-51,共2页
关键词 异麦芽低聚糖 α-寡聚葡萄糖 营养作用 免疫作用 IMO 饲料添加剂
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蜂病毒研究进展 被引量:1
18
作者 马鸣潇 祖乙 王术德 《辽宁医学院学报》 CAS 2008年第5期458-461,共4页
关键词 病毒病 世界范围 养蜂业 麻痹病 特征性 幼虫病 蜜蜂
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冷冻食品中单核细胞增多性李斯特菌的分离鉴定 被引量:2
19
作者 杨松 刘永华 祖乙 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第8期63-64,共2页
随机从锦州市的超市中采集速冻食品,通过细菌的增菌、分离纯化、生化鉴定确定是单核细胞增多性李斯特菌。通过细菌的血清学鉴定确定7株单增李斯特菌的血清型分别是3株为1/2b,2株为1/2 a,2株为1/2 c。通过本研究了解单增李斯特菌在速冻... 随机从锦州市的超市中采集速冻食品,通过细菌的增菌、分离纯化、生化鉴定确定是单核细胞增多性李斯特菌。通过细菌的血清学鉴定确定7株单增李斯特菌的血清型分别是3株为1/2b,2株为1/2 a,2株为1/2 c。通过本研究了解单增李斯特菌在速冻食品中的污染情况,为防治疾病提供依据。 展开更多
关键词 单核细胞增多性李斯特菌 分离鉴定 动物性食品
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鸡坏死性肠炎与慢性小肠球虫混合感染的病理学诊断及综合防制 被引量:1
20
作者 刘秀萍 祖乙 唐雨顺 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第4期108-109,共2页
关键词 慢性小肠球虫病 鸡坏死性肠炎 病理学诊断 混合感染 综合防制 神经症状 实验室检查 40日龄
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