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基于转录组测序研究绿光影响鹅胚心脏早期发育的候选基因
1
作者 陈哲 曲小露 +2 位作者 郭彬彬 孙雪峰 闫乐艳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1978-1988,共11页
旨在通过分析鹅胚心脏在绿光光照刺激下的基因表达差异,挖掘心脏发育的候选基因。本研究将512枚鹅种蛋,随机均分在正常黑暗孵化以及补充绿光的两台孵化机中,每台孵化机内放置4层(64枚·层^(-1)),绿光孵化机提供15 min开灯和15 min... 旨在通过分析鹅胚心脏在绿光光照刺激下的基因表达差异,挖掘心脏发育的候选基因。本研究将512枚鹅种蛋,随机均分在正常黑暗孵化以及补充绿光的两台孵化机中,每台孵化机内放置4层(64枚·层^(-1)),绿光孵化机提供15 min开灯和15 min关灯的间歇光照。在孵化第13、16、20、24、28和30天时,每组随机挑选种蛋8枚,称取胚胎重量,分离胚胎心脏组织并称重;采集孵化第13天的胚胎心脏组织(每组各3),进行转录组测序(RNA-Seq),筛选差异表达基因(DEGs)并进行功能富集分析,鉴定与绿光促进心脏发育相关的候选基因。并通过荧光定量PCR(qRT-PCR方法)验证测序结果的可靠性。结果表明:绿光显著提高16和30胚龄胚重比例(胚胎重/入孵蛋重×100)(P<0.05),以及13和16胚龄心脏指数(心脏重/胚胎重×100)(P<0.05)。心脏转录组测序分析共筛选出1 643个DEGs。随机选择7个DEGs进行RT-qPCR验证,表达趋势与测序结果一致。功能富集分析表明,DEGs主要涉及PI3K-Akt信号通路、AMPK信号通路等通路,最终筛选出GATA4、GATA5、Smad4和GHR这4个候选基因。对它们在不同胚龄阶段心脏组织中的mRNA表达量进行分析,其表达模式进一步表明了其在绿光调控心脏发育过程中的作用。本研究发现,鹅蛋孵化期绿光处理促进了胚胎和心脏发育,进一步通过心脏组织转录组数据分析,鉴定到了4个鹅胚心脏发育候选基因GATA4、GATA5、Smad4和GHR,为鹅胚心脏组织发育的分子调控机制提供了线索,并为绿光应用于鹅种蛋孵化提供了理论基础。 展开更多
关键词 鹅 绿光 孵化 心脏 转录组 GATA4
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抗菌肽Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中的表达及活性研究 被引量：2
2
作者 曲小露 张福欣 +1 位作者 王述柏 刘晓东 《黑龙江畜牧兽医（下半月）》 北大核心 2017年第9期143-146,共4页
为了在枯草芽孢杆菌中表达具有生物活性的Fowlicidin-3,试验采用人工合成的方法合成小分子泛素样蛋白(SUMO)-Fowlicidin-3,将构建的表达质粒p HT01转化至枯草芽孢杆菌WB800N中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后得到高效表达,... 为了在枯草芽孢杆菌中表达具有生物活性的Fowlicidin-3,试验采用人工合成的方法合成小分子泛素样蛋白(SUMO)-Fowlicidin-3,将构建的表达质粒p HT01转化至枯草芽孢杆菌WB800N中,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导后得到高效表达,用Ni柱亲和层析纯化后,再经SUMO酶切割,通过蛋白质印迹(Western blot)检验Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中的分泌表达及酶切情况;采用稀释法抗菌试验检测表达产物的抑菌活性。结果表明:重组Fowlicidin-3在枯草芽孢杆菌中得到高效表达,对6种临床分离菌株的最小抑菌浓度(MIC)在12~16μg/m L之间。说明Fowlicidin-3具有潜在利用价值,可为下一步临床试验提供理论基础。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌肽Fowlicidin-3 融合蛋白 高效表达 分离纯化 活性鉴定
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去势和外源雄激素对扬州公鹅肉质性状的影响
3
作者 邵春荣 曲小露 +4 位作者 戴子淳 朱欢喜 陈蓉 施振旦 雷明明 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第3期748-755,共8页
本研究选取144只150日龄的新品种扬州鹅公鹅为研究对象,研究去势对公鹅肉质性状的影响。结果表明,240日龄去势鹅胸肌和腿肌肌纤维横截面积显著低于对照组,去势鹅腿肌剪切力显著低于对照组,而去势鹅肌内脂肪含量明显高于对照组。饲喂丙... 本研究选取144只150日龄的新品种扬州鹅公鹅为研究对象,研究去势对公鹅肉质性状的影响。结果表明,240日龄去势鹅胸肌和腿肌肌纤维横截面积显著低于对照组,去势鹅腿肌剪切力显著低于对照组,而去势鹅肌内脂肪含量明显高于对照组。饲喂丙酸睾酮后腿肌肌纤维横截面积增大,肌内脂肪含量下降。基因表达研究结果显示,在240日龄去势鹅腿肌组织中PPARγ、RXRG、FASN和A-FABP的表达量上升,显著高于对照组,而饲喂丙酸睾酮后PPARγ、FASN和A-FABP的表达水平显著下降。MYOG在对照组胸肌和腿肌组织中的表达量显著高于去势组。这些研究结果说明,去势能显著提高鹅肌间脂肪沉积,降低肌肉横截面积和肌肉剪切力,提高肉品质。 展开更多
关键词 睾丸摘除(去势) 扬州公鹅 肉质性能 肌间脂肪
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一种优化的猪卵泡颗粒细胞分离方法及验证 被引量：1
4
作者 曲小露 施振旦 李辉 《江苏农业科学》 2019年第23期190-194,共5页
目前,进行体外研究的卵泡颗粒细胞主要通过抽取卵泡液的方式获得。而笔者前期研究发现,通过该方式获得的颗粒细胞贴壁率低且活力差。为解决该问题,在抽取方式的基础上采用FICOLL-Paque分离液对细胞进行进一步纯化,并通过CCK-8、WesternB... 目前,进行体外研究的卵泡颗粒细胞主要通过抽取卵泡液的方式获得。而笔者前期研究发现,通过该方式获得的颗粒细胞贴壁率低且活力差。为解决该问题,在抽取方式的基础上采用FICOLL-Paque分离液对细胞进行进一步纯化,并通过CCK-8、WesternBlot、免疫荧光染色、QRT-PCR、ELISA等方法分别对纯化细胞的形态、增殖能力、激素分泌相关受体(FSHR、LHCGR)和基因(CYP19A1、CYP11A1、StAR)的表达及激素分泌情况进行检测。结果发现,经纯化的细胞贴壁能力、细胞形态和增殖能力明显改善,且各激素分泌相关基因都有表达;E2分泌量明显提高,而P4分泌明显降低。研究结果表明,经FICOLL-Paque分离液纯化后的猪卵泡颗粒细胞中黄体化的颗粒细胞被大部分清除,纯化后的细胞活力更好且更能体现出颗粒细胞的特性。 展开更多
关键词 颗粒细胞 FICOLL-Paque 细胞增殖 孕酮 免疫荧光染色 FSH受体
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