目的探寻外源性硫化氢对人脐静脉平滑肌细胞(HUSMC)钙化的影响及机制。方法在成功复制HUSMC钙化模型基础上,给予硫氢化钠(Na HS)进行培养,实验分为6组(n=6):对照组、钙化组、单纯Na HS组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS高剂量组...目的探寻外源性硫化氢对人脐静脉平滑肌细胞(HUSMC)钙化的影响及机制。方法在成功复制HUSMC钙化模型基础上,给予硫氢化钠(Na HS)进行培养,实验分为6组(n=6):对照组、钙化组、单纯Na HS组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS高剂量组(4.0×10-5mol/L Na HS)、钙化+Na HS中剂量组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS低剂量组(1.6×10-6mol/L Na HS)。对各组HUSMC进行Von Kossa染色、显微图像分析,并检测各组碱性磷酸酶活性、钙离子含量,荧光定量PCR法检测细胞中骨桥蛋白mRNA的表达,放射免疫法检测培养液中骨桥蛋白含量。结果硫化氢可明显减少HUSMC钙结节的聚集生长,Von Kossa染色显示细胞聚集处棕褐色钙结节较钙化组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05);钙化+Na HS高剂量组、钙化+Na HS中剂量组、钙化+Na HS低剂量组钙化细胞百分比、细胞钙含量和碱性磷酸酶活性较钙化组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),培养液中骨桥蛋白含量及其细胞内骨桥蛋白mRNA表达均较钙化组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论硫化氢可以减轻HUSMC钙化的程度,其机制可能是通过下调细胞内骨桥蛋白mRNA的表达,进而导致骨桥蛋白生成减少而实现的。展开更多
文摘目的探寻外源性硫化氢对人脐静脉平滑肌细胞(HUSMC)钙化的影响及机制。方法在成功复制HUSMC钙化模型基础上,给予硫氢化钠(Na HS)进行培养,实验分为6组(n=6):对照组、钙化组、单纯Na HS组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS高剂量组(4.0×10-5mol/L Na HS)、钙化+Na HS中剂量组(8.0×10-6mol/L Na HS)、钙化+Na HS低剂量组(1.6×10-6mol/L Na HS)。对各组HUSMC进行Von Kossa染色、显微图像分析,并检测各组碱性磷酸酶活性、钙离子含量,荧光定量PCR法检测细胞中骨桥蛋白mRNA的表达,放射免疫法检测培养液中骨桥蛋白含量。结果硫化氢可明显减少HUSMC钙结节的聚集生长,Von Kossa染色显示细胞聚集处棕褐色钙结节较钙化组明显减轻,差异有统计学意义(P<0.05);钙化+Na HS高剂量组、钙化+Na HS中剂量组、钙化+Na HS低剂量组钙化细胞百分比、细胞钙含量和碱性磷酸酶活性较钙化组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),培养液中骨桥蛋白含量及其细胞内骨桥蛋白mRNA表达均较钙化组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论硫化氢可以减轻HUSMC钙化的程度,其机制可能是通过下调细胞内骨桥蛋白mRNA的表达,进而导致骨桥蛋白生成减少而实现的。
