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信鸽新城疫病毒的分离、鉴定及F基因的进化分析 被引量：5
1
作者 李治 范俊清 +6 位作者 李冉 任海洋 万颖 易辰阳 王泽宇 付磊 张安定 《中国家禽》 北大核心 2018年第8期56-59,共4页
2014~2016年,湖北、安徽、山东、河北、四川、陕西、天津等地的数家信鸽公棚疑似暴发鸽新城疫,导致大部分信鸽死亡或运动功能障碍,经济损失巨大。通过对病料利用鸡胚病毒分离法进行病毒分离,并结合血凝试验和血凝抑制试验,初步确定病料... 2014~2016年,湖北、安徽、山东、河北、四川、陕西、天津等地的数家信鸽公棚疑似暴发鸽新城疫,导致大部分信鸽死亡或运动功能障碍,经济损失巨大。通过对病料利用鸡胚病毒分离法进行病毒分离,并结合血凝试验和血凝抑制试验,初步确定病料中均含有新城疫病毒。进一步通过RT-PCR方法对病毒的F基因进行扩增并测序和序列分析,发现分离毒株裂解位点均具有强毒的序列特点。F基因遗传进化分析显示,分离株基因型均为VIb型。研究结果与目前报道的导致信鸽新城疫的病原主要为VIb型一致。本研究将信鸽新城疫的有效防控提供了参考。 展开更多
关键词 鸽 新城疫病毒 F基因 VIb型 分离 鉴定
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湖北地区鸡滑液囊支原体分离鉴定和致病性研究
2
作者 徐巧霞 邓明勇 +4 位作者 姚蓉 杨惠佳 易辰阳 康超 金梅林 《养殖与饲料》 2024年第5期1-6,共6页
[目的]分析2023年1月至2024年1月湖北地区鸡滑液囊支原体的遗传特性及致病性,为湖北省鸡滑液囊支原体防控提供理论依据。[方法]将PCR鉴定阳性的病料通过液体培养基分菌,对分离纯化菌株的vlhA基因序列进行测序,用MEGA11软件分析构建进化... [目的]分析2023年1月至2024年1月湖北地区鸡滑液囊支原体的遗传特性及致病性,为湖北省鸡滑液囊支原体防控提供理论依据。[方法]将PCR鉴定阳性的病料通过液体培养基分菌,对分离纯化菌株的vlhA基因序列进行测序,用MEGA11软件分析构建进化树,并通过鸡胚感染试验及45日龄SPF鸡感染试验验证致病性。[结果]发现3株鸡滑液囊支原体与近年来国内的流行株亲缘关系最近,其中HB分离株的鸡胚感染试验显示该菌株具有较强的鸡胚致死性;动物毒力感染试验结果表明,不同剂量的菌液感染45日龄鸡,连续观察14 d,感染剂量为2×10^(6)CCU/只时,90%的鸡出现临床症状,且爪垫、趾跗关节发病部位病原分离率达到96%,龙骨囊肿部位基本无法分离到病原。[结论]本研究建立了一株鸡滑液囊支原体分离菌株的体内感染模型并分析了其感染症状与致病性,为鸡滑液囊支原体疫苗的开发和免疫保护评价提供了基础。 展开更多
关键词 鸡 滑液囊支原体 分离鉴定 致病性 感染模型
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华中地区生猪疾病防控技术对策与措施 被引量：4
3
作者 易辰阳 《科技创业月刊》 2012年第4期151-152,共2页
猪肉是我国居民的主要肉食源,生猪产业在我国畜牧业生产中占有较大的比重,生猪的疾病防控是生猪养殖业的重点。近年来,特别是2006年的蓝耳病和2009年猪H1N1流感发生后,我国生猪产业防疫和检疫所暴露出来的问题受到了社会的广泛关注。对... 猪肉是我国居民的主要肉食源,生猪产业在我国畜牧业生产中占有较大的比重,生猪的疾病防控是生猪养殖业的重点。近年来,特别是2006年的蓝耳病和2009年猪H1N1流感发生后,我国生猪产业防疫和检疫所暴露出来的问题受到了社会的广泛关注。对华中地区生猪疾病防控工作进行了研究,并以生猪产业发展、动物疾病发生与危害情况为重点,提出政府宏观调控、散养户和规模化养殖防疫控疫建议以及生猪疾病防控技术对策与措施,对保障我国猪粮安全有重要意义。 展开更多
关键词 华中地区 生猪疾病 防控技术 宏观调控
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应用基于重组慢病毒的CRISPR/Cas9技术构建基因突变的鸡DF1细胞 被引量：3
4
作者 靳泽华 谢梦利 +4 位作者 易辰阳 黄英 付磊 王晓萍 张安定 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期83-88,共6页
为证实基于慢病毒的CRISPR/Cas9基因编辑技术可用于鸡基因组编辑,以鸡的mavs基因为靶基因,通过设计sgRNA,构建表达靶向mavs基因sgRNA的重组慢病毒,并将其感染DF1-Cas9细胞,通过T7E1酶切试验以及mavs基因的靶向序列测定,分析该方法是否... 为证实基于慢病毒的CRISPR/Cas9基因编辑技术可用于鸡基因组编辑,以鸡的mavs基因为靶基因,通过设计sgRNA,构建表达靶向mavs基因sgRNA的重组慢病毒,并将其感染DF1-Cas9细胞,通过T7E1酶切试验以及mavs基因的靶向序列测定,分析该方法是否可以用于鸡细胞的基因编辑。扩增sgRNA靶向序列1 220 bp片段,经T7E1酶切琼脂糖凝胶分析可见约300 bp和900 bp大小的条带,表明感染sgRNA慢病毒的细胞mavs产生了突变。序列测定结果表明sgRNA靶向序列发生了多个碱基缺失的突变。以上结果表明基于慢病毒系统的CRISPR/Cas9技术可对鸡基因组进行编辑。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 慢病毒 鸡DF1细胞 基因编辑
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鸡传染性贫血病毒衣壳蛋白VP1在大肠杆菌中的可溶性表达
5
作者 黄英 付磊 +3 位作者 靳泽华 易辰阳 王晓萍 张安定 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期16-19,24,共5页
为了获得具有活性的鸡传染性贫血病毒(CIAV)的衣壳蛋白,给疫苗的研制和诊断试剂的开发提供新的思路。根据已发表的CIAV VP 1编码基因的序列并结合大肠杆菌偏爱密码子分析,合成了VP 1(去掉N′端80个氨基酸)的编码序列,并利用大肠杆菌进... 为了获得具有活性的鸡传染性贫血病毒(CIAV)的衣壳蛋白,给疫苗的研制和诊断试剂的开发提供新的思路。根据已发表的CIAV VP 1编码基因的序列并结合大肠杆菌偏爱密码子分析,合成了VP 1(去掉N′端80个氨基酸)的编码序列,并利用大肠杆菌进行表达,SDS-PAGE结果表明,表达产物主要为不可溶的包涵体蛋白。进一步利用伴侣蛋白使VP1蛋白的可溶性表达产量得到提高,并确定了诱导重组表达VP1蛋白的最佳条件:16℃、0.08 mmol/L IPTG诱导。利用Ni 2+树脂对重组VP1蛋白进行纯化,然后利用间接ELISA方法进行检测,发现该重组蛋白可与CIAV阳性血清发生反应。本研究成功利用伴侣蛋白促进VP1蛋白的可溶性表达,而且表达的VP1蛋白有良好的免疫反应,具有开发为新型亚单位疫苗和诊断抗原的潜力。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 衣壳蛋白 大肠杆菌 伴侣蛋白 可溶性表达
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