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维生素D及其受体在吸烟患者中表达水平的研究 被引量：5
1
作者 丁炎 崔湧 +3 位作者 李悦 昌建鈞 葛鑫 聂宏光 《山西医药杂志》 CAS 2017年第6期615-617,共3页
目的探讨吸烟患者血清中的维生素D水平及其受体在肺组织中的表达情况,为临床治疗提供参考依据。方法收集临床肺癌手术患者的血清和肺组织,分为吸烟组和对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测血清中维生素D水平,采用实时定量聚合酶链... 目的探讨吸烟患者血清中的维生素D水平及其受体在肺组织中的表达情况,为临床治疗提供参考依据。方法收集临床肺癌手术患者的血清和肺组织,分为吸烟组和对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测血清中维生素D水平,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹法,检测吸烟对维生素D受体的表达水平的影响。结果吸烟组的维生素D水平、维生素D受体的mRNA和蛋白的表达都高于对照组。结论维生素D及其受体水平表达的提高可能参与了慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者增强肺脏液体清除的作用,将为以后寻求合适药物减轻COPD患者气道黏液高分泌状态提供理论基础。 展开更多
关键词 肺疾病 慢性阻塞性 吸烟 维生素D
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巴豆醛对小鼠气管短路电流的影响及相关机制研究 被引量：2
2
作者 候亚鹏 李悦 +4 位作者 丁炎 昌建鈞 周祉妤 崔湧 聂宏光 《毒理学杂志》 CAS CSCD 2018年第4期273-276,共4页
目的探讨巴豆醛对小鼠气管上皮及原代培养单层气管上皮细胞短路电流的影响及其与PKG2之间的关系,明确巴豆醛在呼吸系统液体转运中可能的作用机制。方法应用尤斯灌流装置记录小鼠气管上皮及原代培养单层气管上皮细胞短路电流,采用Elisa... 目的探讨巴豆醛对小鼠气管上皮及原代培养单层气管上皮细胞短路电流的影响及其与PKG2之间的关系,明确巴豆醛在呼吸系统液体转运中可能的作用机制。方法应用尤斯灌流装置记录小鼠气管上皮及原代培养单层气管上皮细胞短路电流,采用Elisa实验明确巴豆醛对ENa C活性的影响。结果巴豆醛能够抑制小鼠气管上皮和原代培养的单层气管上皮细胞的阿米洛利敏感性短路电流,而此阿米洛利敏感性肺液清除主要是由ENa C介导的液体转运。Elisa实验进一步明确了巴豆醛通过抑制PKG2而参与ENa C活性的调控作用。结论巴豆醛可能通过抑制呼吸系统ENa C的功能,阻碍Na+的重吸收,通过抑制PKG2而参与ENa C活性的调控作用,进而诱导产生肺水肿或急性呼吸窘迫综合征。 展开更多
关键词 巴豆醛 上皮钠通道 短路电流
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骨髓间充质干细胞条件培养基对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制 被引量：1
3
作者 周祉妤 昌建鈞 +2 位作者 候亚鹏 丁炎 聂宏光 《山东医药》 CAS 2018年第20期5-8,共4页
目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BM... 目的探讨骨髓间充质干细胞条件培养基(BMSCs-CM)对小鼠肺泡上皮细胞增殖的影响及机制。方法分离与培养小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),流式细胞仪检测细胞表面标记物示CD44阳性表达率为92.5%、CD34阴性表达率为97.3%,提示成功分离与培养BMSCs,且纯度较高。当第2代细胞融合70%~80%时,提取BMSCs-CM。将人肺泡上皮细胞A549随机分为对照组、无血清组、BMSCs组、BMSCs-CM组。对照组以含10%血清的DMEM/F12培养基培养,无血清组以无血清的DMEM/F12培养基培养,BMSCs组加入已接种小鼠BMSCs的Transwell用无血清的DMEM/F12培养基共培养,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养。培养24 h时,采用CCK-8法检测各组细胞相对存活率。将体外常规培养的肺泡Ⅱ型细胞(ATⅡ)随机分为对照组、BMSCs-CM组,对照组以无血清的DMEM/F12培养基培养24 h,BMSCs-CM组以获取的小鼠BMSCs-CM培养24 h,采用RT-PCR法检测钠通道蛋白α(α-ENa C)相对表达量。结果无血清组细胞相对存活率为(80.70±0.70)%,BMSCs组为(85.83±1.98)%,BMSCs-CM组为(91.28±1.91)%,BMSCs组与BMSCs-CM组均高于无血清组(P<0.05或<0.01)。对照组α-ENa C相对表达量为1.00±0.00,BMSCs-CM组为3.16±1.50,两组比较P<0.05。结论 BMSCs-CM可促进肺泡上皮细胞增殖,其作用机制可能与促进肺泡Ⅱ型细胞α-ENa C表达有关。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 肺泡Ⅱ型细胞 骨髓间充质干细胞条件培养基 钠通道 钠通道蛋白α 小鼠
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间充质干细胞治疗肺部疾病的研究进展
4
作者 昌建鈞 聂宏光 《医学综述》 2016年第23期4577-4580,共4页
间充质干细胞(MSCs)是一种具有多项分化潜能的干细胞,可分化为多种组织细胞,并通过分化和旁分泌效应发挥组织修复、免疫调节、抗菌和抗凋亡等作用。目前,许多肺部疾病发病机制复杂且缺乏有效的治疗方法,而MSCs可对诸多肺部疾病产生治疗... 间充质干细胞(MSCs)是一种具有多项分化潜能的干细胞,可分化为多种组织细胞,并通过分化和旁分泌效应发挥组织修复、免疫调节、抗菌和抗凋亡等作用。目前,许多肺部疾病发病机制复杂且缺乏有效的治疗方法,而MSCs可对诸多肺部疾病产生治疗作用。因此,研究MSCs对肺部疾病的影响,从细胞和分子层面揭示其作用机制,将为肺部疾病的预防和治疗奠定临床前基础。 展开更多
关键词 肺部疾病 间充质干细胞 旁分泌效应
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间充质干细胞条件培养基对肺泡上皮液体清除能力的影响
5
作者 昌建鈞 丁炎 +3 位作者 李悦 侯亚鹏 崔湧 聂宏光 《山西医药杂志》 CAS 2017年第11期1263-1266,共4页
目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)条件培养基对小鼠肺泡液体清除的影响和对人肺泡上皮细胞生存能力的作用,并明确小鼠BMSCs条件培养基在肺脏液体清除中的作用机制。方法细胞贴壁法分离培养小鼠BMSCs,应用流式细胞术对小鼠BMSCs的表... 目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)条件培养基对小鼠肺泡液体清除的影响和对人肺泡上皮细胞生存能力的作用,并明确小鼠BMSCs条件培养基在肺脏液体清除中的作用机制。方法细胞贴壁法分离培养小鼠BMSCs,应用流式细胞术对小鼠BMSCs的表面标记物进行鉴定;运用酶标仪测定小牛血清白蛋白浓度的方法测定小鼠在体肺泡液体清除率;利用活细胞计数盒(CCK-8)试剂研究小鼠BMSCs条件培养基对人H441肺泡上皮细胞生存能力的影响;采用蛋白质印迹法研究小鼠BMSCs条件培养基对人肺泡上皮细胞钠通道蛋白水平的影响。结果小鼠BMSCs稳定表达CD44,阴性表达CD34;小鼠BMSCs条件培养基能够提升在体小鼠肺泡液体清除率;小鼠BMSCs的条件培养基能够提高人肺泡上皮细胞的生存能力;蛋白质印迹法结果显示小鼠BMSCs条件培养基能够增加人肺泡上皮细胞钠通道的蛋白水平表达。结论小鼠BMSCs条件培养基能够增强肺泡上皮细胞的液体清除并能改善其生存能力,机制可能与肺泡上皮细胞钠通道蛋白表达的增加有关。 展开更多
关键词 小鼠骨髓间充质干细胞 肺泡液体清除 肺泡上皮细胞 钠通道
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超极化激活环核苷酸门控通道在人肺组织中的表达及功能
6
作者 丁炎 崔湧 +3 位作者 昌建鈞 候亚鹏 周祉妤 聂宏光 《中国医药》 2018年第2期203-206,共4页
目的探讨超极化激活环核苷酸门控(HCN)通道在人肺组织标本及人肺上皮细胞系中的表达情况,并进行相关功能学研究。方法收集临床肺癌手术患者癌旁正常肺组织标本,体外培养人肺上皮H441。采用聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹技术检测人肺组... 目的探讨超极化激活环核苷酸门控(HCN)通道在人肺组织标本及人肺上皮细胞系中的表达情况,并进行相关功能学研究。方法收集临床肺癌手术患者癌旁正常肺组织标本,体外培养人肺上皮H441。采用聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹技术检测人肺组织标本和人肺上皮细胞中HCN通道的表达水平。应用尤斯灌流室实验装置测定H441单层细胞的短路电流,检测HCN通道的相关功能。结果聚合酶链反应结果显示,HCN 4和HCN 1通道扩增产物经琼脂糖凝胶电泳出现116 bp和91 bp的目的条带,HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有mRNA水平的表达,而HCN 2和HCN 3亚型未见表达。用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,在99 000和130 000分别出现HCN 4和HCN 1的目的条带,HCN 4和HCN 1亚型在人肺组织和H441细胞系中均有表达,HCN 2和HCN 3亚型未见表达。尤斯灌流室系统测定短路电流的变化,3、10、30、100、300μmol/L的ZD7288能够剂量依赖性抑制人H441单层细胞的短路电流,根据Boltzmann方程拟合后的半数抑制率为85.8μmol/L。结论 HCN 4/1通道亚型在人肺组织中具有组织和功能学表达,为临床寻求合适药物治疗肺脏相关疾病提供了理论基础。 展开更多
关键词 超极化激活环核苷酸门控通道 肺组织 短路电流
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