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热习服诱导Treg细胞上调提高小鼠热应激耐受的实验研究 被引量：3
1
作者 叶楠 喻田甜 +5 位作者 郭红霞 马玉玲 旷毓婵 林辉 艾国平 李晋涛 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1013-1018,共6页
目的通过观察热习服诱导的小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞及中性粒细胞变化情况,探究热习服提高机体对高热环境耐受能力的机制。方法 6周龄C57BL/6小鼠常温（18~22℃）饲养30 d后进行43℃高热环境应激,观察150 min内小鼠存活率,并... 目的通过观察热习服诱导的小鼠CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞及中性粒细胞变化情况,探究热习服提高机体对高热环境耐受能力的机制。方法 6周龄C57BL/6小鼠常温（18~22℃）饲养30 d后进行43℃高热环境应激,观察150 min内小鼠存活率,并检测高热应激前后脾脏CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞和中性粒细胞频率;同样6周龄C57BL/6小鼠在温度为34℃、湿度为65%的环境下进行饲养30 d,再进行43℃高热环境应激,观察150 min内小鼠生存率以及高热应激前后脾脏CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞和中性粒细胞频率。通过对比,初步发现热习服后的小鼠存活率与脾脏的CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞频率均有所上升;通过对比前后2组小鼠的脏器干湿质量比,判定发生肺水肿、实质脏器炎性渗出情况,明确热习服后的小鼠脏器损伤是否有所减轻,最后通过对2组小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞和中性粒细胞的相关性进行分析,明确高热应激导致的小鼠脏器损伤、中性粒细胞在急性炎症初期的启动作用,以及Treg细胞对急性非特异性炎症的负调控之间的关联性。结果流式细胞术检测发现热习服组小鼠在高热处理前后,脾脏CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞频率均普遍高于未热习服小鼠,而未热习服小鼠在高热应激后中性粒细胞的细胞频率表现出更加明显的上升,具有统计学差异（P〈0.05）;高热应激存活率对比发现热习服组小鼠在高热环境的生存率明显高于未热习服小鼠,而脏器炎性渗出及肺水肿程度更加轻微;相关性分析表明中性粒细胞与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞呈较为良好的负相关。结论热习服能够诱导机体分化产生更多的Treg细胞,从而更加有效地抑制高热应激下的炎症剧烈程度,对高热环境下机体的脏器起到保护作用。 展开更多
关键词 CD4^+CD25^+Foxp3^+Treg细胞 热习服 中性粒细胞
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核基因在鱼类分子系统学研究中的应用 被引量：2
2
作者 朱敏 刘智皓 +2 位作者 旷毓婵 贾向阳 李英文 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期10-16,共7页
利用分子标记探讨鱼类的系统发育和分子进化已经逐渐成为现代鱼类系统学研究的热点之一。本文综述了核基因在鱼类分子系统发育和分子进化研究中的应用现状及其存在的优缺点。常用的核基因主要有核糖体基因,其中保守的18SrDNA及28SrDNA... 利用分子标记探讨鱼类的系统发育和分子进化已经逐渐成为现代鱼类系统学研究的热点之一。本文综述了核基因在鱼类分子系统发育和分子进化研究中的应用现状及其存在的优缺点。常用的核基因主要有核糖体基因,其中保守的18SrDNA及28SrDNA主要用于研究高级分类阶元;在研究亲缘关系较近的物种以及不同地理种群时,比较常用到的则是ITSs以及SINEs;而RAGs及S7性质独特,也常被用于鱼类的分子系统学研究中。以往的研究主要利用线粒体基因(如Cytb等)研究鱼类的分类和进化,但多年来的研究发现,线粒体基因在研究鲤形目(Cypriniformes)、鲈形目(Perci-formes)等鱼类系统发育时并不能成为最佳的选择。最近的研究表明,核基因能够弥补线粒体基因的缺陷,并可广泛应用于鱼类系统发育研究。然而,核基因的应用也面临着如下问题:1)因核基因重组导致数据分析难度较大;2)鉴定不同类群时存在一定误差;3)单倍性核基因片段较难获得;4)对某些进化时间短的群体的系统发育研究效果较差。随着上述问题的逐步解决,核基因的应用将会更加广泛。 展开更多
关键词 分子系统学 核基因 鱼类
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内分泌干扰物对雄激素受体功能的干扰 被引量：2
3
作者 旷毓婵 李英文 +3 位作者 谭号 郭学鸣 吴迪 刘智皓 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期16-22,共7页
内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDC)是指干扰内源激素的生物合成、代谢和功能,从而干扰动物内分泌系统的外源活性物质。本文特别介绍了做为EDC类物质之一的雄激素干扰物(Androgen disruptors,AD)的不同种类和生理效应。A... 内分泌干扰物(Endocrine disrupting chemicals,EDC)是指干扰内源激素的生物合成、代谢和功能,从而干扰动物内分泌系统的外源活性物质。本文特别介绍了做为EDC类物质之一的雄激素干扰物(Androgen disruptors,AD)的不同种类和生理效应。AD可与雄激素受体(Androgen receptor,AR)结合发挥AR激动剂或拮抗剂作用,其中做为激动剂的AD主要有1,2-二溴-4-环己烷(TBECH);做为拮抗剂的AD主要有氟他胺类、有机氯杀虫剂类、二苯甲烷类、双酚A、邻苯二甲酸酯、烷基酚类等。它们通过多种分子机制干扰AR的功能,进而对动物的生殖和发育等功能产生严重影响。本文认为在国内应加强对AD的深入研究,并重视AD对鱼类等非哺乳类动物的影响的研究;同时应注重从源头上阻止AD在环境中的扩散和二次污染,并大力发展生物植被降解技术、光催化技术、新型纳米材料吸附、人工生态系等生态修复技术,建立无毒、无内分泌干扰效应的AD高通量筛选技术,以消除AD对生态系统的不良影响。 展开更多
关键词 内分泌干扰物 雄激素干扰物 雄激素受体 干扰效应
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黄颡鱼Scp3基因全长cDNA的克隆和表达模式研究 被引量：1
4
作者 吴迪 李英文 +2 位作者 朱敏 旷毓婵 刘智皓 《重庆师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期18-22,F0002,共6页
本研究采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从长江流域重要的经济鱼类黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco)中克隆了与减数分裂密切相关基因Scp3的全长cDNA,并对它的序列、系统进化、组织和细胞表达模式进行了研究。克隆得到的Scp3cDNA全长为1 143... 本研究采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从长江流域重要的经济鱼类黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco)中克隆了与减数分裂密切相关基因Scp3的全长cDNA,并对它的序列、系统进化、组织和细胞表达模式进行了研究。克隆得到的Scp3cDNA全长为1 143bp,编码240个氨基酸;系统进化分析表明黄颡鱼Scp3蛋白与同为鲇形目(Siluriformes)的斑点叉尾鮰(Ietalurus punetatus)Scp3蛋白同源性最高;序列分析结果表明,黄颡鱼Scp3蛋白含有脊椎动物Scp3蛋白保守的卷曲螺旋结构域(Coiled coil domain)和2个保守基序(CM1和CM2);组织和细胞表达模式的研究显示Scp3基因仅表达于黄颡鱼雌雄性腺:1)在精巢中仅表达于初级精母细胞和次级精母细胞;2)在卵巢中仅在初级生长期和卵黄发生前期表达。本文首次从黄颡鱼中克隆得到Scp3全长cDNA并对其进行组织和细胞表达模式的研究,为后续研究脊椎动物生殖细胞的分化及其相互作用奠定了基础。 展开更多
关键词 黄颡鱼(Tachysurus fulvidraco) Scp3基因 克隆 表达模式
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重组人精囊蛋白1片段的原核表达及其对精子活率的影响
5
作者 温彦 白明星 +2 位作者 旷毓婵 何畏 刘威 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期318-321,共4页
目的通过对人精囊蛋白1（semenogelin I,SEMGI）第165~281位氨基酸序列片段（△SEMGI）的原核表达、纯化与鉴定,分析不同质量浓度下的该片段对精子活率影响。方法通过PCR扩增△SEMGI片段目的基因,与p MAL-c2x-tev载体重组;重组质粒转化R... 目的通过对人精囊蛋白1（semenogelin I,SEMGI）第165~281位氨基酸序列片段（△SEMGI）的原核表达、纯化与鉴定,分析不同质量浓度下的该片段对精子活率影响。方法通过PCR扩增△SEMGI片段目的基因,与p MAL-c2x-tev载体重组;重组质粒转化ROSETTAⅡ后IPTG诱导表达,目的蛋白经过Amylose层析柱、Ni柱、分子筛纯化、免疫印迹法和蛋白质谱分析鉴定。最终,在4个不同蛋白质量浓度下孵育并分析其对人精子活率的影响。结果蛋白质谱分析证实△SEMGI蛋白片段重组成功,其在不同质量浓度下对精子活率均有抑制作用（P〈0.05）。结论重组精囊蛋白1的C端片段具有抑制精子活率功能,为进一步研究蛋白结构提供基础。 展开更多
关键词 人精囊蛋白1片段 原核表达 蛋白纯化 精子活率
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