脐带血血清培养体系扩增人骨髓间充质干细胞及其生物学特征 被引量：14

1

作者 旷文勇 周新伏 +5 位作者 张广森 刘利华 陈绍芳 符桑 唐铁钢 李佳元 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第21期4044-4048,共5页

背景：骨髓内的间充质干细胞含量极少，因此课题立项设计之一即如伺得到足够数量的骨髓间充质干细胞，并避免细胞培养过程中因动物血清造成的病原体污染和异种血清所致的过敏反应。目的：拟建立脐带血血清培养系统，以实现体外扩增人骨... 背景：骨髓内的间充质干细胞含量极少，因此课题立项设计之一即如伺得到足够数量的骨髓间充质干细胞，并避免细胞培养过程中因动物血清造成的病原体污染和异种血清所致的过敏反应。目的：拟建立脐带血血清培养系统，以实现体外扩增人骨髓间充质干细胞的目标。设计、时间及地点：开放性实验，于2006-09／2007-10在中南大学湘雅二医院细胞生物实验室完成。材料：12份骨髓标本由中南大学湘雅二医院和湖南省湘潭市中心医院提供，6例采自正常供者，6例采自拟行造血干细胞移植的肿瘤患者。方法：无菌条件下抽取未抗凝的脐带血，静置待血凝块完全析出后吸取血清，离心弃沉淀，取各项病原微生物检测均呈阴性的脐带血血清用于细胞培养，临用前56℃水浴灭活30min。抽取正常供者和肿瘤患者的骨髓液100mL／份，采用Ficoll Paque分离液分离骨髓单个核细胞，加入含体积分数为0．1脐带血血清的DMEM／F12进行传代培养。传至第3代低温、液氮冻存，4-8周后予以解冻复苏，胰蛋白酶消化传代。取第4代骨髓间充质干细胞，锥虫蓝染色后，N／k成骨诱导体系培养14d，碱性磷酸酶染色；加入脂肪诱导体系培养14d，油红O染色。主要观察指标：绘制细胞生长曲线，流式细胞仪测定细胞周期及表面抗原的表达，骨髓间充质干细胞定向分化情况。结果：骨髓间充质干细胞扩增培养至第4代，接种后两三天为生长潜伏期，3-5d为对数增殖期，5-7d细胞生长缓慢进入平台期。采自正常供者和肿瘤患者的骨髓间充质干细胞，冻存前后扩增数量均基本相似（P〉0．05），细胞存活率均〉96％，CD29、CD73、CD105阳性率均〉90％，CD31、CD34、CD45阳性率均〈5％，诱导2周后成骨细胞和脂肪细胞的阳性率均〉85％。结论：应用灭活脐带血清培养体系可成功扩增人骨髓间充质干� 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 脐带血清 细胞培养 定向分化

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用于造血干细胞移植的人骨髓间充质干细胞体外扩增研究 被引量：7

2

作者 旷文勇 周新伏 +4 位作者 张广森 刘利华 陈绍芳 李睿娟 肖乐 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期633-638,共6页

本研究旨在检查4种不同培养液体外培养人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)的效果,建立一种基于临床移植需要的分离、培养人BM-MSC的方法,为BM-MSC联合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础。采用Ficoll P... 本研究旨在检查4种不同培养液体外培养人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BM-MSCs)的效果,建立一种基于临床移植需要的分离、培养人BM-MSC的方法,为BM-MSC联合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础。采用Ficoll Paque细胞分离液从16例新鲜成人骨髓穿刺液中分离BM-MSC,分别用含10%脐带血血清、胎牛血清、成人血清的DMEM/F12培养液和MesenCult培养液培养,用流式细胞术检测细胞表面抗原,以成骨诱导体系及脂肪诱导体系分别诱导各组BM-MSC定向分化,通过细胞形态观察、免疫表型及免疫化学染色进行鉴定。结果表明:4种培养液都能从成人骨髓液中分离培养出BM-MSC,脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC在增殖数量和速度上相似,但均优于FCS组和AB型血清组。脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC表达CD29、CD73、CD105的阳性率比FCS组和AB型血清组高(p(0.05),而CD31阳性率低于FCS组和AB型血清组(p(0.05),脐带血血清组和MesenCult组培养的BM-MSC诱导为成骨细胞和脂肪细胞阳性率高于FCS组和AB型血清组(p(0.05)。结论:4种不同培养液能够从成人骨髓液中分离出BM-MSC,脐带血血清组和Mes-enCult组培养的BM-MSC的纯度和体外诱导分化能力比FCS组和AB型血清组高,含有脐带血血清的培养体系具有临床应用价值。 展开更多

关键词 骨髓 间充质干细胞 脐带血血清 细胞培养 定向分化

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儿童免疫性血小板减少症免疫细胞亚群及其相关因子的改变和临床意义 被引量：11

3

作者 旷文勇 郑敏翠 +2 位作者 李婉丽 杨海霞 李睿娟 《中国医师杂志》 CAS 2017年第4期525-529,共5页

目的探讨T细胞与树突状细胞（DCs）亚群及其相关因子在儿童免疫性血小板减少症（ITP）治疗前后的变化并分析其临床意义。方法采用流式细胞术检测64例ITP儿童（ITP组）治疗前后和65例正常对照儿童（对照组）外周血T细胞和DCs亚群，采用EL... 目的探讨T细胞与树突状细胞（DCs）亚群及其相关因子在儿童免疫性血小板减少症（ITP）治疗前后的变化并分析其临床意义。方法采用流式细胞术检测64例ITP儿童（ITP组）治疗前后和65例正常对照儿童（对照组）外周血T细胞和DCs亚群，采用ELISA方法检测其血清IL4、IFN-γ TGF—β1和IL-27表达水平。结果ITP组采用糖皮质激素或丙种球蛋白治疗，治疗后，ITP组有效41例（有效组），无效23例（无效组）。治疗前，ITP组辅助性T细胞（Th）、Th／抑制性T细胞（Ts）、调节性T细胞（Treg）、浆细胞样DC（pDC）、pDC／髓样DC（mDC）和TGF—B1水平明显低于对照组（P〈0．05），而IFN-γ和IFN-β1／rL-4水平明显高于对照组（P〈0．05）；ITP组有效组治疗后Th、Th／Ts、Treg、pDC、pDC／mDC、TGF—β1和IL-27水平较治疗前明显升高，而IFN-γ和IFN-β1 IL-4明显降低（P〈0．05），无效组治疗前后各指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ITP组患儿存在T细胞和DCs亚群紊乱及相关细胞因子水平异常；免疫抑制治疗后，有效组ITP患儿的T细胞和DCs亚群紊乱及细胞因子水平异常可得到纠正，表明Thl亢进及Treg、pDC数量及功能减低可能与儿童ITP的发病相关。 展开更多

关键词 血小板减少/免疫学/代谢 T淋巴细胞亚群 树突细胞 白细胞介素类/代谢 干扰 素Ⅱ型/代谢 转化生长因子B1/代谢

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糖皮质激素对慢性免疫性血小板减少症患儿树突状细胞的影响 被引量：8

4

作者 旷文勇 郑敏翠 +7 位作者 张广森 宋国才 李婉丽 杨海霞 蒋小梅 张本山 吴攀 顾艳艳 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期91-94,共4页

目的探讨树突状细胞(DCs)在儿童慢性免疫性血小板减少症(cITP)中的变化以及糖皮质激素对cITP患儿DCs的作用。方法流式细胞术分别检测15例cITP患儿应用糖皮质激素治疗前后和20例对照者外周血DCs亚群的变化;体外培养并收集cITP患儿外周血... 目的探讨树突状细胞(DCs)在儿童慢性免疫性血小板减少症(cITP)中的变化以及糖皮质激素对cITP患儿DCs的作用。方法流式细胞术分别检测15例cITP患儿应用糖皮质激素治疗前后和20例对照者外周血DCs亚群的变化;体外培养并收集cITP患儿外周血单核细胞来源的DCs,采用流式细胞术检测其免疫表型。结果与对照组比较,cITP患儿治疗前髓样DC(mDC)绝对数无明显改变,浆细胞样DC(pDC)绝对数降低,mDC/pDC比值增高(P<0.05);cITP治疗后,pDC绝对数较治疗前增高,而mDC绝对数及mDC/pDC比值较治疗前降低(P<0.05);cITP患儿治疗前外周血DCs的HLA-DR、CD80、CD83和CD86阳性表达率均明显高于对照组(均P<0.01);治疗后cITP患儿DCs的HLA-DR、CD80、CD83和CD86表达率较治疗前均明显下降(P<0.01),与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DCs亚群比例失衡及功能失调与儿童cITP的发病有关;糖皮质激素能增强cITP患儿DCs的免疫抑制效应,可能是糖皮质激素有效治疗儿童cITP的机制。 展开更多

关键词 免疫性血小板减少症 树突状细胞 糖皮质激素 儿童

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脐带血清和成人自体血清体外培养人骨髓间充质干细胞的比较 被引量：6

5

作者 旷文勇 周新伏 +1 位作者 李睿娟 郑敏翠 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第45期8917-8921,共5页

背景:为避免骨髓间充质干细胞培养过程中应用异种血清的排斥以及提高骨髓间充质干细胞培养效率,制备脐带血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞是目前的研究热点。目的:比较脐带血清和成人自体血清体外培养人骨髓间充质干细胞的生物学特性... 背景:为避免骨髓间充质干细胞培养过程中应用异种血清的排斥以及提高骨髓间充质干细胞培养效率,制备脐带血清体外扩增培养骨髓间充质干细胞是目前的研究热点。目的:比较脐带血清和成人自体血清体外培养人骨髓间充质干细胞的生物学特性。设计、时间及地点:开放性实验,于2006-10/2008-06在中南大学湘雅二医院细胞生物实验室完成。材料:16份骨髓标本由中南大学湘雅二医院和湖南省湘潭市中心医院提供。方法:采用FicollPaque细胞分离液从16例新鲜成人骨髓穿刺液中分离骨髓间充质干细胞,分别用含体积分数为10%脐带血清、成人自体血清的DMEM/F12培养基培养,取第4代细胞进行实验。流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨诱导体系及脂肪诱导体系分别诱导各组骨髓间充质干细胞定向分化,通过细胞形态观察、免疫表型及免疫化学染色进行鉴定。主要观察指标:①细胞形态。②骨髓间充质干细胞计数和细胞周期。③表面标志物的鉴定。④免疫组织化学染色观察骨髓间充质干细胞诱导成骨、成脂情况。结果:①脐带血清组培养的骨髓间充质干细胞在增殖数量和速度上优于成人自体血清组(P<0.05)。两种血清培养条件下,只有少数细胞处于活跃的增殖期,脐带血清组S期细胞多于成人自体血清组(P<0.05)。②脐带血清组培养的骨髓间充质干细胞表达CD29、CD73、CD105的阳性率均在90%以上,高于成人自体血清组(P<0.05);而CD31、CD34、CD45的阳性率均在2%以下,CD31阳性率低于成人自体血清组(P<0.05)。③脐带血清培养的骨髓间充质干细胞诱导为成骨细胞阳性率和脂肪细胞阳性率均高于自体血清组(P<0.05)。结论:脐带血清组培养的骨髓间充质干细胞的纯度和体外诱导分化能力比成人自体血清组高,更适合临床应用。 展开更多

关键词 间充质干细胞 脐带血清 细胞培养 定向分化

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磁共振成像(T2*)检测重型β-地中海贫血患儿心脏、肝脏铁负荷及左心室射血分数的研究 被引量：6

6

作者 旷文勇 向永华 +5 位作者 李婉丽 杨海霞 张本山 吴攀 何姗 郑敏翠 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2016年第1期37-40,44,共5页

目的观察我院重型β-地中海贫血（β-TM）患儿血清铁蛋白（SF）和体内铁沉积状况及对心脏功能的影响。方法检测我院28例重型β-TM患儿SF水平,并由我院放射科运用磁共振成像T2＊（MRI T2＊）技术检测心脏及肝脏铁沉积状况及左室射血分数... 目的观察我院重型β-地中海贫血（β-TM）患儿血清铁蛋白（SF）和体内铁沉积状况及对心脏功能的影响。方法检测我院28例重型β-TM患儿SF水平,并由我院放射科运用磁共振成像T2＊（MRI T2＊）技术检测心脏及肝脏铁沉积状况及左室射血分数（LVEF）。结果本组28例患儿中男16例,女12例,中位年龄11.2岁（7岁1个月~16岁11个月）。28例患儿中SF轻度升高者4例（14.3%）,中度升高者8例（28.6%）,高度升高者16例（57.1%）。肝脏MRI T2＊检测结果 ：肝铁轻度沉积2例（7.1%）,中度沉积8例（28.6%）,重度沉积18例（54.8%）;心脏MRI T2＊检测结果 ：心铁正常16例（57.1%）,轻度铁沉积4例（14.3%）,中度铁沉积4例（14.3%）,重度铁沉积4例（14.3%）;LVEF降低者19例（67.9%）,4例心脏重度铁沉积患儿中有3例（75%）LVEF明显降低（≤55%）。本组患儿SF水平与肝脏T2＊值（r=-0.467,P=0.036）、心脏T2＊值（r=-0.486,P=0.01）呈明显负相关;SF与输血量呈正相关（r=0.634,P=0.043;r=0.067,P=0.124）而与去铁治疗呈负相关（r=-0.526,P=0.043）,SF和心脏T2＊值与LVEF均无相关性（r=-0.154,P=0.306;r=0.067,P=0.124）。结论重型β-TM患儿SF增高及肝脏重度铁沉积发生率高,虽然心脏重度铁沉积患儿发生率不高,但心脏重度铁沉积患儿多有LVEF明显降低。 展开更多

关键词 Β-地中海贫血 铁蛋白 铁沉积 左室射血分数 磁共振成像T2＊

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淋巴细胞亚群检测在儿童特发性血小板减少性紫癜中的临床意义 被引量：6

7

作者 旷文勇 郑敏翠 +3 位作者 李睿娟 李婉丽 吴攀 张广森 《中国当代医药》 2011年第12期83-84,共2页

目的:探讨淋巴细胞亚群与儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)的关系及临床意义。方法:采用流式细胞术分别检测儿童ITP患者和对照者外周血Th和Tc细胞亚群、B细胞、NK细胞及Treg细胞变化。结果:持续性ITP组和慢性ITP组与对照组比较,CD8+T淋... 目的:探讨淋巴细胞亚群与儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)的关系及临床意义。方法:采用流式细胞术分别检测儿童ITP患者和对照者外周血Th和Tc细胞亚群、B细胞、NK细胞及Treg细胞变化。结果:持续性ITP组和慢性ITP组与对照组比较,CD8+T淋巴细胞、CD19+B细胞升高,CD3+、CD4+T细胞,CD4+/CD8+T细胞降低,CD4+CD25+/CD4+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+细胞/CD4+T细胞降低,新诊断ITP组CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞低于与对照组;与持续性ITP组和慢性ITP组比,CD19+B细胞降低,CD3+、CD4+T细胞,CD4+/CD8+T细胞,CD4+CD25+/CD4+T细胞和CD4+CD25+Foxp3+/CD4+T细胞均升高,对照组CD16+56+NK细胞高于其他三组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:T淋巴细胞亚群、B淋巴细胞和NK细胞比例失衡与儿童持续性和慢性ITP的发病有关,外周血淋巴细胞亚群变化对儿童ITP的临床诊断及预后判断有一定价值。 展开更多

关键词 特发性血小板减少性紫癜 T淋巴细胞亚群 B淋巴细胞 NK细胞

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过氧化物酶增殖物激活受体-γ调节体外诱导培养的人巨噬细胞表达基质金属蛋白酶-9及其抑制物-1的作用及机制 被引量：5

8

作者 罗玉梅 万新红 +6 位作者 姜德谦 旷文勇 郭洪波 陈朝霞 王合金 谢丽华 段雯 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期739-745,共7页

目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）在调节急性冠状动脉综合征（ACS）患者外周血单核细胞源性巨噬细胞（MDM）表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）中的作用及可能机制。方法选取ACS患者48例... 目的探讨过氧化物酶增殖物激活受体-γ（PPAR-γ）在调节急性冠状动脉综合征（ACS）患者外周血单核细胞源性巨噬细胞（MDM）表达基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）中的作用及可能机制。方法选取ACS患者48例（ACS组）、对照者28例（对照组），提取外周血单个核细胞，刺激培养为MDM。随机将ACS组及对照组MDM分别分为罗格列酮0、1、10和20umol／L亚组，分别于相应亚组加入血清、1、10和20umol／L浓度的罗格列酮干预。然后测定各亚组MDM上清液中MMP-9、TIMP-1浓度及MDM细胞中PPAR-γ MMP-9、TIMP-1mRNA表达强度，并用免疫组织化学法测定核因子-kB（NF-kB）蛋白表达变化。分析比较ACS组与对照组间不同浓度罗格列酮干预亚组表达PPAR-γ、MMP-9、TIMP-1 mRNA及MMP-9、TIMP-1、核因子-k B P65（NF—k B P65）蛋白水平上的差异。结果罗格列酮干预后，ACS组及对照组MDM中PPAR-1mRNA表达明显上调[PPAR-1mRNA，ACS组：0．25±0．05，0．26±0．07，0．74±0．12，0．86±0．12，1．16±0．26，1、10、20umo]／L亚组与干预前及0umol／L亚组比JP2较P均〈0．01；对照组：0．39±0．06，0．37±0．04，0．99±0．10，0．99±0．09，1．00±0．12，1、10、20umol／L亚组与干预前及0umol／L亚组比较P均〈0．01；数据排列顺序为干预前、0、1、10、20umol／L亚组，下同]，在ACS组中表达强度与罗格列酮浓度呈正比关系。ACS组及对照组MDM上清液中MMP-9浓度下降[MMP-9浓度（mmol／L），ACS组：231±51，215±47，181±36，172±30，151±24，1、10、20umol／L亚组与干预前及0umol／L亚组比较P均〈0．01；对照组：138±15，127±15，119±13，112±17，107±18，1umol／L亚组与干预前比较P〈0．05，10、20umol／L亚组与干预前比较P均〈0．01，10umol／L亚组与0umol／L亚组比较P〈0．05，20umol／L亚组与0umol／L亚组比较P〈0．01]；MDM中MMP-9mRNA表达下调[ 展开更多

关键词 冠状动脉疾病 巨噬细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体 NF—kB 基质金属蛋白酶9

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学龄期白血病儿童心理行为特征调查和影响因素分析 被引量：5

9

作者 张本山 李婉丽 +5 位作者 郑敏翠 杨海霞 蒋小梅 旷文勇 吴攀 顾艳艳 《医学综述》 2013年第1期161-163,共3页

目的分析学龄期白血病儿童心理行为特征和影响因素。方法选择湖南省儿童医院收治的学龄期白血病患儿200例为病例组,选取同期体检的205例健康患儿作为对照组。分别采用儿童生活质量量表PedsQLTM4.0和Achenbach儿童行为量表对两组患儿的... 目的分析学龄期白血病儿童心理行为特征和影响因素。方法选择湖南省儿童医院收治的学龄期白血病患儿200例为病例组,选取同期体检的205例健康患儿作为对照组。分别采用儿童生活质量量表PedsQLTM4.0和Achenbach儿童行为量表对两组患儿的生活质量和心理行为进行分析,并对患儿心理行为产生影响因素进行分析。结果观察组患儿生活质量较对照组明显下降(P<0.05)。心理行为调查显示,观察组男童在社会退缩、体诉和攻击性因子得分和女童在抑郁、社会退缩、体诉得分均显著高于对照组(P<0.05)。多元性回归分析显示,影响患儿心理行为的关键因素依次为社会活动影响程度,疼痛程度和疾病稳定程度。结论学龄期白血病患儿生活质量较低,心理行为存在问题。 展开更多

关键词 儿童白血病 心理行为 生活质量 影响因素

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靶向乳酸脱氢酶A(LDHA)对T细胞急性淋巴细胞白血病具有抗白血病作用 被引量：5

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作者 于海智 尹亚飞 +11 位作者 易艺芳 程钊 旷文勇 李睿娟 钟海莹 崔亚娟 袁玲俐 龚凡杰 王志华 李姮 彭宏凌 张广森 《癌症》 SCIE CAS 2021年第1期24-40,共17页

背景与目的T细胞急性淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中少见且具侵袭性的一种亚型。在T-ALL患者的血清中,乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LD... 背景与目的T细胞急性淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)中少见且具侵袭性的一种亚型。在T-ALL患者的血清中,乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)的活性增高。我们推测靶向LDHA可以作为改善T-ALL患者预后的一个潜在治疗策略。本研究旨在研究LDHA靶向治疗对T-ALL的抗白血病作用及其潜在的分子机制。方法用LDH抑制剂草氨酸盐处理原代T-ALL细胞系Jurkat和DU528。采用MTT、克隆形成、凋亡及细胞周期检测分析草氨酸盐对T-ALL细胞的作用。采用定量实时PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blotting检测相关的信号通路。采用活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测分析草氨酸盐处理后的T-ALL细胞中的ROS产量。用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建了LDHA基因敲减的T-ALL转基因斑马鱼模型,采用TUNEL、Western blotting及T-ALL肿瘤进展检测分析LDHA基因敲减对T-ALL转基因斑马鱼模型的影响。结果草氨酸盐显著抑制了Jurkat和DU528的细胞增殖,诱导了细胞凋亡,同时也引起了Jurkat和DU528细胞周期G0/G1期阻滞,刺激了ROS的生成(P<0.001)。阻断LDHA显著减低了c-Myc基因及蛋白的表达,也降低了磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3′-kinase,PI3K)信号通路上的磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶(phos-phorylated serine/threonine kinase,AKT)和糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3 beta,GSK-3β)的表达。在T-ALL转基因斑马鱼中,LDHA基因敲减减缓了疾病进展,下调了c-Myc的mRNA和蛋白表达。结论靶向LDHA对T-ALL表现出抗白血病的作用,可作为一种对T-ALL的潜在的治疗策略。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9基因编辑 LDHA 草氨酸盐 T细胞淋巴细胞白血病 转基因斑马鱼模型

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伊达比星、全反式维甲酸和亚砷酸分层序贯疗法治疗儿童急性早幼粒细胞白血病的临床效果分析 被引量：4

11

作者 张本山 杨海霞 +3 位作者 旷文勇 吴攀 何姗 宋娜 《中国医刊》 CAS 2018年第9期1066-1068,共3页

目的探讨伊达比星(idarubicin,IDA)、全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和亚砷酸(arsenous acid,ATO)分层序贯疗法治疗儿童急性早幼粒细胞白血病的临床效果。方法采用随机数字表法将2008年1月至2012年8月在本院就诊的74例诱... 目的探讨伊达比星(idarubicin,IDA)、全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)和亚砷酸(arsenous acid,ATO)分层序贯疗法治疗儿童急性早幼粒细胞白血病的临床效果。方法采用随机数字表法将2008年1月至2012年8月在本院就诊的74例诱导缓解急性早幼粒细胞白血病患儿分为对照组和观察组各37例。对照组给予DA化疗方案巩固治疗,观察组给予IDA、ATRA和ATO分层序贯疗法。观察两组患儿1、2、3、5年的复发率和治疗过程中的不良反应发生率。结果两组患儿的1、2、3年的生存率和复发率比较差异均无显著性(P>0.05);观察组5年生存率高于对照组(P<0.05),5年复发率低于对照组(P<0.05)。观察组白细胞计数最低值高于对照组(P<0.05)。两组患儿的血小板数<20×10~9/L、心脏毒性、严重呕吐、肝功能异常、肺部感染、泌尿系感染、静脉炎、肾功能异常、过敏反应等不良反应发生率比较差异均无显著性(P>0.05)。结论 IDA、ATRA和ATO分层序贯疗法巩固治疗对儿童急性早幼粒细胞白血病疗效肯定,且可降低不良反应发生率,值得临床推广。 展开更多

关键词 急性早幼粒细胞白细胞 分层治疗 序贯治疗 全反式维甲酸 伊达比星 亚砷酸

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水合淫羊藿素对THP-1细胞增殖和凋亡的影响及机制研究 被引量：4

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作者 旷文勇 郑敏翠 +1 位作者 张广森 李睿娟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期94-98,共5页

目的:探讨水合淫羊藿素(icaritin)对THP-1细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:用MTS法、流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色检测icaritin对TP-1细胞的增殖抑制及促凋亡作用,Western blot技术检测BCL-2、BAX和Caspase-3蛋白... 目的:探讨水合淫羊藿素(icaritin)对THP-1细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:用MTS法、流式细胞术和Hoechst 33258荧光染色检测icaritin对TP-1细胞的增殖抑制及促凋亡作用,Western blot技术检测BCL-2、BAX和Caspase-3蛋白的表达。结果:4-32μmol/L icaritin作用24-72 h对THP-1细胞有增殖抑制作用(P<0.05),且呈时间-剂量依赖关系(r=0.946);4-32μmol/L icaritin作用24和48 h,对THP-1细胞有凋亡诱导作用(P<0.05),也显示时间-剂量依赖关系(r=0.924)。icaritin作用THP-1细胞48 h后,THP-1细胞BCL-2蛋白的表达较对照组显著降低(P<0.05),而BAX和Caspase-3表达较对照组显著增高(P<0.05)。结论:Icari血对THP-1细胞有增殖抑制及促凋亡作用,icaritin可能通过线粒体途径诱导THP-1细胞的凋亡。 展开更多

关键词 水合淫羊藿素 白血病 THP-1细胞 细胞增殖 细胞调亡

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93例小儿感染相关性噬血细胞综合征的临床研究 被引量：4

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作者 杨海霞 郑敏翠 +4 位作者 李婉丽 张本山 旷文勇 吴攀 邹爱军 《医学临床研究》 CAS 2017年第4期765-767,共3页

【目的】探讨小儿感染相关性噬血细胞综合征（IAHS）的临床特征、诊断、治疗及预后。【方法】回顾性分析2009年5月至2016年7月本院收治的93例IAHS的临床资料。【结果】①年龄分布：3个月至14岁；②男55例，女38例；③病因特点：EB病毒（... 【目的】探讨小儿感染相关性噬血细胞综合征（IAHS）的临床特征、诊断、治疗及预后。【方法】回顾性分析2009年5月至2016年7月本院收治的93例IAHS的临床资料。【结果】①年龄分布：3个月至14岁；②男55例，女38例；③病因特点：EB病毒（EBV）感染46例，巨细胞病毒（CMV）感染10例，腺病毒感染3例，其他病毒感染3例，支原体感染5例，真菌感染3例，细菌感染23例；④临床主要表现：发热占100％，肝肿大占96．77％，脾肿大占91．40％，淋巴结肿大占49．46％，呼吸道症状占47．31％，皮疹占18．28％，黄疸占51．61％，腹水占22．58％，泌尿系统受累占17．20％，神经系受累占12．90％；⑤实验室检查：表现不同程度的血细胞减少占100％，肝功能异常占96．8％，低纤维蛋白原血症占86．02％，高三酰甘油血症占70．97％，血清铁蛋白〉1500ffg／L占94．62％，NK细胞比例减少占84．70％，骨髓象检查提示噬血组织细胞占91．40％。93例患儿中9例放弃治疗，其中7例死亡，1例失访，1例存活；84例接受HLH-2004治疗，随访时间2～86个月，痊愈55例，继续化疗中12例，失访2例，死亡15例。死亡组患儿血小板（PLT）、白蛋白（A）、纤维蛋白原明显低于存活组（P〈O．05）。【结论】①儿童IAHS以病毒感染多见，其中以EBV感染为主，其次细菌感染；②白蛋白、血小板、纤维蛋白原减低提示预后不好；③早期应用HLH-2004方案有较好疗效并可改善预后。 展开更多

关键词 组织细胞增多症 非郎格尔汉斯细胞/治疗 预后 回顾性研究

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尼曼匹克病3例报告并文献复习 被引量：4

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作者 杨海霞 郑敏翠 +6 位作者 李婉丽 蒋小梅 张本山 吴攀 旷文勇 顾艳艳 邹爱军 《中国误诊学杂志》 CAS 2011年第3期505-507,共3页

目的提高对尼曼匹克病的认识。方法报道3例尼曼匹克病的发病及诊断经过,并复习文献。结果 3例尼曼匹克病均出现肝脾肿大、不同程度的贫血以及肝功能损害,骨髓检查发现尼曼-匹克细胞而确诊。结论尼曼匹克病是少见疾病,临床有疑似病例时... 目的提高对尼曼匹克病的认识。方法报道3例尼曼匹克病的发病及诊断经过,并复习文献。结果 3例尼曼匹克病均出现肝脾肿大、不同程度的贫血以及肝功能损害,骨髓检查发现尼曼-匹克细胞而确诊。结论尼曼匹克病是少见疾病,临床有疑似病例时应尽快完善骨髓检查。 展开更多

关键词 尼曼-皮克病 病例报告

原文传递

儿童噬血细胞综合征的临床特征及预后分析

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作者 范钱秀 罗海燕 +2 位作者 杨海霞 旷文勇 郑敏翠 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2023年第4期237-242,共6页

目的分析噬血细胞综合征(HLH)患儿的临床特点、实验室检查、疗效评估及影响预后的因素,提高对HLH认识并评估危险因素。方法回顾性分析2016年12月—2021年5月湖南省儿童医院收治的142例HLH患儿的临床资料,分析临床特征、实验室检查结果... 目的分析噬血细胞综合征(HLH)患儿的临床特点、实验室检查、疗效评估及影响预后的因素,提高对HLH认识并评估危险因素。方法回顾性分析2016年12月—2021年5月湖南省儿童医院收治的142例HLH患儿的临床资料,分析临床特征、实验室检查结果、转归和危险因素。结果142例患儿中,男性78例(54.9%),女性64例(45.1%),中位年龄2.4(1.4,4.3)岁。截止至随访时间,死亡34例(24.0%),存活100例(70.4%),失访8例(5.6%)。缓解组5年OS明显高于非缓解组(83.3%vs.38.9%),差异有统计学意义(P<0.001),多器官功能受累组5年OS明显低于少器官功能受累组为(63.8%vs.85.7%),差异有统计学意义(P=0.026),CNS受累组5年OS明显低于非CNS受累组(29.1%vs.88.5%),差异有统计学意义(P<0.001)。单因素Cox回归分析,血小板<30×10^(9)/L、多器官功能障碍、CNS受累、年龄≤3岁、消化道出血是影响患儿预后的危险因素(P值分别为P<0.001、P=0.020、P<0.001、P=0.004,和P=0.026),2周疗效评估获得缓解是影响患儿预后的保护因素(P<0.001)。多因素Cox回归分析,多器官功能障碍、CNS受累、血小板<30×10^(9)/L是影响患儿预后的独立危险因素(P值分别为0.007、<0.001和0.006),2周疗效评估获得缓解是影响患儿预后的独立保护因素(P<0.001)。结论HLH病死率高,临床表现多样,以多脏器功能障碍常见,多器官功能障碍、CNS受累、血小板<30×10^(9)/L是影响患儿预后的独立危险因素;2周疗效评估获得缓解是影响患儿预后的独立保护因素。 展开更多

关键词 噬血细胞综合征 儿童 中枢神经系统 多脏器功能障碍

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朗格汉斯细胞组织细胞增生症合并噬血细胞综合征4例报道并文献复习

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作者 范钱秀 罗海燕 +2 位作者 杨海霞 旷文勇 郑敏翠 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2023年第5期318-324,共7页

目的 分析儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)合并噬血细胞综合征(HLH)的临床特征并探讨影响其预后的因素,提高对儿童LCH合并HLH的认识。方法 回顾性分析2019年11月—2021年7月湖南省儿童医院血液肿瘤科收治的4例LCH合并HLH患儿的临... 目的 分析儿童朗格汉斯细胞组织细胞增生症(LCH)合并噬血细胞综合征(HLH)的临床特征并探讨影响其预后的因素,提高对儿童LCH合并HLH的认识。方法 回顾性分析2019年11月—2021年7月湖南省儿童医院血液肿瘤科收治的4例LCH合并HLH患儿的临床资料,并复习相关文献。结果 4例患儿中女性3例,男性1例,截止至随访时间4例患儿均存活。诊断LCH时患儿的平均年龄2.56±0.11岁,均出现发热,脾大及骨髓噬血现象,受累部位皆为多系统伴危险器官受累。4例患儿在诊断HLH时均进行细胞因子检测,所有患儿IL-10和IFN-Υ均明显升高。结论 LCH和HLH同属于组织细胞疾病,MS-LCH伴危险器官受累的患儿,当年龄<2岁,sIL-2R升高、铁蛋白水平不高时更容易并发HLH,当LCH病例出现HLH相关细胞因子谱改变时有助于该两种临床病变的鉴别诊断。 展开更多

关键词 朗格汉斯细胞组织细胞增生症 噬血细胞综合征 儿童

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热休克蛋白70及pim-1基因在白血病骨髓单个核细胞的表达特点及临床意义 被引量：3

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作者 李颖 旷文勇 +2 位作者 李睿娟 张广森 彭宏凌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期267-271,共5页

本研究观察热休克蛋白70(HSP70)基因/蛋白,pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达,确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT-PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70 mRNA及pim-1 mRN... 本研究观察热休克蛋白70(HSP70)基因/蛋白,pim-1基因在白血病患者骨髓单个核细胞(BMMNC)中的表达,确定其表达是否与白血病类型、肿瘤负荷程度及预后有规律性联系。用RT-PCR技术检测40例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70 mRNA及pim-1 mRNA的表达并半定量;用Western blot检测34例白血病患者和10例对照BMMNC HSP70蛋白表达并半定量,并结合白血病类型、肿瘤负荷程度及对治疗的反应进行分析。结果表明:白血病组与对照组BMMNC均存在HSP70 mRNA和蛋白表达,在白血病组显著高于对照组;CML组、AML组HSP70 mRNA/蛋白表达的平均ODR值均显著高于ALL组;肿瘤重度负荷的急性白血病患者组HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于肿瘤轻度负荷组;白血病患者化疗后HSP70 mRNA/蛋白表达显著高于化疗前;白血病组及对照组BMMNC均表达pim-1mRNA,在白血病组显著高于对照组;ALL组pim-1 mRNA表达显著高于AML组和CML组;经相关性分析,白血病患者HSP70 mRNA表达与pim-1 mRNA表达成正相关(r=0.327,p<0.05)。结论:白血病患者BMMNC存在HSP70、pim-1高表达,其中pim-1 mRNA表达与HSP70 mRNA表达呈正相关,HSP70与pim-1基因/蛋白过表达亦与白血病肿瘤负荷程度有关。 展开更多

关键词 白血病 骨髓单个核细胞 HSP70基因 HSP70蛋白 pim-1基因

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原发性免疫性血小板减少症儿童调节性B细胞及淋巴细胞亚群免疫功能失调 被引量：3

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作者 旷文勇 郑敏翠 +2 位作者 李婉丽 杨海霞 李睿娟 《中国医师杂志》 CAS 2021年第9期1321-1325,共5页

目的探讨原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿的调节性B细胞(Bregs)及淋巴细胞亚群的改变,并分析其与ITP持续时间和缓解时间的关系。方法流式细胞术检测88例ITP患儿治疗前和其中84例治疗1个月后和45例正常对照者外周血淋巴细胞亚群及Breg... 目的探讨原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿的调节性B细胞(Bregs)及淋巴细胞亚群的改变,并分析其与ITP持续时间和缓解时间的关系。方法流式细胞术检测88例ITP患儿治疗前和其中84例治疗1个月后和45例正常对照者外周血淋巴细胞亚群及Bregs的比例。采用包括糖皮质激素和静脉注射IgG作为一线药物治疗ITP患儿。对比治疗后不同缓解时间ITP患儿淋巴细胞亚群的改变。结果与对照组相比,所有ITP患儿的Th、NK、Breg细胞计数和Th/Tc比值均明显降低(P<0.05),而Tc以及CD19+B细胞增高(P<0.05)。持续性和慢性ITP组Breg细胞计数较新诊断ITP组明显降低(P<0.05)。共84例ITP患儿治疗后缓解,58例(69.1%)获得长期缓解,26例(30.9%)短期缓解,短期缓解组治疗后Breg和淋巴细胞亚群与治疗前无明显差异(P>0.05),而与对照组仍有明显差异(P<0.05);长期缓解ITP组治疗后Breg和淋巴细胞亚群与对照组无明显差异(P>0.05),而与治疗前比较,除Tc之外,其他细胞亚群均明显增高(P<0.05);长期缓解ITP组NK细胞和Breg细胞明显高于短期缓解ITP组(P<0.05)。结论长病程ITP患儿外周血Bregs明显降低,治疗后获得长期缓解ITP患儿的外周血Bregs显著增加,表明恢复Bregs的免疫机制可能与儿童ITP的长期缓解有关。 展开更多

关键词 免疫性血小板减少症 B淋巴细胞 调节性 淋巴细胞亚群 儿童

原文传递

儿童特发性肺含铁血黄素沉着症临床特征及其预后影响因素分析 被引量：3

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作者 杨海霞 郑敏翠 +1 位作者 李婉丽 旷文勇 《医学临床研究》 CAS 2017年第12期2359-2361,共3页

【目的】分析儿童特发性肺含铁血黄崇沉着症（IPH）的临床特点及预后影响因素。【方法】回顾性分析本院2008年3月至2015年11月首次就诊的IPH患儿23例的临床资料，分析其临床表现、辅助检查、治疗情况及随访情况，按有无反复发作进行分... 【目的】分析儿童特发性肺含铁血黄崇沉着症（IPH）的临床特点及预后影响因素。【方法】回顾性分析本院2008年3月至2015年11月首次就诊的IPH患儿23例的临床资料，分析其临床表现、辅助检查、治疗情况及随访情况，按有无反复发作进行分组，分析其复发的危险因素。【结果】23例IPH患儿多表现为贫血、咳嗽、咳血、发热、乏力等症状，主要体征为肺部哆音、呼吸音增粗，多采取糖皮质激素治疗，经随访2年，存活20例，死亡3例，治疗过程中有11例复发（包括死亡3例），其中误诊时间、初诊咳血史、不规律治疗是IPH患儿复发的危险因素。【结论】IPH患儿临床表现复杂多样，易误诊，经长时间糖皮质激素治疗后，能有效控制病情进展，通过早诊断、早治疗，对缓解患者病情及改善其预后有重要作用。 展开更多

关键词 肺疾病/病理学 含铁血黄素沉着症/病理学 预后 危险因素 回顾性研究

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急性淋巴细胞白血病儿童骨髓单个核细胞CRLF2高表达的临床意义 被引量：3

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作者 旷文勇 李婉丽 +6 位作者 郑敏翠 杨海霞 张本山 吴攀 何珊 宋娜 李睿娟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1058-1063,共6页

目的:检测初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童的骨髓单个核细胞CRLF2表达水平,并探讨其在儿童ALL中的临床意义。方法:对第一疗程化疗获得完全缓解且有完整随访信息的218例初诊ALL儿童,采用实时荧光定量PCR方法检测骨髓单个核细胞CRLF2表... 目的:检测初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童的骨髓单个核细胞CRLF2表达水平,并探讨其在儿童ALL中的临床意义。方法:对第一疗程化疗获得完全缓解且有完整随访信息的218例初诊ALL儿童,采用实时荧光定量PCR方法检测骨髓单个核细胞CRLF2表达水平;分析CRLF2表达水平在ALL儿童临床预后中的意义。结果:有完整资料的218例儿童ALL中有28例CRLF2高表达。CRLF2高表达组累计复发率明显高于低表达组(53.6%vs12.6%)(P<0.01),CRLF2高表达组预计5年无复发生存率明显高于低表达组(P<0.01)。标危组中的CRLF2高表达和低表达患儿预计5年无复发生存率的差异无统计学意义(P>0.05),中危组和高危组中CRLF2低表达的患儿预计5年无复发生存率均高于高表达组的儿童(P<0.05)。Cox法分析显示,CRLF2高表达是影响ALL儿童复发的独立危险因素。结论:CRLF2高表达的ALL儿童复发率高,CRLF2高表达是中高危ALL儿童复发高风险的重要预后因素。有必要将CRLF2表达水平作为ALL儿童的危险分层的指标。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 骨髓单个核细胞 细胞因子受体样因子2 复发率 儿童

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