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马铃薯卷叶病毒外壳蛋白基因的合成、分子克隆和全序列分析 被引量:5
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作者 哈斯阿古拉 张鹤龄 《中国病毒学》 CAS CSCD 1992年第4期432-435,共4页
以分离自马铃薯主栽品种“紫花白”的马铃薯卷叶病毒(PLRV)分离物的RNA为模板,用人工合成的引物,用反转录和随后PCR扩增的方法合成了PLRV外壳蛋白(CP)基因的cDNA,并克隆于pUC19中。进一步用限制酶切和核苷酸序列分析表明,合成的cDNA由62... 以分离自马铃薯主栽品种“紫花白”的马铃薯卷叶病毒(PLRV)分离物的RNA为模板,用人工合成的引物,用反转录和随后PCR扩增的方法合成了PLRV外壳蛋白(CP)基因的cDNA,并克隆于pUC19中。进一步用限制酶切和核苷酸序列分析表明,合成的cDNA由627个核苷酸组成(包括起始和终止密码),序列中有Hinc Ⅱ和BamH Ⅰ两个酶切位点,与国外报道一致。和国外的4个PLRV分离物CP基因序列对比结果,具有高度同源性,其同源率达99.0—99.7%。 展开更多
关键词 马铃薯 卷叶病毒 外壳蛋白基因
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人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14基因的扩增、克隆和鉴定 被引量:2
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作者 于海泉 +3 位作者 郭继彤 李雪玲 王达珍 张肇英 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第3期378-383,共6页
根据人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14(hCD14)基因的核苷酸序列,设计hCD14基因5'端和3'端的两个引物.以人血中提取的基因组总DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术特异性扩增该基因1245加的编码序... 根据人骨髓单核细胞表面分化抗原CD14(hCD14)基因的核苷酸序列,设计hCD14基因5'端和3'端的两个引物.以人血中提取的基因组总DNA为模板,利用聚合酶链式反应(PCR)技术特异性扩增该基因1245加的编码序列.扩增产物经Xbal、KpnⅠ双酶切后,克隆到pUC18质粒XbaI-KpnI位点间,随后转化大肠杆菌JM109.用PCR方法筛选出重组菌落.经酶切和序列分析方法检测后,证明获得了含hCD14基因的重组克隆pHCD14.巳测出的插入片段5'端部分中包含着人CD14基因488bp的序列,与巳报道的相应DNA序列相比具有99%的同源性. 展开更多
关键词 骨髓单核细胞 表面分化抗原 分子克隆 基因扩增
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绵羊β-乳球蛋白基因调控序列的分离、克隆及序列分析 被引量:2
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作者 李雪玲 +3 位作者 郭继彤 于海泉 王达珍 张肇英 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第3期371-377,共7页
根据绵羊β-乳球蛋白基因调控区DNA序列设计了两个引物,以绵羊基因组DNA为模板,用PCR技术扩增,得约900hP的DNA片段插入到pUC18质粒的XbaI/KpnI位点之间.PCR产物的克隆经双酶切、PCR检测和序... 根据绵羊β-乳球蛋白基因调控区DNA序列设计了两个引物,以绵羊基因组DNA为模板,用PCR技术扩增,得约900hP的DNA片段插入到pUC18质粒的XbaI/KpnI位点之间.PCR产物的克隆经双酶切、PCR检测和序列分析证明是绵羊β-乳球蛋白基因的调控序列.序列分析结果表明该克隆片段与绵羊β-乳球蛋白基因相应DNA序列相比有很高的一致性.研究结果为指导异源基因的表达和进一步利用乳腺特异表达的转基因动物生产医用蛋白提供了有效的调控序列. 展开更多
关键词 绵羊 调控序列 PCR β乳球蛋白基因 分离 无性系
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马铃薯天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因克隆和结构分析
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作者 王永胜 刘中大 +1 位作者 扈廷茂 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1996年第5期670-674,共5页
以马铃薯基因组DNA为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的cDNA序列所设计的两个引物,通过PCR扩增得到666bp的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区,并将此片段克隆到pUC18的SmaI位点.序列分析结果表明该基因除... 以马铃薯基因组DNA为模板并基于天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因的cDNA序列所设计的两个引物,通过PCR扩增得到666bp的天冬氨酸蛋白酶抑制剂基因编码区,并将此片段克隆到pUC18的SmaI位点.序列分析结果表明该基因除去末端一终止密码子外其可译框架编码221个氨基酸残基,前导肽包括32个氨基酸残基,故该抑制剂的成熟蛋白由189个氨基酸组成,第67位的精氨酸为抑制胰蛋白酶的活性中心.与cDNA相比核苷酸的同源性为94.3%,氨基酸的同源性为90%.基因DNA无内含子. 展开更多
关键词 抗虫性育种 天冬氨酸 蛋白酶抑制剂 基因结构
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