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猪苓多糖、硒及红细胞对LAK细胞杀伤活性的影响 被引量：3
1
作者 王传恩 方国源 李彩霞 《解剖学研究》 CAS 2000年第2期104-106,共3页
目的　探讨猪苓多糖 (PUPS)、微量元素硒 (Se)及红细胞 (RBC)对LAK细胞杀伤活性的影响。方法　分离正常人外周血单个核细胞 (PBMC)在体外分别与不同浓度的PUPS、亚硒酸钠及红细胞单独或与IL 2协同诱导 ,以MTT法检测LAK细胞活性 ,用ELIS... 目的　探讨猪苓多糖 (PUPS)、微量元素硒 (Se)及红细胞 (RBC)对LAK细胞杀伤活性的影响。方法　分离正常人外周血单个核细胞 (PBMC)在体外分别与不同浓度的PUPS、亚硒酸钠及红细胞单独或与IL 2协同诱导 ,以MTT法检测LAK细胞活性 ,用ELISA检测培养上清中TNF α和IFN γ含量。结果　不同浓度的PUPS和Se能单独诱导LAK细胞 ,与IL 2协同诱导的LAK细胞活性明显提高 ,细胞分泌的TNF和IFN浓度增高。RBC对LAK细胞的杀伤活性有明显地增强作用 ,并呈浓度依赖关系。结论　PUPS、Se及RBC对LAK细胞杀伤性有明显增强作用 ,细胞杀伤活性的提高可能与内源性TNF和IFN的产生增加有关。本研究为PUPS、Se及RBC与IL 2协同诱导细胞的研究和临床应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 猪苓多糖 红细胞 杀伤细胞 杀伤活性
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PCR和分离培养检测细胞培养支原体污染的比较 被引量：5
2
作者 赖小敏 方国源 +1 位作者 李彩霞 王传恩 《中山医科大学学报》 CSCD 1999年第2期151-154,共4页
目的：检测细胞培养中支原体的污染，建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６ＳｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养... 目的：检测细胞培养中支原体的污染，建立支原体通用的ＰＣＲ方法。方法：根据已出版的序列设计并合成一对支原体（柔膜体纲）１６ＳｒＲＮＡ基因组特异引物。对实验室所存的１２种支原体、大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞进行了ＰＣＲ扩增。以ＰＣＲ与分离培养比较检测了３３份细胞培养标本。结果：１２种支原体均出现了约６２０ｂｐ左右的特异性扩增带，敏感性为１００～１０００个支原体细胞，且常见的６种细胞培养污染支原体的扩增片段均能被ＨｉｎｄⅢ切成２８０与３４０ｂｐ左右的２条带。理论上推测这对引物可扩增所有支原体１６ＳｒＤＮＡ。但对大肠杆菌、变形杆菌及无支原体污染的组织培养细胞等未见有扩增带出现。在对３３份细胞培养标本的检测中，除ＰＣＲ和分离培养同时检出２份阳性外，前方法还另检出阳性３份。５份ＰＣＲ扩增物均被ＨｉｎｄⅢ切出２条带。结论：ＰＣＲ较分离培养敏感性高，可提高细胞培养污染支原体的检出率，防止出现假阴性结果；如做好质量控制，对于一般实验室检测细胞培养支原体污染。 展开更多
关键词 细胞培养 支原体污染 聚合酶链反应
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免疫印迹分析肺炎支原体抗原与抗体成分 被引量：2
3
作者 赖小敏 黄彩贤 +1 位作者 方国源 李彩霞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期162-165,共4页
分别以ＭＰ国际标准株ＦＨ株和地方株北京８２株兔免疫血清对自制的ＦＨ株、北京８２株全细胞抗原和美国产ＣＦ抗原三种抗原作了免疫印迹分析。同时用以上三种抗原分析了６２例肺炎儿童血清和７９例健康大学生血清。结果表明ＭＰ的１７... 分别以ＭＰ国际标准株ＦＨ株和地方株北京８２株兔免疫血清对自制的ＦＨ株、北京８２株全细胞抗原和美国产ＣＦ抗原三种抗原作了免疫印迹分析。同时用以上三种抗原分析了６２例肺炎儿童血清和７９例健康大学生血清。结果表明ＭＰ的１７０ＫＤ和７１ＫＤ，还有２３ＫＤ多肽免疫原性较强，其中１７０ＫＤ多肽可能为ＭＰ的主要致病物质粘附因子Ｐ＿ｈ蛋白，自制ＦＨ株抗原与美国产ＣＦ抗原蛋白成分较为相似。 展开更多
关键词 肺炎支原体 抗原 抗体 免疫印迹技术
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PCR和分离培养同时检测儿童呼吸道感染的支原体
4
作者 赖小敏 方国源 +2 位作者 李彩霞 王传恩 佘桂源 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 1998年第6期332-334,338,共4页
为了解广州市儿童呼吸道支原体感染情况，用一条共同的上游引物，二条特异性的下游引物建立的ＰＣＲ方法能同时扩增ＭＰ的６９１ｂｐ和ＭＧ的４３８ｂｐ粘附因子基因片段，但不会扩增其他支原体和细菌的ＤＮＡ。以ＰＣＲ和分离培养同时... 为了解广州市儿童呼吸道支原体感染情况，用一条共同的上游引物，二条特异性的下游引物建立的ＰＣＲ方法能同时扩增ＭＰ的６９１ｂｐ和ＭＧ的４３８ｂｐ粘附因子基因片段，但不会扩增其他支原体和细菌的ＤＮＡ。以ＰＣＲ和分离培养同时检测了１６２份呼吸道感染患儿的咽拭标本，结果ＰＣＲ检测到１２份阳性ＭＰＤＮＡ，阳性率为７４％；从１份阳性标本分离培养并克隆出１株ＭＰ。二方法均未检测到ＭＧ。提示在广州市呼吸道感染患儿中存在ＭＰ的感染，所检测的患儿无ＭＧ感染。 展开更多
关键词 呼吸道感染 聚合酶链反应 分离培养 支原体
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广州市某大学学生肺炎支原体感染的血清流行病学研究 被引量：1
5
作者 方国源 黄彩贤 +3 位作者 麦卓雄 黄婉贞 李彩霞 张柯佳 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 1989年第1期39-41,共3页
本文报道广州市某大学86年级新生自入学开始至1年半期间内,从先后三次健康检采集血清标本共1064份,应用微量补体结合试验测检其肺炎支原体(MP)抗体,阳性率第一次(1986.9)为者225名,血清的MP补结抗体阳性率(阳转率)分别为0.89%(2/225)、2... 本文报道广州市某大学86年级新生自入学开始至1年半期间内,从先后三次健康检采集血清标本共1064份,应用微量补体结合试验测检其肺炎支原体(MP)抗体,阳性率第一次(1986.9)为者225名,血清的MP补结抗体阳性率(阳转率)分别为0.89%(2/225)、22.42%(50/223)和20.0%(35/175)。第二、三次血清MP补结抗体阳转率较第一次的阳性北有非常显著差异(P值<0.01)。提示该批大学生在入学一年半期间内,可能发生过MP感染的流行。 展开更多
关键词 肺炎支原体 微量补结试验 血清补结抗体
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全DNA光敏生物素探针杂交法检测支原体 被引量：1
6
作者 赖小敏 方国源 +1 位作者 王传恩 李彩霞 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期8-10,共3页
分别以人型支原体（ＭＨ）、解脲支原体（ＵＵ）三个血清型（ＳＵ１、ＳＵ４与ＳＵ８）全ＤＮＡ与等体积光敏生物素混合，用特种紫外光照射制备成探针。在分离培养的基础上，用上述全ＤＮＡ光敏生物素探针，对８２例非淋菌尿道炎病人标... 分别以人型支原体（ＭＨ）、解脲支原体（ＵＵ）三个血清型（ＳＵ１、ＳＵ４与ＳＵ８）全ＤＮＡ与等体积光敏生物素混合，用特种紫外光照射制备成探针。在分离培养的基础上，用上述全ＤＮＡ光敏生物素探针，对８２例非淋菌尿道炎病人标本作了检测，结果分离培养ＭＨ２２例，ＵＵ５５例；探针法检出ＭＨ２０例，ＵＵ５３例，两方法ＭＨ、ＵＵ阳性标本均有重叠，提示ＵＵ感染率较ＭＨ感染率高，且ＭＨ感染多数伴随在ＵＵ感染中。三型ＵＵ探针检测结果表明某一单型ＵＵ探针不能代替分离培养检测出所有型ＵＵ。 展开更多
关键词 尿道炎 解脲支原体 核酸杂交 光敏生物素 探针
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支原体全DNA光敏生物素探针杂交方法的建立
7
作者 赖小敏 方国源 +1 位作者 王传恩 李彩霞 《中山医科大学学报》 CSCD 1995年第4期36-39,共4页
支原体基因组全ＤＮＡ分子量较小，本研究直接制备肺炎支原体（ＭＦ），人型支原体（ＭＨ）和解脲脲原体（ＵＵ）中３个型ＳＵ１，ＳＵ４，ＳＵ８全ＤＮＡ光敏生物素探针，用斑点杂交鉴定表明探针可用于检测同种支原体，但３个型ＵＵ探... 支原体基因组全ＤＮＡ分子量较小，本研究直接制备肺炎支原体（ＭＦ），人型支原体（ＭＨ）和解脲脲原体（ＵＵ）中３个型ＳＵ１，ＳＵ４，ＳＵ８全ＤＮＡ光敏生物素探针，用斑点杂交鉴定表明探针可用于检测同种支原体，但３个型ＵＵ探针不能用于型别鉴定。探针检测灵敏度较一般片段ＤＮＡ探针灵敏度低，可能是由于前者分子量放大，降低了杂交速率和效率。直接提取全ＤＮＡ作光敏生物素标记，简化了探针制备过程，且无放射性损害及衰减，探针易于保存。 展开更多
关键词 支原体属 遗传学 DNA探针 核酸杂交
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用自制全细胞抗原检测肺炎支原体抗体ABC-ELISA方法的建立及应用
8
作者 赖小敏 黄彩贤 +1 位作者 方国源 李彩霞 《陕西医学检验》 1995年第4期7-10,共4页
用自制全细胞抗原建立了ABC－ELISA检测MP－IgG抗体方法，其敏感性高于常规ELISA和以美国产抗原建立的CF方法，特异性和重复性也好。应用该方法检测了62例来自广州市两家医院儿科肺炎住院儿童的血清和79例广州市某高校健康大学生体检血... 用自制全细胞抗原建立了ABC－ELISA检测MP－IgG抗体方法，其敏感性高于常规ELISA和以美国产抗原建立的CF方法，特异性和重复性也好。应用该方法检测了62例来自广州市两家医院儿科肺炎住院儿童的血清和79例广州市某高校健康大学生体检血清．结果显示肺炎儿童组8例抗体阳性，占病例总数的12．9％，抗体最高滴度为1∶800，一般为1∶200～1∶400，其中有2例双份血清抗体滴度增高4倍或以上，且随着年龄的增长，抗体阳性例数和P／N比值均增高（有显著性差异，t检验分完。1为P＜0．005和P＜0．01）；大学生组50例抗体阳性，抗体最高滴度为1∶12800，一般为1∶1600～1∶3200。提示，在广州市儿童和大学生中存在MP感染；支原体过儿童肺炎占儿童肺炎病因一定比例。MP感染率和抗MPIgG抗体水平在儿童中有随年龄增长而逐渐增加的趋向。 展开更多
关键词 全细胞抗原 ABC-ELISA 肺炎支原体 支原体肺炎
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