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基于Mas/PKA/CREB通路探讨颈椎横突尖针刺法治疗后循环缺血性眩晕模型大鼠的作用机制 被引量:1
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作者 欧小燕 柳刚 +5 位作者 杨丽芳 文林 汪生志 李娜 杨骏 张闻东 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期288-296,共9页
目的基于Mas原癌基因(Mas)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)通路探讨颈椎横突尖针刺法对后循环缺血性眩晕(PCIV)模型大鼠的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针组,... 目的基于Mas原癌基因(Mas)/蛋白激酶A(PKA)/环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)通路探讨颈椎横突尖针刺法对后循环缺血性眩晕(PCIV)模型大鼠的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、尼莫地平组、电针组,每组各8只。除假手术组外,其余各组大鼠均结扎右侧颈总动脉(CCA)和锁骨下动脉(SCA)建立PCIV模型,假手术组仅剥离右侧CCA和SCA。尼莫地平组大鼠灌胃尼莫地平混悬液(12 mg/kg);电针组大鼠于第2颈椎(C2)、第4颈椎(C4)、第6颈椎(C6)横突尖针刺,于双侧C2、C6进行电针治疗,20 min/次;假手术组和模型组不予任何干预措施,连续14 d。观察各组大鼠右侧前庭神经核脑血流量、脑血流量下降率及跳台躲避时间,采用TUNEL染色法观察右侧脑干前庭神经核细胞凋亡情况,蛋白质印迹法检测右侧脑干前庭神经核Mas、蛋白激酶A⁃C亚基同工型a(PKA⁃Ca)、CREB、磷酸化CREB(p⁃CREB)、B细胞淋巴瘤(Bcl)⁃2和Bcl⁃2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达情况。结果干预前,与假手术组对比,其余3组大鼠右侧前庭神经核脑血流量下降、右侧前庭神经核脑血流下降率升高(均P<0.05),提示造模成功。干预后,与假手术组比较,模型组大鼠右侧前庭神经核脑血流量降低、右侧前庭神经核脑血流下降率升高、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平升高,Bcl⁃2、Mas、PKA⁃Ca、p⁃CREB/CREB蛋白表达水平降低(均P<0.05);与模型组比较,电针组和尼莫地平组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干前庭神经核细胞凋亡率及Bax蛋白表达水平降低,Bcl⁃2、Mas、PKA⁃Ca、p⁃CREB/CREB蛋白表达水平升高(均P<0.05);与尼莫地平组比较,电针组大鼠右侧前庭神经核脑血流量升高、右侧前庭神经核脑血流下降率降低、跳台躲避时间缩短、右侧脑干 展开更多
关键词 颈椎横突尖针刺 后循环缺血 眩晕 细胞凋亡 Mas原癌基因/蛋白激酶A/环磷腺苷效应元件结合蛋白通路 大鼠
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针刺通过良性调控反应性星形胶质细胞极化改善后循环缺血性眩晕
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作者 文林 杨丽芳 +1 位作者 欧小燕 柳刚 《上海针灸杂志》 CSCD 2024年第10期1139-1146,共8页
目的观察针刺对后循环缺血性眩晕(posterior circulation ischemic vertigo,PCIV)大鼠海马反应性星形胶质细胞极化的影响。方法将32只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、常规针刺组和颈椎横突尖针刺组,每组8只。采取手术结扎... 目的观察针刺对后循环缺血性眩晕(posterior circulation ischemic vertigo,PCIV)大鼠海马反应性星形胶质细胞极化的影响。方法将32只清洁级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、常规针刺组和颈椎横突尖针刺组,每组8只。采取手术结扎右侧颈总动脉和锁骨下动脉的方法制备PCIV大鼠模型。常规针刺组针刺百会、双侧风池和内关,颈椎横突尖针刺组取双侧C2、C4、C6颈椎横突尖,假手术组和模型组仅予以抓取和固定,不予针刺,每日1次,持续14 d。治疗结束后使用激光多普勒血流仪检测大鼠前庭神经核(vestibular nerve nucleus,VNN)血流量,Western blot测定大鼠海马反应性星形胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、A1星形胶质细胞标志物补体C3d和A2星形胶质细胞标志物S100钙结合蛋白A10(S100 calcium-binding protein A10,S100A10)的表达水平,并通过免疫荧光双重染色技术观察海马A1、A2星形胶质细胞的数量变化。结果与假手术组比较,模型组大鼠VNN血流量减少(P<0.01),平衡木测试评分升高(P<0.01),海马C3d表达上升而S100A10下降(P<0.01),大鼠海马A1星形胶质细胞数量增加而A2星形胶质细胞数量减少(P<0.01)。与模型组比较,两针刺组大鼠VNN血流量均增加(P<0.01),平衡木得分均下降(P<0.01),海马C3d表达下降而S100A10表达上升(P<0.05),A1细胞均减少而A2细胞均增多(P<0.01)。与常规针刺组比较,颈椎横突尖针刺组大鼠VNN血流量增加(P<0.01),平衡木得分降低(P<0.01),C3d下降而S100A10升高,A1星形胶质细胞减少而A2星形胶质细胞增多,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论针刺可有效增加PCIV大鼠前庭供血,抑制A1伤害性星形胶质细胞并上调A2保护性星形胶质细胞的表达,针刺治疗PCIV的作用机制可能与良性调控反应性星形胶质细胞极化相关。 展开更多
关键词 针刺疗法 电针 后循环缺血性眩晕 星形胶质细胞极化 大鼠
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颈椎横突尖电项针法调控后循环缺血大鼠血管和神经新生
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作者 杨丽芳 文林 +2 位作者 欧小燕 张寒 柳刚 《浙江中医药大学学报》 CAS 2024年第4期398-406,共9页
[目的]观察颈椎横突尖电项针法对后循环缺血大鼠脑血流量和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteina... [目的]观察颈椎横突尖电项针法对后循环缺血大鼠脑血流量和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、内皮抑素(endostatin,ES)和神经巢蛋白(Nestin)、神经元特异性核蛋白(NeuN)蛋白表达的影响,探讨颈椎横突尖电项针法对后循环缺血大鼠血管新生和神经再生的作用及具体机制。[方法]32只雄性SD大鼠结扎右侧颈总动脉和右锁骨下动脉,复制成永久性后循环缺血模型,假手术组8只仅暴露血管不结扎。将造模成功的24只大鼠分为模型组、西药组和颈椎横突尖电项针组,每组8只。模型组不予任何针刺治疗,但在颈椎横突尖电项针组进行针刺治疗的相同时间内,对该组大鼠进行抓取、捆绑和固定,确保时间、条件与颈椎横突尖电项针组相同;颈椎横突尖电项针组大鼠双侧风池穴和C2、C4、C6颈椎尖位置予以电针治疗;西药组采用尼莫地平溶液灌胃。治疗频率每天一次,连续治疗6 d为1个疗程,1个疗程结束后休息1 d,共2个疗程。采用超声多普勒血流仪检测各组大鼠平均脑血流量,异硫氰酸荧光素-葡聚糖示踪法检测缺血区大脑皮质新生毛细血管数量,苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察缺血区大脑皮质组织形态,免疫荧光染色检测右侧大脑纹状体中Nestin、NeuN的阳性表达,免疫印迹分析血管新生相关因子VEGF、bFGF、MMP-9、ES蛋白表达水平。[结果]与假手术组比较,干预后模型组大鼠脑血流量显著降低(P<0.01),新生毛细血管数量增加(P<0.05),右侧纹状体Nestin、NeuN阳性表达增加(P<0.05,P<0.01),缺血区大脑皮质VEGF、MMP-9、bFGF、ES蛋白表达增加(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,西药组和颈椎横突尖电项针组大鼠脑血流量明显上升(P<0.01),缺血区大脑皮质新生毛细血管数量增加(P<0.05),� 展开更多
关键词 后循环缺血 针刺 颈椎横突尖电项针法 血管新生 脑缺血 神经发生
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