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中华蜜蜂与意大利蜜蜂访花行为特点与区别 被引量：9
1
作者 敖塘堰 熊亮 马振刚 《蜜蜂杂志》 2021年第3期1-4,共4页
蜜蜂作为重要的经济昆虫与传粉昆虫,在维持自然界生态平衡、促进农业生产与提供优良蜂产品等方面具有重要意义。概述了中华蜜蜂与意大利蜜蜂的访花行为特点,并对中华蜜蜂与意大利蜜蜂在访花时间、访花范围、访花携粉能力、访花种类、访... 蜜蜂作为重要的经济昆虫与传粉昆虫,在维持自然界生态平衡、促进农业生产与提供优良蜂产品等方面具有重要意义。概述了中华蜜蜂与意大利蜜蜂的访花行为特点,并对中华蜜蜂与意大利蜜蜂在访花时间、访花范围、访花携粉能力、访花种类、访花目的和访花频率等方面的差别进行了系统综述,可为研究提高农作物与自然界植物授粉率和蜂产品生产提供理论依据。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 意大利蜜蜂 访花 特点 区别
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东方蜜蜂微孢子虫一新型孢壁蛋白的基因克隆、表达及亚细胞定位 被引量：1
2
作者 熊亮 敖塘堰 +2 位作者 张真 马振刚 周泽扬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期1070-1079,共10页
【目的】微孢子虫(Microsporidia)孢壁在孢子构成及孢子侵染宿主过程中扮演重要的角色。本研究旨在鉴定获得的东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae新型孢壁蛋白,并进行基因克隆和原核表达,明确其亚细胞定位。【方法】通过在线软件对东方蜜... 【目的】微孢子虫(Microsporidia)孢壁在孢子构成及孢子侵染宿主过程中扮演重要的角色。本研究旨在鉴定获得的东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae新型孢壁蛋白,并进行基因克隆和原核表达,明确其亚细胞定位。【方法】通过在线软件对东方蜜蜂微孢子虫新型孢壁蛋白AAJ76_1400036761序列进行生物信息学分析。利用PCR法获取目的片段并将其克隆至原核表达载体pCold II中,利用IPTG诱导表达重组蛋白并通过镍柱亲和层析法纯化目的蛋白。以获得的重组蛋白为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,通过间接免疫荧光技术和免疫胶体金定位技术对该蛋白进行亚细胞定位分析;利用蛋白质免疫印迹法检测该蛋白与东方蜜蜂微孢子虫几丁质壳的互作。【结果】在MicrosporidiaDB数据库中获得AAJ76_1400036761基因序列,基因全长681 bp,编码226个氨基酸;预测等电点为6.84,分子量为26.19 kD。SDS-PAGE电泳和Western blot结果表明AAJ76_1400036761重组蛋白能够在大肠杆菌Eescherichia coli Rosetta中高量表达。Western blot结果表明,制备的多克隆抗体能够特异地识别东方蜜蜂微孢子虫总蛋白中的AAJ76_1400036761,说明其在成熟东方蜜蜂微孢子虫中有表达。亚细胞定位结果显示,AAJ76_1400036761定位于东方蜜蜂微孢子虫孢壁上。重组蛋白AAJ76_1400036761能够与蜜蜂微孢子虫的几丁质壳结合。【结论】AAJ76_1400036761蛋白在东方蜜蜂微孢子虫成熟孢子中有表达;该蛋白定位于东方蜜蜂微孢子虫孢壁上,为东方蜜蜂微孢子虫新的孢壁蛋白。本研究为深入研究该蛋白的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 孢壁蛋白 原核表达 多克隆抗体 亚细胞定位
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东方蜜蜂微孢子虫一新孢壁蛋白NcER_100148的鉴定与生物学功能研究
3
作者 敖塘堰 王静琳 +1 位作者 马振刚 周泽扬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期747-758,共12页
【目的】东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae作为蜜蜂微孢子虫病的主要病原体,对其侵染机制的相关研究鲜有报道。本研究旨在对团队前期通过质谱鉴定获得的东方蜜蜂微孢子虫候选孢壁蛋白NcER_100148进行原核表达,明确其亚细胞定位,并初步探... 【目的】东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae作为蜜蜂微孢子虫病的主要病原体,对其侵染机制的相关研究鲜有报道。本研究旨在对团队前期通过质谱鉴定获得的东方蜜蜂微孢子虫候选孢壁蛋白NcER_100148进行原核表达,明确其亚细胞定位,并初步探索其生物学功能。【方法】通过在线软件对前期鉴定的东方蜜蜂微孢子虫候选孢壁蛋白NcER_100148序列进行生物信息学分析;利用RT-PCR检测东方蜜蜂微孢子虫侵染后西方蜜蜂Apis mellifera成蜂中肠中NcER_100148的表达量;将NcER_100148基因片段克隆至原核表达载体pET30a中,IPTG诱导表达重组蛋白并用于制备多克隆抗体;利用Western blot检测NcER_100148在东方蜜蜂微孢子虫成熟孢子中的表达量;通过间接免疫荧光和免疫电镜技术分析NcER_100148在东方蜜蜂微孢子虫成熟孢子中的亚细胞定位;利用Western blot和免疫共沉淀法分别分析重组蛋白NcER_100148与东方蜜蜂微孢子虫几丁质孢子壳(chitin spore coats,CSCs)和极管蛋白NcPTP2和NcPTP3的相互作用关系。【结果】序列分析结果表明,东方蜜蜂微孢子虫NcER_100148预测分子量为12.169 kD,含1个O-糖基化位点、1个N-糖基化位点和1个糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)锚定位点;RT-PCR检测结果表明,NcER_100148在东方蜜蜂微孢子虫感染后4 d时的西方蜜蜂成蜂中肠中开始表达;Western blot结果表明,NcER_100148蛋白能在成熟孢子表面表达,并且能够与东方蜜蜂微孢子虫的CSCs互作;亚细胞定位结果显示NcER_100148定位于东方蜜蜂微孢子虫的成熟孢子孢壁上;Western blot和免疫共沉淀结果显示重组蛋白NcER_100148能够与极管蛋白NcPTP2和NcPTP3相互作用。【结论】NcER_100148是定位在东方蜜蜂微孢子虫的成熟孢子孢壁上的一个新型孢壁蛋白,且其可能在孢子内壁的构建、极管的盘绕与固定和参与对宿主的侵染等过程中扮演重要的角色。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 孢壁蛋白 亚细胞定位 几丁质孢子壳 极管蛋白 互作
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蜜蜂养殖对建筑物及周围环境的选择 被引量：1
4
作者 敖塘堰 王静琳 马振刚 《蜜蜂杂志》 2021年第12期8-11,共4页
蜜蜂作为植物的主要授粉昆虫之一,在维持自然生态系统生物多样性的同时,也为人类带来了巨大经济效益,这给蜜蜂养殖业的发展带来了契机。至今,蜜蜂养殖业已经发展成为现代农业重要的组成部分,但养蜂人想要高效养殖蜜蜂需要克服诸多因素... 蜜蜂作为植物的主要授粉昆虫之一,在维持自然生态系统生物多样性的同时,也为人类带来了巨大经济效益,这给蜜蜂养殖业的发展带来了契机。至今,蜜蜂养殖业已经发展成为现代农业重要的组成部分,但养蜂人想要高效养殖蜜蜂需要克服诸多因素。其中,养蜂环境是养蜂人需切实关注的问题。该文系统地介绍了蜜蜂养殖对蜜粉源、水源、交通、蜂种、人和蜂安全等方面的选择与要求,以期为蜜蜂转场养殖提供参考。 展开更多
关键词 蜜蜂 养蜂 环境
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东方蜜蜂微孢子虫诱导蜜蜂中肠蛋白差异表达研究
5
作者 王静琳 陈胜 +3 位作者 敖塘堰 张素贞 马振刚 周泽扬 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期96-111,共16页
【目的】为探讨东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae感染蜜蜂后的形态学影响、各组织的感染情况及对中肠组织蛋白质的影响,初步探索蜜蜂自身免疫应答调控。【方法】分别提取中华蜜蜂/意大利蜜蜂实验组与对照组的蜜蜂中肠组织总蛋白,通过SDS-... 【目的】为探讨东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae感染蜜蜂后的形态学影响、各组织的感染情况及对中肠组织蛋白质的影响,初步探索蜜蜂自身免疫应答调控。【方法】分别提取中华蜜蜂/意大利蜜蜂实验组与对照组的蜜蜂中肠组织总蛋白,通过SDS-PAGE电泳技术筛选差异蛋白条带,LC-MS/MS质谱分析技术鉴定差异蛋白质,利用半定量和荧光定量RT-PCR技术验证筛选出的差异蛋白质。【结果】蜜蜂受东方蜜蜂微孢子虫感染后,中华蜜蜂Apis cerana cerana Fabricius和意大利蜜蜂Apis mellifera Ligustica的体重均未出现显著性差异,而二者受感染的中肠组织形态变化均较为明显。其次,对意大利蜜蜂而言,被筛选出的两条较明显的中肠差异表达蛋白质条带经质谱分析共鉴定到35个候选蛋白质。筛选出的两条中华蜜蜂中肠差异蛋白条带经质谱分析技术共鉴定到11个候选蛋白质。经验证,在感染N.ceranae后的第4天,筛选出的意大利蜜蜂精氨酸激酶(AK)和甘油三磷酸脱氢酶(GPDH)及中华蜜蜂硫氧还原蛋白还原酶(TrxR)及精氨酸激酶(AK)的蛋白表达量分别是对照组的2.02倍、2.21倍、1.72倍和1.88倍,均呈现上调表达,与蛋白质差异表达趋势一致。【结论】在东方蜜蜂微孢子虫感染意大利蜜蜂或中华蜜蜂后,筛选获得差异表达的蛋白质条带并进行鉴定。其中与蜜蜂中肠组织基本代谢、免疫应答、氧化应激与能量代谢相关蛋白质(如意大利蜜蜂的AK和GPDH、中华蜜蜂的AK和TrxR)的表达量被显著上调,暗示这些差异蛋白可能参与了蜜蜂中肠组织的免疫防御。本研究为深入探讨蜜蜂中肠对蜜蜂微孢子虫的免疫与代谢应答方式提供了丰富的数据基础。 展开更多
关键词 东方蜜蜂微孢子虫 蜜蜂 中肠 差异表达蛋白 鉴定 定量分析
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蜜蜂下痢可能隐藏的疾病
6
作者 王静琳 敖塘堰 马振刚 《蜜蜂杂志》 2022年第4期40-40,共1页
下痢属于蜜蜂的肠道疾病,患蜂大多腹部较正常蜂肿胀,出现爬蜂症状,排出呈稀溏状的黄色排泄物,蜂箱中也可见大量病蜂的排泄物。除了由天气、饲料不合格引发以外,多种疾病也能导致蜜蜂下痢,需要具体判定针对性的防治方法。本文总结了能引... 下痢属于蜜蜂的肠道疾病,患蜂大多腹部较正常蜂肿胀,出现爬蜂症状,排出呈稀溏状的黄色排泄物,蜂箱中也可见大量病蜂的排泄物。除了由天气、饲料不合格引发以外,多种疾病也能导致蜜蜂下痢,需要具体判定针对性的防治方法。本文总结了能引起蜜蜂下痢的几种疾病,希望对蜂农判断蜜蜂下痢有所帮助,进而采取有效防治措施。 展开更多
关键词 有效防治措施 下痢 防治方法 肠道疾病 蜜蜂 排泄物 多种疾病 蜂箱
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