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人类STK全长cDNA克隆及其表达谱分析
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作者 张琪 +5 位作者 张民 胡培蓉 傅强 余龙 范玉新 赵寿元 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第3期283-289,共7页
从人类的睾丸组织cDNA文库中分离出 1条新的全长cDNA ,在其 12 2 5bp序列中含有一个长 10 3 2bp ,编码 3 4 4个氨基酸的开放阅读框 .基于它与丝 /苏氨酸蛋白激酶家族中其他成员存在较高的同源度 ,尤其是与小鼠MMSTK1的同源度高达 80 % ... 从人类的睾丸组织cDNA文库中分离出 1条新的全长cDNA ,在其 12 2 5bp序列中含有一个长 10 3 2bp ,编码 3 4 4个氨基酸的开放阅读框 .基于它与丝 /苏氨酸蛋白激酶家族中其他成员存在较高的同源度 ,尤其是与小鼠MMSTK1的同源度高达 80 % ,推论该基因的蛋白产物可能也是一个丝 /苏氨酸蛋白激酶 ,故将其暂命名为HUMSTK1(人类STK1) .它的mRNA在胎儿胸腺中呈高表达 ,在睾丸、小肠和结肠中低表达 ,而在人体其他组织中不表达 . 展开更多
关键词 蛋白激酶 CDNA STK 克隆 基因表达
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利用辐射杂种板(GB4)精细定位人类新基因H-RalGDS于染色体9q34.1
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作者 郑其平 余龙 +5 位作者 赵勇 孙喜元 胡培蓉 付强 庚镇城 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期1-5,共5页
目的 HRalGDS基因是我们新近分离与克隆的人类新的Ras相关基因,是鼠Ral鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)在人类的同源基因。利用辐射杂种板(radiationhybrid,RH)制图法进行该基因的精细定位。方法 根据HRalGDS基因cDNA的3′不翻译区... 目的 HRalGDS基因是我们新近分离与克隆的人类新的Ras相关基因,是鼠Ral鸟嘌呤核苷酸解离刺激因子(RalGDS)在人类的同源基因。利用辐射杂种板(radiationhybrid,RH)制图法进行该基因的精细定位。方法 根据HRalGDS基因cDNA的3′不翻译区设计正反向引物,PCR扩增人鼠辐射体细胞杂种板(radiationhybridGenebridge4panel),并将杂种板每一细胞株的PCR结果按一定方式统计后输入WIMITRadiationHybridMapper的相关网址,进行HRalGDS基因的RH制图和整合分析。结果RH制图将HRalGDS基因定位在9号染色体的骨架图上。定位附近的Marker顺序为9pter——WI6083——HRalGDSWI1405——9qter,经文献检索及进一步与物理图、遗传连锁图及细胞学图谱的整合分析,将其精细定位于染色体9q34.1区带的基因位标SURF5与RPL7A之间。结论 HRalGDS基因的定位不仅有助于人染色体9q34区带的精细基因图与细胞遗传图的构建,而且也表明用RH制图法定位于人类新基因既简便、易行、可靠,又可为丰富染色体上的基因定位提供新的信息。 展开更多
关键词 H-RalGDS 基因 辐射杂种板制图 染色体9q34.1
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用定量PCR从杂交阳性融合噬菌斑中分离候选插入片段
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作者 范玉新 余龙 +5 位作者 江萤 崔映宇 陈驰原 董长宇 赵寿元 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第3期185-187,共3页
目的为了在cDNA文库杂交筛选目的基因过程中,当复筛的杂交信号对应于1个多克隆融合噬菌斑时,能够快速、准确地分离出特异克隆的插入片段。方法依据定量PCR扩增的原理,利用初始模板量的不同,通过两次PCR反应,鉴定和分离... 目的为了在cDNA文库杂交筛选目的基因过程中,当复筛的杂交信号对应于1个多克隆融合噬菌斑时,能够快速、准确地分离出特异克隆的插入片段。方法依据定量PCR扩增的原理,利用初始模板量的不同,通过两次PCR反应,鉴定和分离出所需cDNA片段。结果利用这一方法,在β-1,4-半乳糖苷转移酶cDNA的“步移”复筛中,从一个双克隆融合斑中,得到了特异性克隆的插入片段,经测序证实为β-1,4-半乳糖苷转移酶的5′cDNA序列,长1.9kb,从而完成了全长cDNA的克隆,节省了进行再次复筛的时间和材料。结论该方法简便、快捷,可以显著地节省时间和实验材料,在新基因克隆中有一定的实用价值。 展开更多
关键词 杂交筛选 融合噬菌斑 基因克隆 定量PCR
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Cloning and characterization of a novel member of human β-1, 4-galactosyltransferase gene family
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作者 范玉新 余龙 +7 位作者 张琪 江萤 陈驰原 屠强 毕安定 许月芳 赵寿元 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1999年第4期337-345,共9页
By using the EST strategy for identifying novel members belonging to homologous gene families, a novel full-length cDNA encoding a protein significantly homologous to UDP-Gal: N-acetylglucosamine β-1, 4-galactosyl-tr... By using the EST strategy for identifying novel members belonging to homologous gene families, a novel full-length cDNA encoding a protein significantly homologous to UDP-Gal: N-acetylglucosamine β-1, 4-galactosyl-transferase (GalT) was isolated from a human testis cDNA library. A nucleotide sequence of 2 173 bp long was determined to contain an open reading frame of 1 032 nucleotides (344 amino acids) . In view of the homology to members of the galactosyltransferase gene family and especially the closest relationship to Gallus gallus GalT type I (CK I) , the predicted product of the novel cDNA was designated as human β-1,4-galactosyltransferase homolog I (HumGT-Hl) . Its mRNA is present in different degrees in 16 tissues examined. Southern analysis of human genomic DNA revealed its locus on chromosome 3 . 展开更多
关键词 β-1 4-galactosyltransferase CDNA homolog.
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人类β-1,4-半乳糖苷转移酶基因家族中1个新成员的克隆与表达谱分析
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作者 范玉新 余龙 +7 位作者 张琪 江萤 陈驰原 屠强 毕安定 许月芳 赵寿元 《中国科学(C辑)》 CSCD 1999年第1期1-8,共8页
应用从EST出发克隆基因家族新成员的策略 ,在人类睾丸组织cDNA文库中分离出 1个新的全长cDNA片段 ,它编码的蛋白产物与 (UDP 半乳糖苷 :N 乙酰基葡萄糖胺 )半乳糖苷转移酶 (GalT)有较高的同源度 .分析表明 ,在其 2 173bp的序列中含有 1... 应用从EST出发克隆基因家族新成员的策略 ,在人类睾丸组织cDNA文库中分离出 1个新的全长cDNA片段 ,它编码的蛋白产物与 (UDP 半乳糖苷 :N 乙酰基葡萄糖胺 )半乳糖苷转移酶 (GalT)有较高的同源度 .分析表明 ,在其 2 173bp的序列中含有 1个长 10 3 2bp的开放读框 ,编码 3 44个氨基酸 .基于该基因与半乳糖苷转移酶基因家族各成员的同源关系 ,尤其是与G .gallusβ 1,4 半乳糖苷转移酶Ⅰ型(CKⅠ )的关系密切 ,这个基因的蛋白产物被命名为人类 β 1,4 半乳糖苷转移酶同源蛋白Ⅰ型 .Northern杂交发现它在被检测的人体 16种组织中均有表达 ,但丰度各异 .通过与含人单条染色体的人 /啮齿类的杂种细胞DNA进行Southern杂交 ,证明该基因位于 3号染色体上 . 展开更多
关键词 半乳糖苷转移酶 同源体 GalT基因 人类 克隆
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