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题名内切菊粉酶在大肠杆菌中的高效表达
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作者
吴若凡
马江锋
戴仲雪
王培培
姜岷
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机构
南京工业大学生物与制药工程学院
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出处
《生物加工过程》
CAS
2016年第5期45-50,共6页
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基金
国家自然科学基金(21390200)
江苏高校优势学科建设工程
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文摘
内切菊粉酶可以有效地水解菊粉得到低聚果糖(IOS),低聚果糖是一种水溶性膳食纤维,应用广泛。为了实现内切菊粉酶的高效表达,通过无花果曲霉中的inu2基因,成功在大肠杆菌中重组表达。为提高表达水平,通过使用pel B和omp C代替本身的信号肽序列,来研究不同的信号肽对菊粉内切酶表达的影响。此外,还通过正交试验的方法优化了IOS的催化条件。研究结果表明,用pel B代替本身的信号肽的E.coli INU2-A3的酶活最高,达到75.22 U/mg。在菊粉为150 g/L,纯化的菊粉内切酶为5 U/g菊粉,55℃,p H 4.6,反应24 h时,低聚果糖的收率达到了94.41%,主要的水解产物为DP3-DP7。
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关键词
内切菊粉酶
信号肽
大肠杆菌
低聚果糖
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Keywords
endoinulinase
signal peptide
Escherichia coli
inulooligosaccharides
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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