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自由基与细胞凋亡 被引量：68
1
作者 惠宏襄 赵小宁 +2 位作者 金明 王成济 莫简 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期12-16,共5页
细胞凋亡是指细胞在生理和病理情况下的一种死亡模式，广泛涉及到肿瘤、衰老和退行性病变等一系列疾病．最近有实验表明自由基与细胞凋亡有密切的关系．
关键词 细胞凋亡 自由基 病理化学
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人视网膜色素上皮细胞的冻存和复苏培养 被引量：38
2
作者 王琳 惠延年 +2 位作者 王雨生 惠宏襄 汤朝武 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期157-159,共3页
目的：建立人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞的冻存和复苏方法。方法：根据慢冻速融的细胞冻存原则，将原代或传代１～２次培养的人ＲＰＥ细胞，加入１０％二甲基亚砜作为保护剂，液... 目的：建立人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞的冻存和复苏方法。方法：根据慢冻速融的细胞冻存原则，将原代或传代１～２次培养的人ＲＰＥ细胞，加入１０％二甲基亚砜作为保护剂，液氮中冻存。复苏时将冻存细胞在６０℃、２分钟内融化，用台盼蓝染色测定细胞存活率，用抗人角蛋白抗体免疫细胞化学染色作细胞鉴定，每日计算细胞数以确定细胞生长曲线。结果：经冻存复苏后的ＲＰＥ细胞的存活率达９０％，生长状态与对照组无差异，抗人角蛋白染色阳性，细胞对数生长期在１～４天，群体细胞倍增期约为１．５５天。结论：人ＲＰＥ细胞液氮冻存可保持生物活性，复苏后生长良好，保持了细胞特征。这可提供细胞系，方便了体外实验，并可能作为ＲＰＥ细胞移植治疗一些眼底病的细胞库。 展开更多
关键词 色素上皮 组织保存 低温保存 复苏培养 视网膜
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血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达 被引量：20
3
作者 严瑞兰 惠宏襄 +2 位作者 辛晓燕 王剑波 王健 《第四军医大学学报》 1999年第4期291-293,共3页
目的：探讨上皮性卵巢癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化方法检测了３７例上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达．结果：上皮性卵巢癌、交界性卵巢肿瘤及良性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率分别为７２．９７％，７... 目的：探讨上皮性卵巢癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化方法检测了３７例上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达．结果：上皮性卵巢癌、交界性卵巢肿瘤及良性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率分别为７２．９７％，７５．０％及３８．４６％，恶性肿瘤及交界性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率较良性肿瘤明显增高（Ｐ＜０．０５），且前两者的ＶＥＧＦ强阳性表达率也较良性肿瘤明显增高（Ｐ＜０．０５）．上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达率与淋巴结转移密切相关（Ｐ＜０．０５）．恶性肿瘤不同病理分级及临床分期ＶＥＧＦ表达率无明显差异（Ｐ＞０．０５）．结论：ＶＥＧＦ在与上皮性卵巢癌有关的血管形成中可能起着重要作用． 展开更多
关键词 卵巢癌 上皮性卵巢癌 VEGF 免疫组织化学
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紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡 被引量：15
4
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 曹云新 惠宏襄 金明 王成济 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期402-406,共5页
目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其... 目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其凋亡，凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征，流式细胞仪检测有凋亡峰出现，琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞，在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间（＜2h）去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂，而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡，甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞周期阻断 细胞凋亡 食管癌细胞
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2型糖尿病患者与健康个体间肠道双歧杆菌的差异 被引量：17
5
作者 许小津 惠宏襄 蔡徳鸿 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期531-533,564,共4页
目的研究2型糖尿病患者与健康个体之间肠道双歧杆菌是否存在差异。方法收集50例2型糖尿病患者和30例健康志愿者的粪便样品,提取样品中细菌总DNA,根据细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌总菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双... 目的研究2型糖尿病患者与健康个体之间肠道双歧杆菌是否存在差异。方法收集50例2型糖尿病患者和30例健康志愿者的粪便样品,提取样品中细菌总DNA,根据细菌的16SrRNA序列设计双歧杆菌总菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌的属种特异性引物,并应用实时荧光定量PCR技术对两组人群粪便样品中的以上细菌进行定量检测和分析。结果 2型糖尿病患者组肠道双歧杆菌总菌和青春双歧杆菌的数量较健康对照组均显著减少(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者肠道双歧杆菌数量减少。 展开更多
关键词 肠道菌群 双歧杆菌 2型糖尿病 实时荧光定量PCR
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促凋亡基因bax在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义 被引量：10
6
作者 严瑞兰 王剑波 +2 位作者 惠宏襄 辛晓燕 陈必良 《第四军医大学学报》 1998年第3期322-324,共3页
目的：探讨促细胞凋亡基因ｂａｘ在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义．方法：采用ＳＡＢＣ免疫组化方法观察了７１例上皮性卵巢肿瘤标本中Ｂａｘ的表达．结果：Ｂａｘ在恶性、交界性及良性卵巢肿瘤中的阳性率分别为４０．５％，６２．５％... 目的：探讨促细胞凋亡基因ｂａｘ在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义．方法：采用ＳＡＢＣ免疫组化方法观察了７１例上皮性卵巢肿瘤标本中Ｂａｘ的表达．结果：Ｂａｘ在恶性、交界性及良性卵巢肿瘤中的阳性率分别为４０．５％，６２．５％和３８．９％，三者无明显差异（Ｐ＞０．０５），早期及晚期卵巢癌的阳性率分别为５０．０％和３７．９％，二者无显著差异（Ｐ＞０．０５），在Ｉ～ＩＩ病理分级中的阳性率分别为６６．７％，４０．０％和２３．１％，Ｉ与ＩＩ级间差异显著（Ｐ＜０．０５）．结论：ｂａｘ在上皮性卵巢癌中有高表达，Ｂａｘ的表达与肿瘤的病理分级成反比。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 上皮性卵巢癌 BAX基因 基因表达
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转化生长因子α 被引量：13
7
作者 惠宏襄 金明 赵小宁 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 1994年第6期254-259,共6页
转化生长因子α(TGFα)是一种主要由肿瘤细胞产生的小肽分子,其前体为160个氨基酸,成熟体为50个aa残基,各种形式的TGFα均具有生物活性。TGFα为分泌性蛋白,它与细胞表面的表皮生长因子受体结合,以自分泌和旁分泌的形式参与对细胞增殖... 转化生长因子α(TGFα)是一种主要由肿瘤细胞产生的小肽分子,其前体为160个氨基酸,成熟体为50个aa残基,各种形式的TGFα均具有生物活性。TGFα为分泌性蛋白,它与细胞表面的表皮生长因子受体结合,以自分泌和旁分泌的形式参与对细胞增殖和分化的调节,TGFα与肿瘤密切相关,大多数肿瘤中已发现有TGFα高表达,TGFα具有肿瘤诊断、预后以及治疗临床外伤等多方面的应用价值。 展开更多
关键词 转化 生长因子 肿瘤 细胞增殖 细胞分化 诊断
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bcl-2核酶与Bax在诱导食管癌细胞凋亡中的协同作用 被引量：8
8
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 惠宏襄 许彦鸣 杨安钢 王成济 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期827-831,共5页
为了同时调节二种凋亡相关蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,探索肿瘤基因治疗的可能性 ,同时转入可诱导表达的特异性切割 bcl- 2的核酶基因及 bax基因 ,间接免疫荧光标记法检测 Bcl- 2及Bax蛋白的表达量 ,用 TUNEL、流式细胞术及琼脂糖凝... 为了同时调节二种凋亡相关蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡 ,探索肿瘤基因治疗的可能性 ,同时转入可诱导表达的特异性切割 bcl- 2的核酶基因及 bax基因 ,间接免疫荧光标记法检测 Bcl- 2及Bax蛋白的表达量 ,用 TUNEL、流式细胞术及琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡 .共转染后 Bcl- 2蛋白表达下降 ,同时 Bax蛋白表达升高 ,导致 30 %左右细胞凋亡 ,并可使细胞对紫杉醇的敏感度增加近4倍 ,使紫杉醇有效作用时间缩短近一倍 .同时调节二个凋亡相关基因可导致细胞凋亡 ,并能有效促进化疗药物诱导的凋亡 .同时校正多个基因的异常表达 ,比仅仅改变单个基因可更有效地达到治疗肿瘤的目的 . 展开更多
关键词 BCL-2 BAX 凋亡 基因治疗 食管癌细胞
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氧自由基对基因表达的调节机理 被引量：8
9
作者 李福洋 惠宏襄 《生命科学》 CSCD 1999年第A01期28-31,共4页
关键词 氧自由基 基因表达 调节机理
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抗VEGF发夹状核酶基因抑制VEGF表达及卵巢癌细胞增殖的实验研究 被引量：10
10
作者 严瑞兰 钱新华 +4 位作者 辛晓燕 金明 惠宏襄 王德堂 王健 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期39-44,共6页
背景与目的:研究表明血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在与上皮性卵巢癌有关的血管形成过程中可能发挥着重要作用。目前,核酶策略已成为一种基因治疗的策略,用于阻断肿瘤形成或肿瘤的生长与转移。VEGF在卵巢肿... 背景与目的:研究表明血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在与上皮性卵巢癌有关的血管形成过程中可能发挥着重要作用。目前,核酶策略已成为一种基因治疗的策略,用于阻断肿瘤形成或肿瘤的生长与转移。VEGF在卵巢肿瘤形成中的作用尚不十分清楚。我们试图采用抗VEGF发夹状核酶基因阻断卵巢癌中VEGF的自分泌和/或旁分泌通路,以检测其对卵巢癌细胞增殖的影响。方法:采用脂质体介导的方法将自行设计和构建的抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌SKOV3细胞,采用G418筛选获得阳性克隆;RNA斑点杂交检测核酶基因在卵巢癌细胞中的表达;免疫组化、间接免疫荧光染色及流式细胞仪结合免疫荧光检测转染前后卵巢癌细胞中VEGF表达;通过MTT、细胞贴壁克隆形成实验、软琼脂克隆形成实验及细胞周期分析观察其对卵巢癌细胞增殖的影响。结果:与SKOV3细胞相比,转染后的SKOV3-RZ细胞VEGF表达明显降低(P<0.01);细胞生长减慢,细胞贴壁克隆形成及软琼脂克隆形成率明显降低犤(12.7±1.4)%和(9.4±2.0)%比(30.1±1.9)%和(24.8±1.5)%,P<0.001犦;G1期细胞显著增多(77.6%比57.9%,P<0.01),S期细胞显著减少(17.0%比29.9%,P<0.01)。结论:抗VEGF发夹状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖; 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 发夹状核酶基因 卵巢肿瘤 细胞增殖 基因治疗
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抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因抑制卵巢癌移植瘤生长的实验研究 被引量：8
11
作者 严瑞兰 辛晓燕 +3 位作者 金明 惠宏襄 王健 王德堂 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期683-686,共4页
目的　采用抗血管内皮生长因子 (VEGF)发夹状核酶基因 ,阻断卵巢癌中VEGF的自分泌和 (或 )旁分泌通路 ,以检测抗VEGF发夹状核酶基因对卵巢癌细胞VEGF表达及其肿瘤生长的影响。方法　采用脂质体介导的方法 ,将自行设计和构建的抗VEGF发... 目的　采用抗血管内皮生长因子 (VEGF)发夹状核酶基因 ,阻断卵巢癌中VEGF的自分泌和 (或 )旁分泌通路 ,以检测抗VEGF发夹状核酶基因对卵巢癌细胞VEGF表达及其肿瘤生长的影响。方法　采用脂质体介导的方法 ,将自行设计和构建的抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体转染人卵巢癌细胞SKOV3,采用氨基糖甙庆大霉素 (G418)筛选获得阳性克隆 ;RNA斑点杂交检测核酶基因在卵巢癌细胞中的表达 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测转染前后卵巢癌细胞中VEGF的表达 ;透射电子显微镜观察卵巢癌细胞超微结构改变 ;观察裸鼠皮下成瘤实验检测转染前后细胞的致瘤能力的变化。结果　转染核酶基因后的卵巢癌细胞VEGFmRNA表达明显降低 ;透射电子显微镜观察出现凋亡细胞 ;裸鼠致瘤能力减弱 ,肿瘤组织中VEGF表达及血管形成减少。结论　抗VEGF发夹状核酶基因可显著抑制卵巢癌细胞VEGF表达 ,通过减少血管形成抑制肿瘤生长 ,为进一步开展肿瘤血管靶向基因治疗 。 展开更多
关键词 实验研究 内皮生长因子 淋巴因子 催化RNA 卵巢肿瘤 实验性肿瘤
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紫杉醇诱导食管癌细胞凋亡 被引量：4
12
作者 彭玮丹 张杰 +2 位作者 惠宏襄 金明 王成济 《第四军医大学学报》 1998年第2期129-133,共5页
目的:研究紫杉醇对食管瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用.方法;应用MTT分析法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察.结果:紫杉醉在6 nmol.L浓度时对食管癌细胞就有显著的生... 目的:研究紫杉醇对食管瘤细胞生长抑制及诱导凋亡的作用.方法;应用MTT分析法、形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察.结果:紫杉醉在6 nmol.L浓度时对食管癌细胞就有显著的生长抑制作用,并且有时间依赖关系及一定范围的剂量依赖关系.凋亡可发生在细胞间期和分裂期,分别具有典型的凋亡形态特征及分裂期特有的凋亡特征.琼脂糖凝胶电泳显示紫杉醇作用48h便可出现DNA梯带,并呈时间剂量性增强.最低3 nmol/L浓度可见DNA梯带.紫杉醇可很快启动细胞凋亡的程序,并不需要持续作用.用流式细胞仪测定细胞周期,可见明显的凋亡峰.结论:紫杉醇对食管瘤细胞的细胞毒作用是诱导其凋亡的结果,这种诱导凋亡的能力是紫杉醇疗效的基础,因而在对食管瘤的治疗中紫杉醇有着巨大的潜力. 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞凋亡 食管肿瘤
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bcl-2核酶(Ribozyme)促进紫杉醇诱导的细胞凋亡 被引量：6
13
作者 彭玮丹 张杰 +4 位作者 赵永同 惠宏襄 朱峰 杨安钢 王成济 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第2期258-263,共6页
用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡 ,探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径 .将特异性切割 Bcl- 2 m RNA的核酶克隆至含MTII启动子并可为 Zn SO4 诱导表达的真核表达载体中 ,通过... 用核酶技术阻断或降低抗凋亡蛋白 Bcl- 2的表达以促进化疗药物紫杉醇诱导的食管癌细胞凋亡 ,探索克服耐药、提高紫杉醇疗效的新途径 .将特异性切割 Bcl- 2 m RNA的核酶克隆至含MTII启动子并可为 Zn SO4 诱导表达的真核表达载体中 ,通过脂质体转入食管癌鳞状上皮细胞系Eca 1 0 9中 ,经 G41 8筛选得到稳定抗性细胞株 X1 0 9R,挑取单细胞株扩大培养 ,1 40μmol/L Zn SO4诱导 3d,用 Northern- blot、免疫荧光、流式细胞仪鉴定核酶及 Bcl- 2蛋白表达情况 ,用 TUNEL标记及流式细胞术检测凋亡细胞的比例 .bcl- 2核酶在不同单细胞株中有不同程度的表达 ,其中一株X1 0 9R1 4表达最高 .测定其中 Bcl- 2蛋白含量 ,发现 Bcl- 2蛋白表达大为降低 .加入紫杉醇后 ,TUNEL标记及凋亡峰测定结果都表明同一条件下凋亡率升高 .结果提示 ,转入特异性切割 bcl- 2m RNA的核酶可有效地阻断 Bcl- 2蛋白合成 .Bcl- 2蛋白表达降低可明显促进紫杉醇诱导的细胞凋亡 .说明 Bcl- 展开更多
关键词 Bcl-2核酶 紫杉醇 肿瘤抗药性 细胞凋亡
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血管内皮生长因子及其受体在卵巢癌中表达的免疫组化检测 被引量：3
14
作者 严瑞兰 王剑波 +2 位作者 辛晓燕 惠宏襄 王健 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第4期269-271,共3页
目的： 检测血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ） 及其受体（ＫＤＲ） 在卵巢癌中的表达， 并探讨其与卵巢癌发生的关系。方法： 采用ＳＡＢＣ免疫组化染色法， 对６６ 例卵巢肿瘤中， ＶＥＧＦ 和ＫＤＲ 的表达进行检测。结果： 恶性、交界... 目的： 检测血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ） 及其受体（ＫＤＲ） 在卵巢癌中的表达， 并探讨其与卵巢癌发生的关系。方法： 采用ＳＡＢＣ免疫组化染色法， 对６６ 例卵巢肿瘤中， ＶＥＧＦ 和ＫＤＲ 的表达进行检测。结果： 恶性、交界性及良性卵巢肿瘤中， ＶＥＧＦ 和ＫＤＲ 的表达率分别为７２－９％ 、７５－００ ％ 、３８－４６ ％ 及５４－０５％ 、４３－７５％ 、７－６９ ％ ； 恶性肿瘤及交界性肿瘤ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达， 明显高于良性肿瘤（Ｐ＜ ０－０５） 。ＫＤＲ 不仅表达于肿瘤血管内皮细胞， 在肿瘤细胞内也有强表达。有淋巴结转移的卵巢癌ＶＥＧＦ 的表达与无淋巴结转移者相比较， 有显著差异（Ｐ＜ ０－０５）； ＫＤＲ 的表达与卵巢癌淋巴结转移无关（Ｐ＞ ０－０５）； 卵巢癌的不同临床分期、病理类型及病理分级间ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达， 无显著性差异（ Ｐ＞ ０－０５） 。结论： ＶＥＧＦ和ＫＤＲ 的表达可能与卵巢癌的发生有关。 展开更多
关键词 VEGF KDR 卵巢癌 免疫组织化学
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反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡 被引量：4
15
作者 朱峰 王成济 +2 位作者 惠宏襄 赵永同 金明 《第四军医大学学报》 1996年第1期22-27,共6页
目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转... 目的：分析反义ｂｃｌ－２对ＨＬ－６０细胞凋亡的作用，为进一步研究凋亡机制打基础．方法：我们用ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将插有反义ｂｃｌ－２基因片段的重组逆转病毒载体ｐＤＯＲ－ＡＢ转染ＨＬ－６０细胞，用核酸打点杂交方法检测转染效果和载体表达效果，用流式细胞仪检测ｂｃｌ－２的改变及细胞周期的变化，用光镜和电镜观察转染细胞的形态学改变，并用转染的细胞对足叶乙甙敏感性的变化间接证明反义ｂｃｌ－２的作用．结果：ｐＤＯＲ－ＡＢ转入ＨＬ－６０细胞并表达ｂｃｌ－２反义ＲＮＡ；细胞内Ｂｃｌ－２蛋白含量明显下降；细胞周期分析可见凋亡峰；电镜下可见凋亡细胞；ＤＮＡ凝胶电泳出现梯状电泳带．结论：反义ｂｃｌ－２瞬时表达可促进ＨＬ－６０细胞的凋亡。 展开更多
关键词 白血病 细胞凋亡 反义 核糖核酸 BCL-2
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反义PCNA与反义bcl-2脱氧寡核苷酸抑制人视网膜色素上皮生长 被引量：4
16
作者 王琳 惠延年 +2 位作者 王雨生 惠宏襄 金明 《第四军医大学学报》 2000年第2期204-206,共3页
目的　观察反义增生细胞核抗原 (PCNA)和反义 bcl-2脱氧寡核苷酸对培养的人视网膜色素上皮细胞 (RPE)生长的作用 .方法　用 DNA合成仪合成有 1 8个核苷酸的反义PCNA和 1 5个核苷酸的反义 bcl- 2脱氧寡核苷酸片段 ,以不同浓度加入 RPE培... 目的　观察反义增生细胞核抗原 (PCNA)和反义 bcl-2脱氧寡核苷酸对培养的人视网膜色素上皮细胞 (RPE)生长的作用 .方法　用 DNA合成仪合成有 1 8个核苷酸的反义PCNA和 1 5个核苷酸的反义 bcl- 2脱氧寡核苷酸片段 ,以不同浓度加入 RPE培养液 ,培养 2～ 4d,用 SABC法检测细胞PCNA和 bcl- 2的表达 ,用 MTT法及流式细胞仪测定细胞抑制率 .结果　 6 .2 5～ 1 0 0μm ol· L- 1 的反义 PCNA对 RPE的抑制率为 8.3%～ 38.4% ,呈剂量依赖性 ,并抑制细胞 PCNA的表达 .反义 bcl- 2未显示抑制作用 .结论　反义 PCNA脱氧寡核苷酸可抑制近 40 %的 RPE生长 。 展开更多
关键词 视网膜色素上皮 PCNA bcl-2 反义 脱氧寡核苷酸
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发卡式核酶结构与功能的研究进展 被引量：4
17
作者 惠宏襄 王成济 +1 位作者 金明 赵小宁 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 1995年第5期228-230,共3页
发卡式核酶的一级结构为RNA分子,切割活性所需的最小长度为50个核苷酸,其立体结构由四个螺旋区及数个环状区域组成,核酶结构中有15个核苷酸是必需的,它们的改变对核酶活性和立体结构都会产生显著的影响,本文综述了发卡式核酶结构与功能... 发卡式核酶的一级结构为RNA分子,切割活性所需的最小长度为50个核苷酸,其立体结构由四个螺旋区及数个环状区域组成,核酶结构中有15个核苷酸是必需的,它们的改变对核酶活性和立体结构都会产生显著的影响,本文综述了发卡式核酶结构与功能的研究进展,并讨论了其作用机理和应用原则。 展开更多
关键词 烟草环斑病毒 核酶 发卡式核酶 RNA 立体结构
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逆转录病毒载体表达的TGFα反义RNA对人脑胶质瘤细胞BT325的生长抑制作用 被引量：5
18
作者 惠宏襄 王成济 +2 位作者 金明 赵小宁 胡敏 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期31-32,共2页
逆转录病毒载体表达的ＴＧＦα反义ＲＮＡ对人脑胶质瘤细胞ＢＴ３２５的生长抑制作用惠宏襄，王成济，金明，赵小宁，胡敏西安第四军医大学（７１００３２）转化生长因子α（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＴＧＦ... 逆转录病毒载体表达的ＴＧＦα反义ＲＮＡ对人脑胶质瘤细胞ＢＴ３２５的生长抑制作用惠宏襄，王成济，金明，赵小宁，胡敏西安第四军医大学（７１００３２）转化生长因子α（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ，ＴＧＦα）是一种小肽分子，其成熟体由５０... 展开更多
关键词 转化生长因子 TGFA RNA BT325 肿瘤
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核酶对bcl－2mRNA的体外切割 被引量：4
19
作者 赵永同 惠宏襄 +2 位作者 刘爱平 王刚 王成济 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第1期1-5,共5页
通过微机对ｂｃｌ－２ＲＮＡ二级结构的分析，设计针对ｂｃｌ－２片段５＇ＣＧＣＧＡＣＣＣＧＧＵＣＧＣＣＡＧＧＡＣＣＵＣＧ３＇的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＤ）基因，平端连接于ｐＧＥＭ－３Ｚ... 通过微机对ｂｃｌ－２ＲＮＡ二级结构的分析，设计针对ｂｃｌ－２片段５＇ＣＧＣＧＡＣＣＣＧＧＵＣＧＣＣＡＧＧＡＣＣＵＣＧ３＇的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＤ）基因，平端连接于ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（－）ＨｉｎｃⅡ位点，克隆后经测序表明序列正确，ｂｃｌ－２和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因经体外转录，５０℃作用２ｈ，从１６５６－１６５７（Ｃ－Ｇ）位之间切断ｂｃｌ－２ＲＮＡ片段． 展开更多
关键词 核酶 MRNA BCL-2 切割活性 MRNA
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含多克隆位点的可诱导型真核表达载体的构建 被引量：4
20
作者 张杰 彭玮丹 +2 位作者 惠宏襄 金明 王成济 《第四军医大学学报》 1998年第2期229-230,共2页
我们利用MT-Ⅱ启动子的特性,构建了含多克隆位点的可诱导型真核表达载体pMDNA3-neo.
关键词 基因载体 基因治疗 多克隆位点 构建
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