乙型脑炎诊断方法研究进展 被引量：15

1

作者 徐高原 陈焕春 +2 位作者 徐晓娟 王祥 何启盖 《动物医学进展》 CSCD 2002年第6期20-23,共4页

乙型脑炎是由黄病毒科的乙型脑炎病毒引起的一种人与动物共患的虫媒病毒性疾病。由于本病对人类和多种动物危害非常严重 ,因而对其进行确诊很重要。

关键词 猪病 乙型脑炎 诊断方法 研究进展

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乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒的构建 被引量：12

2

作者 徐高原 王祥 +4 位作者 陈焕春 徐晓娟 李自力 何启盖 吴斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期192-197,共6页

设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK NS1。将pUSK NS1与伪狂犬病毒Ea株TK /gG /LacZ+突变株基因组共转染真核细胞IBRS 2,通过空斑纯化得到了... 设计1对引物从含有乙型脑炎病毒NS1基因的质粒pNS1上亚克隆NS1基因,将NS1基因插入到中间转移载体pUSK中,获得重组中间转移质粒pUSK NS1。将pUSK NS1与伪狂犬病毒Ea株TK /gG /LacZ+突变株基因组共转染真核细胞IBRS 2,通过空斑纯化得到了乙型脑炎病毒NS1基因重组伪狂犬病毒株TK /gG /NS1+。经检测,重组病毒能表达具有生物活性的NS1蛋白。该重组病毒可作为猪乙型脑炎和伪狂犬病双价基因工程疫苗用毒株。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 NS1基因重组 伪狂犬病毒 中间转移载体

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猪乙型脑炎研究进展 被引量：13

3

作者 邓永 徐高原 《养殖与饲料》 2007年第6期43-46,共4页

关键词 流行性乙型脑炎 日本乙型脑炎 乙型脑炎病毒 中枢神经系统 人类危害 virus 病毒性疾病 人畜共患

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聚赖氨酸复合涂膜协同气调包装对金鲳鱼保鲜作用研究 被引量：16

4

作者 张涵 徐高原 +2 位作者 冯爱国 申铉日 王佳媚 《食品科技》 CAS 北大核心 2018年第11期166-171,共6页

以聚赖氨酸(?-PL)与海藻酸钠复合成膜,研究复合涂膜协同气调包装对金鲳鱼冷藏保鲜作用。通过菌落总数、色泽、p H、水分含量、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、挥发性盐基氮值(total volatile basic nitrogen,TVB-N)变化,分... 以聚赖氨酸(?-PL)与海藻酸钠复合成膜,研究复合涂膜协同气调包装对金鲳鱼冷藏保鲜作用。通过菌落总数、色泽、p H、水分含量、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)值、挥发性盐基氮值(total volatile basic nitrogen,TVB-N)变化,分析金鲳鱼冷藏期间品质的变化。结果表明:经ε-PL复合涂膜的金鲳鱼冷藏9 d后,菌落总数为5.34 lg(CFU/g),TVB-N和TBA值分别为12.42mg/100 g和0.422 mg/100 g,属于一级鲜度。未经涂膜处理组样品在冷藏5 d后出现腐败现象,菌落总数和TVB-N值分达7.54 lg(CFU/g)和13.65 mg/100 g,TBA值达0.969 mg/100 g。可见,ε-PL复合涂膜协同气调包装能有效抑制冷藏金鲳鱼中微生物生长,维持良好的品质,可将金鲳鱼冷藏期延长至9 d以上。 展开更多

关键词 聚赖氨酸 海藻酸钠 气调包装 冷藏保鲜

原文传递

胸膜肺炎放线杆菌apxⅡCA基因的克隆、表达及ApxⅡ-ELISA检测方法的初步建立 被引量：8

5

作者 徐晓娟 何启盖 +1 位作者 徐高原 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期335-337,共3页

根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连... 根据国外已发表的胸膜肺炎放线杆菌 (APP) Apx 的基因序列设计了 1对引物 ,从我国 APP武汉株扩增出约3.5 kb的 apx CA基因。测序结果表明 ,该基因的大小与国外已报道的 1型和 9型 APP的 apx CA基因大小一致 ,同源性达 99%。将该基因连接到原核表达载体 p ET- 17b,构建了原核表达质粒 p ET- apx CA,并在大肠杆菌 BL 2 1(DE3)中表达出了大小约 10 5 0 0 0的 Apx 蛋白。提取包涵体蛋白作为抗原包被 EL ISA酶标板 ,对已知阳性、阴性血清和临床送检血清样品进行了 EL ISA检测 ,从而为最终建立 Apx - EL 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 apxⅡCA基因 克隆 表达 ELISA

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表达乙脑病毒PrM基因重组伪狂犬病病毒的构建 被引量：8

6

作者 李自力 陈焕春 +4 位作者 徐高原 方六荣 肖少波 王祥 何启盖 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-58,共6页

本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA(558 bp),用BamHI和EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物,回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中,获得了转... 本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA(558 bp),用BamHI和EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物,回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中,获得了转移载体pPgG-PrM,并对其外源片段进行了测序。序列分析结果表明:与已报道的乙型脑炎病毒SA14强毒株和SA14-14-2疫苗株的核苷酸序列比较,PrM基因的同源性为100%。以伪狂犬病病毒Ea株TK-/gG-/LacZ+突变株为载体构建了一株表达乙型脑炎病毒PrM基因的重组伪狂犬病病毒TK-/gG-/PrM+,为进一步开展猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 PrM基因 重组伪狂犬病病毒

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乙型脑炎病毒SA14-14-2株E基因的克隆、测序与表达 被引量：4

7

作者 徐高原 陈焕春 +4 位作者 徐晓娟 李自力 孙圣福 何启盖 吴斌 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期22-25,共4页

目的　克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达 ,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。方法　根据乙型脑炎病毒株SA14 - 14 - 2E基因的序列设计一对引物 ,采用RT -PCR技术扩增其E基因全长cD NA ,将扩增产物克隆... 目的　克隆乙型脑炎病毒E基因并在大肠杆菌中进行表达 ,为今后研制乙脑分子诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。方法　根据乙型脑炎病毒株SA14 - 14 - 2E基因的序列设计一对引物 ,采用RT -PCR技术扩增其E基因全长cD NA ,将扩增产物克隆到pBlusecriptIISK(+)载体中 ,然后亚克隆到原核表达载体PGEX -KG中 ,筛选重组质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3)表达重组蛋白。结果与结论　获得了含全长乙型脑炎病毒E基因的重组质粒 ,经酶切和测序证实构建正确。表达的目的蛋白经SDS -PAGE和Westernblot分析证实确为乙型脑炎病毒E蛋白且有生物学活性。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 SA14—14—2株 E基因 克隆 测序 表达

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猪链球菌2型的分离鉴定及致病性试验 被引量：6

8

作者 潘建刚 张华伟 +3 位作者 陈波 周明光 王召贺 徐高原 《中国兽药杂志》 2020年第8期14-19,共6页

从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒... 从全国部分猪场采集疑似猪链球菌感染病例脑样品20份进行细菌分离,成功分离到10株细菌,通过猪链球菌及血清类型鉴定,最终确定其中一株为2型猪链球菌。应用猪链球菌7种主要毒力因子特异性基因扩增检测方法检测所分离到的2型猪链球菌的毒力因子分布情况,并应用小鼠攻毒试验对其致病性进行观察研究。结果表明:分离的2型猪链球菌具备7种毒力因子;动物试验表明SS2能引起小鼠的急性败血症及脑膜炎;细菌回归试验结果表明,试验组死亡小鼠的脑、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏均有细菌定植,且能分离出攻毒菌。此分离菌株的研究为研制2型猪链球菌病疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 猪链球菌 分离 鉴定 致病性

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强直性脊柱炎合并骨折的特点及手术治疗研究体会

9

作者 徐高原 《中文科技期刊数据库（全文版）医药卫生》 2024年第10期0107-0110,共4页

分析强直性脊柱炎合并骨折的特点及手术治疗效果。方法 随机入选40例强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)合并骨折患者进行探究,入选时间2022年8月~2023年12月,随机摸球分为对照组和观察组,均30例/组,两组按照不同入路手术差异作为... 分析强直性脊柱炎合并骨折的特点及手术治疗效果。方法 随机入选40例强直性脊柱炎(ankylosingspondylitis,AS)合并骨折患者进行探究,入选时间2022年8月~2023年12月,随机摸球分为对照组和观察组,均30例/组,两组按照不同入路手术差异作为比较,分析疗效差异。结果 两组骨折愈合时间相比较差异不大(P>0.05),手术时间及出血量比较,组间构成差异(P<0.05);两组神经功能恢复优良率对比构成显著差异,优良率较高的一组是观察组(P<0.05);组间并发症比较,构成显著差异,发生率较低的一组是观察组(P<0.05);术前生活质量评分在组间未构成显著差异(P>0.05),术后评分较高的是观察组,且组间构成差异(P<0.05)。结论 前后联合入路手术治疗AS合并骨折疾病效果较好,虽然出血量较大、操作时间较长,但术后并发症更少,可确保骨折愈合效果,同时减轻了痛苦,提高了患者生活质量,值得使用。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 骨折 手术治疗 临床疗效 并发症 生活质量

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猪肺炎支原体SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

10

作者 闫微 杨柳 +7 位作者 龙云志 宋文博 李倩倩 余道兵 周明光 徐高原 黄超 汤细彪 《中国动物检疫》 CAS 2024年第2期72-79,共8页

为建立一种快速高效的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)检测方法,根据NCBI公布的Mhp保守序列设计4对特异性引物,依据4对引物的荧光定量PCR检测结果及拟合曲线进行相关性分析,筛选出最佳引物(SX4),建立了Mhp SYBR Green Ⅰ实... 为建立一种快速高效的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)检测方法,根据NCBI公布的Mhp保守序列设计4对特异性引物,依据4对引物的荧光定量PCR检测结果及拟合曲线进行相关性分析,筛选出最佳引物(SX4),建立了Mhp SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法。该方法可特异性检测Mhp,对猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、副猪嗜血杆菌4型及链球菌2型等病原均无特异性扩增;最佳引物SX4检测的灵敏度可达4.9×10^(1) copies/μL,组内和组间变异系数均小于2%。该方法可稳定检测出工艺生产抗原和市售疫苗中的Mhp菌量。试验表明,本研究成功建立了Mhp SYBR Green Ⅰ实时荧光定量检测方法,其特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于Mhp疫苗抗原生产和临床疫苗中的Mhp菌量检测。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 荧光定量PCR 颜色改变单位(CCU) 相关性

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乙型脑炎重组伪狂犬病病毒TK^-/gG^-/NS_1^+的安全性及免疫性 被引量：2

11

作者 徐高原 陈焕春 +4 位作者 徐晓娟 李自力 何启盖 吴斌 孙圣福 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期145-147,共3页

用含有日本乙型脑炎病毒 (SA14 - 14 - 2株 )非结构蛋白 NS1基因的重组伪狂犬病病毒 TK- / g G- / NS+ 1 免疫BAL B/ c小鼠和断奶仔猪。结果表明 ,该重组病毒对 BAL B/ c小鼠和断奶仔猪是安全的 ,免疫的 BAL B/ c小鼠能抵抗伪狂犬病病毒... 用含有日本乙型脑炎病毒 (SA14 - 14 - 2株 )非结构蛋白 NS1基因的重组伪狂犬病病毒 TK- / g G- / NS+ 1 免疫BAL B/ c小鼠和断奶仔猪。结果表明 ,该重组病毒对 BAL B/ c小鼠和断奶仔猪是安全的 ,免疫的 BAL B/ c小鼠能抵抗伪狂犬病病毒 (PRV )强毒 (Ea株 )的致死性攻击 ,免疫的断奶仔猪能产生乙型脑炎病毒 (JEV)特异性抗体和 JEV特异性 CTL 活性。 展开更多

关键词 重组病毒 乙型脑炎病毒 伪狂犬病病毒 安全性 免疫性

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2017-2021年我国多个省份猪场猪圆环病毒2型流行病学调查 被引量：1

12

作者 黄英 陈翔鸿 +9 位作者 杨柳 龙云志 宋文博 李倩倩 余道兵 梁巩 周明光 徐高原 黄超 汤细彪 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期16-23,共8页

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)在我国部分省份的流行情况,本试验在2017-2021年期间于湖北、河南、湖南、江西、浙江、河北、福建和山东8个省份127个规模化猪场采集了2357份病料样品,使用聚合酶链式反应(PCR)对PCV2进行病原检测,同时对PCV... 为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)在我国部分省份的流行情况,本试验在2017-2021年期间于湖北、河南、湖南、江西、浙江、河北、福建和山东8个省份127个规模化猪场采集了2357份病料样品,使用聚合酶链式反应(PCR)对PCV2进行病原检测,同时对PCV2的单独感染和PCV2与其他病原体的混合感染进行分析,并对华中地区的50株PCV2进行遗传演化分析。结果显示,8个省份的PCV2阳性率介于52.17%~67.78%;不同年份PCV2阳性率介于50.53%~71.85%;共检出PCV2阳性样品1436份,总体阳性率为60.92%;PCV2单独感染率为15.18%,PCV2与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的混合感染率为22.08%,PCV2与猪肺炎支原体(MHP)、猪链球菌(SS)的混合感染率为18.31%;遗传演化分析发现,PCV2d亚型占阳性样品数的80%(40/50),PCV2a亚型占4%(2/50),PCV2b亚型占16%(8/50),未发现PCV2c和PCV2e亚型。结果表明,我国华中地区PCV2的感染率较高,且PCV2和PRRSV及PCV2和MHP、SS的混合感染率高于PCV2的单独感染率,同时PCV2d亚型已经成为华中地区当前PCV2流行的优势毒株。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型(PCV2) 流行病学调查 PCV2d亚型 华中地区

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乙脑病毒prM/E基因重组伪狂犬病病毒的构建 被引量：2

13

作者 李自力 陈焕春 +3 位作者 徐高原 肖少波 王祥 何启盖 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期162-165,共4页

以乙型脑炎病毒 SA1 4 - 1 4 - 2株基因组 RNA为模板 ,采用RT- PCR一步法扩增 pr M/ E基因的全长 c DNA(约 2 kb) ,将其克隆至 p MD1 8- T载体 ,获得了克隆质粒 p Tpr M/ E,并对其进行了测序。序列分析结果表明 ,与已报道的 SA1 4 强毒... 以乙型脑炎病毒 SA1 4 - 1 4 - 2株基因组 RNA为模板 ,采用RT- PCR一步法扩增 pr M/ E基因的全长 c DNA(约 2 kb) ,将其克隆至 p MD1 8- T载体 ,获得了克隆质粒 p Tpr M/ E,并对其进行了测序。序列分析结果表明 ,与已报道的 SA1 4 强毒株和 SA1 4 - 1 4 - 2疫苗株的核苷酸比较 ,pr M基因的序列同源性为 1 0 0 %,E发生了 4个点突变 ,其中 1个为回复突变 ,并导致了 3个氨基酸的改变。以伪狂犬病病毒 Ea株 TK- / g G- / L ac Z+突变株为载体 ,构建了 1株乙脑病毒 pr M/ E基因的重组伪狂犬病病毒 TK- / g G- / pr M/ E+。乙脑病毒 pr M/ E基因的克隆及重组伪狂犬病病毒的成功构建 ,为开展乙脑病毒分子生物学及猪猪伪狂犬病一乙脑二价基因工程疫苗的研究打下了坚实基础。 展开更多

关键词 猪 乙型脑炎病毒 prM/E基因 基因克隆 重组伪狂犬病病毒 序列分析

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胸膜肺炎放线杆菌apxⅡ C突变株转移载体pSKPG的构建 被引量：2

14

作者 徐晓娟 何启盖 +1 位作者 陈焕春 徐高原 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期551-554,共4页

通过 PCR方法克隆了胸膜肺炎放线杆菌 ( Actinobacillus pleuropneum oniae)武汉株完整的 apx C基因和部分apx A基因约 3.4 kb。将该 DNA片段克隆到载体 p Bluescript SK( + )中得到质粒 p SKPP,并进一步将 gfp基因插入到 apx C基因的 X... 通过 PCR方法克隆了胸膜肺炎放线杆菌 ( Actinobacillus pleuropneum oniae)武汉株完整的 apx C基因和部分apx A基因约 3.4 kb。将该 DNA片段克隆到载体 p Bluescript SK( + )中得到质粒 p SKPP,并进一步将 gfp基因插入到 apx C基因的 Xba1 位点处 ,构建了 apx C基因插入失活的转移载体 p SKPG,从而为构建胸膜肺炎放线杆菌apx 展开更多

关键词 胸膜肺炎放线杆菌 猪 传染性胸膜肺炎 apxⅡC基因 转移载体 毒力基因 基因改造

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猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗制备及免疫效果评估

15

作者 何娅 王召贺 +3 位作者 陈波 宋玉平 周明光 徐高原 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期3752-3761,共10页

【目的】制备猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制巴氏杆菌病的发生和流行。【方法】从发病猪病料中分离猪源A型多杀性巴氏杆菌,测定生长曲线,通过小鼠致病性试验筛选疫苗候选菌株。将筛选得到的疫苗候选菌株培养后进行灭活,无菌检... 【目的】制备猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗,有效控制巴氏杆菌病的发生和流行。【方法】从发病猪病料中分离猪源A型多杀性巴氏杆菌,测定生长曲线,通过小鼠致病性试验筛选疫苗候选菌株。将筛选得到的疫苗候选菌株培养后进行灭活,无菌检验合格后,按1∶4的比例与SUMMIT-CB-200佐剂混合,制备猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗。最后通过小鼠和仔猪免疫攻毒保护试验评估疫苗保护力。【结果】分离到11株猪源A型多杀性巴氏杆菌;生长曲线测定结果显示,11株菌均在培养至6 h时达到生长稳定期,活菌数范围为2.1×10^(9)~8.4×10^(9)CFU/mL;小鼠致病性试验结果显示,攻毒后小鼠出现精神沉郁、食欲降低、行动迟缓、被毛粗糙、扎堆、眼睛周围大量脓性分泌物、腹式呼吸、共济失调等症状,共筛选到A4、A8、A9和A11 4株疫苗候选菌株,其中最强毒株A4小鼠皮下攻毒半数致死量(LD50)为167 CFU;仔猪毒力试验结果显示,攻毒后仔猪出现精神沉郁、食欲降低、皮肤发红、呕吐、呼吸困难、腹式呼吸、体温升高、关节肿大、跛行等症状,A4菌株仔猪皮下攻毒LD50为1.72×10^(10)CFU;免疫攻毒保护试验结果显示,4株猪源A型多杀性巴氏杆菌灭活疫苗对小鼠和仔猪均具有一定保护力,其中A9保护力最强,对小鼠保护率达60%,对仔猪保护率达75%。【结论】本研究制备的灭活疫苗能对猪源A型多杀性巴氏杆菌强毒株提供较好的免疫保护力,具有一定的开发价值。 展开更多

关键词 猪源多杀性巴氏杆菌 血清A型 灭活疫苗 保护力

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聚赖氨酸复合涂膜对金鲳鱼冷藏保鲜效果 被引量：4

16

作者 张涵 徐高原 +2 位作者 冯爱国 申铉日 王佳媚 《食品工业》 CAS 北大核心 2019年第5期235-239,共5页

为延长金鲳鱼冷藏期,对聚赖氨酸复合涂膜金鲳鱼进行真空包装,分析冷藏过程中菌落总数、主要理化指标和感官指标的变化情况。结果表明,冷藏9 d后,经复合涂膜处理的金鲳鱼菌落总数为6.35 lg (CFU/g), TBA和TVB-N值分别为0.223 mg/100 g和2... 为延长金鲳鱼冷藏期,对聚赖氨酸复合涂膜金鲳鱼进行真空包装,分析冷藏过程中菌落总数、主要理化指标和感官指标的变化情况。结果表明,冷藏9 d后,经复合涂膜处理的金鲳鱼菌落总数为6.35 lg (CFU/g), TBA和TVB-N值分别为0.223 mg/100 g和22.75 mg/100 g,鱼肉未呈现异味和明显腐败,鱼肉颜色变化不明显,水分流失率降低。因此,聚赖氨酸复合涂膜协同真空包装的综合包装方法对金鲳鱼具有良好保鲜效果。 展开更多

关键词 金鲳鱼 聚赖氨酸 真空包装 综合包装方法 保鲜效果

原文传递

伪狂犬病病毒TK^-/gG^-缺失株的构建及其生物学特性研究 被引量：2

17

作者 徐晓娟 徐高原 +2 位作者 陈焕春 刘正飞 何启盖 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期532-535,共4页

将伪狂犬病病毒TK- gG- LacZ+ 突变株的基因组DNA与含有缺失的gG基因的转移质粒pUSKBB共转染猪肾传代细胞PK 1 5 ,待完全病变后收获病毒进行空斑试验 ,用PCR筛选gG缺失的重组病毒。空斑纯化 3次后 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所... 将伪狂犬病病毒TK- gG- LacZ+ 突变株的基因组DNA与含有缺失的gG基因的转移质粒pUSKBB共转染猪肾传代细胞PK 1 5 ,待完全病变后收获病毒进行空斑试验 ,用PCR筛选gG缺失的重组病毒。空斑纯化 3次后 ,随机挑取空斑进行PCR扩增 ,证实所获得的病毒为均一的TK- gG- 缺失株。遗传稳定性试验表明该重组病毒能在PK 1 5细胞上稳定遗传 ,动物试验表明该缺失株对Balb c小鼠极为安全且能保护Balb c小鼠抵抗致死量PRV强毒的攻击。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒 TK^-/gG^-/LacZ^+突变株 TK^-/gG^-缺失株

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2株牛源多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物特性 被引量：3

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作者 高尚 徐高原 +5 位作者 周明光 张华伟 郝根喜 陈波 顾强 向文杰 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期15-20,26,共7页

为了诊断广东某养殖场肉牛连续出现发热、呼吸困难、病死等原因,对死亡牛进行病理剖检,采集肺、肝组织进行细菌分离。采用染色镜检和16S rRNA序列测定对分离菌进行鉴定;分型PCR对分离菌进行分型,并分析其系统进化;药敏试验分析药物敏感... 为了诊断广东某养殖场肉牛连续出现发热、呼吸困难、病死等原因,对死亡牛进行病理剖检,采集肺、肝组织进行细菌分离。采用染色镜检和16S rRNA序列测定对分离菌进行鉴定;分型PCR对分离菌进行分型,并分析其系统进化;药敏试验分析药物敏感性;绘制生长曲线,挑取对数期细菌进行小鼠攻毒试验确定分离菌的毒性。结果显示:2株分离菌均为革兰阴性杆菌;分型及测序结果显示,2株分离菌均为荚膜A型多杀性巴氏杆菌;生长曲线显示,2株分离菌在6 h后进入平台期,12 h活菌数达到峰值;药敏试验结果显示,分离菌对克林霉素和阿米卡星耐药,对头孢哌酮和左氧氟沙星最敏感;测序发现,分离株与海南株具有较高亲源性;小鼠攻毒试验的结果显示,本菌具有强毒性,可引起小鼠出血性败血症,导致小鼠死亡。结果表明肉牛病死原因可能为多杀性巴氏杆菌感染,应选用敏感药物及时控制牛群继续发生该病。 展开更多

关键词 多杀性巴氏杆菌 荚膜A型 分子进化树 药敏试验 生长曲线 攻毒试验

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一株猪肺炎支原体的分离鉴定 被引量：2

19

作者 潘建刚 陈波 +1 位作者 周明光 徐高原 《中国兽药杂志》 2019年第3期13-19,共7页

从全国部分猪场采集到疑似猪支原体肺炎肺组织病料12份,提取DNA进行猪肺炎支原体PCR和多重PCR检测,将病料研磨后分离猪肺炎支原体,最终分离到1株疑似猪肺炎支原体;通过测序分析、形态观察、生化试验、血清学试验证实其为猪肺炎支原体。... 从全国部分猪场采集到疑似猪支原体肺炎肺组织病料12份,提取DNA进行猪肺炎支原体PCR和多重PCR检测,将病料研磨后分离猪肺炎支原体,最终分离到1株疑似猪肺炎支原体;通过测序分析、形态观察、生化试验、血清学试验证实其为猪肺炎支原体。该菌株能适应人工培养基的培养,且传代生长良好,液体培养基中培养活菌滴度达109CCU/m L;菌株有一定的致病性,免疫原性好,可作为疫苗备用菌株,该菌株的分离鉴定为研制猪支原体肺炎疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 猪肺炎支原体 分离 鉴定

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国家三类新兽药：猪链球菌病三价灭活疫苗

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作者 康超 陈波 +1 位作者 徐高原 金梅林 《兽药市场指南》 2011年第7期21-22,共2页

目前采用疫苗进行免疫预防是国内外控制猪链球菌病的根本手段，而市售商品疫苗只有猪链球菌2型、马链球菌兽疫亚种二价疫苗。当前猪链球菌7型疫苗也较常见，但现有疫苗不能对其起到预防作用．而且市售商品疫苗需多次免疫，成本较高，对... 目前采用疫苗进行免疫预防是国内外控制猪链球菌病的根本手段，而市售商品疫苗只有猪链球菌2型、马链球菌兽疫亚种二价疫苗。当前猪链球菌7型疫苗也较常见，但现有疫苗不能对其起到预防作用．而且市售商品疫苗需多次免疫，成本较高，对猪只的应激较大。因此，急需研制出更安全高效的新型猪链球菌病疫苗对其进行预防。为此， 展开更多

关键词 三价灭活疫苗 猪链球菌病 三类新兽药 马链球菌兽疫亚种 免疫预防 猪链球菌2型 预防作用 国内外

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